GA_4间接酶联免疫吸附测定方法的建立

利用 GA_4-17-BSA 作为免疫抗原,GA_4-16-OA 作为包被抗原,建立了检测自由态 GA_4的间接ELISA。检测极限为4.1ng/mL,抗血清与 GA_7,GA_3,GA_4-ME 的交叉反应率分别为68.51%,9.10%。1.90%,与 IAA,ABA,ZR 交叉反应率极小。     

酶联免疫吸附测定分析棉纤维中的GA3

ＧＡ３作为一种植物生长激素,在棉纤维生长发育过程中,其含量的变化对棉纤维的品质有较大的影响,因而对ＧＡ３的检测越来越引起人们的重视［１,２］。传统的酶联免疫吸附测定和高效液相色谱法分析ＧＡ３,须经过一系列复杂的提取净化步骤,因而分析速度慢,成本高。本研究利用酶联免疫吸附测定分析的特点,在棉纤维中ＧＡ３的分析过程中,样品经简单提取后,无需净化,直接进行ＥＬＩＳＡ分析,结果表明,：该方法分析速度快,准确可靠,ＧＡ３在棉纤维中的最小检出量为２８×１０－９ｍｇ·ｋｇ－１。１　材料和方法１１　仪器ＤＧ…     

应用间接酶联免疫吸附试验检测人参软腐细菌

通过间接酶联免疫吸附试验可以检测参土、田间腐烂参根和潜伏在外观无病参根内的软腐细菌。对人参软腐细菌检出的灵敏度为4×10~5细胞/ml。病、健参根组织提取液的稀释度为1/1000-1/2000。免疫球蛋白最适浓度为10μg/ml。应用人参细菌性软腐病菌株Ecc和Ps.c.分别免疫家兔得到相同效价(1:1280)的抗血清。     

酶联免疫吸附分析法测定土壤中的毒死蜱

采用自制多克隆抗体,考察了pH值和甲醇含量对竞争反应的影响,并对反应体系进行了优化,最终建立了土壤中毒死蜱的残留检测ELISA方法。试验表明,毒死蜱对抗体竞争性结合的I50为76.8μg/L,方法检出限为5.2μg/L。土壤样品经简单前处理后,分别采用ELISA和GC测定,用ELISA方法测得土壤中毒死蜱的添加回收率为80.33%~83.36%,CV为5.28%~9.83%,最低检出限为0.005mg/kg,与GC测定结果基本相当,符合农药残留分析的要求。     

酶联免疫吸附分析法测定黄瓜中的甲基对硫磷

采用自制多克隆抗体,考察了不同离子强度和不同甲醇含量对竞争反应的影响,并对反应体系进行了优化,最终建立了黄瓜中甲基对硫磷的残留检测ELISA方法。实验表明,甲基对硫磷对抗体竞争性结合的I50为0.13mg/L,方法检出限I20为6.7μg/L。除倍硫磷与杀螟硫磷表现了一定的交叉反应外,其它结构相类似的有机磷农药均无交叉反应。黄瓜样品经简单前与处理后分别采用ELISA和GC测定,用ELISA方法测得黄瓜中甲基对硫磷的添加回收率为83.10%￣93.46%,C.V为6.61%￣10.36%,最低检出限为0.003mg/kg,与GC测定数据基本相符,符合农药残留分析的要求。     

脱落酸间接酶联免疫吸附测定法的建立

报道了一种利用兔抗 IAA-N-BSA 抗血清和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔 IgG 建立的IAA 固相抗原型(或称间接)酶联免疫吸附测定法;该法的线性测定范围在0.8～200ng 之间;本文研究了合成包被抗原的适宜方法;并在植物样品测定冲对该法做了一系列的质量控制试验。     

甲基对硫磷的酶联免疫吸附分析(ELISA)研究

根据甲基对硫磷的结构特征,从甲基对硫磷的甲氧基部位连接了两种间隔臂,合成了两种半抗原,并通过活性酯法和混合酸酐法分别制备了与不同的载体蛋白偶联的人工抗原。采用其中两种结合物进行动物免疫,得到了针对两种抗原的高效价抗体。在此基础上,建立了两种甲基对硫磷的酶联免疫吸附测定(ELISA)方法。结果表明,该方法检测限分别为2.0和6.1ng·mL-1。两种抗体对甲基对硫磷表现了很高的特异性,除了对硫磷以外,对结构相似的几种有机磷农药均无交叉反应。土壤和河水中的添加回收实验结果表明,采用ELISA方法得到的回收率及CV值都与GC方法基本吻合,且检测灵敏度比GC还高,符合农药残留分析的要求。     

吲哚-3-乙酸间接酶联免疫吸附测定法的建立

报道了一种利用兔抗IAA-N-BSA 抗血清和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG 建立的IAA 固相抗原型(或称间接)酶联免疫吸附测定法;该法的线性测定范围在0.8～200ng 之间;本文研究了合成包被抗原的适宜方法;并在植物样品测定冲对该法做了一系列的质量控制试验。     

猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体间接酶联免疫吸附测定方法的建立与应用

[目的]建立一种检测猪圆环病毒3型抗体的血清学方法.[方法]以猪圆环病毒3型衣壳蛋白为包被抗原,通过筛选和优化反应条件建立一种检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法,并进行特异性试验与重复性试验以及初步临床应用.[结果]确定检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法的各项最佳反应条件;仅有猪圆环病毒3型阳性血清的检测结果为阳性,显示出良好的特异性;批内变异系数和批间变异系数都小于5％,显示出良好的可重复性.在来源于北京地区与河北地区的318份猪的血清中检出猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体阳性率为32.70％,表明这两个地区存在较多的猪圆环病毒3型感染.[结论]建立了一种具有良好特异性和可重复性的检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法,可用于猪圆环病毒3型抗体的检测.     

大型溞胆碱酯酶间接非竞争酶联免疫吸附定量分析法的建立

用达到电泳纯的大型溞(Daphniamagna)胆碱酯酶(cholinesterase,ChE)免疫BALB/c小鼠,得到效价达1∶8000的鼠抗大型溞ChE多克隆抗血清;通过优化抗原抗体反应条件,建立定量分析大型溞ChE含量的间接非竞争酶联免疫吸附法(indirectandnon‐competitiveenzyme‐linkedimmunosorbentassay).结果表明:此方法检测灵敏度为24ng爛mL-1;经免疫交叉反应鉴定,所获抗血清与5、10μg爛mL-1标准蛋白质和其他生物如花翅摇蚊、尖额溞、斑马鱼(脑、脑除外的整体)、家蚕、意大利蜜蜂、赤子爱胜蚯蚓、非洲爪蟾(蝌蚪)等来源的ChE交叉反应率分别为:<0畅25%、<0畅25%、 2畅13%、 10畅19%、3畅88%、 3畅56%、 2畅81%、 3畅93%、 5畅00%和2畅75%,具较高的特异性.说明用本试验得到的抗血清建立的间接非竞争酶联免疫吸附法可用于大型溞体内ChE含量的测定,以利于在农药暴露环境下大型溞体内ChE活性的精确检测.     

GA3处理对春菊花期的影响及其生物学效应

在花芽形态分化期喷施25mg/L、50mg/L、100mg/L GA3溶液使现蕾期提早1d、3d和1d；同样浓度的GA3溶液在花蕾膨大期施用后，显著增加了花蕾膨大的速度，并且使始花期分别比对照提前了2d、6d和6d；50mg/L的GA3溶液在花芽形态分化期喷施1次使始花期提前2d，在花蕾膨大期喷施1次使始花期提前6d，而GA3溶液2次处理后始花期提前8d。分析GA3溶液处理提前花期的生理学基础发现，GA3处理有利于顶芽中的干物质积累，并加强了可溶性糖向茎顶端转移。     

GA3提高毛竹种子活力的机理探索

用不同浓度的GA3处理在4℃下贮藏2年的毛竹种子,以探索提高毛竹种子活力的机理。结果表明：试验条件下不同浓度的GA3处理均能提高毛竹种子活力,以100mg／L处理效果最佳;处理后的种子浸出液相对电导率下降,吸胀种子的可溶性糖含量增加,SOD,POD,CAT活性增强,MDA含量下降,且这些指标与种子活力呈显著相关性。     

GA3对柿果实成熟软化及细胞壁组分代谢的影响

为探讨柿果实软化机理和延缓成熟软化的技术措施,以扁花柿为试材,研究了20℃下50 mg.kg-1的GA3处理对采后柿果实成熟软化和细胞壁组分代谢的影响.结果表明:GA3处理不但推迟柿果实呼吸高峰和乙烯高峰的出现,而且还抑制了柿果实PE、PG和β-Gal酶活性的增加,延缓纤维素和原果胶降解以及水溶性果胶含量增加,保持果肉硬度.表明GA3可延缓柿果实的软化进程,延长贮藏期限.     

杨梅花芽生理分化期叶片赤霉素与矿质元素互作关系的研究

以杨梅芽和叶片为试材,研究了杨梅花芽生理分化期赤霉素和矿质元素的互作关系。结果表明:GA3含量与Mn和Fe含量呈显著正相关,与K含量呈显著负相关,与其它元素含量没有显著相关性。     

赤霉素处理马铃薯整薯休眠效应的研究

为探讨用于破除马铃薯整薯休眠的适宜赤霉素施用浓度,以Mira、50-2、T962-76、04-3、036-1和紫花白6个品种(系)为试验材料,设置赤霉素不同浓度处理整薯的试验。结果表明,赤霉素各浓度处理均较对照有效缩短了休眠日数,使其通过休眠集中整齐,且随着赤霉素处理浓度的升高,芽的伸长加快,芽茎直径呈先增加再减少的趋势,当浓度达100 mg/L时,芽变得细长瘦弱。     

GA_3对不同年份烟草种子萌发和幼苗生长的影响

利用不同浓度(50～200 mg/L)的GA3溶液处理不同年份采收的烟草种子K326,结果表明:GA3具有提高烟草种子活力,打破种子休眠,促进幼苗生长、伸长的作用。在一定浓度范围内,增加GA3的浓度可以提高种子的活力和促进幼苗的生长,但在达到一定浓度后,种子活力和幼苗的生长却受到抑制,GA3在试验范围内的浓度处理对幼苗生长和种子的萌发以100~150 mg/L较好。     

外源GA3对NaCl胁迫下黄瓜幼苗离子吸收和光合特性的影响

研究了外源GA3对NaCl胁迫下黄瓜幼苗离子吸收和光合特性的影响.结果表明:外源GA3能显著缓解胁迫对黄瓜植株造成的伤害,25mg/L GA3缓解效果最好,可显著增加幼苗的生长量,减少了Na 、Cl-的积累,增强了K 、Ca2 吸收和运输的选择性,提高了净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)及气孔限制值(Ls).降低了胞间二氧化碳浓度(Ci).外源GA3可有效增强黄瓜的抗盐能力.     

GA3处理对刺葡萄和腺枝葡萄种子发芽特性的影响

以贵州野生腺枝葡萄和刺葡萄种子为试材,以栽培品种水晶葡萄种子为对照,研究了GA3对野生腺枝葡萄和刺葡萄种子发芽特性的影响.结果表明:在一定浓度范围内,GA3能显著提高葡萄种子的发芽率、发芽势和发芽指数,缩短平均发芽天数.综合4项指标,适宜水晶浸种的GA3浓度为150～200 mg/L,而适宜刺葡萄和腺枝葡萄的浓度为200～250 mg/L.     

不同气候条件下花期GA3处理对巨峰葡萄无核化的效应

研究不同气候条件下,花期GA3处理对葡萄无核化的影响。为便于生产操作,根据花序开花特点,将葡萄花期重新划分为3个时期:以单个花序为处理对象,开花前,除去花序上部的小穗、副穗和支梗穗,留取下部穗尖3.5￣4cm,以花序末端的1/3开花时为初花期,中间1/3段开花时为盛花期,尖端1/3开花时为末花期。在不同气候条件下,每个花期采用12.5mg/L、25.0mg/L、37.5mg/L和50.0mg/LGA3浓度蘸湿花穗,分别对葡萄的无核率、可溶性固形物含量、果实成熟期、座果率进行观察测定。结果表明:各处理都不同程度地提高了葡萄的无核率,可溶性固形物含量增加1￣3个百分点,果实成熟期提前一周,座果率平均降低20%左右。综合分析,笔者认为:不同气候条件下对巨峰葡萄无核化处理,花期和GA3浓度应有所选择。在日照良好,湿度、气温适宜,选择初花期,以25.0和37.5mg/L浓度处理为宜;气温偏低、阴雨天偏多年份,选择盛花期,以37.5和50.0mg/L浓度处理效果最佳。     

含GA3的预处理液对百合切花的保鲜效应

采用预处理液[40 g/L蔗糖 300 mg/L 8-羟基喹啉柠檬酸盐 60 mg/L Al2(SO4)3 100 mg/L赤霉素(GA3)]对百合切花进行保鲜效应研究,预处理液保鲜效果明显,能延长切花瓶插寿命3 d,增加鲜重,增加花瓣可溶性糖及可溶性蛋白质含量,改善体内水分平衡,提高过氧化物酶(POD)活性,降低脯氨酸的含量,从而改善切花品质,延缓衰老进程。