Cu2+诱导刺激对喜树悬浮培养细胞喜树碱生物合成的影响

[目的]探讨Cu^2＋作为诱导子对喜树悬浮培养细胞喜树碱积累的影响。[方法]在喜树悬浮培养细胞中,细胞生长的不同阶段,添加不同终浓度的Cu^2＋,诱导刺激喜树碱的生物合成。[结果]0.5μmol/L终浓度的Cu^2＋在第8天添加对细胞的生长最有利,而40.0μmol/L终浓度的Cu^2＋在第18天添加对喜树碱生物合成最有利。在第8天添加0.5μmol/L终浓度的Cu^2＋后再在第18天添加40.0μmol/L终浓度的Cu^2＋,可以使喜树碱的产量在第24天达到71.9mg/L,是未经处理的7.9倍。[结论]Cu^2＋诱导刺激可以显著提高喜树悬浮培养细胞喜树碱的产量。     

喜树栽培技术与喜树碱积累的研究进展

从喜树的形态学,栽培技术,以及如何提高喜树碱含量等方面的研究进展做一综述,同时对喜树的研究方向做了展望。     

L-色氨酸对喜树愈伤组织中喜树碱合成的影响

喜树碱是一种从天然植物喜树中分离的抗癌活性物质,通过细胞培养合成喜树碱是喜树碱生产的一条重要途径。本试验利用喜树的顶芽、叶片、茎段为外植体,在B5培养基上(附加1.0 mg/l的NAA,0.5 mg/l的2,4-D和0.5 mg/l的KT)诱导喜树愈伤组织。同时考察L-色氨酸对喜树愈伤细胞培养中喜树碱积累的影响,结果表明,在B5培养基中添加0.001-0.002 mg/ml的L-色氨酸,对喜树愈伤细胞的生长没有明显影响,但是对喜树愈伤细胞合成喜树碱的促进作用明显,喜树碱含量比未添加L-色氨酸培养的愈伤增加了3倍。     

喜树幼苗根生长过程中喜树碱的含量变化

用高效液相色谱法（HPLC）测定喜树幼苗生长过程中各级根的喜树碱含量,分析了喜树幼苗根系中喜树碱含量及产量的变化规律。结果表明,主根的喜树碱含量和产量均为最高。随着幼苗的生长,整株根系及各级根的喜树碱含量都呈缓慢上升趋势,整株根系及各级根干质量与相应的喜树碱总量均持续增加。     

二年生喜树各器官中喜树碱含量动态分析

分析了二年生喜树各器官不同时期喜树碱的含量和不同部位不同时期喜树叶的生物学产量和经济学产量;二年生喜树三叶一心叶片的喜树碱含量最高可达0.3576%;二年生喜树收获的适宜部位为枝条中上部叶片,收获的适宜时期为8月中下旬至9月上旬.     

不同时间采摘的喜树嫩叶中喜树碱含量的HPLC分析

[目的]探讨喜树碱含量最高的喜树叶片的最佳采摘时间。[方法]采用高效液相色谱法研究同一地区不同时间采摘的喜树嫩叶中的喜树碱含量差别。[结果]高效液相色谱的条件为：Kromasil C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为：甲醇：水=6：4（体积比）,流速1．0ml／min。检测波长为254nm,柱温为室温,进样量20m。样品制备条件：以甲醇为溶剂,60℃下超声提取1h。高效液相色谱法测定喜树嫩叶中喜树碱最高含量为3．25‰。喜树嫩叶在4月中旬到4月末这段时间,喜树碱的含量是最高的,它比喜树果和喜树成叶都高,因此喜树嫩叶可作为喜树碱的生产原料。[结论]该研究为喜树碱的工业化生产奠定了基础。     

田间栽培喜树不同品系枝叶喜树碱含量动态分析

以四川种源的普通喜树为对照品系,采用高效演相色谱法对海喜1号喜树品系不同冠层枝叶的喜树碱含量进行了连续3年生长季动态检测.结果表明:海喜1号枝叶喜树碱含量高于普通喜树;根据下游提取工艺的需求,海喜1号的采收季节可确定在6月或9月;海喜1号适合枝叶连年采收利用,但应以8-10年为一个采伐周期.     

喜树生物学特性及喜树碱的开发利用

喜树碱是从喜树中分离到的一种生物碱,具有重要的药用价值。本文概述了喜树的生物学特性,分析了喜树碱在喜树中存在的部位：即根、茎、叶和果实中都含有喜树碱。并提出了喜树碱的开发利用,喜树碱主要具有抗癌、抗病毒和治疗皮肤病3方面的作用。     

喜树的研究进展

本文从喜树的形态结构,资源分布,应用价值等方面综述了近年来喜树的研究进展。指出喜树的规范化栽培、组织培养及基因工程方面的研究可作为扩大喜树药源的途径,同时对未来的研究方向进行了展望。     

喜树果实中喜树碱含量的产地差异及季节变化

测定了采自于七个不同产地的喜树果实中的喜树碱含量 ,结果表明 :四川的喜树果实中喜树碱含量最高 ,陕西的喜树碱含量最低 ,且差异显著 (P <0 .0 1)。对生长于四川都江堰的喜树果实中喜树碱含量的季节变化分析表明 ,喜树果实在生长发育过程中 ,喜树碱含量一直呈增长趋势 ,当喜树果实完全成熟时 ,喜树碱含量最高     

不同土质对喜树幼苗生长和喜树碱质量分数及产量的影响

利用花土和沙土对喜树幼苗分别进行栽培,并观察了不同土质对不同生长时期的喜树幼苗生物量和喜树碱质量分数的变化。研究结果表明:经过花土栽培的喜树幼苗,在生长45d后,其全株生物量显著高于沙土栽培的幼苗;从喜树碱的质量分数和产量看,沙土栽培的喜树幼苗根和茎中喜树碱质量分数均随着栽培时间的增加呈现先下降后上升的趋势,但在喜树幼苗生长的前45d,花土栽培的幼苗根中喜树碱的质量分数和产量却均高于沙土栽培,茎中喜树碱的质量分数和产量则是沙土栽培的高于花土栽培。不论是沙土还是花土栽培,其喜树幼苗叶片喜树碱的质量分数均随着栽培时间的递增呈现先上升后下降再上升的变化趋势;在幼苗生长的前75d,花土栽培的喜树幼苗叶片喜树碱质量分数和产量均高于沙土栽培。可见,花土栽培更适合于喜树幼苗的生长。     

喜树碱和10-羟基喜树碱提取方法的比较与优化

以乙醇为溶剂,比较了浸提法、超声波法、微波法和匀浆提取法从喜树(Camptotheca acuminata Decaisne)幼叶中提取喜树碱和10-羟基喜树碱的效果,并通过正交试验设计对提取温度、提取时间以及匀浆时间对提取效率的影响进行了分析。利用反向-高效液相荧光法检测喜树碱和10-羟基喜树碱的浓度。结果显示提取10-羟基喜树碱的最优条件为匀浆12 min、60℃浸提30 min、超声处理30 min;提取喜树碱的最优方案为匀浆12 min、60℃浸提30 min、超声处理15 min。多种提取工艺混合使用能显著提高喜树碱和10-羟基喜树碱的产率。     

微量样品中喜树碱含量的高效液相色谱测定

为了测定微量喜树(Camptotheca acuminata Decne)样品中的喜树碱含量,建立了HPLC—荧光检测测定方法(采用Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 m m,5μm),以乙腈:水(体积比4:6)为流动相,流速1.0mL·min-1,荧光检测器激发波长380 nm,发射波长553 nm).结果表明:喜树碱质量浓度在20～800 μ g·L-1范围内,与峰面积呈现良好的线性关系,r=0.999 6,平均加样回收率为98.41％,峰面积的相对标准偏差1.88％.这一方法仅需2 mg干质量植物样品即可实现对喜树碱含量的测定,且操作简单、重复性好、结果精确可靠,为微量植物材料中喜树碱含量的测定提供了有效方法.     

喜树内生真菌的研究进展

介绍了喜树内生真菌的生物活性代谢产物,对其内生真菌的生物多样性及其与寄主植物的关系进行了综述,并对喜树内生真菌的研究方向进行了展望。