毛细管电泳联用电化学发光法测定食品中泰乐菌素的研究

基于泰乐菌素能增强联吡啶钌[Ru(bpy]32+]电化学发光信号的现象,结合毛细管电泳分离技术,建立了动物组织和蜂蜜中泰乐菌素测定的新方法.分别对检测和分离条件进行了优化,在优化的试验条件下,泰乐菌素在浓度为0.05～10.00 μg/mL范围内具有良好的线性关系,检测限为0.02 μg/mL,用于实际样品中泰乐菌素的测定,回收率为80.0%～95.0%.     

超高效液相色谱-串联质谱法检测鸡肉中6种大环内酯类药物残留量

建立鸡肉中6种大环内酯类药物的高效液相色谱-串联四级杆质谱(UPLC-MS/MS)残留分析方法。样本在乙腈水溶液提取下经PRiME HLB固相萃取柱净化,氮吹浓缩后定容过膜上机检测。在1.00～50.0μg·L~(-1)线性范围内,红霉素、替米考星、泰乐菌素、林可霉素、吉他霉素和螺旋霉素的标准曲线相关系数(r)0.999,方法检出限0.95μg·kg~(-1),空白样品加标回收率范围为75.8%～110.7%,相对标准偏差11.50%,适用于可食动物肌肉红霉素、替米考星、泰乐菌素、林可霉素、吉他霉素和螺旋霉素残留的检测。     

毛细管电泳 电化学发光测定苯磺酸顺阿曲库铵

基于苯磺酸顺阿曲库铵对三联吡啶钌电化学发光信号的增敏作用,建立了检测苯磺酸顺阿曲库铵的毛细管 电泳电致电化学发光新方法.最佳实验条件为:检测电位1.30V,三联吡啶钌浓度5mmol/L,检测池磷酸缓冲溶 液浓度65mmol/L(pH=8.5),运行缓冲溶液100mmol/LTris-HCl(pH=8.5),进样电压16kV,进样时间30s, 分离电压17kV.方法的检测限为0.45μg/mL,线性范围为4.5~150μg/mL,相关系数为0.9987,回收率为 86.8%~96.9%.本方法简便、快速、灵敏、进样量少,可用于苯磺酸顺阿曲库铵注射液含量测定.     

磷酸替米考星在猪组织中的残留消除研究

为了解磷酸替米考星在猪肌肉、肝脏、肾脏、皮肤和脂肪等组织中的残留消除规律,制订安全合理的药物休药期,利用高效液相色谱法(HPLC)在280 nm处检测10％磷酸替米考星可溶性粉的代谢物替米考星在猪组织中的残留情况,对HPLC检测方法进行改良,确定流动相体积比为乙腈∶四氢呋喃∶二丁胺磷酸盐缓冲液∶水=10∶5∶5∶80.测得猪肝、肾中替米考星的检测限为0.025 μg/g,定量限为0.05 μg/g,肌肉、脂肪和皮肤中替米考星的检测限为0.01 μg/g,定量限为0.02 μg/g;平均加标回收率为77.56％～97.82％,变异系数为0.78％～10.5％.以80 mg/L临床推荐剂量进行饮水给药,连续7d,在肝、肾组织中药物残留量较高,在肌肉、皮肤和脂肪中残留量较低.使用休药期WT1.4软件计算,替米考星在肝脏的休药期为5.73d,在肾脏的休药期为3.75d,在肌肉的休药期为11.57 d,在皮肤和脂肪的休药期为10.91 d,按双单侧95％置信区间计算替米考星在猪的休药期为12 d.     

替米考星长效注射液体外抑菌试验及对人工感染巴氏杆菌雏鸡的保护作用

研究替米考星长效注射液的体外抗菌活性及对仔鸡感染多杀性巴氏杆菌的保护作用.采用试管二倍稀释法,以红霉素、磷酸替米考星、泰乐菌素为对照,测定替米考星长效注射液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、无乳链球菌、多杀性巴氏杆菌的最小抑菌浓度(MIC).将替米考星长效注射液以20、40、50 mg/kg 3个剂量,磷酸替米考星10 mg/kg,泰乐菌素10 mg/kg,红霉素5 mg/kg皮下注射,治疗人工感染多杀性巴氏杆菌的雏鸡.体外抑菌试验结果显示:替米考星长效注射液对革兰氏阳性菌抑菌效果与磷酸替米考星相当,强于泰乐菌素和红霉素.体内治疗试验结果表明,替米考星高、中、低剂量组疗效明显,均优于磷酸替米考星治疗组和泰乐菌素治疗组(P<0.01).     

胶束电动毛细管色谱法对复杂农药体系的分离和测定

用胶束电动毛细管色谱法(MEKC)分离了12种不同的农药,研究了电泳电压、十二烷基硫酸钠(SDS)、电泳缓冲溶液、有机改性剂(甲醇)及pH等对分离的影响,找出了最佳分离条件,使12种农药在最短时间内达到基线分离.此外,对含其中6种农药的试样溶液用C18小柱进行了纯化和富集,富集因子为10;然后用MEKC方法测试,它们的检测限为0.1～0.02 μg&#183;kg-1,回收率范围为70.20%～88.71%,变异系数为1.3%～13%.     

胶束电动毛细管色谱法对复杂农药体系的分离和测定

用胶束电动毛细管色谱法 (MEKC) 分离了 12种不同的农药, 研究了电泳电压、十二烷基硫酸钠 (SDS)、电泳缓冲溶液、有机改性剂 (甲醇) 及pH等对分离的影响, 找出了最佳分离条件, 使 12种农药在最短时间内达到基线分离。此外, 对含其中 6种农药的试样溶液用C18小柱进行了纯化和富集, 富集因子为 10; 然后用MEKC方法测试, 它们的检测限为 0 1~0 02μg·kg-1, 回收率范围为 70 20% ~88 71%, 变异系数为 1 3% ~13%。     

大环内酯类药物对化脓隐秘杆菌防突变浓度的研究

测定5种大环内酯类药物对化脓隐秘杆菌的防突变浓度(MPC),为临床合理用药奠定理论基础.采用肉汤法富集化脓隐秘杆菌使菌液浓度为1010CFU· mL-1,采用琼脂二倍稀释法测定红霉素、阿奇霉素、泰乐菌素、乙酰螺旋霉素和替米考星对化脓隐秘杆菌的MPC,计算选择指数(SI).结果表明:各药的MPC和SI值分别为:红霉素1.02μg· mL-1、25.5;阿奇霉素0.64μg· mL-1、16;泰乐菌素0.2μg· mL-1、10;乙酰螺旋霉素0.8μg· mL-1、16;替米考星1.02μg· mL-1、20.4.泰乐菌素的MPC及SI值最低,不易产生耐药突变株,建议临床选择泰乐菌素治疗化脓隐秘杆菌引起的感染.     

利用高效毛细管电泳测定真菌代谢产物吲哚乙酸含量

建立真菌代谢产物吲哚乙酸的高效毛细管电泳检测方法,具体探讨缓冲溶液的种类、浓度、酸碱度,检测波长、有机添加剂及操作电压、进样时间等因素对检测结果的影响.结果表明,以Na<,2>B<,4>O<,7>-NaH<,2>PO<,4>(Na<,2>B<,4>O<,7>浓度为20 mmol/L)为缓冲液,在进样时间20 s、检测波长200 nm、分离高压30 kV、pH值9.0的碱性条件下可以检测吲哚乙酸含量,检测的线性范围为0.1～50.0 mg/mL,回归方程为y=11460x-1226,相关系数r为0.99992,检出限为0.15 μg/mL.     

高效毛细管电泳法分离检测盐酸普鲁卡因和盐酸利多卡因

建立了两种局部麻醉药—盐酸普鲁卡因和盐酸利多卡因的高效毛细管电泳方法。以微铂电极为工作电极,通过优化选择检测电位、缓冲溶液pH、工作电压等实验参数,盐酸普鲁卡因和盐酸利多卡因在5 min内可以得到较好的分离,检出限分别为4 μg/L,6 μg/L,回收率在96.3%～101.6%。方法简便,快速,重现性好,适合药物生产过程的质量控制和临床检测。     

毛细管区带电泳法测定中草药中的有机酸

阿魏酸、绿原酸、咖啡酸是三种结构相似的酚酸类化合物,本研究建立了毛细管区带电泳法测定中草药中的阿魏酸、绿原酸、咖啡酸的分析方法,以pH=8.7的150 mmol/L硼酸为缓冲溶液,在0.5 psi进样8 s,分离电压23 kV,检测波长320 nm,温度25℃的条件下进行测定。阿魏酸、绿原酸、咖啡酸的浓度在0.01~0.2 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数分别为0.999,0.997和0.999,其检出限分别为0.2μg/mL、0.4μg/mL和0.2μg/mL(信噪比为3∶1)。该方法用于金银花、蒲公英、蜂胶、感冒止咳颗粒等药物中阿魏酸、绿原酸、咖啡酸含量的测定,其样品平均回收率在96.0%~100.4%之间,取得了满意的结果。     

LVSS-CE法测定独一味中黄酮类成分研究

[目的]建立大体积进样堆积-毛细管电泳（LVSS-CE）法,富集并测定独一味全草中槲皮素、木犀草素、芹菜素和木犀草素-7-O-葡萄糖苷的含量。[方法]分离条件为：背景电解质为30 mmol/L硼酸盐溶液（pH 9.0）,含8%（V/V）乙腈,分离电压20 kV,检测波长为210nm。进样堆积过程为：流体动力进样5 000 Pa×250 s,施加-25 kV至基质完全排出,20 kV进行分离。[结果]木犀草素-7-O-葡萄糖苷、芹菜素、木犀草素和槲皮素的堆积因子分别达到33、31、50和51,最低检测限分别为10.0、4.5、2.5、2.5μg/L。与常规电泳流体动力进样5 000 Pa×3 s相比,该法提高检测灵敏度300~800倍。[结论]该法简单易行,结果准确度高,精密度好,可用于检测药物中低含量的黄酮类化合物。     

涂层毛细管胶束电动色谱法快速测定三聚氰胺

[目的]初步建立了涂层毛细管胶束电动色谱快速测定三聚氰胺含量的简便方法.[方法]以40 mmol/L磷酸二氢钠和20mmol/L十二烷基硫酸钠（SDS）为分离缓冲溶液,以石英毛细管为分离柱,于234 nm波长处检测,采用峰高外标法定量.通过对分离缓冲液的组分、石英毛细管涂层、pH及电压对三聚氰胺分析的影响进行研究.[结果]该方法检出限0.48 mg/L,线性范围为10 ～ 500mg/L,线性相关系数0.998 5,三聚氰胺出峰时间小于0.8 min.[结论]通过改进样品处理和试验操作方法,提高回收率,可望满足乳制品中三聚氰胺的定性、定量测定.     

一种适用于PCR的环境友好型植物DNA提取方法(英文)

改进DNA提取方法,利用含2%CTAB、1%SDS、2%PVP、100mmol/LTris-Cl(pH8.0)、20mmol/LEDTA(pH8.0)和1.4mol/LNaCl的DNA提取缓冲液,提取了不同种属12种植物的DNA,并对其进行了PCR检测.结果显示,所提取的DNA符合PCR试验要求,用真核生物ITS4/ITS5通用引物均能扩增出清晰的条带.该方法无需酚仿抽提,简单、高效、环保,特别适合大规模植物DNA的提取.     

几种离子对豇豆根瘤腺苷酸琥珀酸裂解酶活性和最适PH值的影响

在含１５％（ｖ／ｖ）甘油和ｐＨ８．０的１００ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｃｉｎｅ缓冲液中，当离子浓度＜１５０ｍｍｏｌ／Ｌ时，Ｋ＋和Ｎａ＋离子是豇豆根瘤腺苷酸琥珀酸裂解酶（ＡＳＡＬ）的激活剂，其最适浓度约为７５ｍｍｏｌ／Ｌ，可分别提高酶活性４０％和３５％。Ｍｇ２＋离子是ＡＳＡＬ的抑制剂，能拮抗Ｋ＋和Ｎａ＋离子的激活效应。ＨＰＯ二４离子可显著降低酶活性，抑制效应与ＨＰＯ二４离子浓度呈正相关。在含１５％（ｖ／ｖ）甘油和ｐＨ６．６～８．０的１００ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液中，ＡＳＡＬ的最适ｐＨ值约为７．４，而在含１５％（ｖ／ｖ）甘油和ｐＨ７．４～８．６的Ｔｒｉｃｉｎｅ缓冲液中，ＡＳＡＬ的最适ｐＨ值约为８．２。     

CZE法用于肾上腺素的优化分离及其在马齿苋中含量测定的研究

[目的]采用区带毛细管电泳法实现去氧肾上腺素、肾上腺素和去甲肾上腺素3种化合物的优化分离,建立测定中药马齿苋中去甲肾上腺素的简便、快速的分离检测方法。[方法]采用未涂层弹性石英毛细管柱(60 cm×75μm i.d.,有效长度50 cm)作为分离通道,以含8 mmol/Lβ-CD的20 mmol/L硼砂(pH=9.5)为运行缓冲溶液,进样0.5 psi(3.447 kPa)×10 s,分离电压15 kV,检测波长215 nm,柱温25℃。[结果]3种肾上腺素在10 min内得到基线分离,且去氧肾上腺素、肾上腺素和去甲肾上腺素分别在16.74～267.84 mg/L(r=0.999 5),16.18～258.88 mg/L(r=0.999 2),16.181～94.16 mg/L(r=0.999 2)浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率(n=6)分别为99.16%、101.24%和98.96%,RSD均小于2.2%。同时,测得中药马齿苋中去甲肾上腺素的质量分数为0.052%。[结论]该方法简便、快速,可用于肾上腺素类药物的分离和含量测定。     

高效毛细管电泳方法同时测定茶叶中多种水溶性维生素

建立了毛细管电泳法同时分离检测多种水溶性维生素的方法,在柱温25℃、电压20 kV、20 mmol/LpH8.8磷酸二氢钾-硼砂缓冲液的电泳条件下,10 min内实现了7种水溶性维生素(VB1、VB12、VB2、VB6、Vc、烟酸和叶酸)的良好分离。比较了水浴萃取、超声波萃取以及SPEC18柱萃取对茶样中维生素分离效果的影响,结果显示SPEC18柱具有较好的纯化和富集作用。利用上述的毛细管电泳法对茶树顶芽和叶片中7种水溶性维生素进行了检测,其迁移时间重现性为0.155 7%~0.166 4%,峰面积重现性为1.080%~3.466%,回收率为96.3%~103.9%。结果还显示茶树顶芽中的水溶性维生素含量最高。     

高效毛细管电泳法测定加杨叶芦丁含量的动态变化

建立了加杨叶中芦丁含量测定的高效毛细管电泳方法。用甲醇溶解样品采用超声提取,研究了缓冲溶液浓度、pH值、电压、温度及进样时间等因素对分离检测的影响;确定了最佳的测定条件:50mmol/L硼酸盐缓冲溶液(pH值为9.3),压力进样时间为5s,温度为25℃,运行电压为20kV,检测波长为254nm。在此条件下,峰面积与芦丁浓度具有良好的线性关系,平均回收率达到98.58%,方法准确。同时,利用建立的方法研究了加杨叶生长过程中芦丁含量的变化。     

外源水杨酸对叶用莴苣生化特性的影响

在3叶1心时,选取大小一致的莴苣幼苗,定植到日光温室中。分别以不同浓度(0,0.1,0.2,0.4,0.6mmol/L)的外源水杨酸(SA)溶液进行叶面喷施处理,旨在研究外源水杨酸对叶用莴苣幼苗生理生化特性的影响。结果表明:浓度在0.2～0.4mmol/L的SA处理,能显著提高叶用莴苣幼苗叶片的过氧化物酶、过氧化氢酶和超氧物歧化酶的活性,增加可溶性蛋白的含量,降低丙二醛的含量。当处理浓度超过0.4mmol/L或低于0.2mmol/L时,幼苗的生理生化特性,各指标均反应出SA处理的效应呈下降的趋势。     

TMR饲养条件下奶牛瘤胃VFA、pH变化规律的研究

为探究全混合日粮(TMR)饲养条件下奶牛瘤胃发酵参数的变化规律,以3头装有永久性瘤胃瘘管的中国荷斯坦奶牛为试验动物,采用TMR饲养,测定了瘤胃24h挥发性脂肪酸(VFA)浓度及pH值。结果表明:在TMR条件下,试验奶牛瘤胃液pH值的变化范围为5.86～6.51,各时间点之间差异不显著(P>0.05);乙酸浓度、丙酸浓度、丁酸浓度变动范围分别为69.62～85.71mmol/L、19.33～25.91mmol/L、10.44～14.02mmol/L,且3种VFA出现最高浓度和最低浓度的时间点均为20:00和08:00;乙酸/丙酸值的变动范围为3.31～3.61,且在20:00比值最小,在8:00比值最大。综合分析显示,TMR技术有利于奶牛瘤胃丙酸型发酵,提高生产效益。