四川猪链球菌Ⅱ型分离株生物学特性的初步研究

猪链球菌Ⅱ型是导致许多国家猪链球菌病的主要病原，自90年代晚期江苏发生猪链球菌Ⅱ型感染以来已成为我国引起人畜共患病的一种重要的新病原菌。最近在四川省部分地区发生了不明原因的猪源人畜共患病，且具有较高的死亡率。我们从病死猪的病料中成功分离到三株猪链球菌分离株，经革兰氏染色、生化试验、血清凝集试验和PCR鉴定，最终证实为猪链球菌Ⅱ型。通过对其毒力因子进行鉴定．结果发现MRP和EF均为阳性。进一步的药敏试验证实：分离菌株对氨苄青霉素、先锋霉素Ⅳ、羧苄青霉素、复方新诺明、头孢肤肟等抗菌药高度敏感。     

猪链球菌广西分离株耐药性分析

采用药敏纸片扩散法对32株猪链球菌广西分离株进行12种临床常用抗生素耐药性试验分析,结果表明:广西区内猪链菌分离株耐药性非常普遍,而且耐药谱广,所有分离株对阿莫西林均具有耐药性,耐药率为100%;对强力霉素、壮观霉素、林可霉素、罗红霉素具有高度耐药性,耐药率分别为96%、89%、89%、84%,分离株对3种以上抗生素都具有耐药性,其中有3株对试验的12种抗生素都具有耐药性,表现为多重耐药性(M DR)。     

上海地区31株2型猪链球菌的分离鉴定及其耐药性分析

猪链球菌病是由猪链球菌引起的一种重要人畜共患病,尤其是猪链球菌2型,不仅对猪的致病性最强,而目可感染特定人群并致死,给人类公共卫生和养猪业带来巨大影响。本研究采集临床症状疑似2型猪链球菌感染猪的全血及内脏器官,通过观察菌落形态及培养特征,筛选出可疑样品,纯化培养并进行PCR鉴定,筛选到31株2型猪链球菌,最后用纸片扩散法对临床分离到的2型猪链球菌菌株测定其耐药性,结果显示对5种药物耐药率分别为：80%（AM）、68%（GM）、84%（CHL）、52%（SXT）、55%（CIP）。试验结果表明分离的31株2型猪源性链球菌,均为多重耐药株,且青霉素类药物的耐药性较为严重,这为临床在治疗2型猪链球菌病提供了合理的指导作用。     

四川某猪场猪链球菌2型菌株的分离鉴定与耐药性分析

本研究采集某发病猪场的环境及病猪样品,通过细菌分离纯化、PCR鉴定为猪链球菌2型致病菌株,随后用纸片扩散法测定该菌株的耐药性,结果显示对青霉素类、头孢类（头孢噻呋）、喹诺酮类、糖肽类、氨基糖苷类、多肽类最为敏感,对头孢类（头孢西丁）、氯霉素类较为敏感,对磺胺类、碳青霉烯类（亚胺培南）、四环素类、大环内酯类耐药。选取敏感的10种药物进行最小抑菌浓度（MIC）值测定,结果显示：阿莫西林的MIC为8μg/mL,苯唑西林、头孢噻呋、氧氟沙星、万古霉素和庆大霉素的MIC为4μg/mL,恩诺沙星和恩拉霉素的MIC为1μg/mL。     

Ⅱ型猪链球菌的致病因子研究进展

Ⅱ型猪链球菌的致病因子研究进展杜文金孙融冰黄引贤①（农业部动物检疫所青岛２６６０３２）Ｆｉｅｌｄ（１９５４）在英国从暴发败血症、脑膜炎和多发性关节炎的乳猪中分离出一株α－溶血猪链球菌,可是却不能归属于现今所认识的１９个Ｌａｎｃｅ－ｆｉｅｌｄ群,ＤｅＭ...     

四川地区一株猪链球菌16型菌株的分离与鉴定

猪链球菌16型是一种人畜共患病原,猪和人感染的病例国内外鲜有报道。菌株ZY16分离自四川资阳某猪场1头表观健康仔猪。通过对谷氨酸脱氢酶基因(gdh)和16S rRNA基因的PCR扩增分析,确定该分离株为猪链球菌。经玻片凝集试验和PCR扩增cps16K基因,鉴定血清型为16型。药敏试验结果显示ZY16对青霉素、氨苄西林、头孢曲松、卡那霉素、环丙沙星、氯霉素敏感,对四环素、庆大霉素耐药。本研究为四川地区首次报道分离到猪链球菌16型,具有重要的公共卫生意义。     

猪链球菌2型四川分离株猪体回归试验

选用35~38日龄的健康断奶仔猪21头,分3组,用2005四川分离株SSsc0501分别经静脉、肌肉注射和口服3种途径感染,进行猪体回归试验。肌肉注射组(含菌0.6×108个/mL)16 h开始出现症状,至36 h全部死亡,发病率、病死率均为100%;静脉注射组(含菌0.2×108个/mL)25 h开始出现症状,48 h内全部死亡,发病率和病死率均为100%;口服攻毒组(含菌2×108个/mL)90 h后开始有发病症状,第9天有1头死亡,发病率75%,病死率33%。从感染病死猪的肝脏、脾脏、肾脏、心血、大脑、脑脊液、淋巴结、肺脏和关节液中均分离到链球菌,经鉴定为试验攻毒的目的菌,表明猪体能够很好地用于猪链球菌2型动物感染模型,同时说明该菌侵害器官广泛,为进一步探讨该病的综合防制提供了重要技术依据。     

猪链球菌2型四川分离株毒力基因的检测及其序列分析

根据猪链球菌2型的MRP、EPF和SLY基因设计合成了四对引物,对我们分离鉴定的2005四川分离株进行毒力因子检测,并对阳性产物测序比较。结果以分离株为模板,获得了与预期结果一致的867bp(MRP)、572bp(EF)的2个片段,以及SLY的长度为1502bp目的片段(外引物)和1443bp的目的片段(内引物)。说明分离株SSsc0501为MRP+EF+SLY+,属于具有3种主要毒力因子的强毒株。经对PCR阳性产物测序及序列分析,结果其与P1/7株的核苷酸序列完全一致,与1933株的同源性达99.7%,仅在128位、217位、744位、1380位、1386位的5个核苷酸发生突变。在氨基酸水平上SSsc0501株与1933株的同源性达99.6%,有2个氨基酸发生替代。     

甘草等五味中药对猪链球菌Ⅱ型的抗菌活性试验

为验证清热解毒类中药对猪链球菌的抗菌活性。采用不同的提取方法验证甘草、黄连、秦皮、黄柏、金银花的水提物和乙醇提取物对猪链球菌Ⅱ型的抗菌活性。结果表明,甘草醇提物的效果最理想,最小抑菌浓度(MIC)为4.13 mg/mL,而水提物对猪链球菌Ⅱ型的MIC为40.63 mg/mL,表明甘草的醇提物对猪链球菌Ⅱ型的体外抑菌效果比其水提物显著。黄连醇提物对猪链球菌Ⅱ型的MIC为28.13 mg/mL,显著低于水提物对猪链球菌Ⅱ型的MIC为87.50 mg/mL。秦皮水提物为68.75 mg/mL,秦皮醇提物为175.0 mg/mL,表明秦皮的水提物比其醇提物对猪链球菌Ⅱ型效果显著。而黄柏、金银花的不同提取物对猪链球菌Ⅱ型的抑制作用差异性不显著(P>0.05)。     

浙江部分地区屠宰场待宰猪链球菌的检测及药敏试验

对浙江部分地区屠宰场中猪链球菌的分布和耐药情况进行调查.结果表明,猪链球菌的携带率为13.1%(38/290),其中2型猪链球菌为0.69%(2/290);不同地区之间待宰猪的猪链球菌携带率存在明显的差异,义乌地区的猪链球菌携带率为21.0%(22/139),而江山为0;各地区不同分离株的耐药性无明显差异,均对β-内酰胺类药物敏感,50%以上分离株对四环素、强力霉素、红霉素、麦迪霉素等几种药物表现为多重耐药.     

猪链球菌2型的分离鉴定与药敏试验

从广东省某猪场病猪脑内分离到1株细菌,经培养特性观察、镜检、生化鉴定和PCR检测,结果鉴定为链球菌2型。该菌对阿莫西林、头孢拉定、头孢喹肟、头孢曲松均敏感;对青霉素G、氨苄西林、恩诺沙星、氧氟沙星、阿奇霉素、多西霉素中度敏感;对林可霉素、壮观霉素、链霉素、土霉素、复方新诺明、阿米卡星耐药。     

Streptococcus suis isolated from pigs in Finland

A total of 58 Streptococcus suis strains were isolated from deceased pigs submitted to the National Veterinary Institute, Regional Laboratory in Kuopio, Finland, over a 3 1/2 year period, most frequently from cases of pneumonia. The bacteria were isolated from cases of meningitis, sepsis, rhinitis, endocarditis and abortion. S. suis was also isolated from nasal cavity, lung and brain of some sick piglets without signs of inflammation. Further S. suis was detected in 12 out of 107 tonsils of healthy fatteners tested. S. suis strains were identified by biochemical methods followed by typing. The most common capsular types were 7, 3 and 2, respectively. Only one type 1 strain and no types 6 and 9 strains were found. All S. suis strains tested were sensitive to penicillin and ampicillin.S. suis is not uncommon in Finnish pig herds. S. suis may be regarded as a potentially pathogenic organism which under certain predisposing conditions may cause serious disease.     

湖南省猪链球菌的分离与鉴定

从病猪脏器病料中通过细菌培养、生化试验分离鉴定出了121株猪链球菌.经PCR技术鉴定马链球菌兽疫亚种28株,占23.1%,猪链球菌24株,占19.8% ,其中猪链球菌2型4株,占3.3%,猪链球菌9型2株,占1.7%,猪链球菌1型和7型都没检测到,证实省内除了猪链球菌2型外,也存在其他血清型的猪链球菌.     

猪链球菌病研究进展

猪链球菌(Streptococcus suis)是一种重要的人兽共患病病原体,能够引起猪的疫病,人类感染该菌可导致脑膜炎、败血症,甚至死亡.该菌对养猪业造成严重经济影响,对公共卫生事业构成巨大威胁.由于猪链球菌血清型较多,抗原结构复杂,在临床上又可呈现不同的症状,如败血症、脑膜脑炎、心内膜炎、肺炎、化脓性淋巴结炎、关节炎等,还常常与其他疾病发生合并感染.近几年来,该病的发病率和死亡率有逐年上升趋势.链球菌的致病性已引起临床工作者和科研人员的广泛关注和重视,国内外许多学者对猪链球菌做了大量的研究工作,已发现的猪链球菌2型的致病因子包括荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、细胞外因子、蛋白质片段和IgG结合蛋白、溶血素等.     

河南省猪链球菌的分离鉴定及耐药性分析

为探讨河南省猪链球菌的血清型分布和耐药性情况，本试验对2016年5月~2017年5月从河南省猪场采集的各种组织病料进行猪链球菌的分离培养、生化鉴定及PCR鉴定，并进行了血清群的分群鉴定和血清型的分型鉴定，对其中的2型猪链球菌进行了药敏试验。结果显示，试验共鉴定出189株猪链球菌，流行的猪链球菌的血清群主要以D群为主，其次是G群和C群；优势的血清型是2型、7型、9型和1型。其中87株为2型猪链球菌，超过90%的2型菌株对β-内酰胺类（青霉素G、阿莫西林和头孢菌素类）、氯霉素、万古霉素、环丙沙星敏感，超过40%的2型菌株对多西环素、四环素、红霉素、复方新诺明、丁胺卡那霉素、克林霉素、链霉素、米诺环素产生耐药性。以上结果为指导猪场使用敏感药物及时控制疫情、选择血清型相符的疫苗进行预防及减少损失提供参考依据。     

常用抗菌药物对东北地区猪源链球菌的体外抗菌活性研究

采用微量稀释法(27种药物)和琼脂扩散法(7类药物)分别对临床分离的101株猪源链球菌进行了体外耐药性研究。以美国临床检验标准委员会(CLSI/NCCLS)的临界浓度和抑菌圈直径做为判断标准,判定了其对27种药物的耐药性和7类药物的耐药谱。结果表明,临床分离的菌株以耐药菌为主,且100%的菌株呈多重耐药;对头孢菌素类(100%)、磺胺类药物(96%～100%)、大环内酯类(97%～99%)、四环素类(98%)、青霉素类(94%～97%)耐药性最为严重,氟喹诺酮类药物(48%～91%)耐药性次之,共有25种不同的耐药谱型。结果表明,在东北地区分离到的猪源链球菌以多重耐药为主。     

广东省1株猪2型链球菌的分离鉴定及部分生物学特性研究

为确诊引起广东省某规模化猪场保育仔猪发生死亡的病因,本试验采集病猪肝脏、脾脏、心脏、脑、关节液和淋巴结等病料进行细菌分离,并对分离菌株进行纯化培养、菌落形态观察、革兰氏染色、形态学观察、生化试验,用血清型特异性引物进行PCR扩增,并进行毒力基因检测、药敏试验、生长曲线测定及动物试验。结果显示,分离菌株在成牛血清琼脂平板上呈圆形、灰白色、表面光滑、边缘整齐的菌落,镜检为革兰氏阳性球菌,呈链状排列。该菌株的生化试验结果符合链球菌的特征,PCR扩增结果显示猪链球菌保守基因片段（gdh和gapdh）和猪2型链球菌特异的cps2J基因片段均为阳性,表明该分离菌株为猪2型链球菌。毒力基因检测结果表明,该菌株毒力因子基因型为gdh⁺/gapdh⁺/epf⁺/mrp⁺/sly⁺/orf2⁺/fbps⁺。分离菌株用营养肉汤培养6 h达到对数生长期,培养10 h的菌液D_{600 nm}值为0.310。药敏试验结果表明,该菌株对青霉素、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸钾等药物敏感,但对强力霉素耐药。动物试验结果表明,感染分离株的BALB/c小鼠未出现死亡且无明显临床症状,毒力较低。本研究为该猪场链球菌病的防控提供了重要参考信息。     

猪链球菌通用及2型TaqMan荧光PCR检测技术建立与应用

在对设计合成的引物和6-carboxy-fluorescein(6-FAM)荧光素标记的TaqMan水解探针进行筛选的基础上,通过反应体系优化,建立了检测猪链球菌通用和2型的2种荧光PCR检测技术,实现了对猪链球菌的快速检测和定型。敏感性、特异性、重复性、感染组织模拟试验及临床样品的检测结果均表明建立的方法快速、特异、灵敏,整个检测过程(包括样品的前处理时间)可在1.5 h内完成,检测培养物和模拟组织样品的灵敏度可达10 CFU～100 CFU。