葡萄茎尖组培苗中扇叶病毒的酶联（ELISA）检测

目前使用的扇叶病毒(GFLV)检测方法包括:接种昆诺藜与千日红、嫁接接种砂地葡萄(Vitis rupestris Scheele)的St.George 品种、免疫双扩散,抗体致敏乳胶试验、免疫电镜及酶联免疫吸附试验(ELISA)。(ELISA)方法由于无需特殊设备,从而得到最广泛应用。在植株体内,GFLV 的含量随季节而变化。在某些时期,含量很低,即使用ELISA,也无法测出其中的 GFLV。茎尖     

甘薯茎尖脱毒研究

本文报道了应用甘薯茎尖分生组织培养技术获得脱毒苗的研究结果。试验表明切取的茎尖大小与脱毒效果呈显著的负相关（ｒ＝－０．９８７５），表明病毒距茎尖呈递减分布，越接近茎尖顶端带病毒越少或不带病毒。分生组织带１～２个叶原基脱毒效果较好，添加适量的病毒钝化剂可提高脱毒率，但抑制茎尖生长，成苗率有所降低。选用无症状、生长健壮的薯苗作脱毒材料，可以得到较高脱毒率的组培苗。     

植物诱抗剂AHO联合茎尖培养脱除马铃薯S病毒和马铃薯Y病毒

研究了植物诱抗剂3-丙酮基-3-羟基羟吲哚(3-acetonyl-3-hydroxyoxindole, AHO)联合茎尖培养从试管苗中脱除马铃薯S病毒(PVS)?马铃薯Y病毒(PVY)的方法和效率?取PVS侵染的‘定薯3号’和‘定薯4号’以及PVY侵染的‘靖薯3号’和‘靖薯4号’的壮芽, 茎尖剥离后培养至4~5个叶片, 用100 mg/L植物诱抗剂 AHO水剂喷施试管苗, 每隔2 d喷施一次, 共3次, 末次喷施2 d后取茎尖剥离培养, 获得再生试管苗?用电子显微镜负染色?ELISA?荧光定量RT-PCR检测再生试管苗的带病毒情况?结果显示, AHO对4个品种的马铃薯试管苗生长无影响, 用AHO处理后再茎尖剥离培养, 脱毒率均高于未处理的对照; 检测结果还显示AHO处理的马铃薯再生苗的带毒量也低于未处理的对照, 且随处理次数增加带毒量下降?研究结果表明, 利用植物诱抗剂AHO联合茎尖剥离培养方法可以提高脱除PVS?PVY的效率, 获得无病毒核心苗?     

植物茎尖超低温技术脱除病原体研究进展

本文阐述了植物茎尖超低温技术脱除病原体的原理,介绍了各种常用方法的技术要点,回顾了该技术成功脱除病原体的历史,总结了该技术独特的优势,并分析了该项技术在植物检疫和种质资源保存中应用的潜力和前景。     

茎尖嫁接脱除柑桔主要病原的研究

 应用茎尖嫁接及热处理与茎尖嫁接相结合的技术,对我国柑桔的主要病毒类病害(黄龙病、衰退病、裂皮病、碎叶病)进行脱除病原研究。结果表明:黄龙病、衰退病、裂皮病平均脱除率分别为100%、80.6%和54.1%。单用茎尖嫁接对碎叶病脱除无效,但用热处理与茎尖嫁接相结合的方法进行脱除,可以收到理想效果。同时,研究了嫁接前切口处加激素、茎尖大小、适宜砧木苗龄、砧木带与不带子叶、再嫁接等对提高茎尖嫁接成活率的影响。     

从韩国进口枫叶树上截获到锐尖茎线虫

在对韩国进口枫叶树的线虫检疫中发现锐尖茎线虫Ditylenchus acutus(Khan,1965)Fortuner&Maggenti,1987.并对其进行描述.     

柑桔碎叶病毒,茎陷衰退病毒脱除技术研究

Calavan等(1972)报道采用40/30℃ 44/30℃6 2星期,脱除北京柠檬碎叶病毒。Roistacher等(1972)采用50℃湿热处理北京柠檬3～22h,得到无碎叶病毒,并于1976、1977年报道,茎尖嫁接不能脱除柑桔碎叶病毒(CTLV)。宫川(1980)提出40/30℃120日脱除椪柑、蕉柑等碎叶病毒。Koizumi(1984)采用40/30℃9日 35/30℃13～20日 茎尖     

杏（Prunus armeniaca L.）的茎尖培养研究

９个杏品种的茎尖培养结果表明,初代培养基因ＭＳ＋０．２ｍｇ／ｌＫＴ＋０．２５ｍｇ／ｌ２,４,－Ｄ＋０．２５ｍｇ／ｌＮＡＡ＋３％蔗糖,增殖培养基为ＭＳ＋１．５ｍｇ／ｌＢＡ＋０．１ｍｇ／ｌＩＡＡ＋２．５％山梨醇,加长生长培养基为ＭＳ（１／２Ｎ）＋２．２ｍｇ／ｌＺＴ＋３％蔗糖,诱导生根培养基为１／２ＭＳ＋０．５ｍｇ／ｌＩＢＡ＋２％蔗糖,在相同培养条件下,不同品种的茎尖增重速率不同,从大到小依次为Ｔｙｒｎ     

组织培养技术在植物病毒和类病毒研究中的应用

组织培养技术在植物病毒和类病毒研究中的应用陈纯贤，万蜀渊（华中农业大学柑桔研究所武汉４３００７０）植物病毒和类病毒不能在人工培养基上生长，但可以在离体培养的寄主组织或细胞里繁殖。利用组织培养技术为研究病毒、类病毒等植物病原与寄主细胞的关系，建立离体鉴...     

苹果茎尖培养的脱病毒效果

在我国的栽培苹果中,病毒病的感染率很高。苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)、茎痘病毒(SPV)和茎沟病毒(SGV)等潜隐型病毒的感染株率达60—100%,严重影响树体的生长、结果,甚至引起死亡。脱掉病毒,获得无病毒原种材料,并以此繁殖无病毒苹果苗     

电流处理抑制甘薯丛枝病症状及提高茎尖培养成苗率

甘薯丛枝病在我国东南沿海主薯区流行多年,发病率高,是影响我国甘薯产量和品质的一个主要限制因子。其典型症状是植株叶小、褪绿、矮缩和侧枝丛生。甘薯丛枝病病原物是一种类菌质体(Mycoplasma-like organism,MLO),现在国际上统称植原体(Phytoplasma)。     

甘薯无病毒苗培育技术研究

１９９１￣１９９６年,甘薯茎尖离体培养采用ＭＳ为基本培养基,添加６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）０．５ｍｇ／Ｌ＋萘乙酸（ＮＡＡ）０．２ｍｇ／Ｌ＋腺素（Ａｄ）５ｍｇ／Ｌ,培育出１２个甘薯品种的脱毒苗,茎尖培养成苗率５０．０％￣９５．６％,成苗期４３￣６０ｄ。切取的茎尖大小与脱毒效果呈显著的负相关（ｒ＝－０．９８７５）,茎尖带１个叶原基时,ＳＰＦＭＶ脱毒率为３８．１％,培养基中添加适量的植物病毒钝化剂可使     

菊花母株病毒鉴定及其茎尖组培脱毒苗的病毒检测

选用显斑驳症状的兼云香、赤线金钩和叶片黄化的泉乡万圣和泉乡冲天等共4个品种的葡萄母株，龙茎脱毒获得的茎组培苗用生物学和血清学方法检测葡萄母株和组培苗的带毒情况。鉴定结果表明，兼云香母株（1A）带有葡萄B病毒，其组培苗未能脱去该病毒。赤线金钩母株（2A）带有番茄不孕病毒（TAV）和葡萄B病毒（CVB）复合侵染，其组培苗脱去了TAV病毒还带有CVB病毒。万乡泉圣母株（3A）和泉乡冲天母株（4A）带有菊花B病毒，其组培苗均脱去了此病毒，是真正的脱毒组培苗。     

梨离体植株中苹果茎沟病毒的脱除技术

为建立苹果茎沟病毒(ASGV,Apple stem grooving virus)的有效脱除方法,以3个梨品种的离体植株为材料,比较了4种脱毒方法对ASGV的效果.结果 显示,3个梨品种的离体植株在茎尖培养、茎尖病毒醚处理、茎尖变温热处理和茎尖病毒醚加变温热处理后,其平均脱毒率分别为50.0％、70.8％、69.6％和...     

油桃茎痘相关病毒中国分离物基因组的分子特征分析

为明确我国油桃茎痘相关病毒(nectarine stem-pitting-associated virus,NSPaV)基因组的分子特征,利用RT-PCR和RACE技术对NSPaV中国分离物NSPaV-T04基因组进行克隆,采用最大似然法对得到的NSPaV基因组序列和GenBank中的5条NSPaV基因组序列构建系统发育树,应用RDP软件对NSPaV基因组序列进行重组分析。结果表明:中国分离物NSPaV-T04基因组序列全长为4 991 nt,包括4个开放阅读框(open reading frame,ORF),其中ORF1与ORF2共同编码1个RdRp P1-P2融合蛋白,ORF3编码1个CP,ORF5与ORF3共同编码CP通读蛋白。系统发育树和序列比较分析结果显示,中国分离物NSPaV-T04(MN095353)与美国分离物NSPaV/12P42(KT273410)的亲缘关系最近,核苷酸序列同源性最高,为96.4%;NSPaV-T04的RdRp P1变异较大,与GenBank中5条NSPaV基因组核苷酸序列的同源性为90.5%~96.1%,CP较为保守,核苷酸序列的同源性为96.6%~98.7%。重组分析结果显示,中国分离物NSPaV-T04为鉴定的一个重组体(韩国分离物SK)的亲本序列,表明中国分离物NSPaV-T04可能是一个实际的重组体。     

三种ELISA方法检测苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒的比较

苹果褪绿叶斑病毒（ＡＣＬＳＶ）和苹果茎沟病毒（ＡＳＧＶ）是感染苹果和其它一些果树的重要病毒。作者应用ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ法成功地检测了苹果组培苗中的这两种病毒。为了简化操作步骤,试验了ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ和改良ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ法,并与ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ的检测结果比较。试验结果表明,ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ能检测出ＡＳＧＶ,却不能检测出ＡＣＬＳＶ,与此同时,这两种病毒均可用改良ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ检测。ＤＡＳ     

侵染青蒿的烟草曲茎病毒的分子鉴定及基因组结构特征分析

菜豆金色花叶病毒属病毒是一类在全球热带及亚热带地区造成严重经济损失的植物病毒,田间杂草是这类病毒重要的中间寄主。 本研究从云南省玉溪市采集了表现黄脉的青蒿植株,通过PCR扩增、克隆及测序从样品中获得两条菜豆金色花叶病毒属病毒DNA-A全基因组序列,分别为YN6393-23和YN6393-27,其全长均为2 739 bp,相似性为100%。序列分析发现,YN6393-23和YN6393-27的核苷酸序列与烟草曲茎病毒Tobacco curly shoot virus(TbCSV）的分离物YN4584的核苷酸序列相似性最高,为99.45%。根据国际病毒分类委员会对菜豆金色花叶病毒属病毒种的分类标准,全基因组序列相似性大于91%则为同种病毒,表明此病毒分离物为烟草曲茎病毒的一个分离物。这是菜豆金色花叶病毒属病毒侵染青蒿植株的首次报道。     

利用Real-time RT-PCR方法检测苹果中苹果茎沟病毒

以含有苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)的苹果枝条为试材,设计扩增产物片段为176 bp的特异性引物,优化反应条件,构建标准曲线,建立了苹果茎沟病毒的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法.对该方法进行了灵敏度和重复性试验,并且利用建立的方法对受ASGV感染的苹果枝条和树叶进行定量检测.最后,比较了实时荧光定量RT-PCR与常规RT-PCR检测的灵敏度.结果表明:样品的荧光定量PCR有良好的扩增曲线和溶解曲线,该方法的灵敏度可达6.8× 102拷贝/μL,检测其灵敏度是传统RT-PCR的100倍,所建立的荧光定量技术可用于田间样品中此病毒的检测,丰富了ASGV的检测手段,提高了检测灵敏度,具有较好的应用前景.     

B型烟粉虱携带传播烟草曲茎病毒的能力

B型烟粉虱近20年来入侵许多国家和地区,已成为重要的世界性作物害虫,其主要危害方式之一是传播双生病毒,造成作物病毒病大发生.应用PCR技术,研究了入侵我国的B型烟粉虱个体获取、存留及传播烟草曲茎病毒（Tobacco curly shoot virus,TbCSV）的能力.B型烟粉虱在感染TbCSV的普通烟毒株上饲毒30 min时,就可在40%的个体内检测到TbCSV DNA,个体带毒率随饲毒时间延长而增加,饲毒12 h后,带毒率达100%;TbCSV DNA在B型烟粉虱体内可存留10天左右,但不能终身存留;传毒处理植株的发病症状及PCR检测结果表明,B型烟粉虱是TbCSV的传播媒介.