山羊痘免疫效果检测

应用山羊痘正向间接血凝诊断试剂对贵州省和广西柳州市共604头份山羊血清进行了抗体检测。同时对3种山羊痘疫苗进行了免疫效果比较,测定了山羊痘疫苗的免疫抗体消长规律、免疫保护期,对皮内、皮下、肌肉接种疫苗的免疫效果进行了比较。结果表明:山羊痘弱毒疫苗免疫后7~8 d可检测出抗体,皮内、皮下注射接种方式的免疫效果优于肌肉注射。制定了对山羊痘病的免疫程序,使用B组疫苗,采用皮内注射方式对山羊进行免疫,产生抗体的时间较快,水平较高,维持时间可达196 d以上。     

山羊痘的防治

山羊痘是山羊的一种接触性热性传染病,一年四季均可发生.病羊和病愈带毒羊是主要传染源,病毒常存在于痘疱液、痘疱上皮和分泌物中,随脱落的痂皮和分泌物而污染周围环境、饲料和饮水等,通过损伤的粘膜传染疫病,也可通过羊虱等吸血昆虫问接传播.     

应用间接竞争ELISA检测山羊痘抗体方法的建立

[目的]为山羊痘疫苗接种山羊后产生的抗体效价检测和山羊痘的诊断奠定基础。[方法]采用Vero-E6传代细胞分离山羊痘病毒抗原,建立检测山羊痘抗体的间接竞争ELISA方法。[结果]检测山羊痘抗体的间接竞争ELISA的最佳工作条件：最佳抗原包被浓度为1μg/ml,兔抗高免血清最佳稀释度为1∶16 000,待检血清的工作浓度为1∶400,阳性血清的临界值为45.19%,阴性血清的临界值为38.89%。用该试验建立的ELISA方法检测3 000份接种山羊痘疫苗的山羊血清,阳性检出率为83.33%,琼脂扩散试验检出率为77.33%,竞争抑制ELISA方法较琼脂扩散试验方法敏感。[结论]该方法具有特异性高、快速、敏感等特点,适合检测山羊痘抗体。     

山羊痘的防制

山羊痘是严重危害养羊业发展的疫病之一,笔者认为只有加大免疫力度,提高群体免疫保护率,强化环境消毒,加强饲养管理才能做到有效防止该病的发生。     

山羊痘暴发与防治

2002年8月,宣州区某羊场暴发了一起山羊痘,共发病112只,发病率为60%,死亡8只,死亡率7.10%.经采取综合防治措施,疫情得到了控制.     

贵州省黔西南州山羊痘的血清学调查

为调查黔西南州山羊痘的隐性感染率和使用疫苗后血清抗体水平,采用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）对黔西南州规模化养羊场和农村散养户共762头份羊血清样本进行了GPV抗体水平检测.结果,未免疫羊群GPV的血清抗体阳性率为14.15％;而在免疫羊群GPV的血清抗体阳性率为79.96％;这表明GPV的免疫效果比较理想,但未免疫羊群存在GPV感染,应引起重视.     

山羊痘的诊断与防治

<正> 山羊痘病是由山羊痘病毒引起的一种疾病。该病今年春夏在我区古驿、峪山、黄龙等地大规模发生,对我区养羊业造成极大威胁。经过积极防治,已控制蔓延。现将防治该病的知识介绍如下: 1 流行病学:山羊痘的流行最初是由个别羊发病,以后逐渐蔓延全群。本病主要通过呼吸道传染,病毒也可通过损伤的皮肤和粘膜侵入机体。饲养管理人员,护理工具、皮毛、饲料、垫草和外寄生虫等都可成为传播媒介。 一般情况下,山羊痘一般仅发生于山羊,不传给绵羊和其它家畜,羔羊较老龄羊敏感,病死率亦高,妊娠母羊易引起流     

应用反向间接血凝试验检测山羊痘病毒抗原

以兔抗山羊痘病毒IgG致敏绵羊红细胞，采用反向间接血凝试验(RPHA)检测山羊痘病毒抗原。该诊断试剂与山羊痘病毒抗原发生特异性的凝集反应；在PBS中不自凝；与其它动物病病毒抗原无交叉反应。对贵州省8个疫区现场采集山羊痘待检抗原检测结果表明，该方法阳性检出率为87．5％(7／8)。与琼脂扩散试验(AGP)阳性检出率为50％(4／8)相比较，RPHA敏感性比AGP高；同时对山羊痘野生强毒H—GZ株F1～F5代细胞培养物进行检测，F1代就可检出RPHA效价，而AGP则不能检测。该诊断试剂可用于兽医临床上山羊痘的快速诊断及作为病毒分离培养的检测指标。     

应用正向间接血凝试验检测山羊痘抗体

采用硫酸铵盐析、Sephadex G-200柱层析的方法纯化山羊痘病毒,以病毒抗原致敏绵羊红细胞建立了山羊痘正向间接血凝试验,并进行了最佳试验条件的摸索.结果表明,试验所制备的诊断液能与山羊痘参考阳性血清发生特异性凝集,其凝集现象能被山羊痘阳性抗原特异性抑制,与其它常见的动物病阳性血清无交叉反应.用本方法及琼脂扩散试验对山羊痘血清进行检测,IHA阳性检出率为89.1%（41/46）;而AGP阳性检出率为34.8%（16/46）.表明正向间接血凝试验比琼脂扩散试验敏感性高.本次试验制备的正向间接血凝试验诊断液可用于兽医临床上进行快速诊断.     

山羊痘病的综合防制

山羊痘病是一种急性热性接触性传染病.本病以皮肤、黏膜发生特异性的痘疹为特征,其流行快,发病率高,重者使病羊死亡,孕羊流产等.     

山羊痘病毒增殖与沉淀抗原制备

取山羊痘分离野生强毒H—GZ株通过Vero—E6细胞传代增殖，经硫酸铵盐析与Sephadex G-200层析制备了山羊痘病毒沉淀抗原。该抗原在琼脂扩散反应和对流免疫电泳的试验中能够与山羊痘参考阳性血清、山羊痘免疫阳性血清出现沉淀线，所形成的沉淀反应能够被山羊痘参考阳性血清特异性地抑制，与其它常见的动物病血清不发生交叉反应。本次制备的山羊痘病毒沉淀抗原和山羊痘免疫阳性血清，可以用于兽医临床诊断、免疫效果监测和流行病学调查。     

贵州山羊遗传多样性及其起源研究

采用DNA测序技术分析了贵州3个山羊品种42个个体的mtDNA D—loop全序列。结果表明,贵州山羊mtDNA D—loop全序列分子长为1212～1213bp,检测到67个变异位点,约占分析位点总数的5．53％,界定了33种单倍型。贵州山羊品种单倍型多样度为0．9615～0．9905,核苷酸多样度为1．5883％～1．9004％,表明贵州山羊品种遗传多样性丰富。根据mtDNA单倍型构建了贵州山羊的NJ分子系统树,聚类表明,贵州山羊存在支系A和支系B两大母系起源。     

山羊痘病毒结构蛋白P32基因的表达

将山羊痘病毒结构蛋白P32基因从重组质粒pMD-P32中亚克隆至pGEX-4T-1原核表达载体上,用构建的重组表达质粒pGEX-P32转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,1 mmol/L IPTG诱导表达,细菌裂解物经SDS-PAGE检测到分子量约为58 ku的目的蛋白,与预期的产物大小一致.Western-blotting表明该重组蛋白可被山羊痘阳性血清所识别.     

南江黄羊与贵州白山羊杂交改良试验

试验选取铜仁职业技术学院养殖场购入的南江黄羊作为父本,生产母本为本地饲养的贵州白山羊。测试羊50只,体型外貌、生产性能基本一致,发育整齐,健康无病,年龄为2~4岁,分成试验组(南江黄羊×贵州白山羊)和对照组(贵州白山羊×贵州白山羊),平均每组25只能繁殖母羊。主要观测两组羊后代的体型外貌、繁殖性能和初生、断奶(2月龄)、4月龄、6月龄、周岁(12月龄)体重及体长、体高、胸围等主要生产性能、经济效益指标。试验结果表明,试验组黄本杂羊F1代体型趋向父本,表现出良好的杂交优势和适应性,具有生长快、产肉性能好、耐粗放牧、合群易管理等特点。     

贵州地方山羊品种肌肉生长抑制素基因的表达差异

为了解贵州地方山羊肌肉生长抑制素基因(Myostatin)的表达部位及组织分布模式,比较各组织中Myostatin基因表达的品种间差异,以β-actin作为内参基因,应用Taq Man实时荧光定量方法检测了黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊等贵州地方山羊品种以及南江黄羊的肝、肾、心、肺、背最长肌、半膜肌、皮下脂肪组织中Myostatin基因mRNA的表达水平。结果显示:肝和皮下脂肪中Myostatin基因的表达水平较高,肾和肺次之,半膜肌、背最长肌和心等肌肉组织中的表达水平相对较低;而半膜肌和背最长肌中Myostatin基因的表达水平高于心肌。肝和皮下脂肪Myostatin基因的表达在各品种间差异不显著;心、肺、肾、背最长肌和半膜肌中Myostatin基因的表达,贵州白山羊显著高于黔东南小香羊和黔北麻羊;肺、背最长肌和半膜肌中,Myostatin基因的表达贵州白山羊显著高于贵州黑山羊和南江黄羊。可见,贵州地方山羊心、肝、肺、肾、背最长肌、半膜肌和皮下脂肪中均有Myostatin基因表达,其组织表达水平总体为肝和皮下脂肪肾和肺半膜肌、背最长肌和心(肌),且多数组织中Myostatin基因的表达存在品种差异。     

贵州白山羊板皮品质研究

通过对贵州白山羊板皮质量的研究表明,板皮鲜皮重(1.975±0.47)kg,皮张面积为(3963.06±541.69)cm2,肩部皮肤厚度为(2576.32±287.39)μm,肩部与体侧、股部的厚度差异不大,比较均匀;在组织结构上,表皮层占皮厚的0.4%～1.0%,真皮层占99.0%,乳头层占真皮的41. 5%,网状层占真皮的58.5%,表皮层均匀;真皮层中毛囊群间隙较大;弹性纤维细,分布均匀.板皮的脂肪含量为3.55%,抗张强度为2.24g·mm-2,伸长率60%,这些指标均达到轻工部的标准.     

LEPR基因在贵州白山羊组织中的表达

为探究瘦素受体基因(LEPR)在贵州白山羊组织中的表达规律,利用实时荧光定量PCR技术检测LEPR基因在贵州白山羊心、肝、脾、肺、肾、肠、背肌、腿肌和皮下脂肪9个组织的表达量。结果表明:目的基因LEPR和内参基因GAPDH的熔解曲线均呈单一峰形,说明所选条件可准确定量LEPR基因在贵州白山羊各组织中的相对表达量。具体表达量为脂肪脾肺背肌肠肝肾心腿肌。