GC-MS-SIM法定量测定毛白杨休眠芽中IAA、Ester-IAA、ABA和ABA-G

Ester-IAA可以作为Free-IAA源供给植物生长发育,并能防止Free-IA A被氧化.目前已有一些利用GC-MS定量测定Ester-IAA及IAA的报导,但尚未见到定量测定ABA-G的文章.本文利用GC-MS-SIM法定量测定毛白杨休眠芽中IAA、Ester-IAA,ABA和ABA-G.     

干旱胁迫下小麦（Triticumaestivum L.）幼苗中ABA 和IAA的免疫定位及定量分析

【目的】干旱是农业生产中存在的严重问题,是制约作物生长和限制农业种植面积进一步扩大的最主要因素,探明植物抗旱机理,将为农业增产增收提供重要保障。本试验旨在分析干旱胁迫下小麦幼苗中（根、叶鞘、叶片）脱落酸（ABA）和吲哚乙酸（IAA）的定位及含量,探索其动态变化规律,为干旱地区作物栽培的激素调控、干旱条件下小麦的化学调控提供理论依据。【方法】以冬小麦品种鲁麦21号为材料,采用温室盆栽自然干旱法,以免疫组织化学定位方法研究干旱胁迫下小麦幼苗（根、叶鞘、叶片）中内源激素ABA和IAA的定位,并用间接酶联免疫吸附测定法（icELISA）进行内源ABA和IAA含量分析。通过比较免疫组织化学定位的化学信号强度和icELISA检测的内源ABA和IAA含量,验证本试验结果的有效性。【结果】称重法控制水分持续干旱4周后,对照组（CK）小麦植株直立生长,叶片健康呈绿色,长势良好。干旱处理组（ND）小麦植株矮小,叶片面积减小,有不同程度的萎蔫和发黄现象。干旱胁迫下小麦幼苗根、叶鞘、叶片中的ABA免疫组织荧光信号均强于对照,其中叶片强弱差异最显著,叶鞘次之,各器官中保卫细胞和维管的强弱对比最为明显;IAA免疫荧光信号强度也高于对照,但相比ABA不明显;用icELISA进行定量分析,比较免疫组织化学定位的信号强度和icELISA检测的内源激素含量表明,上述免疫组织化学定位结果与icELISA的测定结果相一致,其中,根中的ABA含量为61.51 ng•g-1 FW,是对照的2.82倍（21.8 ng•g-1 FW）;叶鞘中ABA含量增加幅度较大,为175.35 ng•g-1 FW,是对照的3.65倍（48.02 ng•g-1 FW）;叶片中ABA含量增幅最大（512.12 ng•g-1 FW）,为对照的10.16倍（50.42 ng•g-1 FW）。显著性分析表明,干旱胁迫与正常供水小麦幼苗根、叶鞘、叶片中ABA含量差异均呈极显著（P＜0.01）。用icELISA对IAA进行检测,正常供水时,小麦幼苗根、叶鞘、叶片中的IAA含量分别为72.81、274.46 和195.75 ng•g-1 FW。水分胁迫条件下,IAA含量增加但幅度不大,分别为123.56、400.48 和417.30 ng•g-1 FW。叶片中IAA上升的幅度稍大为对照的2.13倍,根、叶鞘中的IAA含量分别为对照的1.70和1.46倍。显著性分析（t检验法）显示,在干旱胁迫与正常供水条件下小麦幼苗根中IAA含量差异不显著（P＞0.05）,但叶片和叶鞘中IAA含量差异极显著（P＜0.01）。【结论】水分胁迫下小麦幼苗根、叶鞘、叶片中ABA和IAA含量均增加,ABA含量增加幅度较大,IAA较ABA含量增加幅度较小。二者之间协调的总趋势是向着气孔关闭,促进根系生长,减缓茎叶生长速率的方向发展,可有效的避免缺水伤害。     

GC-MS内标法测定苹果中哒螨灵残留量不确定度的评定

介绍了气相色谱-质谱内标法测定苹果中哒螨灵残留量不确定度的方法,建立了不确定度评定的数学模型,分析了不确定度的来源,并对不确定度分量进行量化和合成。评定结果表明,标准曲线拟合、标准溶液配制和量取体积所产生的不确定度分量较大;苹果中哒螨灵含量为0.0900mg/kg时,其扩展不确定度为0.0044mg/kg(k=2)。     

用GC-MS-SIM测定植物中IAA含量方法的研究

气相色谱一质谱联用的选择离子监测(GC-MS-SIM)技术是近年来发展起来的测定复杂体系中痕量成分的新技术。用以氘标记的类似物为内标的内标法可以使测定值更接近真实值。本文研究了用该技术测定植物中内源激素吲哚-3-乙酸(IAA)含量的方法,并讨论了影响结果准确性的因素。指出该方法可以有效地补偿因样品在前处理中的无规律丢失或仪器不稳定等因素所造成的误差,而且对样品的提纯及色谱分离条件的要求比气相色谱低。     

GC-MS内标法测定烟用水基胶中7种邻苯二甲酸酯含量的不确定度评定

依据YC/T 333—2010《烟用水基胶邻苯二甲酸酯的测定气相色谱-质谱联用法》,建立烟用水基胶中7种邻苯二甲酸酯含量的不确定度评定方法。采用GUM法进行不确定度评定,建立数学模型,分析并计算影响检测结果准确性的各不确定度分量,得到了合成不确定度和拓展不确定度,形成一套合理的不确定度分析方案。结果表明：7种邻苯二甲酸酯的扩展不确定度值为2.50～5.11 mg·kg^-1(k=2);在6个因素中,影响检测结果的主要因素是标准工作曲线的拟合,其次是测量重复性和标准溶液配制,其他因素的影响较小,可以忽略不计。该评定结果可为GC-MS内标法测定烟用水基胶中7种邻苯二甲酸酯含量的不确定度提供理论参考。     

三株产吲哚乙酸根际促生芽孢杆菌的筛选鉴定及其促生作用

为丰富具有产吲哚乙酸(IAA)功能的芽孢杆菌菌种资源,开发高效根际促生微生物菌肥,从玉米、生菜和绿化带植被的根际土壤中筛选产IAA的芽孢杆菌,最终获得3株高效产IAA的菌株——YC9L、YC3172和YC5064,其IAA产量分别为46.72、79.75、67.55 mg·L-1.对其进行理化特性和16 S rDNA序...     

茉莉酸甲酯和生长素对苦玄参苷积累的影响

【目的】研究植物生长调节物质对人工种植苦玄参中苦玄参苷积累的影响,为苦玄参人工种植化学调控措施的制定提供参考。【方法】采用不同浓度的茉莉酸甲酯(MeJA)和生长素(IAA)对苦玄参植株进行叶面喷施和浸根处理,测定其苦玄参苷IA、IB及苦玄参总苷积累量。【结果】MeJA叶面喷施和浸根处理均以20 mg/L对苦玄参苷IA的调控效果最佳,此时苦玄参苷IA积累量最高,分别达0.63%和0.62%,均显著高于清水对照(CK)(P<0.05,下同)。2 mg/L MeJA叶面喷施对苦玄参苷IB的促进作用最强,随MeJA浓度增加其促进作用减弱;浸根处理时,随MeJA浓度增加其促进作用逐渐加强,至20 mg/L时苦玄参苷IB积累量达峰值0.34%。两种处理方式下,苦玄参总苷积累量均在MeJA浓度为20 mg/L时最高,叶面喷施整体优于浸根处理。 IAA叶面喷施时,随其浓度增加,苦玄参苷IA积累量先降低后升高,浓度为100 mg/L时苦玄参苷IA积累量最高,达0.68%,显著高于CK和其他浓度处理;浸根处理时,苦玄参苷IA积累量的变化趋势与叶面喷施相反,浓度为10 mg/L时促进作用最强,随IAA浓度增加苦玄参苷IA积累量逐渐降低。两种处理方式均以IAA 50 mg/L对苦玄参苷IB的促进作用最强。 IAA对苦玄参总苷积累量的影响与其对苦玄参苷IA的影响趋势相似,叶面喷施时100 mg/L的促进作用最强,浸根处理则以50 mg/L时苦玄参总苷积累量最高。两种处理方式相比,IAA浸根处理优于叶面喷施。【结论】MeJA和IAA均可通过叶面喷施和浸根处理促进苦玄参苷的积累,其中,MeJA宜选择20 mg/L进行叶面喷施, IAA宜选择50 mg/L进行浸根处理。     

吲哚乙酸在蔬菜上的应用

吲哚乙酸作为生长素的一种,对蔬菜的作用极大。针对不同品种的蔬菜其发挥的作用不同:它可以控制黄瓜花的性别,防止西瓜裂果;又可以提高番茄、甘蓝、大白菜等蔬菜的扦插成活率,而在食用菌方面,它可以提高黑木耳、香菇等的产量。     

砷胁迫下3-吲哚乙酸对不同砷富集能力植物根系形态和生理的影响

采用室内水培法,研究了2 mg·L~(-1)五价砷胁迫下,外源添加不同浓度(0、10、20、40、60 mg·L~(-1))3-吲哚乙酸(IAA)14 d对砷超富集植物大叶井口边草(Pteris cretica var.nervosa)和同属的非超富集植物剑叶凤尾蕨(Pteris ensiformis)株高、生物量、砷含量、根系形态(根长、根尖数、根表面积)、根系活力、根细胞质膜ATPase活性、抗氧化酶(超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、过氧化物酶POD)活性以及细胞膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)含量的影响,并用逐步回归法分析了根部砷含量与所测定根系形态和生理指标的关系。结果表明:20 mg·L~(-1)IAA处理下,两种植物的生物量与对照相比显著增加,大叶井口边草叶片和叶柄砷含量、根系活力和根细胞质膜ATPase酶活性显著增加,且明显高于剑叶凤尾蕨;20~60 mg·L~(-1)IAA处理下,大叶井口边草根中的CAT、SOD和POD活性显著增加,而剑叶凤尾蕨根中的CAT活性显著降低,SOD活性显著增加,POD活性则无显著变化;20~40 mg·L~(-1)IAA处理下,两种植物根中的MDA含量显著降低,但大叶井口边草显著低于剑叶凤尾蕨。逐步回归分析结果显示,大叶井口边草根中砷含量与根系活力显著正相关,而剑叶凤尾蕨根中砷含量与各变量无关。因此,IAA的添加促使大叶井口边草保持较高的根系活力,进而有助于其超量富集砷。     

Phenotype and mechanism analysis of plant dwarfing in pear regulated by abscisic acid

Close planting of dwarf varieties is currently the main cultivation direction for pear trees,and the screening of excellent dwarf varieties is an important goal for breeders.In this study,the dwarfing pear variety ’601D’ and its vigorous mutant ’601T’ were used to show their biological characteristics and further explore the dwarfing mechanism in ’601D’.The biological characteristics showed that ’601D’ had a shorter internode length,a shorter and more compact tree body,thicker and broader leaves...     

植物脱落酸信号传导途径的网络分析

从已发表论文和相关数据库中收集到与ABA代谢有关数据,构建脱落酸代谢网络图;根据信号传递网络性质,获得ABA信号传递中所需要的信号分子、受体、第二信使和激酶等信息.应用CellNetAnalyzer软件分析ABA信号传递网络,获得了信号传递路径与网络冗余性,为研究植物ABA代谢调控机理提供依据.     

一种人工合成的茉莉酸类似物PDJ对寄主中黄瓜花叶病毒含量的影响

茉莉酸(Jasmonic acids, Ja)为一种新型的植物内源生长激素,广泛存在于自然界中,其主要生物学效应是对生长的抑制作用和对衰老脱落的促进作用,如抑制非休眠种子的萌发、强烈抑制根系的生长、促进块茎的形成等.Ja 作为关键的化学信号物质在植物损伤和病原菌侵染过程中具有重要作用.本实验以一种人工合成的茉莉酸类似物PDJ (9,10-二氢茉莉酸丙酯,9,10-Propyl dihydro-jasmonate)作为研究对象, 采用RNA点杂交方法对用不同浓度PDJ处理的假酸浆叶片中的黄瓜花叶病毒的基因组RNA负荷量进行测定, 结果表明:在处理后不同的时间段和不同的浓度条件下,PDJ对黄瓜花叶病毒的基因组RNA负荷量具有较大差别的影响.处理早期(7 d),与对照相比,各浓度PDJ促进CMV基因组RNA3的复制;随着时间的推移(处理21 d),0.001～5 mg/kg浓度PDJ处理的假酸浆叶片中CMV-RNA3负荷量的积累均明显低于对照,而高浓度50 mg/kg PDJ处理的高于对照,说明PDJ对CMV的促进作用随时间的增加逐渐消失;至处理42 d,对照中CMV RNA3的积累显著地大于各浓度的PDJ处理,显示出在处理后期PDJ对CMV较强的抑制作用,而且这种作用随PDJ浓度的降低而增强.     

苹果幼树梢尖3-吲哚乙酸、赤霉酸和脱落酸的高效液相色谱测定法的研究

植物的基因表达、生长发育以及植物对环境刺激的响应,都与其体内激素水平有关,为了研究激素的分布、消长规律和代谢途径,必须将其从植物体内提出并作定性定量测定。本文在前文献［’－’］的基础上,对苹果组织样品的提取、净化及液相色谱条件做了较为系统的实验,提出了一个简便、可靠的测定方法。１材料和方法１．１仪器美国Ｓｐｅｒａ－ｐｈｙｓｉｃｓ高效液相色谱系统,由ＳｐｅＷＳＹ～Ｐ４０００四元梯度泵、ＳｍｐＦＯＣＵＳ前置紫外扫描检测器、Ｓｐｅｔ。３８６Ｅ计算机组成。Ｉ。ＢｏｎｄａｗｔＣ;;。（１０Ｉ。,３ｔｏｘ４ｎ…     

茶树内源激素IAA和ABA提取方法研究

用HPLC检测法研究了茶树芽叶甲醇浸提时间与芽叶的内源激素吲哚乙酸(IAA)脱落酸(ABA)被浸提出的产额关系.结果表明:提取8小时,IAA达最大产额,随后逐渐下降,提取13和23小时分别下降到最大产额的95.24％和64.36％,ABA在前13小时提取过程中,提取速度较快,以后变慢,提取13小时的产额为提取23小时的92.82％;IAA、ABA标样的添加回收率测定分别为93.79％和97.19％.     

GPC-HPLC-LC/MS测定植物组织中的赤霉素

以胡杨叶片、烟草组培苗及萌发绿豆为材料,研发了利用凝胶渗透色谱(GPC)纯化、液相质谱(LC-MS)定性、 高效液相色谱(HPLC)定量测定植物组织中赤霉素(GAS )的方法。植物样品用80% 甲醇研磨后4℃浸提过夜,抽 滤离心(5 000 r/ min, 20 min)、滤液加2 滴浓氨水浓缩至水相,冻融离心,上清液,调pH 2.5 ~3.0 乙酸乙酯萃取,过 Sep-pak C18 小柱,用含5% 甲醇的CH2 Cl2 溶解样品,经0.22 m 滤膜过滤后,通过GPC 纯化、LC-MS 定性,利用 HPLC 外标曲线法定量。经检测:胡杨叶片中GA3 含量为1 162.789 8 ng/ g 鲜质量; 烟草中GA3 含量为920.906 7 ng/ g 鲜质量; 萌发绿豆中GA3 含量为700.923 6 ng/ g 鲜质量。