生姜对小鼠血清溶菌酶活性的影响

为观察生姜对小鼠血清溶菌酶活性的影响，将40只小鼠随机分为4组，每组10只，实验组灌服生姜匀浆液，对照组灌服蒸馏水，4组小鼠均饲喂正常饲料，20d检测小鼠血清中溶菌酶含量。结果表明，灌服生姜组小鼠血清溶菌酶含量明显高于对照组。实验证实，提高血清溶菌酶活性是生姜抗菌的机制之一。     

鸭蛋清中溶菌酶的提取研究

本文采用离子交换法从鸭蛋清中提取溶菌酶，所用树脂为大孔径弱酸性阳离子树脂，用传统的检测方法测定活力。得出较佳的提取条件为：蛋清树脂比为4：1，提取时间3．5h，洗脱液浓度1mol/L，洗脱液用量1．5倍。     

牛乳溶菌酶在毕赤酵母中的分泌表达及活性分析

为真核表达牛乳溶菌酶,本研究在通过酵母偏爱密码子改造并人工合成LYZ1基因的基础上,将LYZ1基因经克隆构建了高效表达具有生物活性牛乳溶菌酶的分泌型表达载体pPICZα-A-LYZ1,将其经SacⅠ酶切线性化后电转化毕赤酵母菌株GS115中,通过Zeocin筛选和PCR鉴定后的阳性重组菌用甲醇诱导60h后,进行SDS-PAGE和western blot鉴定,用溶壁微球菌对其进行活性检测,并对其进行体外抑菌效果检测分析。结果表明:分泌表达的重组目的蛋白约16ku,而且抗血清具有良好的反应原性。活性检测表明,培养液中重组溶菌酶活性达到2842u/mL。体外抑菌试验结果表明,重组牛乳溶菌酶对标准葡萄球菌及大肠杆菌菌株具有较好的抗菌作用,而对无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌作用较弱。     

蛋清溶菌酶的改造及其抑菌活性

本研究旨在探讨高温酸性改造的蛋清溶菌酶对两种革兰阳性菌G⁺（金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis）和两种革兰阴性菌G^-（大肠杆菌Escherichia coli、鳗弧菌Vibrio anguillarum）的抑制作用。采用高温（57.0±0.1）℃、pH 2.0条件对蛋清溶菌酶进行改造，透射电镜观察改造蛋清溶菌酶的超微结构，8-苯胺基-1-萘磺酸（ANS）测定蛋清溶菌酶改造前后疏水性的变化，圆二色谱法与BeStSel软件分析改造后溶菌酶二级结构的改变，并采用牛津杯法测量改造后蛋清溶菌酶对供试菌的抑菌直径，生长曲线测定法测定改造后蛋清溶菌酶的最小抑菌浓度，Western blot检测4种供试菌菌液与菌体中溶菌酶含量变化。透射电镜结果显示，改造后蛋清溶菌酶为短杆状纤维结构；ANS和圆二色谱法结果显示，改造后蛋清溶菌酶疏水性增强，β折叠含量提高31.7%；牛津杯法显示，改造后蛋清溶菌酶对试验菌的抑菌强弱为鳗弧菌>枯草芽胞杆菌>金黄色葡萄球菌>大肠杆菌；生长曲线测定结果发现，鳗弧菌最小抑菌浓度为8 μmol·L^-1，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽胞杆菌的最小抑菌浓度为6 μmol·L^-1；Western blot发现菌液中改造蛋清溶菌酶分子质量未发生改变，而菌体中溶菌酶含量和分子质量发生改变，革兰阳性菌和阴性菌均在10 ku处出现条带，且革兰阳性菌在22 ku处溶菌酶含量增加，但菌液上清均仅在14.3 ku处有条带。结果提示，改造蛋清溶菌酶对革兰阳性菌和阴性菌均具有较强的抑菌效果，为改造蛋清溶菌酶在畜牧业中的应用提供了基础数据。     

真空冷冻干燥技术在溶菌酶制备中的应用

溶菌酶是一种糖耷水解酶，它能使N一乙酸壁酸与p—N一乙酸葡萄糖腹之间的p—1，4糖着键水解，因而溶菌酶能使革兰氏阳性菌的细胞壁水解破坏而起溶菌作用。可用于抗感染、消炎、消肿。此外，溶菌酶分解的稠厚粘蛋白，能排出脓性创渗物，可用于清除坏死组织，加速创口的修复再生。近年发展的溶菌酶的复合物，如溶菌酶一木瓜蛋白酶、溶菌酶一菠萝酶、溶菌酶一青霉素、溶菌酶一头抱氨节等，开发了溶菌酶的新用途，因此是一种国内外紧俏的生化制品。以鸡蛋清或蛋壳膜为原料分离提取溶菌酶，本课题采用超滤一真空冷冻干燥新工艺制备溶菌酶，取得…     

添加溶菌酶的婴幼儿配方奶粉的研究

本研究通过Excel规划求解，确定了婴幼儿配方奶粉的最佳配方工艺，并将溶菌酶这一绿色天然防腐剂和生理调节功能因子应用到婴幼儿配方奶粉中。本文还研究了溶菌酶添加时间及添加量等因素对产品抑菌效果的影响，确定了喷雾干燥后添加量为50mg／100mL的溶菌酶添加量，抑菌效果最好。     

蛋清溶菌酶淀粉样纤维对人神经母细胞瘤细胞的毒性

本研究旨在探讨一定理化条件下形成的蛋清溶菌酶淀粉样纤维对人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）的毒性作用。采用高温（57±0.1）℃、pH 2.0甘氨酸溶液、振荡条件下孵育100 μmol·L^-1的蛋清溶菌酶蛋白，使其聚集成为蛋清溶菌酶淀粉样纤维；透射电子显微镜观察蛋清溶菌酶淀粉样纤维的超微结构，ANS荧光法测定纤维的疏水性，圆二色谱法测定并计算纤维的二级结构含量；将此纤维作用于培养的SH-SY5Y神经细胞，MTT法检测细胞活力，核染色法检测细胞凋亡状况。透射电镜结果显示，蛋清溶菌酶在孵育4 d后形成了呈短杆状超微结构的淀粉样纤维；与天然蛋清溶菌酶蛋白相比，纤维的疏水性和二级结构β折叠含量均显著提高；且1~3 μmol·L^-1纤维作用于SH-SY5Y细胞12、24和48 h均产生了显著的毒性作用（P<0.01），1、2和3 μmol·L^-1纤维作用细胞12 h时的细胞活力分别为75.16%±15.51%、67.54%±12.13%和67.89%±10.26%，作用24 h的细胞活力分别为75.78±13.01%、58.41%±5.55%和61.90%±8.94%，作用48 h的细胞活力分别为71.59%±14.75%、55.65%±5.78%和46.45%±6.23%，细胞活力降低呈现明显的浓度依赖性和时间依赖性，且细胞核染色呈现典型的核凋亡变化。结果提示，蛋清溶菌酶在一定理化条件下可形成具有神经细胞毒性的淀粉样纤维，为解释朊蛋白或其他蛋白质形成淀粉样纤维的机制提供参考。     

溶菌酶在食品工业中的应用

本文综述了溶菌酶的基本性质，影响溶菌酶活性的因素，讨论了溶菌酶可抑制的各类微生物，并较为系统地阐述了溶菌酶在乳制品，肉制品和酵母生产过程中的应用情况。     

人溶菌酶基因hLYZ在小鼠乳腺中的表达及其抗菌活性检测

从人胎盘组织中克隆获得人溶菌酶基因hLYZ,选用体内表达载体pcDNA3.1,构建表达载体pcDNA3.1hLYZ,并转染至小鼠体内,采集小鼠乳汁和乳腺组织,通过RT-PCR方法检测基因的表达水平,用免疫组化反应、Western blotting检测蛋白的表达,并通过体外抗菌活性检测重组人溶菌酶的抗菌活性。经酶切鉴定和核苷酸序列测定,表明重组质粒pcDNA3.1-hLYZ构建正确,小鼠乳清的SDS-PAGE电泳显示在约14700处有特异的蛋白条带出现,Western blotting检测表明成功表达了人溶菌酶,根据回归方程计算酶活性为4011U/mL,体外抗菌活性检测结果显示重组人溶菌酶对大肠杆菌有明显裂解作用。本试验成功地在小鼠乳腺中表达了重组人溶菌酶,表达的蛋白具有较高的酶活性,这些结果为哺乳动物乳腺生物反应器的研究奠定了基础。     

鸡溶菌酶基因3‘端MAR在同源细胞系对基因表达调控的研究

用带有鸡溶菌酶基因增强子和启动子的编码细胞氯霉素乙酰基转移酶的融合基因，在其上游区、下游区或在上游和下游和下区同时插入鸡溶菌酶基因３＇端核基质附着区的不同表达载体ＭＥＰＣ、ＥＰＣＭ和ＭＥＰＣＭ，稳定转染鸡ＨＤ１１Ｐｒｏｍａｃｒｏｐｈａｇｅ同源细胞系，筛选不同表达载体稳定整休整合的细胞株，检测ＣＡＴ表达水平，确定表达基因拷贝数，从而分析鸡溶菌酶基因３＇端ＭＡＲ对基因表达的影响。稳定整合表达和瞬时表达