不同抗性黄瓜品种连作对枯萎病菌群体遗传分化的影响

尖孢镰刀菌黄瓜专化型(Fusarium oxysporum f. sp.cucumerinum,Foc)是引起黄瓜枯萎病的病原真菌,为了明确不同抗性黄瓜品种连作对枯萎病菌遗传分化的影响,本研究采用TEF1-α、H3基因片段对不同抗性黄瓜品种连作及对轮作后分离的枯萎病菌群体进行遗传分化分析。结果表明,感病品种连作及轮作后菌群分化程度较低(0.007ST<0.045);与种植抗病品种一茬后的菌群相比,连作三、五茬后的菌群均发生显著分化(F_ST> 0.050),其中连作三茬后的菌群遗传分化程度最高(F_ST> 0.300)。单倍型分析发现,抗、感病品种连作后部分菌株形成新的单倍型,且分离自抗病品种的病原菌群体分化产生的单倍型数量多于感病品种。主成分分析结果进一步证明,与感病品种连作及轮作相比,抗病品种连作后病原菌菌群呈现出更显著的菌群分化。综上所述,抗病品种连作能够加剧黄瓜枯萎病菌群体的遗传分化。     

儿茶素在棉苗对枯萎病抗性中的作用

 分析了枯萎病菌接种后棉苗组织内儿茶素含量的变化以及儿茶素对枯萎病菌及其多聚半乳糖醛酸酶活性的影响。健康棉苗组织中儿茶素含量随着棉苗的生长而增加。枯萎病菌接种后,病苗组织中儿茶素含量显著高于健康对照,而且抗病品种棉苗儿茶素含量的增加明显高于感病品种。经氟乐灵预处理的棉苗接种枯萎病菌后,儿茶素含量增加更快,增幅更大。说明儿茶素是品种抗性和氟乐灵诱发棉苗对枯萎病诱导抗性的机理之一。儿茶素可抑制枯萎病菌的菌丝生长、产孢及孢子萌发,对培养液中病菌的多聚半乳糖醛酸酶(PG)有抑制作用。儿茶素化学制品及棉苗组织提取液经TLC分离后获得的含儿茶素组分提取液对初步纯化的PG活性有明显的抑制作用。这些结果表明:儿茶素可能通过抑制病菌的菌丝生长、产孢以及其PG活性而在棉花对枯萎病的抗病性中起到作用。     

黄瓜花叶病毒两亚组分离物寄主反应和血清学性质比较研究

 本文对枯萎病菌侵入黄瓜不同抗性品种的途径,以及黄瓜受侵染根部维管组织的变化进行了观察。分生孢子在幼根表皮上萌发产生菌丝,通过胞间层侵入表皮细胞,之后菌丝继续向内部生长,穿过皮层组织进入导管。受侵染的导管内相继出现壁覆盖物、侵填体及褐色物。抗病品种的壁覆盖物比感病品种的厚:侵填体由受侵染导管旁边的薄壁细胞产生,一个细胞可产生多个侵填体,并在侵填体中观察到细胞核的存在,感病品种中的侵填体发育不充分,抗病品种中的侵填体能完全堵塞导管;谒色物在感病、抗病品种中均能完全堵塞导管,对菌丝的侵入构成了较强的机械障碍。     

棉花不同抗性品种根系分泌物分析及其对黄萎病菌的影响

 对7个不同抗黄萎病性能的棉花品种根系分泌物进行了收集和测定,结果发现抗病品种根系分泌物对病菌的孢子萌发和菌丝生长有一定的抑制作用,而感病品种根系分泌物则能刺激病菌生长。感病品种分泌物中氨基酸含量和种类较多,而且苯丙氨酸、脯氨酸等仅出现在感病品种的分泌物中;抗病品种根系分泌物中糖类物质含量亦明显低于感病品种。     

桧木醇对西瓜枯萎病菌的抑制作用

由尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f. sp. niveum,FON)引起的西瓜枯萎病是一种毁灭性的土传病害。本研究通过离体及活体试验，测定了植物源天然抑菌活性物质桧木醇对西瓜枯萎病菌的抑制活性、对西瓜枯萎病的盆栽防效以及对病原菌生理生化指标的影响。结果表明：桧木醇对西瓜枯萎病菌具有明显的抑制效果，其对病原菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用EC₅₀值分别为31.1和45.2μg/mL；在250、500和1000μg/mL 3个质量浓度下，桧木醇对西瓜枯萎病均有显著的防治效果，其中1000μg/mL时防效可达75.2%，与对照药剂多菌灵500μg/mL的效果相当。生理生化指标测定及外观形态观察发现，经桧木醇处理后，西瓜枯萎病菌菌丝相对电导率上升，菌丝体内镰刀菌酸含量显著降低，菌丝呈现扭曲、畸形、缠绕等不规则外观形态。研究表明，桧木醇不仅能显著抑制西瓜枯萎病菌的生长，同时能抑制其相关毒素的生物合成或促进其代谢，从而降低病原菌的致病力，具有开发为西瓜枯萎病防治替代药剂的潜力。桧木醇处理能破坏病原菌细胞膜的完整性、干扰病原菌次生代谢物的合成或代谢过...     

香菇菌糠对绿色木霉防治黄瓜枯萎病的增效作用

试验以栽培香菇剩余的菌糠为原料,采用室内抑菌试验和盆栽试验相结合的方法探讨了香菇菌糠对绿色木霉防治黄瓜枯萎病的增效作用。菌糠提取液对绿色木霉菌丝生长和孢子萌发表现促进作用,促进率分别为18.20%和9.82%;对黄瓜枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发表现抑制作用,抑制率分别为11.85%和87.78%。香菇菌糠与木霉混合使用对黄瓜枯萎病的防效达70.26%,黄瓜的地上部分鲜重和根重分别增加了65.06%和58.10%。与单用木霉相比,加入香菇菌糠后绿色木霉在土体土、根际土和根系中定殖数量分别提高了251.39%、208.21%和104.76%,黄瓜枯萎病菌数量分别减少了56.98%、77.72%和76.83%。     

大黄酚对黄瓜白粉病菌的抑制作用研究

 采用子叶喷雾法分别测定了大黄酚(chrysophanol)对黄瓜白粉病菌(Sphaerotheca fuliginea)的保护和治疗生物活性。结果表明,大黄酚能有效降低黄瓜白粉病的病情指数,其保护和治疗作用的EC₅₀分别为0.23μg/mL和25.88μg/mL,对照药剂50%硫磺悬浮剂保护作用的EC₅₀为59.75μg/mL,10%苯咪甲环唑可湿性水分散粒剂治疗作用的EC₅₀为13.55μg/mL。在此基础上,利用2.4μg/mL大黄酚溶液处理黄瓜子叶24h后接种白粉病菌,在不同时段对病组织进行透明染色观察白粉病菌的变化情况。结果发现,大黄酚可有效降低黄瓜白粉病菌分生孢子的萌发率和萌发芽管个数,并能抑制菌丝的生长以及降低新生分生孢子的个数。接菌后24h,清水对照萌发率为66.6%,而大黄酚处理后的孢子不萌发;接菌后48h,对照菌丝的平均长度为414.7μm,大黄酚处理的菌丝平均长度为40.1μm;接菌后144h,对照的新生分生孢子串最多为8个孢子,大部分为6-7个,而大黄酚处理后的新生分生孢子串孢子个数最多为2个,大部分为1个。接菌7d后对照的病情指数为72.2,大黄酚处理组的病情指数仅为2.1,其保护作用防治效果达到97.1%,远高于50%硫磺悬浮剂65.4%的防效。     

金黄垂直链霉菌DF06的分类鉴定及防病促生作用

为研究生防菌株DF06对黄瓜枯萎病的防效和生防机制,通过培养特征、生理生化特征以及16S rDNA序列分析对DF06进行分类鉴定;采用平板对峙和室内盆栽法测定DF06对黄瓜枯萎病菌菌丝生长的抑制作用、对病害的防治效果及对黄瓜植株促生作用和防御酶活性变化影响;并通过实时荧光定量技术测定抗性相关基因的表达。结果表明：菌株DF06为金黄垂直链霉菌Streptomycesaureoverticillatus,该菌株对黄瓜枯萎病病原菌有较强的抑制作用,菌丝抑制率达80.80%,且能够导致黄瓜枯萎病菌基内菌丝发生畸变;在室内盆栽试验中DF06发酵液对黄瓜枯萎病有较好的防治效果,其保护作用达到68.42%,优于对照药剂多菌灵;不同浓度DF06发酵液能促进黄瓜种子和幼苗生长,经10⁷ CFU/mL的DF06发酵液处理后黄瓜幼苗株高、叶绿素含量和干重均显著增加,分别可达23.56 cm、2.16 mg/g和0.84 g;同时该菌能够诱导黄瓜抗病相关基因表达量的上调,提高相关防御酶活性,其中CAT、PAL和POD活性均在处理后的24h内快速增加。研究表明,DF06菌株可通过分泌某些拮...     

枯萎病菌对不同抗性黄瓜品种几种酶活性的影响

用枯萎病菌接种不同抗性黄瓜品种,研究不同抗性黄瓜品种的过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）和几丁质酶的活性变化。结果表明,接种后抗感品种POD、PPO和几丁质酶活性基本都呈现先升后降再升（再降）的趋势。抗感品种均在接种后12 h时出现第1次POD活性峰值,抗病品种中农13号、津优3号分别在接种后60、72 h、感病品种在84 h出现第2次POD活性峰值;接种后24 h时抗感品种均达到第1次PPO活性峰值,抗病品种在48 h、感病品种在60 h时达到第2次PPO活性峰值;接种后抗病品种在48 h时达到第1次几丁质酶活性峰值,72 h时达到第2次峰值,而感病品种只在60 h时出现1次几丁质酶活性峰值。抗感品种的POD、PPO、几丁质酶活性的2次峰值都显著或极显著地高于各自的对照,在接种后的早期阶段,感病品种的POD、几丁质酶活性的第1次峰值都显著或极显著地高于抗病品种,PPO活性的第1次峰值极显著地低于抗病品种。     

枯萎病菌对不同抗性黄瓜品种几憾活性的影响

用枯萎病菌接种不同抗性黄瓜品种,研究不同抗性黄瓜品种的过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）和几丁质酶的活性变化。结果表明,接种后抗感品种POD、PPO和几丁质酶活性基本都呈现先升后降再升（再降）的趋势。抗感品种均在接种后12h时出现第1次POD活性峰值,抗病品种中农13号、津优3号分别在接种后60、72h、感病品种在84h出现第2次POD活性峰值;接种后24h时抗感品种均达到第1次PPO活性峰值,抗病品种在48h、感病品种在60h时达到第2次PPO活性峰值;接种后抗病品种在48h时达到第1次几丁质酶活性峰值,72h时达到第2次峰值,而感病品种只在60h时出现1次几丁质酶活性峰值。抗感品种的POD、PPO、几丁质酶活性的2次培值都显著或极显著地高于各自的对照,在接种后的早期阶段,感病品种的POD、几丁质酶活性的第1次峰值都显著或极显著地高于抗病品种,PPO活性的第1次峰值极显著地低于抗病品种。     

抗感枯萎病黄瓜品种的病理组织结构学研究

选取不同抗性黄瓜品种中农13(抗)和中农6号(感)为试材,采用蘸根法接种,利用电镜技术和石蜡切片方法观察了病菌侵染前后根茎组织结构的变化。结果表明,抗病品种有环纹和网纹两种导管类型,有较厚的角质层,感病品种有环纹导管一种类型,无角质层。抗病品种在接种后细胞壁加厚、导管腔内出现褐色物、胞壁覆盖物以及侵填体。感病品种仅出现胞壁加厚和胼胝体。对于病原菌侵染,抗感品种具有不同程度的反应,抗病品种反应程度早于且强于感病品种。     

黄瓜苗期对菌核病抗性筛选研究

采用离体叶片菌丝体接种法和活体叶片菌丝体接种法对19 份黄瓜品种( 系) 进行了黄瓜菌核病抗性筛选。结果表明:黄瓜品种C1 、A15 、甘丰2 号、中农2 号的抗病性较强。中农7 号、828 等品种具一定的抗病性。其余品种( 系) 大多抗病性较差,其中津春3 号、山东密刺较感病。     

Responses of cucumber cultivars to induction of systemic resistance against anthracnose by plant growth promoting fungi

Initial experiment on the reactions of five Japanese cultivars of cucumber toColletotrichum orbiculare infection in the greenhouse revealed that cv Suyo and Gibai were susceptible and moderately susceptible, respectively, while cv Shogoin fushinari and Sagami hanjiro were resistant to infection byC. orbiculare; cv Ochiai fushinari was moderately resistant. The ability of 16 plant growth promoting fungi (some isolates belonged to species ofPhoma and some non-sporulating isolates) isolated from zoysiagrass rhizospheres to induce systemic resistance in the above five cucumber cultivars was tested by growing plants in potting medium infested with barley grain inocula of PGPF in the greenhouse. The second true leaves of 21-day-old plants were challenge inoculated withC. orbiculare and disease assessed. Nine, out of 16 isolates, caused significant reduction of disease caused byC. orbiculare in at least two cultivars.Phoma isolates (GS8-1 and GS8-2) and non-sporulating isolates (GU21-2, GU23-3, and GU24-3) significantly reduced the disease in all the five cultivars. The disease suppression in cucumber was due to the induction of systemic resistance, since the inducer(s) and the pathogen were separated spatially and that the inducer did not colonize aerial portions. The resistance induced by certain isolates in a susceptible cultivar was less than that in a resistant cultivar. Disease suppression caused by isolate GU21-2 was similar to theC. orbiculare induced control in certain cultivars. The average rate of expansion of lesion diameter on leaves due toC. orbiculare was slower due to induction with the selected plant growth promoting fungi compared to the uninduced control plants. Roots of four cultivars were colonized by only three isolates, however, roots of one cultivar (Suyo) was colonized by five isolates suggesting the cultivar-specific root colonization ability.Abbreviations cv cultivar(s) - PGPF plant growth promoting fungal isolates - PGPR plant growth promoting rhizobacteria     

棉花根系分泌物对枯草芽胞杆菌NCD-2菌株趋化性的影响

 枯草芽胞杆菌NCD-2菌株在不同棉花品种根际定殖能力表现不同,在感黄萎病品种冀棉11根际的定殖能力最强,而在耐病品种中棉所41根际的定殖能力最弱。本研究收集了5个不同棉花品种的根系分泌物,测定了NCD-2菌株对根系分泌物的趋化作用,结果表明NCD-2菌株对冀棉11根系分泌物的趋化作用最强,而对中棉所41根系分泌物的趋化作用最差。通过柱前衍生高效液相色谱法(AccQ-Tag-HPLC)测定了根系分泌物中氨基酸的成分及含量,结果表明不同氨基酸在不同棉花品种中含量不同。冀棉11的根系分泌物中氨基酸种类最多,可达17种。在中棉所41的根系分泌物中氨基酸种类最少且大多数氨基酸含量均为最低。测定了NCD-2菌株对14种氨基酸标准品的趋化性,结果表明NCD-2菌株对精氨酸(Arg)、丙氨酸(Ala)和赖氨酸(Lys)趋化性最强,但对甘氨酸(Gly)呈现负趋化性。RT-qPCR试验表明冀棉11的根系分泌物可提高cheA和cheD基因在NCD-2菌株中的表达量。室内防治试验表明,NCD-2菌株对冀棉11黄萎病的防效最好,防治效果可达到66.68%。本研究明确了棉花根系分泌物中氨基酸对NCD-2菌株趋化性的影响,该菌株在棉花根际定殖能力与棉花根系分泌物中氨基酸对本菌株的趋化性相一致。     

防治大豆疫霉根腐病的药剂筛选

在离体条件下测定了 8种内吸性杀菌剂对大豆疫霉菌菌丝生长的抑制作用。甲霜灵、甲霜灵锰锌、安克锰锌、杀毒矾、霜脲锰锌、克露和加瑞农为有效杀菌剂 ,霜霉威不具有抑菌效果。甲霜灵的 EC50 值为0 .4 870 μg/ m L,抑菌效果最好 ,安克锰锌、甲霜灵锰锌的 EC50 值分别为 1.4 2 6 1μg/ m L和 1.76 97μg/ m L,效果次之。在活体条件下 ,甲霜灵和甲霜灵锰锌能完全抑制大豆疫霉菌对感病大豆品种的侵入 ,并具有较长的药效期 ,安克锰锌、杀毒矾和霜霉威虽然具有明显的防治效果但药效期很短。大豆疫霉菌菌株间对甲霜灵锰锌的敏感性存在差异 ,但这种差异与菌株来源没有相关性 ,EC50 平均值为 1.830 2μg/ m L ,没有发现耐药性菌株。在我国黑龙江省目前缺乏有效抗病品种的情况下 ,建议应用甲霜灵锰锌防治大豆疫霉根腐病。     

邻烯丙基苯酚处理黄瓜种子控制土传腐霉菌和丝核菌侵染危害秧苗的效果

采用ISTA滤纸法检测得出:20%邻烯丙基苯酚悬浮种衣剂按1∶ 30~1∶ 90药种比(质量比)包衣处理"中农8号"和"长春密刺"黄瓜品种的种子,对黄瓜种子安全,种子发芽率分别达到95.75%~97.75%和80.00%~84.25%;PDA平板上检测药剂包衣处理对黄瓜种子带菌消毒效果显示,消毒处理效果达到66.67%~100%。菌丝生长速率法和染色处理结合显微技术实验证实,邻烯丙基苯酚对危害黄瓜秧苗的土传病原菌腐霉病菌Pythium aphanidermatum和立枯丝核菌Rhizoctonia solani具有较强的抑制作用,EC50值分别为27.59和34.16 μg/mL;药剂处理使供试病菌的菌丝发生中空、解体断裂等异常现象。20%邻烯丙基苯酚悬浮种衣剂1∶ 30~1∶ 90包衣处理黄瓜种子后接种供试病菌,对腐霉病菌和立枯丝核菌的防病效果分别达到73.31%~100%和85.16％~100%;随着药剂包衣处理浓度的增大,邻烯丙基苯酚防治两种病原菌侵染危害黄瓜秧苗的效果提高,等效或者优于常规药剂福美双种子处理。     

Colonization of roots of subterranean clover cultivars by virulent and avirulent races of Phytophthora clandestina

The colonization of the roots of four cultivars of subterranean clover by isolates representing four races of Phytophthora clandestina was studied. There was a highly significant race × cultivar interaction in the growth of inoculated tap roots and the degree of colonization of roots by the pathogen. While all races were able to infect the roots of all cultivars tested, roots of the susceptible cultivars were colonized more rapidly and extensively than those of the resistant cultivars. In compatible combinations, fungal colonization extended for a few centimetres in the tap root and lateral roots in the moderately susceptible cultivars Trikkala and Meteora, or throughout the whole root system leading to the death of the host in the very susceptible cultivar Woogenellup. In contrast, limited fungal colonization of the tap root and lack of extension of the fungus into lateral roots was typical of incompatible combinations. In all cultivars, lateral roots were as susceptible to infection as tap roots. The number of lateral roots of Woogenellup was significantly reduced by infection. However, neither the rate of lateral root formation nor the total number of lateral roots of Seaton Park, Meteora and Trikkala was reduced by infection with virulent or avirulent races of the pathogen.