激素对木薯体细胞胚胎发生与植株再生的影响

采用3种激素,通过不同浓度对华南8号木薯品种体细胞胚胎发生和植株再生的试验,获得适宜诱导胚性愈伤组织的培养基配方(MS+0.5mg/LCuSO4+4mg/L2,4-D或12mg/L Picloram)和体细胞胚成熟培养基配方(MS+0.5mg/LCuSO4+0.5mg/LBA)各一个。采用这些培养基配方应用于3个国内推广品种,一个海南当地品种以及两个模式种,诱导体细胞胚胎发生和植株再生效果显著。     

平贝母愈伤组织和不定芽诱导研究

目的应用组织培养技术对平贝母进行离体培养,从而得到愈伤组织和不定芽。方法以鳞茎为材料诱导愈伤组织与不定芽,采用正交实验设计确定最佳的激素种类与浓度。结果适当的激素组合及配比可诱导出愈伤组织和不定芽,最高的诱导率可分别达到14%以上、86.7%。结论愈伤组织最佳诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.9mg/L+NAA 0.5mg/L;最佳继代培养基为MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA 0.3mg/L;不定芽最佳诱导培养基为MS+KT 0.8mg/L+NAA 0.3mg/L。     

橡胶树品种云研77-2茎芽诱导体系优化及移栽管理

采用正交设计方法,研究橡胶树品种云研77-2茎段快繁试验中NAA、KT、6-BA 3种激素对茎芽诱导的影响.结果表明,培养基中添加6-BA对茎芽诱导起主导性的作用.橡胶树云研77-2茎芽诱导最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0～0.5 mg/L KT.诱导生根试验中,培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA的生根率可达66.7%.叶片剪去1/2的自根无性系进行移栽的植株平均成活率为43.6%.     

花生幼叶组织培养及有效植株再生

以花生品种白沙果成熟种胚发芽7 d的幼叶为外植体,对花生体细胞胚胎发生和植株再生进行了研究,并建立了其高效再生体系.将幼叶切成1 mm×1 mm,接种在添加1～3 mg/L 2,4-D和1～5mg/L BAP的MS培养基上进行培养,获得了高频率的胚胎发生丛(89%～96%).将带有胚胎发生丛的愈伤组织分别转移至添加10 mg/LBAP或添加3 mg/L BAP和1 mg/L ABA的MS培养基上进行培养,57%～100%的胚胎发生丛产生体细胞胚(简称体胚);当将其进一步转移至添加3 mg/L BAP和1mg/L ABA或添加BAP(4,10 mg/L)的MS培养基上进行培养时,体胚萌发,再生植株.植株再生率最高可达96%.     

甜菜组织培养与植株再生体系的建立

本研究以甜菜品种"甘糖7号"叶柄为外植体,通过诱导愈伤组织、愈伤组织分化不定芽、芽生根和移栽等步骤建立一套甜菜组织培养与植株再生体系。结果表明,诱导甜菜叶柄愈伤组织的最佳培养基为MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率达88.2%;诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,分化率仅为9.4%;生根培养基为MS+0.1 mg/L NAA,生根率达33.3%。甜菜再生苗移栽至蛭石中,保温保湿7~10 d后,成活率可达90%以上。本研究结果将对糖料作物甜菜抗逆遗传改良及其基因工程育种具有推动作用。     

甘蔗新品种云蔗05-51组培快繁试验简报

以甘蔗新品种云蔗05-51腋芽为试验材料,以MS为基本培养基,试验不同植物生长调节剂对云蔗05-51外植体丛芽诱导培养、增殖培养和生根培养的影响。比较3种分化培养基中云蔗05-51分化丛芽和种苗的生势情况,以不同浓度的KT和6-BA组合增殖培养的增殖率和生势情况,不同浓度NAA诱导生根的情况,最终筛选适合云蔗05-51的最佳组培方案。研究结果表明:分化培养基以MS+Dicamba 0.2mg/L+6-BA 0.5mg/L+KT 0.1mg/L最佳;增殖培养基以MS+Dicamba 0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L+KT 0.5mg/L最佳;生根壮苗培养基以1/2MS+NAA 2.0mg/L最佳。利用常规的方法移栽温室及大田移栽成活率高。     

麝香百合花梗的离体培养研究

选品种优良、植株健壮、刚开花的麝香百合，取得较佳花梗作外植体，接种于不同激素组合培养基中，在MS 6-BA 2mg/L NAA0．1mg／L的培养基中分化效果最好，可诱导花梗外植体分化、增殖，形成小鳞茎或芽；在MS KT0．1mg/L NAA0．2mg／L中增殖最快，增殖次数以3～4次最佳；经生根壮苗后进行常规炼苗，移栽至盆中，移栽成活率高。     

锯叶棕体细胞胚胎发生及植株再生体系的建立

从锯叶棕成熟种子中成功实现体细胞胚胎发生和植株再生。成熟种子放在MS培养基上培养，加入0.15%活性炭，452 μmol/L 2,4-D和14.7 μmol/L N6-2iP，所有成熟合子胚培养5周后长出体胚簇，12周后，外植体转移到2,4-D浓度减到90.4 μmol/L的MS培养基中进行体胚增殖，之后体胚转移到含有0.9, 9 μmol/L TDZ或没有生长调节剂的基本培养基中转化成小植株。9 μmol/L TDZ对植株再生是无效的，然而，在0.9 μmol/L TDZ中作次培养有12%胚胎能长成完整植株，没有生长调节剂中35%胚胎长出嫩枝，这些嫩枝转移到含有22.2 μmol/L NAA的培养基中全部都会生根。picloram和2,4-D对锯叶棕幼苗愈伤的诱导效果最佳，6-BA次之，对子叶来说，picloram和2,4-D对愈伤的诱导起不到任何作用，而对茎尖的诱导效果最好。     

2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生

进行了无核白、红地球2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生的研究。通过葡萄品系无核白、红地球叶片和叶柄外植体的愈伤组织的诱导、再分化,以器官发生途径实现植株再生。结果表明:(1)愈伤组织诱导以MS+BA5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖40g/L培养基最佳,诱导率为35%;同一葡萄品种的叶片与叶柄诱导愈伤组织的频率基本相同,而红地球外植体诱导愈伤组织的频率高于无核白;(2)不定芽的诱导再生以1/2MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+CH500mg/L+蔗糖30g/L培养基最佳,平均诱导率达35.4%;叶柄来源的愈伤组织诱导不定芽的频率高于叶片愈伤组织;(3)根系的诱导以1/2MS+KT0.5mg/L+IBA1.0mg/L+AC2g/L+蔗糖15g/L培养基最佳,无核白和红地球来源的不定芽诱导生根频率基本相同,都在80%以上。     

咖啡小粒种六倍体和中小粒杂种四倍体胚乳的组织培养

进行了利用咖啡胚乳离体培养技术培育六倍体咖啡胚乳植株及四倍体中小粒种咖啡种间杂种的研究。结果表明:将小粒种咖啡自花授粉所得六倍性胚乳及以中粒种咖啡为母本、小粒种咖啡为父本进行杂交所获得的四倍性种间杂种胚乳,分别在附加有6-BA1~2mg/L和NAA2mg/L的改良MS培养基上培养,能诱导出有效的愈伤组织;在附加有6-BA或KT0.5mg/L,NAA0.1mg/L的改良MS培养基上,愈伤组织能分化出各种类型的胚状体;在附加有NAA或IBA0.5mg/L及2g/L活性炭的1/2MS培养基上,胚状体可被诱导生根而再生完整的六倍体咖啡胚乳植株和四倍体种间杂种咖啡胚乳植株。      

红杨桃胚乳愈伤组织的诱导和三倍体植株再生

以红杨桃成熟干种子为材料,萌发后剥离胚乳进行培养。结果表明,最佳诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D　2mg/L+BA 0.2mg/L,诱导频率可达93.5％:将淡绿色致密的愈伤组织转至MS+ZT　3mg/L+NAA0.2mg/L的培养基上,经连续继代后,形成芽原基并发育成小植株,壮苗后取茎尖染色体显微观察,证明再生植株多为三倍体,其发生频率可达73.7％。      

仙人球的组织培养与快速繁殖

以全盛球种仙人球的茎切段和整个子球为外殖体进行试管培养，结果表明，在外殖体的切口处可诱导形成愈伤组织，在其刺座上的疣突处可直接产生小球体，经试验筛选出最适宜的培养基为：不定芽（小球体诱导，MS＋6－BA 8mg/L KT 1mg/L NAA 0.1mg/L；从生芽分化和继代，MS＋6－BA 3．5mg/L KT 0.5mg/L NAA 0.1mg/L；生根，1／2MS＋NAA0．1mg/L IBA 0.1mg/L 活性炭0．5％。     

云蔗03-194甘蔗组培快繁技术

以甘蔗新品种云蔗03-194的幼嫩叶片作为外植体,采用不同2,4-D浓度对幼嫩叶片的切片进行愈伤诱导,以不同6-BA和KT激素配比对甘蔗愈伤进行分化诱导和增殖培养,以不同NAA浓度及香蕉汁添加量诱导甘蔗组培苗生根。结果表明:适宜甘蔗幼嫩叶片愈伤诱导的培养基为MS+2,4-D 1.5mg/L,诱导分化培养以MS+6-BA1mg/L+KT 0.5 mg/L为宜,增殖培养以6-BA 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L为宜,适宜的生根培养基为MS+NAA 1.5mg/L+30mL香蕉汁。以河沙:红壤土(2∶1)为假植基质,假植成活率达92%～96%,植株生长健壮,长势良好。     

珂字棉312组织培养体系的建立

以珂字棉312为试验材料,以无菌苗的下胚轴为外植体诱导愈伤,并将愈伤组织置于不同培养基下诱导分化,初步建立棉花组织培养体系。结果表明:一是对珂字棉312组织培养体系建立较好的各阶段培养基分别是愈伤组织诱导培养基为MS+0.1 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+30g/L葡萄糖+8 g/L琼脂,胚性愈伤组织的诱导培养基为MS+30 g/L葡萄糖+2.5 g/L phytagell,分化培养基为MS+0.1 mg/L IAA+30 g/L葡萄糖+2.5 g/L phytagell,生根培养基为MSB5(双倍KNO_3,无NH_4NO_3)+0.1 mg/L GA3+30 g/L葡萄糖+2.5 g/L phytagell;二是各培养基调节pH值为5.8,培养温度为28℃时能够获得植株再生体系。     

橡胶草的组织培养研究

以橡胶草的茎叶为外植体,以MS为基本培养基,探索了橡胶草组织培养的最佳途径。结果表明：茎叶愈伤诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2-4,D 1.0 mg/L;最佳分化培养基为MS+6BA 0.8 mg/L+NAA 0.3 mg/L;诱导生根的最佳培养基是1/2 MS(蔗糖减半)+NAA 0.5 mg/L。     

高品质甜叶菊品系“1096”的组培快繁

采用改良DNS等方法筛选出的生长快、糖苷含量高的甜叶菊品系1096为材料,研究了不同外植体、不同激素种类和配比对愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明:以茎尖为外植体愈伤组织和不定芽诱导率均最高;其次是带腋芽茎段;再次为叶片。无腋芽茎段和无菌根均能诱导出愈伤组织,但不能诱导成芽。茎尖不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L;叶片不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 1.0mg/L;带腋芽茎段不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.5mg/L。不定芽继代增殖培养采用MS+6-BA 0.5mg/L+NAA0.05mg/L;在1/4MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L+1g/L活性炭的培养基上诱导生根,生根率可达100%,生根苗移栽后成活率达95%。     

柱花草花药离体培养研究

以热研2号柱花草花药为外植体,研究不同植物生长调节剂 、培养基以及低温预处理等对柱花草花药培养的影响,以期建立柱花草花药培养体系,获得再生植株,为柱花草倍性、基因组学及分子生物学研究提供材料。结果表明：花药4 ℃低温预处理24 h诱导效果较好;N6培养基对愈伤组织的诱导效果比MS培养基好;最佳愈伤组织诱导培养基组合为N6＋2,4-D 0.5 mg/L＋KT1.0 mg/L;分化培养的最佳组合为MS＋NAA 0.2 mg/L＋6-BA 3.0 mg/L。     

金花茶松散型愈伤组织诱导与悬浮细胞系建立

采用组织培养及显微观察技术,以金花茶植株茎段、叶片、花药及离体培养的金花茶体细胞胚为试验材料,对松散型愈伤组织的获得及悬浮细胞系的建立进行了研究。结果表明:在黑暗条件下,以金花茶体细胞胚切块为外植体,在MS+KT 0.5 mg/L+NAA 8.0 mg/L+硝酸银5mg/L+蔗糖30 g/L培养基上诱导出愈伤组织后,将其转接到该诱导培养基上连续培养3个月,最后从培养物中挑选状态良好的松散型愈伤组织在分别含有肌醇与硝酸银的2种培养基上交替培养,可以获得金花茶松散型愈伤组织;方差分析表明:蔗糖添加量、肌醇添加量及硝酸银添加量均对金花茶悬浮培养液细胞密度有显著影响且后两者分别与光照条件存在相互作用;将松散型愈伤组织在分别添加100 mg/L肌醇与2.5 mg/L硝酸银的液体增殖培养基上交替培养,可以建立并保持金花茶悬浮细胞系。该研究结果可为金花茶大规模细胞培养提供科学依据。     

阿希蕉合生花组培快繁技术研究

阿希蕉为野生香蕉资源,可作为重要的遗传育种资源并具有观赏价值。本研究以阿希蕉合生花为植物材料,进行组培快繁技术研究。结果表明,阿希蕉在巴西蕉愈伤诱导培养基上可诱导出愈伤组织,最佳芽分化培养基配方为MS+6-BA（3.0 mg/L）+NAA（0.1~0.2 mg/L）,最佳芽增殖培养基配方为MS+6-BA（2.0 mg/L）+NAA（0.1 mg/L）,最佳生根培养基配方为MS+IBA（3.0 mg/L）+NAA（0.3 mg/L）。从取材到获得根系完整的组培苗约需100 d,繁殖效率100株/花苞以上,增殖效率高,可达到快速繁育的目的。     

银后粗肋草的离体培养和快速繁殖

以银后粗肋草的幼嫩叶片为材料,研究不同植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导和分化的影响;以带侧芽的茎段为材料,研究不同接种方式、不同6-BA和NAA组合对丛生芽诱导的影响;以愈伤组织诱导的不定芽和茎段诱导的丛生芽为材料,研究不同植物生长调节剂组合对丛生芽的增殖和生根的影响;最后研究不同移栽基质组合对试管苗移栽成活的影响。结果表明:(1)叶片接种在MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基培养中60 d后,愈伤组织诱导率为63.41%,不定芽再生率为26.88%,平均生成芽数为3.80个。(2)带侧芽的茎段水平放置接种在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基上,丛生芽诱导率为91.91%,平均生成芽数为5.29个。(3)将经叶片诱导愈伤组织分化所得的不定芽和经茎段诱导所得的丛生芽切成单株,接种到MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L或MS+KT 3.0~4.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L增殖培养基中,不定芽和丛生芽增殖和生长良好。(4)将在增殖培养基中长至4 cm以上的小植株转入到1/2 MS+NAA 0.2 mg/L的生根培养基中培养20 d后,生根率达100%,平均根长4.49 cm,每株平均根数6.80条。(5)生根苗移栽到1/2木屑+1/4珍珠岩+1/4菜园土混合基质中,成活率达95.40%。