单头柑橘木虱中黄龙病菌快速检测方法建立与应用

本研究将快速裂解制样法和环介导恒温扩增技术结合,建立了单头木虱体内黄龙病菌的快速检测方法,整个检测不需要提取核酸,仅需在65℃恒温,45min 内就可以完成。本方法和实时定量PCR法检测结果一致,其灵敏度高于普通PCR法。本研究所建立检测方法操作简便,所需时间短,准确度高,适用于基层检测部门,为单头柑橘木虱体内柑橘黄龙病菌的快速检测提供了新策略。     

桂北地区柑橘木虱携带黄龙病菌量及其种群动态变化

柑橘木虱是柑橘新梢期的重要害虫,也是传播柑橘黄龙病的主要自然虫媒,其种群数量越大,越有利于黄龙病的扩散,因此是一种重要的柑橘经济害虫。本研究采用五点调查法,监测了2018年4月至12月桂北地区失管果园柑橘木虱种群发生动态,并利用实时荧光定量PCR方法明确了感病果园柑橘木虱含黄龙病菌量的动态规律。结果表明,2018年桂北地区失管果园柑橘木虱种群发生动态具有3个高峰期,分别出现在6月、9月和11月。柑橘木虱携带黄龙病菌量在4 ~ 7月处于较低水平,随后逐步上升并于10月达最高值,其动态变化为单峰型。此外,柑橘木虱年均含菌量可能与性别有关,且雌性含菌量高于雄性。     

赣南脐橙产区应用有人直升机防治柑橘木虱 控制柑橘黄龙病初报

防治柑橘木虱是遏制柑橘黄龙病扩散的关键措施之一,应用有人直升机防治柑橘木虱目前还没有相关文献报道。本文介绍了赣南脐橙产区在嫩梢期应用有人直升机防治柑橘木虱的做法及成效。结果表明：有人直升机施药雾化性能较好,雾滴附着率高,雾滴分布较均匀,14个处理607个雾滴检测样本平均雾滴密度13.33 粒/cm2,雾滴密度符合农业航空植保技术作业要求;各处理对柑橘木虱均有很好的防治效果,药后7 天,防效都达90%以上。有人直升机具有作业效率高、突击能力强、不同地形地貌适应性好等特点,能在短时间内大面积施药作业,对失管果园、隔离带和杂草上的木虱也能同时防治,解决了一家一户防治时间不统一的问题,可以大面积减少虫口基数,是目前柑橘黄龙病发生区可以借鉴应用的重要技术措施。提出了加快农药产品的研发和登记、防范发生次生灾害、完善防治技术及轮换用药避免产生抗药性等建议。     

三种提取单头柑橘木虱体内黄龙病菌DNA方法的比较研究

对饲养在温室内的感染柑橘黄龙病甜橙树上的柑橘木虱采用三种方法进行单头核酸提取,通过超微量核酸蛋白分析仪和细菌通用引物27F1492R常规PCR检测核酸质量,利用柑橘黄龙病菌特异性引物OI1/OI2c常规PCR和以r-rplLAs/f-rplLAs引物进行荧光定量qPCR检测。研究结果表明,三种方法均可以成功提取到单头柑橘木虱总核酸且均能检测到黄龙病菌,李菁方法时间短,步骤简便,提取的核酸浓度较高,但核酸质量较低;氯仿-异戊醇抽提方法步骤较多、历时长,提取核酸浓度较低,但核酸质量较高;试剂盒方法简便快速,提取的核酸浓度高,核酸质量一般,成本较高。三种方法各有优缺点,可根据后续分子实验具体要求选择合适的提取方法。本文为有效的检测柑橘木虱体内黄龙病菌提供了技术基础,也可以推广到其他微小昆虫的内生细菌等相关基因研究领域。     

江西信丰柑橘木虱的药效测定

柑橘木虱（Diaphorina citri K瑄wayama）是柑橘黄龙病的媒介昆虫,目前,其防治以化防为主。为了监测化学农药的防治效果,选用9种柑橘生产上常用的药剂对江西赣州市信丰县的柑橘木虱田间种群进行药效测定,并用华南农业大学昆虫生态研究室用九里香饲养的种群作为敏感对照。测定虫态为成虫。结果表明,对信丰种群,处理24h后敌敌畏效果最好,死亡率达95.5%;其次为毒死蜱,死亡率为84.7%。48h和72h后,除敌敌畏、毒死蜱外,啶虫脒、丁硫克百威、噻虫嗪的防效也显著高于其它处理。另外,吡虫啉SL的防效随时间推移逐渐提高。而甲维盐与清水对照相比一直无显著差异,阿维菌素和高效氯氰菊酯的防效也很低。对敏感种群,24h后效果最好的也是敌敌畏和毒死蜱;48h后除了甲维盐和阿维菌素以外,其余7种药剂的防效均达87%以上,各处理之间无显著差异;72h后,这7种药剂的防效均接近100%。两个种群相比,信丰种群用高效氯氰菊酯、吡虫啉SL、吡虫啉SC、毒死蜱、噻虫嗪、啶虫脒处理24h后校正死亡率显著低于敏感种群,说明信丰种群对这些农药的敏感性都有不同程度的下降。48h和72h后,前4种处理的防效还显著低于敏感种群;另外,72h后阿维菌素和甲维盐处理的信丰种群防效也显著低于敏感种群。信丰种群对高效氯氰菊酯的敏感性下降最为显著,与敏感种群相比死亡率降低了65%~77%,其次为吡虫啉,降低17%~75%,建议该地区暂时停止使用。     

常用农药对湛江红江橙和广州九里香柑橘木虱种群的室内药效测定

柑橘木虱(Diaphorina citri Kuwayama)是柑橘黄龙病最重要的媒介昆虫,对其进行严格防控是阻延黄龙病传播的有效手段。本研究采用室内药效测定方法,测定了12种常用农药对广东重要柑橘品种红江橙(Citrus sinensis Osbeck cv. Hongjiang)和广州园林植物九里香(Murraya paniculata (L.) )上的柑橘木虱成虫的防治效果,并与实验室饲养的敏感种群进行比较,为合理选择农药、有效防治柑橘木虱提供依据。结果显示,77.5%敌敌畏乳油对3个种群防效一致,处理24 h后死亡率都达100%。25%呋虫胺可湿性粉剂和20%甲氰菊酯乳油处理24 h后敏感种群死亡率也达100%,但2个野外种群死亡率略有下降。2.5%高效氯氟氰菊酯水乳剂、350 g/L吡虫啉悬浮剂、30%噻虫嗪悬浮剂、5%啶虫脒乳油、45%毒死蜱乳油、12%高氯·毒死蜱乳油对敏感种群也有理想的防治效果,48 h或72 h死亡率达100%。但广州九里香种群对高效氯氟氰菊酯、吡虫啉、高氯·毒死蜱、噻虫嗪的敏感性显著下降,高效氯氟氰菊酯尤为严重,下降率达64-70%;湛江种群对啶虫脒、毒死蜱、高氯·毒死蜱、噻虫嗪的敏感性也显著下降,对高氯·毒死蜱敏感性下降最为显著,下降率达39%。97%矿物油乳剂处理24 h防效很低,但随时间推移不断提高,72 h达71-86%。5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂、3.2%阿维菌素乳油对3个种群的效果都不理想。测定结果说明两个地区、两种寄主植物的柑橘木虱对多种农药的敏感性存在差异,建议各柑橘产区加强对本地区柑橘木虱的抗药性监测,充分考虑防治其他害虫对柑橘木虱抗性产生的影响,以保证农药的防治效果。     

贵州省柑橘黄龙病发生历史回顾及现状调查

为掌握柑橘黄龙病在贵州省的发生及控制情况,本文回顾了病害在贵州省的发生历史,并对田间的疑似样品进行了。结果表明：贵州省柑橘黄龙病在经过近些年大力防控后,目前在黔东南柑桔主产区黄龙病病情得到一定控制,为零星发生。而在黔西南及黔南一些失管产区,病害发生较为严重。从病原菌序列比对的结果来看,此次收集的样品均为柑橘黄龙病菌亚洲种。此外,在本次田间调查中没有发现柑橘木虱。     

赣南地区柑橘木虱田间发生规律研究

对赣南14个不同区域正常生产管理果园定园、定时调查,结果表明,果园柑橘木虱成虫、若虫、卵一年均有4个高峰期。成虫高峰期分别为5月下旬、7月中旬、8月上、中旬和10月上旬;若虫高峰期分别为7月中旬、8月、9月上旬和10月中旬;卵高峰期分别为5月下旬、7月中旬、8月上、中旬和10月上旬。果园成虫、若虫、卵发生消长规律基本相符,卵和若虫的消长动态紧随成虫消长动态。果园柑橘木虱发生与新梢抽发和防控措施关系密切,各虫态虫口发生量下半年明显重于上半年。     

室内条件下矿物油农药对柑橘木虱的驱避作用和获取黄龙病病菌的影响

本文采用Ｙ型嗅觉仪测定矿物油农药对柑橘木虱成虫的驱避作用,并研究喷洒矿物油农药1 h、1 d、4 d和7 d后对柑橘木虱成虫驱避作用的持效性;此外,本文还研究了矿物油农药对柑橘木虱成虫获取黄龙病病菌的抑制作用。结果表明,矿物油农药对柑橘木虱有明显的驱避作用,但是这种作用随着时间延长而降低,喷洒矿物油农药1 h后,驱避作用最强,达70.49%,处理7 d后,仍然表现出驱避作用,驱避率达38.54%;矿物油农药明显抑制柑橘木虱获取黄龙病病菌,处理1 h后抑制率高达86.67%,处理7 d仍然具有抑制效果,抑制率为7.60%。本次室内研究表明矿物油农药对柑橘木虱的驱避作用显著,并且可能通过驱避作用抑制柑橘木虱获取黄龙病病菌。     

柑橘木虱信息素复合诱捕器监测柑橘木虱成虫效果试验

以柑橘木虱信息素复合诱捕器进行橘树树冠挂放不同高度及方位诱集柑橘木虱成虫的试验,结果表明：诱捕器挂放高度以橘树树冠顶部的为较好,比挂放在中部和基部的诱集虫量分别增25.2、42.8头/株,诱虫率分别增50.2、85.3%。挂放方位以东部、南部的诱虫量偏多,其东部平均每株34.4头、南部33.4头。并建立人工目测成虫与诱捕器诱集的成虫之间的线性方程为y=0.727x-12.47;目测若虫和成虫的总虫量和诱捕器的成虫数量之间的线性方程为y=0.711x 9.161。可替代目前采用人工田间目测柑橘木虱的监测方法。     

赣南柑桔木虱发生动态与携带黄龙病菌变化研究

为掌握近年来赣南柑桔木虱发生动态及其携带黄龙病菌变化情况,2016-2020年,定点、定时监测了赣南10个县（区）20个正常管理果园的柑桔木虱成虫发生动态变化,并于2018年和2020年利用实时荧光定量PCR检测了赣南8个县（市）正常管理果园和失管果园柑桔木虱成虫带菌率变化。结果表明,赣南地区柑桔木虱成虫发生高峰集中在5月下旬-10月上旬,2016-2019年发生数量呈逐年下降趋势,但2020年发生量较前几年有所增加,平均虫量最高峰达93头/百梢;2020年正常管理果园和失管果园柑桔木虱带菌率均低于2018年,失管果园柑桔木虱带菌率明显高于正常管理果园;经相关回归分析,柑桔木虱带菌率与果园黄龙病发病率呈显著正相关性。     

江西省吉水县柑橘黄龙病菌检测

为了确切诊断江西省吉安市吉水县近年出现的疑似柑橘黄龙病,从该县6个果园共采集12份(株)病叶样品,采用PCR和序列测定技术对病样进行黄龙病菌检测,结果从6份样品中检测到柑橘黄龙病菌即亚洲韧皮部杆菌(Candidatus Liberibacter asiaticus, CLas),结果表明吉水县已有柑橘黄龙病发生。检测结果同时还表明,依据叶片不对称斑驳症状进行柑橘黄龙病田间诊断具有可靠性。     

柑橘木虱的生活史和田间消长规律研究

柑橘木虱(Diaphorina citri Kuwayama)是传播柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB.)自然虫媒。2015～2017年,通过在自然变温条件下饲养与大田调查相结合的方法,明确了柑橘木虱在江西赣州地区一年发生9～10代,在3月底和4月初,柑橘木虱各虫态在田间的数量都极低,每年的7～9月,柑橘木虱在田间大发生,在环境条件适宜时,柑橘木虱的虫口数量在短时间内可暴发。     

网室栽培对柑橘生长及病虫害的影响

柑橘黄龙病（Citrus Huanglongbing,HLB）是柑橘生产上的毁灭性病害,在田间主要通过柑橘木虱（Diaphorina citri Kuwayama）传播,目前尚未有有效防治柑橘黄龙病的药剂。通过搭建防虫网室种植柑橘是目前国内多个黄龙病高发区用以防控柑橘木虱及黄龙病的新型种植方式,但有关网室栽培技术在柑橘木虱及黄龙病等主要柑橘病虫害上的防控效果并未有系统评估。本研究以黄龙病流行区（广东惠州）的柑橘果园为实验地进行防虫网覆盖,通过对网室栽培区与露天区柑橘的树势、柑橘木虱与黄龙病的流行状况及其他害虫发生情况进行系统比较,分析其差异。本研究发现,搭建防虫网室种植柑橘有利于增长其树势,一定程度上能够减少柑橘害虫的种类和数量,特别是柑橘木虱,同时黄龙病的病情也有所减轻。但网室内的相对湿度会在秋季降低,进而引起柑橘红蜘蛛（Panonychus citri McGregor）的爆发。搭建防虫网室的种植方式对柑橘生长及黄龙病的防控有重要的作用,但也会引起部分柑橘红蜘蛛和粉虱的泛滥。     

广西南宁柑橘粉虱和黑刺粉虱的种群动态监测

于2013-2014年调查了南宁市武鸣县柑桔园柑橘粉虱和黑刺粉虱的种群消长情况。结果表明：2013-2014年柑橘粉虱卵在4月上旬分别达到了全年发生最高峰,由0.51粒/叶增至5.49粒/叶;柑橘粉虱若虫分别在2013年8月上旬和2014年4月上旬达到该年发生最高峰,由0.38头/叶增至3.90头/叶;柑橘粉虱伪蛹发生数量少;柑橘粉虱成虫分别在2013年6月下旬和2014年5月中旬达到该年发生最高峰,由51.63头/黄板降低为4.08头/黄板。2013-2014年柑桔园黑刺粉虱种群数量少,没有诱集到成虫。因此,监测表明2013-2014年南宁柑桔园柑橘粉虱种群发生数量比黑刺粉虱多,以当年4月上旬达到全年发生最高蜂;黑刺粉虱偶尔发现为害;2014年柑橘粉虱卵、若虫发生数量比2013年的有所上升,但伪蛹和成虫发生数量同比有所下降。     

赣南地区柑橘黄龙病发生规律研究

柑橘黄龙病在赣南有30多年发病历史,但对其在赣南地区的发生为害规律尚未深入系统研究,2013年和2014年,结合赣南各地柑橘黄龙病普查,对柑橘黄龙病发病规律进行了分析研究。结果表明,赣南地区橘黄龙病发生分布南北纵向差异大,由南至北随着纬度的增加发病程度明显呈下降趋势,并在北纬25.33度和北纬25.88度有2个明显转折点,即北纬25.33度以南为重发区,25.33度至25.88度间为中等发病区,北纬25.88度以北为轻病区;东西横向区域发生分布差异不明显。果园黄龙病发生危害程度与果园规模、树龄段和品种敏感性有较密切关系;小规模果园病情重、5年以下幼龄树和16年以上老龄树易感病;赣南主栽品种中的温州蜜柑比脐橙敏感,脐橙比沙田柚敏感。     

柑橘木虱对颜色和光波的趋性

以RGB值设置的16种颜色的色纸和17种波段的LED灯为供试材料,以白色色纸和日光灯为对照,利用自制试验器材测定柑橘木虱对不同颜色和不同波段光波的趋性,旨在筛选出对柑橘木虱引诱效果最好的颜色和光波,为柑橘木虱的种群监测和绿色防控提供依据。结果表明,柑橘木虱对不同颜色的趋性存在较大差异,对草绿色、黄绿色、浅黄色、黄色、金色和橙色的选择率超过50%,其中对黄色和金色的趋性强,选择率分别达到72.63%和69.96%。柑橘木虱对不同波段光波的趋性也存在较大差异,对365-455 nm和480-525 nm波段光波的选择率超过50%,其中对365-415 nm波段紫外光的趋性最强,选择率为72.48%-80.39%,其次为480-525 nm波段的绿光,选择率为63.83%-75.00%,再次为420-455 nm波段的蓝光,选择率为59.58%-60.18%。     

柑橘木虱对45种植物精油的趋性反应

为了寻找柑橘木虱无公害防治新方法,采用行为生测法,测定了45种植物精油对柑橘木虱成虫的行为反应,并从中筛选出柠檬桉、欧芹、艾纳香、柠檬马鞭草、山鸡椒、芫荽、尤加利、花梨木、松共9种对柑橘木虱具有显著驱避作用的植物精油进行不同浓度的驱避效果比较。结果表明：当浓度为10-2、10-3、10-4时,柠檬桉、欧芹、艾纳香、柠檬马鞭草、山鸡椒、芫荽、尤加利、松精油对柑橘木虱均具有显著驱避作用,且随着精油浓度的提高驱避作用增强;而花梨木精油仅在浓度为10-2对柑橘木虱具有显著驱避效果,但在浓度为10-4时却表现显著的引诱作用。此外,植物精油间的驱避率比较结果表明芫荽与欧芹精油对柑橘木虱具有较好的驱避活性,有望用于开发柑橘木虱防治新方法。     

自然条件下柑桔木虱种群扩散规律的调查研究

柑桔木虱( Diaphorina citri Kuwayam.)是果园柑橘黄龙病(huanglongbing,HLB)主要传播途径,明确果园柑桔木虱扩散规律,就掌握了柑橘黄龙病传播蔓延趋势。2016年3月—2017年5月在广西金秀县桐木镇一个具有特殊条件的柑橘园开展自然条件下柑桔木虱种群扩散规律的调研。本研究结果与现有国内外相关报道有明显差异性,柑桔木虱传入新果园,刚开始时形成“中心虫株”,然后向外扩散;风是自然条件下影响柑桔木虱种群扩散的主要因子,柑桔木虱扩散与风具有明显正相关,柑桔木虱扩散范围、趋势与风的吹向基本吻合,呈现以“中心虫株”为头部的慧星扩散形状;无台风异常天气影响下,柑桔木虱种群一年自然扩散距离约为105米。