芦荟组织培养体系的建立

[目的]建立一个比较合理和完善的芦荟组织培养体系,为大规模快速生产芦荟组织培养苗提供依据。[方法]以木立芦荟和中国芦荟的叶、茎尖和根为外植体,接种于不同激素配比的MS和N6固体培养基上进行组织培养,研究不同培养基对芦荟组织培养的影响。[结果]在不定芽诱导过程中,茎尖在培养基MS＋6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L上的芽诱导率最高。在诱导生根过程中,以1/2MS为基本培养基,NAA浓度在0.2～0.3 mg/L时芦荟组织不定芽生根效果较好。[结论]芦荟组培效果受到遗传基因型和外在培养条件的双重制约。     

沙棘组织培养体系建立的研究进展

介绍了沙棘组织培养技术中无菌系的建立、外植体的选择、不同部位外植体的培养及生根驯化等方面的研究现状,总结出沙棘组织培养的条件和目前存在的问题,并提出今后的展望,为今后沙棘组培快繁技术及工厂化育苗奠定基础。     

番木瓜组织培养无菌体系的建立

试验以田间成龄番木瓜的顶芽和侧芽为基本试材,旨在探索出适宜于番木瓜顶芽与侧芽诱导培养的外植体消毒方法,建立起番木瓜离体快繁的无菌体系。     

意大利生菜组织培养体系的建立

[目的]建立意大利生菜组织培养体系。[方法]以意大利生菜(Lactuca sativa L.var.ramosa Hort.)种子为试验材料,用不同有效氯含量(0、0.5%、1.0%、2.0%、4.0%)的漂白水灭菌,于MS培养基上培养无菌苗。取4~5 d苗龄的无菌幼苗子叶,在添加不同浓度激素的MS培养基上诱导愈伤组织,并进一步诱导生芽、生根,筛选最佳诱导激素配比及激素浓度。[结果]意大利生菜种子经有效氯含量1.0%的漂白水处理,于MS培养基上培养可获得意大利生菜无菌苗。无菌幼苗子叶在MS+0.5 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基上,可以得到理想的意大利生菜愈伤组织;在MS+0.25 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基上,最有利于意大利生菜愈伤组织不定芽的发生且对后期生根有良好的诱导作用。[结论]配合使用一定浓度的6-BA和NAA可有效建立意大利生菜组织培养再生体系,为进一步建立意大利生菜遗传转化体系奠定基础。     

生菜组织培养再生体系的建立

以“四季耐热抗抽薹”生菜为试材,10d苗龄的真叶为外植体,MS培养基为基本培养基,附加不同浓度的6-BA和NAA激素配比,经愈伤组织诱导、芽分化、生根3个步骤的离体培养,建立生菜快速、高频再生体系,以期为进一步研究生菜遗传转化奠定基础.研究表明:该品种最佳诱导外植体分化培养基为MS+0.15 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,出愈率达到100％,出芽率达到87％.     

红掌组织培养再生体系建立的研究

以红掌"骄阳"幼嫩叶片为材料,筛选出红掌愈伤组织诱导、不定芽分化、生根的最佳培养基及激素配比。结果表明:红掌愈伤组织诱导的最佳培养基为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+2.4-D0.5 mg/L,不定芽分化培养基为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,生根培养基为改良MS+IBA 0.6 mg/L+IBA 0.3 mg/L,生根率达到100%。     

悬铃木再生组织培养体系的建立

为优化从而建立悬铃木再生的组织培养体系,本研究以茎段作为外植体,设计不同的实验方式进行其诱导,分析消毒时间、激素配比、生根培养等对悬铃木再生的组织培养体系的影响,筛选出不同阶段的最佳培养基。结果表明:悬铃木茎段的最佳的消毒条件是0.1%HgCl2消毒17min,最适初代培养基为MS+ZT4mg/L+IAA1.0mg/L,增殖培养基为MS+ZT3mg/L+IAA1.0mg/L,生根培养基为MS+IBA0.1mg/L。     

蓼蓝组织培养再生体系的建立

[目的]建立蓼蓝组织培养再生体系。[方法]以半野生蓼蓝种子、幼叶和茎段为外植体,探讨不同浓度植物激素配比的培养基对其愈伤组织诱导、继代、分化及生根的影响。[结果]以蓼蓝茎段为外植体进行组培是适宜的;诱导和继代最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L,平均诱导率可达73.33%;分化最佳培养基为6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,平均分化率可达51.67%;生根适宜的培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg/L,生根后移栽成活率达100%。[结论]该研究为优良蓼蓝快速繁殖提供了新的途径,并为其种质资源的保存与利用提供了依据。     

小叶朴组织培养无菌体系的建立

[目的]建立小叶朴组织培养初代无菌体系。[方法]通过对不同消毒剂及消毒时间的对比,筛选出能够有效控制小叶朴初代培养的污染率,且不抑制小叶朴茎段萌发的消毒处理。[结果]小叶朴茎段经70%乙醇消毒30 s 2次,再用氯化汞消毒6 min所得茎段污染率低,萌发率高。对于后期出现的真菌污染采用多菌灵作为消毒剂和添加剂,用200 mg/L多菌灵浸泡外植体60 min能有效地控制污染,且具有较高的萌发率。在培养基中添加200 mg/L多菌灵也能抑制真菌污染,且效果优于多菌灵浸泡处理。[结论]建立了小叶朴组织培养无菌体系,为小叶朴组培苗的增殖和生根提供参考。     

杉木组织培养繁殖体系建立的研究

通过对杉木组织块的离休培养,组培苗的移栽,萌芽特性及其穗条的扦插等方面的系统研究,建立以组培为中心,以组培的苗采穗圃为基础的现代生物技术与常规繁殖方法相结合的杉木无性系繁殖体系。     

菘蓝组培再生体系的建立

以菘蓝(Isatis indigotica)无菌苗的叶片和叶柄为外植体,分别接种到添加不同生长调节剂浓度的MS培养基上,研究不同生长调节剂配比对菘蓝愈伤组织诱导与分化的影响,建立菘蓝组培再生体系。结果表明,叶片是菘蓝愈伤组织形成的最佳外植体,菘蓝愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L。以1/2MS培养基添加0.1 mg/L NAA可使再生植株的生根率达到92.3%。     

罗汉果组培苗生产体系的建立

以罗汉果带节茎段为材料,对其诱导、继代、生根和移栽等条件进行研究,为罗汉果组培苗生产体系的建立提供条件。结果表明:MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0g·L-1为诱导培养基,诱导率可达40.0%;继代培养采用单节茎段扦插和促进腋芽生枝方法,适合的培养基为2/3改良MS+IBA 0.5mg·L-1+GA30.3mg·L-1+蔗糖40g·L-1+琼脂6.0g·L-1,增殖系数为4.0;生根培养基为1/2改良MS+IBA 0.5mg·L-1+蔗糖2.0%+活性炭0.1%+琼脂6.0g·L-1,生根率达到94%;栽培基质以泥炭土∶珍珠岩=10∶2为宜,移植成活率可达97.8%。     

花椒组织培养再生体系的建立

以凤椒的嫩茎和嫩叶为外植体,研究了不同种类和浓度的细胞分裂素(TDZ、ZT、6-BA和KT)和生长素(IBA和NAA)组合对花椒组织培养再生体系的影响,建立了完整的花椒组培再生体系.结果表明:嫩叶是诱导花椒愈伤组织较好的材料;MS 2,4-D 0.5 mg·L-1 BA 0.5 mg·L-1能成功诱导嫩叶产生愈伤组织,诱导率达90%,且愈伤组织生长良好;MS TDZ 0.03 mg·L-1 BA 0.1 mg·L-1能成功的诱导愈伤组织分化出正常的不定芽,诱导率达70%;芽增殖的适宜培养基为MS 0.4 mg·L-16-BA 0.3 mg·L-1IBA,增殖系数为20;1/4MS 0.4 mg·L-1IBA 能成功诱导健壮的无根苗生根,生根率90%以上.     

陕西卫矛组织培养再生体系的建立

为建立陕西卫矛高效再生体系,以幼茎为外植体诱导愈伤组织,在成功继代愈伤组织的基础上,进行愈伤组织再分化培养研究。采用正交设计方法,考察了6-BA、NAA及Ca2+3个因素对陕西卫矛愈伤组织再分化率的影响。结果表明:再分化培养基中添加3mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA+5mmol/L Ca2+,能明显提高陕西卫矛愈伤组织的再分化率。     

花生再生体系的建立

取4 d龄花生(鲁花14)的胚轴、小叶和成熟子叶为外植体,对其进行离体组织培养研究。结果表明:在培养1个月后,胚轴在MS+8.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA培养基上可以诱导产生丛生芽,诱导率达到80%,平均每个外植体可以产生10~20个芽点;小叶在MS+5.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA培养基上能诱导出胚性愈伤组织,进一步诱导分化形成芽点并伸长;诱导出的丛生芽接种在MS+5mg/L6-BA+1.0 mg/LNAA+50.0 mg/LAD的培养基上可以扩繁和伸长;花生成熟种子的子叶在MS+20 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT+1.0mg/LAgNO3培养基上可直接诱导形成颗粒状、表面光滑、干燥的体细胞胚,每个外植体可以诱导出8个左右的体细胞胚。     

金丝桃组织培养再生体系的建立

为了建立金丝桃高效再生体系,以金丝桃为材料,研究了6-BA、KT、NAAI、BA、IAA对其嫩茎切段再生、扩繁及试管苗生根的影响。结果表明:6-BA、NAA对金丝桃嫩茎切段的再生作用显著,再生最佳培养基为MS+6-BA3.0 mg.L-1+NAA0.1 mg.L-1,6-BA对金丝桃不定芽的形成有明显影响,GA3能有效抑制玻璃化苗的形成。MS+6-BA2.0 mg.L-1+IBA0.2 mg.L-1+GA30.5 mg.L-1为其最佳增殖培养基;IAA对金丝桃嫩茎生根影响显著,最佳生根培养基为1/2MS+IAA0.2 mg.L-1。     

鲜食葡萄组织培养快速繁育系统的建立

以鲜食葡萄品种无核白和美国早熟红无核（弗莱姆）为试材,利用当年生的半木质化嫩茎段作为组织培养的外植体,从外植体消毒、激素配比、培养基组分和移栽过渡等方面,对鲜食葡萄品种离体快繁系统进行了探索。结果表明：将当年生半木质化嫩茎段,先用75%乙醇消毒60 s、再用0.1%升汞（内加1%食盐）消毒8 min,获得葡萄单芽茎段无菌外植体;利用改良B5＋6-BA 0.5 mg/L＋IBA 0.1 mg/L培养基进行葡萄腋芽萌发启动诱导,产生初代苗;利用改良B5＋IBA 0.20 mg/L培养基作为继代生根培养基,将继代增殖培养与生根培养同时进行,能够减少愈伤组织过多的培养环节,提高基础瓶苗的使用率;在温度20～33℃、相对湿度≥65%条件下,光照强度从0.5万LX逐步上升到4.0万LX,光培炼苗4～7 d;待部分叶片长出瓶口形成角质层,有明显的反光感,茎秆充分转红后,选用粒径0.3～1.0 mm、pH值≤7.3的纯净河沙作基质进行沙培炼苗;当叶片明显增大,转绿,出现新生叶1～2片,叶表有光泽,长出白色侧根时,即可转入营养袋（或温室苗圃）炼苗;将驯化后的试管苗移栽到大田苗圃,只要营养袋土坨不散,一般成活率≥90%。将试管苗带叶接种扦插,对于加快繁殖速度、提高繁殖系数和节约时间具有重要意义。建立的该组培快繁系统,能够为建立优良品种的快速繁育体系提供有效可行的途径。