应用反向间接血凝试验诊断急性猪丹毒

猪丹毒的病料检验,以往多用细菌培养、动物接种,有时还要用生化试验等方法,方可获得较正确的结果,费时甚长。国外虽有应用正向间接血凝检测猪丹毒抗体、诊断慢性猪丹毒的试验报告,但对急性或亚急性病猪以及尸检病料难以检出,而这些又均是临床诊断急待解决的问题。我们用血清培养凝集试验诊断急性猪丹毒,已获得结果。现在应用反向间接血凝试验检测猪丹毒抗原,诊断猪丹毒病猪及其尸体的病料,也得到初步结果。     

一种简单经济的猪丹毒杆菌培养基

在实验室内培养猪丹毒杆菌(Erysipelothrix rhusiopathiae),过去常需于基础培养基(如肉汤,营养琼脂)内加入动物血清或血液,或胎犊血清(Poole,G.M.),才能比较地生长旺盛。一般文献上介绍的叠氮钠—结晶紫琼脂,也加入有牛血清。     

猪丹毒丝菌GAPDH线性B细胞表位预测与鉴定

为预测并鉴定猪丹毒丝菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)分子线性B细胞表位,首先通过多序列比分析已经全基因组测序的10株菌株的GAPDH一级结构保守性;然后使用在线软件Bepipred-2.0预测猪丹毒丝菌GAPDH线性B细胞表位,接下来通过人工化学合方式合成GAPDH表位对应的多肽;最后使用间接ELISA法检测这些多肽与猪丹毒丝菌GAPDH高免血清之间的反应.研究发现已经完成全基因组测序的10株菌株的GAPDH一级结构高度保守.通过软件预测,找到了猪丹毒丝菌GAPDH的3个潜在的表位.ELISA检测结果表明74 VLSERDPKNLPWKELGV90和178 HAYTNDQNTLDGPHAKGDLRRGRAAAQSIIPNSTGA213与GAPDH高免血清反应明显,是猪丹毒丝菌GAPDH的表位.成功预测并鉴定到2个猪丹毒丝菌的抗原表位,这些表位将为以后基于猪丹毒丝菌GAPDH表位的诊断、疫苗设计及致病机制研究提供技术基础.     

广东某地区猪丹毒杆菌的分离鉴定与药物敏感性分析

对广东某地区暴发的疑似患有猪丹毒杆菌的猪,取其肝、肾、脾等组织进行猪丹毒杆菌的分离鉴定,应用16S rRNA通用引物对获得的优势菌株进行基因扩增及序列鉴定,对鉴定的猪丹毒杆菌进行SPF级小鼠攻毒试验;ELISA检测小鼠血清中IgM和IgG的含量,观察肝脏、脾脏的病理变化;药物敏感性试验分析鉴定菌株对青霉素、氨苄西林、链霉素、头孢克肟和头孢噻肟等9种药物的敏感程度。结果表明,经过分离培养及16S rRNA鉴定的细菌有5株为猪丹毒杆菌,小鼠血清中IgM和IgG含量试验组显著大于对照组,感染小鼠肝脏和脾脏细胞均出现不同程度的变性或坏死;药物敏感试验结果显示,获得的5株菌均对林可霉素耐药,对青霉素、氨苄西林和头孢噻肟极度敏感,对头孢氨苄重度敏感,对阿奇霉素、恩诺沙星中度敏感。     

猪血清中抗猪丹毒丝菌特异性IgG的纯化

为了获得纯度高、特异性好的抗猪丹毒丝菌特异性IgG，采用抗原反向吸附结合重组葡萄球菌蛋白A(SPA)亲和层析法对猪丹毒丝菌阳性血清进行纯化。结果表明，血清用量对IgG的纯化结果影响不大，而细菌的用量则与IgG的获得量成正比；用猪丹毒丝菌与阳性血清吸附，初步纯化出的猪丹毒丝菌特异性IgG，再用SPA亲和层析法特异性的浓缩和纯化IgG，获得的抗体含量为240 μg/mL，即从8 mL阳性血清中获得360 μg猪丹毒丝菌特异性IgG，其纯度接近100%，可用于噬菌体展示的靶分子。 关　键　词：猪丹毒丝毒；特异性免疫球蛋白G(IgG)；猪血清；IgG纯化；纯度；重组葡萄球菌蛋白A凝胶(SPA)；SDS–聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)     

应用协同凝集反应检测鸡新城疫病毒试验报告

<正> 利用含A蛋白的金黄色葡萄球菌与抗体Fc段非特异性结合而其Fab段仍有特异性结合能力的特性,建立协同凝集反应,从而检测畜禽致病菌。近年来国内兽医界已用于检测炭疽杆菌、猪丹毒杆菌、多杀性巴氏杆菌、猪付伤寒杆菌、猪败血性链球菌以及致     

金花茶多糖的凝集反应特性初探

采用比色法分析比较了金花茶多糖与蓖麻凝集素、伴刀豆凝集素等凝集素的凝集反应特性.结果显示,不同凝集素均能与金花茶多糖发生凝集反应,但凝集反应程度有明显差异.特异结合糖残基为半乳糖的蓖麻凝集素与金花茶多糖的凝集反应效果最显著,而特异结合糖残基同样为半乳糖或其衍生物的海红豆凝集素、欧卫矛凝集素、怀槐凝集素和花生凝集素的凝集反应程度则比较弱.当金花茶多糖浓度上升至6.59 mg/mL时,蓖麻凝集素的凝集反应是其他凝集素的6～10倍.另一方面,特异结合糖残基为甘露糖的伴刀豆凝集素与金花茶多糖虽然有类似的凝集反应特征,但是其凝集反应程度明显弱于蓖麻凝集素.从以上结果推测,凝集素的分子形态对金花茶多糖的凝集反应有显著影响.     

鸡致病性大肠埃希氏菌的菌毛血清型检测

使用透射电镜对3株鸡致病性大肠埃希氏菌(E.coii)的菌型进行了形态观察,发现其中2株菌具有纤细、中空、挺直的菌毛,另外1株未见菌毛。有菌毛的2株菌与K88、K99、987P和F41单因子兔高免血清的玻片凝集反应阴性,而与2株兔源的具菌毛的E.coli菌的兔高免血清呈强阳性。未见菌毛的那株菌与上述所有血清的玻片凝集反应均呈阴性。     

屠宰厂猪瘟、猪丹毒检验方法优化

收集疑似猪丹毒、猪瘟病例,整理在宰前检疫、宰后检验过程中皮肤、体内各器官系统出现的病理变化特点,用微生物学检查和血清学检查佐证屠宰检验结果,对检出猪丹毒、猪瘟生猪按规定处理。结果屠宰检验过程收集到出现典型的皮肤病理变化特征及其他组织器官病变的疑似猪丹毒、猪瘟病例,从疑似猪丹毒病料中分离到猪丹毒杆菌,且分离株可使小鼠感染死亡;对疑似猪瘟病例30份血清进行血清学检查,阳性率达73.3%。表明熟练地掌握猪丹毒、猪瘟病理变化鉴别要点可以提高不合格生猪的检出率。     

屠宰场猪瘟及猪丹毒检验方法的优化

[目的]探讨用于屠宰场生猪猪瘟、猪丹毒的检验方法。[方法]收集疑似猪丹毒、猪瘟病例,宰前检疫,并观察宰后检验过程中皮肤、体内各器官系统出现的病理变化,用微生物学和血清学检查佐证屠宰检验结果,对检出猪丹毒、猪瘟生猪按规定处理。[结果]从疑似猪丹毒病料中分离到猪丹毒杆菌,且分离株可使小鼠感染死亡;对疑似猪瘟病例30份血清进行血清学检查,阳性率达73.3%。[结论]熟练地掌握猪丹毒、猪瘟病理变化鉴别要点,结合实验室快速检测可以提高不合格生猪的检出率。     

清远市肿眼肉鸡病原诊断和药敏试验

广东省清远地区3群肉鸡临床表现不同程度的肿眼、流鼻水等症状,临床治疗处理效果不理想。在3群病鸡中各取病鸡鼻窦腔分泌液进行细菌分离培养、革兰氏和瑞氏染色,并对分离菌株进行了玻片凝集和生化试验。结果表明,革兰氏染色呈阴性,瑞氏染色呈蓝色,油镜下可见细菌呈短杆菌或球杆菌,两极着色,3群分离株均与副鸡嗜血杆菌A型血清完全凝集反应,与B和C型血清无凝集反应,确定肿眼肉鸡病原为A型副鸡嗜血杆菌。同时选用多种药物研究了该病原菌的药敏性,结果显示,A型副鸡嗜血杆菌对头孢噻呋、氟苯尼考和青霉素3种药物均表现极敏。     

猪丹毒三十年来研究的成就和展望

猪丹毒是猪的烈性传染病之一.Koch于1878年首先从实验小白鼠体内发现猪丹毒杆菌.Paste-ur于1882年从猪体也分离到此菌,并制备菌苗防制本病.近三十年来,国内外对本病的病菌特性、血清型分类、流行病学、诊断、治疗、免疫以及防制等都有许多研究报告.现就国内外研究猪丹毒的流行病学、菌落的形态与变异、菌的超微结构、血清型的分类、诊断、治疗和免疫等成就加以简述.一、猪丹毒的流行病学研究1.Kobe,K.(1943)以不能使健康猪发病的猪丹毒菌株和传染性胃肠炎病毒混合感染猪,结果使猪发生显著的症状.Kita,J.等(1966)发现.在气温30℃下,猪的吞噬指数下降,嗜酸性白细胞减少,对猪丹毒杆菌易感性增加.Chylinski,G.     

霉形体肺炎微粒凝集反应阴性猪的带菌研究

对多次微粒凝集反应均为阴性的猪采取血清,同时,用无菌操作法取肺,作“肺块浸泡法”,试分离培养霉形体,结果从7头猪的肺中分离到3株霉形体.其中1株69~#菌株经血清学反应鉴定为猪肺炎霉形体.用69F_(10)48小时培养物对健康猪3头滴鼻,14天后1头发病,5周后都发病.扑杀1头160~#猪,取肺仍作“肺块浸泡法”,也分离到霉形体.     

用微粒凝集试验检查气喘病带菌猪

微粒凝集试验具有血清学的特异性,它可应用于对猪气喘病的诊断、菌株鉴定、种猪场检疫和建立无气喘病健康猪群等.1981年,我们应用微粒凝集试验,对猪场的猪只,逐头采血检查诊断猪气喘病.凡属微粒凝集反应阳性的猪只,全部淘汰剖解,行无菌操作,采集肺组织,以病肺块接种法分离培养猪肺炎霉形体,作带菌检查,借以验证微粒凝集反应的检出率,再度证明此法为猪气喘病检疫的一种简便准确的方法.     

猪丹毒及其防控措施

<正>猪丹毒是由猪丹毒杆菌引起的传染性疾病,一般呈季节性流行,高温高湿季节比较适合猪丹毒杆菌繁殖,猪群发病率升高。不同年龄和品种的猪群都容易发生本病,发病后通常表现精神不振、体温升高、食欲下降、皮肤红斑、关节肿胀等症状,对猪群造成程度不同的危害。一、流行病学1.病原。引起猪丹毒病的病原主要是猪丹毒杆菌,它属于革兰阳性菌,     

猪丹毒的流行病学、临床症状及防治

猪丹毒是由猪丹毒杆菌引起的猪的一种急性或慢性传染病.目前,猪丹毒已被发现有传染给人的危害,文中介绍猪丹毒的流行病学特点、临床症状和防治知识,有效掌握防控的手段对人类健康和养猪业的发展具有重要意义.     

浅析猪丹毒的综合防治措施

猪丹毒是由猪丹毒杆菌引起的一种急性、热性传染病,以急性败血症、亚急性皮肤疹块、慢性疣状心内膜炎、皮肤坏死和多发性非化脓性关节炎为特征.过去药品单一,用常规的青霉素就可控制,而后疫苗诞生,该病对猪业影响越来越小.然而,随着养殖环境恶化,从去年下半年开始,猪丹毒死灰复燃,似乎有卷土重来之势,先后在广西、江西、广东等地流行.湖南省今年也有零星疫情出现.为了使养猪户更多地了解该病,加强防范意识,就猪丹毒的病原、流行特点、临床症状、病理变化、综合防治措施等方面进行了较全面的阐述,为科学防治该病提供参考.     

应用悬浮凝集法诊断猪丹毒的研究

许多血清学诊断方法,例如环状凝集试验、沉淀反应等,在抗原或抗体较少的情况下往往观察不到可见反应.尤其检测病原时,被检样品中往往含菌量较少,直接影响检出率.为此,我们在特定的培养基中加入适量的琼脂,使抗体和抗原(菌体)培养后形成凝集颗粒,悬浮在透明的胶液中,以便观察和判别.此法定名为“悬浮凝集试验”(简称悬凝法).试验材料一、培养基1.检测病原培养基:为0.05%琼脂及2%牛抗猪丹毒高免血清(效价1:640)的马丁汤胶液.分装于     

牛流产病例的诊断报告

为确诊牛频繁发生流产的病因,将30份牛血清分别用试管凝集反应和虎红平板凝集反应检测牛布氏杆菌抗体.结果表明,虎红平板凝集反应检测的阳性率为93.3%(28/30),试管凝集反应检测的阳性率为93.3%(28/30),2种检测方法结果一致,可初步诊断为布氏杆菌病.     

用葡萄球菌甲蛋白协同凝集鉴别猪痢疾密螺旋体的研究

应用猪痢疾蜜螺旋体（Ｔ．Ｈ．）免疫血清结合葡萄球菌甲蛋白（ＳＰＡ）与Ｈ１０，２－５，Ｘ２３，Ｃ１７等Ｔ．Ｈ．菌株进行协同凝集试验，均出现明显凝集反应。而免疫血清结合不含ＳＰＡ的菌株，无特定病原（ＳＰＦ）血清结合含ＳＰＡ的菌株均无凝集反应。免疫血清结合ＳＰＡ与７种肠道菌均无凝集反应。免疫血清用量以０．２ｍｌ为合适。最低用菌量为３０倍稀释，即每个视野Ｔ．Ｈ．约４０个菌体。