禽类转基因研究进展

转基因动物是指借助基因工程技术将体外重组的基因导入受精卵或早期胚胎，生产的带有外源基因的动物(Tramgemc Anima1)。整合到动物基因组上的外源结构基因称为转基因。在哺乳动物、鱼类方面转基因技术已取得了很大突破，得到的转基因动物在生产实践中已展示很好的应用前景。而禽类由于其生殖生理的独特性，目前用显微注射存在着以下困难：1、不易获得大量的受精卵；2、受精时多精入卵的干扰使雄原核不易识别；3．卵子重新输入母体输卵管内的技术或受精卵体外孵化技术难度大。     

家禽转基因技术的分类方法与存在的问题

1993年英国Sang博士将外源基因导入公鸡,首次获得了蛋黄中含有珍贵的人类蛋白的母鸡犤1犦。由于家禽的繁殖周期短,产蛋量高,且转基因产品具有巨大的潜在价值,因此,转基因家禽是一种理想的输卵管生物反应器犤2犦。但由于母禽的生殖生理系统特殊,家禽为体内受精,受精后在卵子周围形成卵白、壳膜及蛋壳,同时受精卵发生快速分裂,受精蛋约20h后产出体外时,胚胎已发育到6000个细胞。因此,对家禽进行早期遗传操作十分困难,以致于在哺乳动物上已经成熟的转基因方法在家禽上却不能发挥有效的作用,使得转基因家禽的生产相对落后于哺乳动物。因此,家禽…     

鸡胚胎体外操作技术的研究现状和进展

本文介绍了禽类胚胎操作技术方面的概况，对受精卵收集及体外受精、早期胚胎体外培养、人造材料蛋壳培养胚胎、代用蛋壳培养胚胎、嵌合体鸡的生产、转基因鸡生产等的进展及发展进行了综述。     

早期胚胎体外培养相关细胞因子研究进展

在体外培养哺乳动物和人类早期胚胎时，早期胚胎往往不能完成从受精卵到囊胚的发育全过程，而停留在某个发育时期，该现象被称为“发育阻滞”。研究表明动物早期胚胎发育是由贮存在受精卵内的母型mRNAs和蛋白质控制的。母型基因指导受精卵最初的数次卵裂，合子型基因在随后的胚胎发育中起调控作用。而在体外培养过程中，合子型基因开启受阻是导致早期胚胎发育阻滞的直接原因m。推测输卵管上皮细胞分泌的某些蛋白可能激活合子型基因开启圆，虽然这些信号分子的结构和作用机制尚不清楚，但不能排除其中含有某些已知细胞因子的可能性。因此，本文就影响体外早期胚胎发育的5种细胞因子作一简要综述。     

家禽受精卵体外培养技术研究进展

一、家禽受精卵体外培养的意义用显微注射方法生产转基因小鼠、家兔、猪、羊、牛及其他哺乳动物已成为常规操作。外源 DNA 可直接用微型注射器注入这些动物的受精卵的雄原核中。禽卵的结构明显不同于哺乳动物的卵子,产出时已受精24小时,在体内已发育到5000～6000个细胞。此时外源注射DNA 显然已经太晚了。而禽受精卵在单细胞时,胚胎在输卵管的膨大部,不易接近。已证实,这时将受精卵取出体外操作,再转入母体     

禽早期胚胎发育的分子机制研究进展

禽早期胚胎发育是指禽卵子受精后在雌性生殖道内发育的过程，一般需要持续24～26 h。根据耶尔基勒迪及柯查夫（Eyal-Giladi and Kochav,EGK）时期分段标准，归纳为卵子-合子、合子-EGK I和EGK I-EGKX3个经典阶段。禽类早期胚胎在母体内发生多次卵裂，产出后细胞数目可达55000个左右。近几年关于禽早期胚胎发育中母源-合子转换（Maternal-Zygotic Transition,MZT）过程，合子基因组激活（Zygotic Genome Activation,ZGA）时间和分子机制有了新的发现，其中NOTCH和WNT等信号通路以及DLX6、ATA2和ZIC4等母源基因在胚胎早期发育阶段率先被激活，合子基因组开始表达并逐步替代母源物质。禽类作为胚胎发育研究的理想动物模型，揭开其相关分子机制对推动养禽业发展、鸟类胚胎发育和转基因技术等具有重要意义。本文主要围绕禽类卵子发育、卵子受精和合子在母体内发育的主要分子机制进行综述，为禽类早期胚胎发育的研究和发展奠定基础。     

雏禽防病先抓免疫

禽类是经过胚胎发育和出世发育两个不同阶段进行繁衍的,免疫接种对禽类防病有重要作用。 胚胎免疫 又称超前免疫,对鸭,鸡、鸽、鹅等禽类新城疫免疫效果突出。家禽受精卵在蛋形成过程中就开始发育。小生命受卵黄膜、蛋壳膜、蛋壳的保护,一般有害病菌很少侵入。但当温度突破生理性温度(20℃)时,蛋壳膜、蛋壳上的污     

以骡鸭为宿主的PGCs转染途径制备转基因家禽

转基因技术在基础理论研究和生产实际中都展示出良好的应用前景。目前,哺乳类与鱼类的转基因技术已相当成熟,并获极大成功,而家禽的转基因技术还十分落后。家禽为体内受精,受精后在卵子周围形成卵白、壳膜及蛋壳,同时受精卵发生快速分裂。受精约20h后产出体外时,胚胎已发育到6000个细胞。因此,对家禽进行早期遗传操作十分困难。尽管如此,国外仍在努力探讨克服家禽胚胎遗传操作的难题,并取得一定的进展。据报道,到目前为止国外实验室已研究的家禽转基因技术主要有:1逆转录病毒感染技术,2DNA显微注射技术3精子介导法[1,2]。其中逆转录病毒感…     

鸡胚胎体外操作技术的研究现状和进展（续）

5嵌合体鸡的生产　　嵌合体制作最早主要用于发育生物学、细胞遗传学等学科的理论研究。目前，禽类嵌合体的制作中作供体细胞用的囊胚层细胞(BC)和原生殖细胞(PGCs)可以代替受精卵和早期胚胎用于体外遗传操作，已成为禽类转基因研究的一个热点。同时，BC和PGCs还可以在体外进行培养和冷冻保存。基本原理是经过遗传操作的BC细胞或PGCs细胞作供体，嵌合到受体胚胎中。如果是嵌合在生殖细胞，则该嵌合体性成熟后可产生一定比例经过遗传操作的配子。　　有关鸡嵌合体方面的报道及鸡嵌合体制作方法、嵌合体的嵌合程度的判断以及怎样提高嵌…     

鸡胚胎的发育及孵化期的注意事项

1胚胎发育过程及其条件要求胚胎发育即从卵巢上排出的卵子被输卵管漏斗部接纳后,与精子相遇受精开始。由于母鸡体温高达41.5℃,卵子受精不久即开始发育。到蛋产出体外为止,受精卵约经24小时不断分裂而形成的1个多细胞的胚胎。     

提高绵羊早期体外胚胎发育效率的研究

哺乳动物胚胎体外发育培养技术是胚胎发育生物学、转基因、动物克隆等研究的重要技术平台.因此,建立稳定的体外胚胎培养体系和提高胚胎发育效果显得尤为重要.     

嵌合体鸡及其在基因组操作中的应用

在哺乳动物,利用显微注射等方法,把外源基因导入受精卵的雄性原核,再把经遗传修饰的合子移植到受体母畜体内,使之发育成转基因后代己获成功。然而在禽类,由于其生殖解剖及生殖生理比较独特,因此把外源DNA导入其基因组的技术,还存在着一系列问题,如处死法获得单细胞卵子、受精时多精入卵的干扰使雄性原核不易识别以及把卵子重新移入母鸡输卵管内等过程中。致使在哺乳动物中已经广泛应用的转基因技术,不适     

家畜受精卵或胚胎保存的进展(综述)

哺乳动物卵子或胚胎的保存,特别是家畜的受精卵或胚胎的保存,对于家畜受精卵或胚胎移植十分重要。在畜牧生产中具有实际应用的意义。过去对于体外保存卵子或胚胎的研究,在实验室哺乳动物中较多,许多实验动物受精卵或胚胎保存的研究,为保存家畜受精卵或胚胎的研究开辟了途径。因此,在这篇综述中有时不能不涉及一些实验室哺乳动物,但尽可能从     

种蛋开窗部位及封口方法对鸡胚发育的影响

鸡胚胎遗传操作的必需条件之一是体外培养出雏方法的建立.若对家禽的卵子进行操作则需要通过手术将卵子从母鸡的输卵管中取出经处理后再放回,操作费时费力且不易成功.     

前列环素与着床前胚胎发育

着床前胚胎发育相对独立于母体,可以进行体外培养,是人类医疗、辅助生殖和畜牧生产等领域基础研究的重要材料。目前猪等物种的胚胎体外发育率仍较低,发育质量相对较差,而获得高质量的体外胚胎是相关研究的重要前提,因此寻找提高猪胚胎体外发育质量的培养体系具有非常现实的意义。前列环素是体内多种组织分泌的一种前列腺素。有研究显示在输卵管上皮分泌的前列腺素促进着床前胚胎发育。在体外培养过程中,可以提高胚胎发育效率和发育质量。本文对目前关于前列环素对着床前胚胎发育作用的研究进展做以总结,并探讨了前列环素促进体外胚胎发育的应用前景。     

不同时期鸡胚胎体外培养的比较研究

试验采用代用蛋壳体外培养方法进行了不同时期鸡胚胎换蛋壳培养的研究。结果显示：体外受精卵体外培养发育率为10％。X期胚胎体外培养的孵化率为1．2％；孵化1日龄的胚胎体外培养的孵化率为7．9％；直接去1／4壳的鸡胚孵化率为3．7％；鸡胚胎换蛋壳以后，添加6～8札的稀蛋白对换壳鸡胚发育比较适宜。     

读者信箱——禽胚胎逐日发育的特点

<正>问:我从事鸡人工孵化多年,但缺乏这方面的专业技术知识,希望了解较详细的鸡的逐日胚胎发育的特点,以利于掌握鸡人工孵化技术,请贵刊给予指导。答:鸡的(禽)胚胎发育,分体内发育与体外发育两部分,鸡的早期发育从受精后在母禽体内受到母禽体温影响开始发育,在鸡蛋产出体外后停止发育,下面介绍体内发育与鸡的体外(孵化后)发育前四天的发育特点。1禽的早期发育(体内发育)禽卵在各自生长发育过程中,从卵细胞形成后,在输卵管喇叭口内与精子相结合(成百上千的精子只与一个卵子结合)。一般种禽卵巢中有肉眼可见发育不同的卵细胞约2000个;成熟的卵     

略论影响牛繁殖力的因素和对策

略论影响牛繁殖力的因素和对策李碧春，陈国宏江苏农学院（扬州２２５００１）随着科学技术的不断发展，人们对哺乳动物卵子的显微结构及其受精过程的生物化学变化、受精卵在生殖道内的发育有了更深入的了解，特别是对哺乳动物的卵子和受精卵与所处的环境，如输卵管、子宫...     

鸡Ⅹ期囊胚细胞研究进展及其应用

鸡Ⅹ期囊胚细胞(Blastodermal cells,BCs)作为潜在的胚胎干细胞,在胚胎发育动物模型、禽类转基因技术以及家禽种质资源冷冻保存等方面有广阔的应用前景。文章对鸡BCs的形态特征、体外培养、诱导分化、遗传修饰、冷冻保存、性别鉴定等体外操作方面的研究与应用进行了综述。     

用逆转录病毒法制作鸡输卵管生物反应器的研究

自80年代以来,人们对转基因鸡的方法进行了探索。已经运用的制作转基因鸡的方法有显微注射法、精子载体法、原生殖细胞法、逆转录病毒法。从目前世界各研究室的研究结果来看,逆转录病毒法是制作转基因鸡最有效、最成功的方法。所以在鸡的胚胎干细胞的筛选还未成功、基因打靶尚不可能的情况下,此法是制作鸡的输卵管生物反应器首选的方法。下面就鸡的生物反应器和逆转录病毒法分别作以综述。 1 鸡生物反应器的研究 从80年代以来随着转基因动物个体表达系统的研究,哺乳动物的乳腺生物反应器如鼠、牛、羊等已有成功的报道。作为禽类的生物反应器也已经起步,鸡是禽类中最常见、数量最多的。鸡蛋成分简单,由白蛋白、卵黄、卵壳组成,白蛋白又包括卵清蛋白、卵转铁蛋白、卵粘蛋白、溶菌酶,其中卵清蛋白最多可达重量比的65%,在产蛋母鸡输卵管管状腺体细胞总合成蛋白中占55%～60%,在成熟母鸡输卵管的管状腺体细胞中主要白蛋白的合成超过了总翻译能力的70%,卵清蛋白的高效合成过程促使研究者想到它的启动子,高效启动合成外源蛋白。