版纳微型猪近交系精子冷冻保存研究

在版纳微型猪近交系（BMI）公猪精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度甘油,并对不同解冻液配方和解冻方法进行研究,对比解冻后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率,优化BMI公猪精液冷冻保存方法。结果表明,解冻后,甘油浓度为2%和3%组的精子活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于1%、4%和5%组（P<0.05）;Ⅰ号解冻液解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率均显著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号解冻液（P<0.05）;在活力、质膜完整率和顶体完整率方面,40℃ 6 s和50℃ 6 s这两种程序的解冻效果都显著优于38℃ 30 s（P<0.05）。由此可见,2%或3%的甘油作为抗冻保护剂、Ⅰ号解冻液解冻、40℃ 6 s或50℃ 6 s水浴解冻是较为理想的BMI公猪精液冷冻保存方法。     

成年版纳微型猪近交系克隆猪的制备

本研究以版纳微型猪近交系成年母猪为材料,采用冷胰酶消化法获得成年猪成纤维细胞后,进行细胞的生物学特征检测,研究其作为供体细胞对体细胞核移植效果的影响。结果表明,版纳微型猪近交系成年猪的成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态,细胞冻存前和复苏后存活率分别为97.2%和92.6%(P>0.05),生长曲线呈"S"形,细胞群体倍增时间为36h,体外培养14代后仍能保持正常核型。以其作为核移植供体细胞,核移植重构胚卵裂率、囊胚率及囊胚细胞数分别为61.9%、13.0%和37枚,移植了重构胚的3头代孕母猪均妊娠,并且有1头母猪产下1头正常的克隆猪。综上所述,利用版纳微型猪近交系成年猪能建立稳定的成纤维细胞系,该细胞系作为核移植供体细胞可获得版纳微型猪近交系克隆猪。     

论微型猪资源的开发利用—实验动物化

论微型猪资源的开发利用──实验动物化张彬李丽立（湖南农学院长沙市４１０１２８）（中国科学院长沙农业现代化研究所长沙４１０１２５）中国是养猪大国，养猪历史悠久，品种资源十分丰富。几千年来，在长期的人工选育和特定的生态条件的综合作用下，形成了数以百计各具...     

版纳微型猪近交系生长激素基因克隆及原核表达研究

本研究旨在获得版纳微型猪近交系(BMI)生长激素基因编码区序列,揭示其原核表达规律.采用RTPCR方法从版纳微型猪近交系(BMI)脑垂体中克隆生长激素(GH)基因,并将其连接到pMD 18-T载体进行测序和生物信息学分析.克隆得到的GH基因cDNA序列长690 bp,其中CDS长651 bp,编码216个氨基酸,前26个氨基酸为信号肽序列.多猪种GH氨基酸序列比对表明其在各猪种中高度保守,版纳微型猪近交系的GH氨基酸序列与五指山猪和宁香猪的相似性均为100％,与藏猪、香猪、大乌猪、太湖猪、成华猪、内江猪、荣昌猪、长白猪、约克夏的相似性均为99％,与雅南猪、杜洛克的相似性均为98％.扩增GH成熟肽区编码序列,定向克隆至表达载体pET-32a(+),转化入大肠杆菌Rosseta (DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导表达蛋白.SDS-PAGE和Western blotting分析表明,重组质粒在大肠杆菌中获得了高效表达,融合蛋白以包涵体形式存在,分子质量约为40.6 ku.以上结果为进一步探究GH基因对BMI矮小性状的影响奠定了基础.     

氯胺酮和丙泊酚对版纳微型猪近交系麻醉效果的观察

为了比较氯胺酮肌内注射和丙泊酚静脉注射对版纳微型猪近交系全身麻醉的效果,将30头8～15月龄、体重15～25 kg的版纳微型猪近交系随机分为两组,A组按每千克体重0.01 mg肌内注射氯胺酮,B组按每千克体重2.0 mg静脉注射丙泊酚;两组实验猪均在术前30 min肌注硫酸阿托品每千克体重0.01 mg,缓慢注入麻醉药后,很快进入麻醉状态,观察动物麻醉维持时间、镇痛效果、体温、呼吸频率和心率变化及术后苏醒情况。结果：A、B两个组的诱导期分别为(4.47±1.55)min和(0.87±0.14)min;维持期分别为(51.27±8.61)min和(35.87±5.08)min;苏醒期分别为(7.60±2.10)min和(4.67±1.23)min。两组实验猪的诱导期、维持期和苏醒期差异极显著(P<0.01);但两组间的体温、呼吸频率和心率差异不显著(P>0.05)。结论：丙泊酚麻醉的诱导时间短、起效快,恢复快速平稳,且无副作用,但丙泊酚静脉麻醉应根据手术过程中实验动物的反应情况适当调整丙泊酚追加量;氯胺酮的麻醉过程平稳,麻醉效果好,术后苏醒快,适合情况复杂且时间较长的手术,是...     

我国破解科学界难题 培育“版纳微型猪”

国际科学界近大半个世纪都没有攻克的难题——大型哺乳类实验动物近交系，被我国科学家成功破解。权威专家认为，云南农业大学成功培育的“版纳微型猪”近交系，是我国原始创新的重大科技成果．对生物医学研究意义重大。     

版纳微型猪近交系TSARG7基因克隆及功能生物信息学分析

为获得版纳微型猪近交系（Banna Mini-pig inbred line,BMI）TSATG7基因序列并分析组织表达情况,本研究以GenBank中猪及近缘物种的TSARG7基因mRNA序列为参考序列,设计特异引物扩增BMI TSARG7基因,半定量分析10个重要组织的表达谱,并对蛋白质序列进行功能生物信息学分析。结果显示,获得了BMI TSARG7基因1 371 bp的编码区序列（GenBank登录号：KU950831,对应的氨基酸登录号：AMY60405）,编码456个氨基酸,蛋白质分子质量为52.05 ku,等电点（pI）为9.28。多组织表达分析表明,TSARG7基因在睾丸中高表达,在其他组织中呈中、低表达。功能生物信息学分析表明,TSARG7蛋白质存在1个保守结构域,有3个跨膜螺旋结构,无信号肽序列;N末端疏水,C末端亲水;有5类功能活性位点,位于细胞质的概率是94.1%。本试验结果为进一步研究TSARG7基因在猪精子发生和性成熟方面的作用及功能奠定基础。     

我国破解科学界难题 培育“版纳微型猪”

国际科学界近大半个世纪都没有攻克的难题一大型哺乳类实验动物近交系，被我国科学家成功破解。权威专家认为，云南农业大学成功培育的“版纳微型猪”近交系，是我国原始创新的重大科技成果，对生物医学研究意义重大。     

“微型猪”珍品欣赏

微型猪也是一个丰富多彩、琳琅满目的家族．可以说是家丁兴旺，灿若群星。可惜的是，由于人们乃至整个社会，在相当长的历史发展中对其歧现，乃至冷落，以至于在一些产区已几乎濒临灭绝。所幸的是，我国特色农业的知名企业河南省淇县小灵猫公司的有关专家较早预见到了其辉煌的未来，及早进行了一些珍品的保护、育种、繁殖方面的工作．使一些名贵品种得以保留，现保留下来的珍稀品种有：     

不同抗应激措施对断奶仔猪的影响

本试验研究了不同抗应激措施对刚断奶仔猪的影响。结果表明，效果较好的措施有：１．在全漏缝地板仔＊猪高床上安置部分木质铺板；２．采用潮拌料过渡饲喂；＊３．开始１星期内添加氯丙嗪或Ｓｅ－Ｖ合剂；４．在断奶后培育阶段添加电解质溶液。这些措施加能使断奶仔猪得到较好的过渡，减少应激反应，提高生产效益。     

地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能的影响

近几年来,利用微生态制剂来促进动物生长、改善动物健康成为了动物营养研究的热点之一。地衣芽孢杆菌是微生态制剂中的一种,以其耐高温、耐酸碱、抗逆性强、易贮存等特点被广泛作为益生菌或致病菌竞争抑制剂应用于畜禽养殖业中。     

早期断奶仔猪日粮中添加不同种类酸化剂的效果

选用杂种仔猪（杜洛克×长白×大白）１２５头，于２８±３日龄断奶，以玉米－豆粕－鱼粉型日粮饲喂，进行为期２８天的饲养试验，研究日粮中添加柠檬酸（１％）、磷酸（０．３％）及复合酸（０．３％和０．５％）对仔猪生产性能、日粮蛋白质消化率、胃肠道消化酶活力及肠道大肠杆菌数的影响。结果表明，日粮中添加各种酸化剂可提高仔猪日增重９－１７％（Ｐ＞０．０５）；日粮中添加柠檬酸和复合酸则可显著提高饲料转化效率１１－１５％（Ｐ＜０．０５）；日粮中添加０．３％磷酸可提高饲料利用效率８％（Ｐ＞０．０５）。添加酸化剂对日粮蛋白质消化率无影响。柠檬酸和磷酸有降低胃肠道ｐＨ值、提高胰蛋白酶、淀粉酶活力及减少结肠中大肠杆菌数的趋势。     

异麦芽低聚糖对断奶仔猪肠道菌群及腹泻的影响

选 35± 2日龄仔猪 4 0头 ,随机分成 5组。 1组为对照组 ,喂基础日粮 ,2～ 5组为试验组 ,在基础日粮基础上分别添加 0 .1%、0 .2 %、0 .4 %和 0 .8%异麦芽低聚糖浆 (含异麦芽低聚糖 77.0 7% ) ,测肠道菌群浓度、蛋白酶活性、肠绒毛高度、小肠隐窝深度、生产性能、腹泻指数、相关血液指标及粪氨含量。试验结果表明 ,4、5组肠道菌群、小肠绒毛高度、小肠隐窝深度、蛋白酶活性、饲料转化率等指标显著优于其它组 (P <0 .0 5 ) ;5组尿素氮显著低于其它组 (P <0 .0 5 ) ,血钙浓度、平均日增重与采食量显著高于其它组 (P <0 .0 5 ) ;4组腹泻指数和粪氨含量显著低于其它组 (P <0 .0 5 )。     

生物饲料添加剂对断奶仔猪生长和消化的影响

选用120头15kg左右健康、公母各半的杜×长×大三元杂交断奶仔猪,随机分为4组,每组三个重复,每重复10头。其中第1组饲喂基础日粮,第2组基础日粮中添加0.2%的益生素,第3组基础日粮中添加0.2%复合酶制剂,第4组添加0.2%的益生素 酶制剂。结果表明添加益生素组、添加酶制剂组和益生素 酶制剂组与基础日粮组相比,日增重分别提高1.85%、3.00%和8.99%;料重比分别降低2.98%、3.83%和4.68%;腹泻率分别下降20.38%、8.81%和30.04%。粗蛋白质表观消化率分别提高5.01%、1.92%和2.90%;粗纤维消化率分别提高了27.88%、18.80%和1.96%。说明生物饲料添加剂可有效提高仔猪生产性能和饲料营养成分利用率,是一种较为安全、高效的饲料添加剂。     

生物饲料添加剂对断奶仔猪生长和消化的影响

选用120头15kg左右健康、公母各半的杜×长×大三元杂交断奶仔猪,随机分为4组,每组三个重复,每重复10头.其中第1组饲喂基础日粮,第2组基础日粮中添加0.2%的益生素,第3组基础日粮中添加0.2%复合酶制剂,第4组添加0.2%的益生素+酶制剂.结果表明添加益生素组、添加酶制剂组和益生素+酶制剂组与基础日粮组相比,日增重分别提高1.85%、3.00%和8.99%;料重比分别降低2.98%、3.83%和4.68%;腹泻率分别下降20.38%、8.81%和30.04%.粗蛋白质表观消化率分别提高5.01%、1.92%和2.90%;粗纤维消化率分别提高了27.88%、18.80%和1.96%.说明生物饲料添加剂可有效提高仔猪生产性能和饲料营养成分利用率,是一种较为安全、高效的饲料添加剂.     

酵母活性物质对断乳仔猪红细胞免疫功能的影响

选取28日龄断奶的[杜×(大×长)]三元杂交仔猪10头,平均初始体重为5.62 kg±1.16 kg,随机分为2组,每组5头.对照组饲喂基础日粮,试验组在相同的基础日粮中添加酵母培养物,剂量为10mL/只,连续服用10 d.应用红细胞C3b受体花环(Erythrocyte C3bR,E-C3bR)试验和红细胞免疫复合物花环(Erythrocyte ICR,E-ICR)试验,探讨酵母活性物质对断乳仔猪红细胞免疫功能的影响.结果发现,试验组红细胞C3b受体花环率(E-C3bRR)和红细胞免疫复合物花环率(E-ICRR)在服药后第1周、第2周与对照组相比,差异均极显著(P＜0.01),第3周无明显差异.试验组E-C3bRR和E-ICRR,在服药后第1周、第2周与服药前相比差异亦极显著(P＜0.01),第3周差异不显著.结果表明,口服酵母活性物质可增强断乳仔猪红细胞免疫功能,增强机体免疫力.     

益生康代替抗生素对断奶仔猪生产性能及腹泻的影响

试验选用200头平均体重(6.95±0.11)kg、23日龄断奶三元杂交(杜×长×大)仔猪,研究玉米豆粕型日粮中添加益生康代替抗生素在断奶仔猪阶段的应用效果。配对试验设计2个处理,每个处理设5个重复,每个重复20头仔猪,公母各半混合饲养。处理1为抗生素对照组;处理2为添加0.15%益生康组,6～12kg阶段和12～20kg仔猪阶段。结果表明:6～12kg体重阶段与抗生素对照组相比,益生康增加仔猪日增重9.3%,提高日采食量10.6%,改善饲料转化率9.8%,仔猪腹泻发生率降低29.4%(P<0.05);12～20kg阶段日增重提高7.9%,改善饲料转化率15.8%。     

早期断奶仔猪的饲养管理

论述了影响早期断奶仔猪生产性能的一些应激因素。并提出减小应激的一系列饲养管理措施。     

长期饲喂高锌日粮对断奶仔猪免疫机能的影响

试验选用60头23日龄±1日龄临床检查健康的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,按体重和性别随机分成3组,每组20头,分别饲喂基础日粮、基础日粮 3000mg/kg氧化锌、基础日粮 500mg/kg蛋氨酸锌,测定断奶仔猪免疫机能的变化。结果显示,在断奶后0d～21d饲喂高锌日粮能显著提高仔猪白细胞吞噬率和T淋巴细胞转化率,增加血清免疫球蛋白水平;而在断奶后42d、70d,仔猪白细胞吞噬率、T淋巴细胞转化和血清IgG、IgA水平显著下降。