胚胎冷冻技术及其在转基因小鼠中的应用

随着生物工程技术的发展,出现了许多生物工程小鼠品系,促使胚胎冷冻技术得到了广泛应用。胚胎冷冻技术不仅为转基因动物提供可用胚胎,还使胚胎移植不受时间、地域限制,简化引种过程,防止疾病传播,为建立优良动物的胚胎库提供了条件。综述了几种常用的胚胎冷冻方法及其在转基因小鼠中的应用研究,指出了胚胎冷冻方法存在的主要问题,并展望了其发展前景。     

小鼠和猪胚胎冷冻保存技术的研究进展

从胚胎冷冻保存技术原理对小鼠和猪胚胎冷冻发展速度相差悬殊的原因进行了概述,比较了小鼠和猪胚胎冷冻技术发展的历程及影响两种动物胚胎冷冻的因素,并展望了未来猪胚胎冷冻保存技术。以期能对今后的研究提供参考。     

21世纪哺乳动物胚胎生物工程发展趋向

动物胚胎生物工程主要是指在实验室条件下,对动物胚胎进行人为干预、改造和操作,按照人们的意愿生产某种性别或特定功能动物的实践。进入21世纪以来,动物胚胎生物工程技术发展迅速,研究不断深入,在动物配子/胚胎超低温冷冻保存、MOET育种、性别鉴定与控制、转基因、克隆和胚胎干细胞分离与培养技术等研究领域取得了令人瞩目的成就,同时也突现了许多新的研究热点和存在的问题。该文围绕哺乳动物配子与胚胎生物工程中几个热点研究进行简述。     

动物胚胎干细胞在动物科学中的应用

自Evans等从延迟着床胚胎中分离出小鼠胚胎干细胞(ES)以来,科学家就不断地对胚胎干细胞进行深入研究,特别是在应用研究方面,将转基因技术、克隆技术、器官移植以及胚胎工程等方面结合起来在动物遗传育种、胚胎学的领域应用。就此而言,胚胎干细胞在生产转基因动物、克隆动物、细胞分化研究、生产用于人类器官移植的动物器官以及细胞分化的机制研究。本文就以上指出的这些方面的应用前景进行评述和展望。生产转基因动物1.生产转基因动物的程序和方法利用ES细胞生产转基因动物的方法有:(1)细胞核移植法:以转基因ES细胞作供体进行细胞核移植,…     

高效制备转基因小鼠的优化试验

为了优化转基因小鼠的制备技术,试验着重对注射DNA的制备、高质量受精卵的获得、显微注射、胚胎移植及早期胚胎检测等各步骤中的主要影响因素进行了优化。移植后出生的小鼠经PCR及Southern Blot检测,阳性鼠检出率由1.85%(2/108)增加到23.36%(25/107)。由此说明,通过注射DNA的改良、技术优化以及GFP在转基因动物中的应用,转基因效率可以得到明显提高,为高效制作转基因动物提供基础。     

奶山羊胚胎冷冻和移植试验

家畜胚胎冷冻保存的研究对于优良品种胚胎库的建立及品种推广有重要意义,同时冷冻胚胎便于在生产中应用。哺乳动物胚胎冷冻保存始于实验动物。50年代Ferdow等初次成功地使冷冻家兔受精卵发育成胎儿。Whittingham(1972)冷冻移植小鼠胚胎成功。同一时期Wilmut也成功地进行了小鼠胚胎冷冻试验,1973年又成功地进行了牛冷冻胚胎的移植。此后在绵羊(Willasen et al.1974)、山羊(Bilioan et al.1976) 和马(Ra ma moto,1982)等动物的胚胎冷冻移植相继成功。英、美和西德等国已建立奶牛胚胎移植公司,向国外输送冷冻胚胎。目前国内在奶牛、兔和绵羊方面均有成功的报道,但在奶山羊还未见报道。本试验旨在解决奶山羊胚胎冷冻和解冻的方法问题,为建立我国优良奶山羊品种西农萨能奶山羊胚胎库创造条件。     

动物胚胎冷冻保存技术的研究进展

分析了动物胚胎冷冻保存的机理,综述了几种常见的动物胚胎冷冻保存方法的研究进展,并对动物胚胎玻璃化冷冻保存技术的发展前景进行了展望。     

哺乳动物胚胎冷冻保存研究进展

[目的]介绍哺乳动物胚胎冷冻保存技术的最新研究进展。[方法]从冷冻原理、防冻剂种类、冷冻方法、解冻方法等方面综述了哺乳动物胚胎冷冻保存技术的最新研究进展。[结果]胚胎冷冻保存的原理是阻止冷冻、解冻过程中细胞内形成致死冰晶;防冻剂的种类大致分为低分子量渗透性防冻剂、低分子量非渗透性防冻剂、大分子物质、生物活性物质;胚胎冷冻方法主要有常规慢速冷冻法、玻璃化冷冻法和快速冷冻法;解冻方法主要介绍了快速解冻。[结论]胚胎冷冻保存技术的应用愈加广泛,将对胚胎生物工程和其他生物技术产生推动作用。     

“哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存技术研究与应用”取得突破性成果

动物科技学院动物繁殖教研室的自选研究课题“哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存技术的研究与应用”于１９９９年１２月１８日通过鉴定。专家委员会认为:该项目在系统研究哺乳动物胚胎对几种常见抗冻剂的耐受性和细胞膜通透性的基础上,结合抗冻剂的化学特点,研制出在常温下高效、低毒的冷冻保护液ＥＦＳ和ＧＦＳ,并建立了简易、快速、稳定的胚胎玻璃化冷冻技术方法。运用这种技术方法已成功地对小鼠、家兔、绵羊和牛的体内、外受精胚胎及显微操作胚胎进行了玻璃化冷冻保存。冷冻胚胎解冻后的体内、外继续发育率高于国内同类研究水平,达到或超过本…     

影响猪卵母细胞冷冻效果的主要因素及其研究进展

卵母细胞冷冻保存技术的发展为体外受精和核移植以及转基因动物生产等胚胎工程技术提供了极大的灵活性,同时为家畜保种及珍稀濒危动物的保护提供了新的技术途径.本文综述了以猪为主的家畜卵母细胞的冷冻保存的原理并对影响卵母细胞冷冻保存的各种因素进行分析,以期为猪卵母细胞的冷冻保存研究提供一定的理论参考,从而提高猪卵母细胞冷冻后的成活率和体外受精生产效率.     

动物转基因技术及其研究进展

本文简述了转基因动物技术的发展、现状和转基因动物的技术原理，介绍了显微注射法、反转录病毒法精子载体法、胚胎干细胞法和体细胞核移植法制作转基因动物以及转基因动物的鉴定方法。     

猪卵母细胞冷冻损伤的研究进展

卵母细胞冷冻保存技术的发展为体外受精、核移植以及转基因动物生产等胚胎工程技术提供了极大的灵活性,同时为家畜保种及珍稀濒危动物的保护提供了新的技术途径。在此,综述了以猪为主的家畜卵母细胞的冷冻保存的原理及冷冻保存对卵母细胞超微结构和发育潜力的影响,以期为猪卵母细胞的冷冻保存研究提供一定的理论参考,从而提高猪卵母细胞冷冻后的成活率和体外受精生产效率。     

动物超数排卵技术发展现状

超数排卵技术充分挖掘了母畜的繁殖潜力,是获得大量整齐、优质的卵子或胚胎的一种有效方法,为胚胎移植、克隆和转基因动物生产等提供了卵子和胚胎来源,为获得大量胚胎来源提供了技术支撑和保证。本文就超数排卵的原理、概况、药物的方法和存在的主要问题进行了综述。     

动物转基因技术及其研究进展

本文简述了转基因动物技术的发展、现状和转基因动物的技术原理,介绍了显微注射法、反转录病毒法、精子载体法、胚胎干细胞法和体细胞核移植法制作转基因动物以及转基因动物的鉴定方法.     

胚胎工程技术及其在畜牧业中的应用

胚胎工程技术研究的目的,是对哺乳动物的胚胎在体外进行人为控制操作,让其继续发育,进而获得优良或珍稀动物个体,并应用这类技术进行基础研究和应用开发性研究。文章主要叙述了胚胎移植、胚胎冷冻保存、胚胎分割、体外受精、性别鉴定及控制、转基因动物、细胞核移植、胚胎干细胞和胚胎嵌合等胚胎工程技术及其在畜牧业中的应用前景。     

小鼠胚胎冷冻保存条件研究

为探索在实验室条件下最佳的小鼠胚胎冷冻保存条件.对不同发育阶段小鼠胚胎按照同一个冷冻程序进行冷冻;两个不同的冷冻程序对同一个发育阶段的小鼠胚胎进行冷冻.结果表明,-7℃平衡10 min,然后以0.3℃/min的速率迅速降至-35℃,-35℃平衡5min后投入液氮中,此冷冻程序比较适合小鼠胚胎冷冻;冷冻保存对16细胞以上的小鼠胚胎影响较小.     

奶牛胚胎冷冻保存技术的研究

<正> 自从Whittngham发现经超低温冷冻保存的小鼠胚胎可以成活后,超低温冷冻保存哺乳动物胚胎的方法取得很大进展。目前许多国家都在对不同的胚胎冷冻保护技术进行探讨,如加入冷冻保护剂的种类和浓度、冷冻程序的选择、脱除保护剂的方法等,试图寻找一个胚胎冷冻和解冻的最佳方案。我们从87年开始从事这方面的研究,其目的是探索胚胎冷冻的方法和步骤、寻找适宜于基层生产单位应用的解冻和脱除冷冻保护剂的简易方法。为今后胚胎移植的推广应用打下基础。     

鱼类基因转移研究中存在的问题与对策

转基因动物技术是20世纪80年代初发展起来的一项生物领域高新技术[1]。转基因鱼模型的构建为鱼类基因工程育种奠定了理论基础,基因导入方法的成熟、胚胎干细胞技术的发展以及基因组学理论的应用为鱼类基因工程育种提供了操作平台。目前,转基因技术在外源基因片段长度、外源基因定点整合率、外源基因表达率、转基因动物存活率等技术方面都有了很大提高。转基因动物的研究内容也非常广泛,从基础理论到应用技术,从实验室到生产也都有了较大发展,如基因表达的调控、基因产品的制备、动物品种的培育等[2]。以下就鱼类基因转移研究中转基因技…     

鱼类基因转移研究中存在的问题与对策

转基因动物技术是20世纪80年代初发展起来的一项生物领域高新技术[1]。转基因鱼模型的构建为鱼类基因工程育种奠定了理论基础,基因导入方法的成熟、胚胎干细胞技术的发展以及基因组学理论的应用为鱼类基因工程育种提供了操作平台。目前,转基因技术在外源基因片段长度、外源基因定点整合率、外源基因表达率、转基因动物存活率等技术方面都有了很大提高。转基因动物的研究内容也非常广泛,从基础理论到应用技术,从实验室到生产也都有了较大发展,如基因表达的调控、基因产品的制备、动物品种的培育等[2]。以下就鱼类基因转移研究中转基因技…     

应用胚胎生物工程技术扩繁良种奶牛

湛江南翔胚胎生物工程技术研究所“应用胚胎生物工程技术扩繁优良奶牛”工程，又传来喜讯：该研究所2005年4月以当地著名的雷州母黄牛为受体。运用胚胎生物工程性别控制体内体外冷冻胚胎技术，首批10头母黄牛移植北美洲高产“荷斯坦”奶牛胚胎，于近日成功产下第一头奶牛犊，重30多千克，健康活泼。据称，这是广东省率先成功借当地母黄牛之腹产下“洋奶牛犊”，技术在国内居领先地位。