纯化的苏云金杆菌00-50-5晶体和芽孢对甘蓝尺蠖的杀虫活性

苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)00-50-5 菌株可以高效地杀死多种鳞翅目昆虫害虫。为了深入研究该菌的治病机理和作用方式,首先需要分离和纯化晶体和孢子,研究它们的杀虫活性。本研究用纯化后的00-50-5菌株晶体和芽孢,比较它们对昆虫甘蓝尺蠖(Trichoplusia ni)的杀虫活性。初步的活性测定结果证实,在用100 μg/mL浓度处理48 h后,00-50-5菌株纯晶体以及晶体和孢子混合物都能够杀死二龄甘蓝尺蠖幼虫,死亡率达100%,纯芽孢则无毒杀效力。 致死中浓度(LC50)的测定结果表明,Bt 00-50-5菌株纯晶体的杀虫活性(LC50＝0.32 μg/mL)高于晶体和孢子的混合物(LC50＝0.48),然而纯孢子的杀虫活性是非常低的(LC50大于500.00)。因此,00-50-5的晶体主要负责引起幼虫的死亡。     

苏云金芽孢杆菌chi36基因的克隆、表达和酶活性分析

通过PCR方法从苏云金芽孢杆菌010菌株克隆出几丁质酶基因chi36,该基因开放阅读框(ORF)的长度为1 083bp,编码360个氨基酸。氨基酸序列分析表明:Bt 010的Chi36与Bt15A3、Bc28-9、Bc6E1的Chi36相似性分别为99%、99%和96%,其N-端具有27个氨基酸的信号肽序列。该蛋白归类为18家族几丁质酶,属于一种胞外酶。将chi36基因插入到PGEX-KG原核表达载体的表达框中,构建成原核表达载体并转化到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)进行蛋白表达,酶活性测定结果表明,表达产物对几丁质有降解作用,在pH值为5.0、温度为55℃时酶活性最高。     

纳豆芽孢杆菌发酵产品研究进展

纳豆是日本的传统食品,由纳豆芽孢杆菌发酵制作而成,其分泌的纳豆激酶具有安全性高、溶栓性能力强等特点。近些年来,纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)在食品及农副产物深加工领域应用越来越广泛,生产了多种活性产物并有效地提高了食品的营养特性。纳豆激酶除溶栓外更多最新的功能活性也逐渐被研究者发现,在稳定性及气味改良等方面的改善也有着很大的进步。本文综述了纳豆芽孢杆菌及纳豆激酶的开发及应用现状及存在的瓶颈问题和解决对策等研究进展,以期为纳豆相关食品的开发提供支持。     

枯草芽孢杆菌在农作物生产上的应用研究进展

综述了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在土壤提质改良、促进作物生长发育及产质量的提高、耕作土壤降害与修复等方面的研究成果,并对作物生产上枯草芽孢杆菌与环境相关影响因子间其专业化功能开发研究及其分子生物学水平上的作用机理等进行了展望。     

白僵菌与苏云金芽胞杆菌水悬浮剂研制及田间防治玉米螟研究

通过室内生物测定,研究球孢白僵菌和苏云金芽胞杆菌联合防治玉米螟的效果。研究表明,确定白僵菌与苏云金芽胞杆菌浓度分别为1.0×106孢子/mL、1.0×109孢子/mL条件下,杀虫效果达到最佳,LT90为6.64(±0.07)d,较1.0×109的Bb LT90缩短26.06%。通过助剂悬浮率、乳化效果以及助剂对微生物活性影响等确定1个白僵菌与苏云金芽孢杆菌水悬浮剂剂型配方。田间防治玉米螟结果表明,两种生防菌均在防治过程中起作用,田间玉米受害株数、活虫数均明显低于未施药对照,防治效果优于单一使用白僵菌或苏云金芽胞杆菌。     

解淀粉芽孢杆菌HAB-7对18株植物病原真菌的抑制作用

HAB-7是一株分离自豇豆根际土壤、具有较强抑菌作用的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。研究HAB-7对18株植物病原真菌及其发酵液粗提蛋白对植物病原的抑制作用,并测定其对番茄种子的促生作用。采用平板对峙法测定其对18株植物病原真菌的抑制活性,以橡胶树炭疽菌为指示菌,对其发酵上清液经60%、80%硫酸铵盐析获得的抗菌粗蛋白进行测试;并将HAB-7菌液稀释成6个浓度梯度,分别用来对番茄种子进行促生测试。结果显示：HAB-7对18株植物病原真菌的平均抑菌率为61.03%;     

小麦赤霉病拮抗性芽孢杆菌生防作用的研究

为探索小麦赤霉病生物防治的有效途径,对分离自中国东北嫩江小麦赤霉病流行地区小麦植株叶面和穗部的8株拮抗性芽孢杆菌进行了室内生物测定和田间小区防治试验.平板对峙培养、菌丝生长速率及孢子萌发测定等试验表明,8个菌株对小麦赤霉病菌的菌丝生长及孢子萌发均具有明显的抑制作用,其中以菌株B08的综合抑菌活性最强,其活菌体抑菌带宽达8.4 mm,无菌发酵液稀释5倍处理后96 h对菌丝生长抑制率为66.2%,处理分生孢子可使其完全丧失萌发能力,10倍稀释液可使孢子刚萌发的芽管膨大畸变而不能伸长,活体菌悬浮液和灭菌后的发酵液田间防效达59.5%～65.9%.发酵液热稳定性好,121℃、30 min加压蒸气灭菌后仍保持良好的抑菌活性.研究结果说明,供试拮抗菌株作为小麦赤霉病的生防材料具有很好的开发应用前景。     

地衣芽孢杆菌CHB6高芽孢形成率发酵条件的研究

以CHB6的细胞生物量和芽孢率为指标,采用正交试验方法,研究了无机盐离子对地衣芽孢杆菌CHB6的细胞生长量及芽孢形成的影响,通过优化获得地衣芽孢杆菌CHB6的细胞生长量和芽孢形成率均较高的培养基配方。结果表明,Mn2+离子对CHB6的影响最显著,最佳培养基配比为:糖蜜1.5%、大豆蛋白胨0.5%、MnSO4.H2O 0.04%、MgSO4.7H2O 0.05%、CaCl2 0.1%、K2HPO4.3H2O 0.1%、KH2PO4 0.125%、NaCl0.5%。细胞生长量可达4.8×109 CFU/mL,芽孢形成率达到90.6%。     

枯草芽孢杆菌CS16菌株抑菌活性物质的提取分析

枯草芽孢杆菌CS16发酵液经盐酸沉淀,甲醇抽提得到粗提物,稳定性试验结果表明,抑菌物质在pH2～11较稳定,对温度、紫外、有机溶剂耐受力较好.利用中压液相色谱得到较纯的抑菌物质,薄层层析后显色分析表明,该抑菌物质初步可以确定为酚类物质.     

叶面分离Bt及对茶树主要害虫高毒力菌株的筛选

通过分离培养基和分离方法的筛选,得到了从叶面分离Bt的有效方法。用此法从25种植物叶面分离出54株Bt,利用茶尺蠖、茶小绿叶蝉和茶橙瘿螨作为靶标昆虫,筛选对茶树主要害虫有毒力菌株,得到了对鳞翅目有效的菌株10株,对同翅目有效的菌株4株,但所有测试菌株均对茶橙瘿螨无效。     

转cry8C/cry3A工程菌BIOT1853A对花生田主要节肢动物类群结构的影响

以受体菌株Bt185和常规化学农药为对照,研究转cry8C/cry3A工程菌BIOT1853A对花生田主要节肢动物类群数量的影响。研究结果表明:花生田地上部分主要节肢动物分为以下9个类群:蝗虫类、蟋蟀类、粉虱类、叶甲类、叶蝉类、瓢虫类、蝽类、草蛉类和蜘蛛类;施加不同浓度工程菌BIOT1853A对主要节肢动物类群的组成、数量和时序动态均无显著性影响。综合分析认为,工程菌BIOT1853A对花生田节肢动物群落无明显的负面影响。     

苏云金芽胞杆菌制剂及其与小卷蛾斯氏线虫对腰果重要害虫的作用效果

室内测定了苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）对腰果重要害虫腰果细蛾(Acrocercops syngramma)和腰果云翅斑螟（Nephopteryx sp.）幼虫的作用效果。研究表明,在500或1000倍浓度下,Bt对低龄（1~3龄）腰果细蛾幼虫的致死作用较强,致死率为70%~100%,但对高龄（4龄和5龄）腰果细蛾幼虫致死作用较低（20.0%~52.5%）。Bt对腰果云翅斑螟3龄幼虫的致死作用相对较慢,在500倍浓度下作用120 h后致死率为75%。2000倍Bt与200 IJs/皿小卷蛾斯氏线虫Steinernema carpocapsae All对腰果云翅斑螟联合作用48 h后表现为增效作用,致死率达90%。     

转Bt基因抗虫棉毒蛋白检测方法及其表达规律研究进展

研究转Bt基因抗虫棉毒蛋白的表达规律及其对标靶害虫毒杀性,对评价Bt基因成功转化、转Bt基因抗虫棉选育和推广、目标害虫抗性预测以及生物安全评价管理都具有重要意义。概述了国内外转Bt基因棉毒蛋白检测方法及其表达变化规律,并提出引起Bt毒蛋白表达变化的原因及改进对策。     

茶多糖调控肥胖作用研究进展

随着人们生活水平的提高,肥胖的发病率不断攀升,已经成为严重的健康问题。茶多糖作为一种与蛋白质结合的酸性杂多糖,能够通过调节食物摄取和能量吸收、调节脂肪生成、增强抗氧化防御酶活性和减轻炎症、调节肠道菌群紊乱和维护肠道屏障完整性等不同途径有效调控肥胖。综述了近年来茶多糖调控肥胖功能及其作用机理的研究进展。     

一株新型Bt菌株的鉴定及其抗椰子茎泻血病菌和杀小菜蛾活性

从海南采集的土样中分离鉴定获得1株可抑制椰子茎泻血病菌和杀小菜蛾幼虫的苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis, 简称Bt）WENCHANG-BT20;经cry基因的鉴定明确了该菌株含有cry1Aa、cry1La、cry1Ai、cry1Ac、cry1Be、cry1Ka、cry1Ia、cry2Ab基因。生物学检测结果表明,该菌株晶体蛋白对小菜蛾幼虫的LC50为0.088 μg/mL（95％置信区间为0.046~0.127 μg/mL）;该菌株对椰子茎泻血病菌菌丝生长有一定的抑制作用,平板对峙培养法培养5 d后,抑菌圈直径为22 mm。     

水稻粒型基因克隆和调控机制研究进展

水稻粒型是影响其产量和品质的重要性状,阐明其遗传调控机理,有助于提高水稻单产和改良品质。水稻粒型性状主要包括粒长、粒宽、粒厚、长/宽比,属于数量性状,受胚、胚乳及母体植株等不同遗传体系的控制。随着水稻功能基因组学和重测序技术的快速发展,目前已经定位超过400个与水稻粒型相关的数量性状位点(QTL),并已克隆了60个水稻粒型基因,涉及植物激素、泛素-蛋白酶体通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、G蛋白信号通路及表观修饰等多个调控通路。本文对水稻粒型基因克隆及其调控机制的研究进展进行了系统总结和梳理,并对这些基因在育种上的利用价值进行了评价。     

植物耐盐研究概况

盐害是影响农业生产的一个主要环境因素。随着全球环境的恶化，世界很多地区都发生了土地的盐渍化。近年来植物的耐盐研究已经成为研究的热点。本文从植物耐盐的机理、耐盐相关的基因及转基因植物几个方面进行综述，为从事耐盐研究的工作者提供一定的参考。