鹿骨胶水解物抗氧化活性及对H2O2损伤PC12细胞保护作用的研究

[目的]研究鹿骨胶水解物的抗氧化活性及其对H_2O_2损伤PC12细胞的保护作用。[方法]采用热水抽提法对脱脂脱钙的鹿骨进行蛋白提取,用胃蛋白酶和胰蛋白酶进行双酶酶解得鹿骨胶水解物。以DPPH、·OH自由基清除能力测定鹿骨胶水解物的体外抗氧化活性。利用H_2O_2损伤PC12细胞的模型,探究鹿骨胶水解物(HDBG)对氧化损伤PC12细胞的保护作用。[结果]鹿骨胶水解物具有良好的抗氧化活性,对DPPH自由基和·OH均有一定的清除能力,IC_(50)值分别为10.05和4.76 mg/mL。鹿骨胶水解物对正常PC12具有明显的增殖作用,对H_2O_2诱导损伤的PC12细胞具有显著的保护作用,且呈剂量依赖关系。在250、750和1 500μg/mL时,细胞活力分别53.79%、73.16%和82.43%。[结论]鹿骨胶水解物具有良好的抗氧化活性,对H_2O_2损伤PC12细胞具有保护作用。     

二苯乙烯苷和三七总皂苷配伍对Aβ25-35致PC12细胞损伤影响的研究

目的 探讨二苯乙烯苷(TSG)和三七总皂苷(PNS)配伍对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的影响。方法 PC12细胞采用Aβ25-35诱导建立阿尔茨海默病的损伤模型,被随机分成空白组、模型组、多奈哌齐组（10 μmol/L）、TSG（100 mmol/L）组、PNS组（50 mg/L）、TSG-PNS配伍组（TSG100 mmol/L+PNS50 mg/L)。取细胞上清液测各组的乙酰胆碱酯酶（AchE）及超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量。结果 与模型组比较,TSG组、PNS组、TSG-PNS配伍组可降低AchE活力、MDA含量及提高SOD活力(P<0.05)。且TSG-PNS配伍组的效应比TSG或PNS单用组效应更好(P<0.01)。结论 TSG和PNS配伍对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能与胆碱能系统及氧化应激有关。     

高良姜提取物对PC12细胞的神经保护作用

通过建立H2O2介导的PC12细胞损伤模型;采用MTT法检测细胞存活率,利用荧光显微镜观察细胞形态;检测细胞中乳酸脱氢酶漏出率,丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GGSH-Px)活性,评价高良姜提取物对H2O2介导的PC12细胞损伤的保护作用。结果表明,高良姜提取物能明显降低细胞内乳酸脱氢酶漏出率,降低细胞内MDA含量,提高SOD和GGSH-Px的活性,且具有浓度依赖性,由此推断,高良姜提取物对H2O2介导的PC12细胞损伤有明显保护作用。     

诺丽果汁对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用

为了探讨诺丽果汁对过氧化氢诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用,本试验采用H_2O_2造成PC12神经细胞氧化损伤模型,通过荧光显微镜观察细胞形态,MTT测定细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)活力检测法,Ho/PI染色检测细胞凋亡和细胞坏死,研究的诺丽果汁对过氧化氢所致PC12细胞氧化损伤的影响。结果发现,体积分数在1%~5%诺丽果汁均能不同程度地保护细胞形态,增加细胞的生存率,抑制过氧化氢诱导的PC12细胞坏死,减少损伤后LDH的生成。以上结果表明,1%~5%体积分数诺丽果汁对过氧化氢诱导的PC12细胞损伤有保护作用。     

多巴胺对分化的PC12细胞par-4基因表达的影响

目的：观察多巴胺(dopamine，DA)对分化的PC12细胞par-4基因表达的影响。方法：PC12细胞采用终浓度分别为0，100，200，400μmol／L的DA处理24h后，用RT—PCR检测mRNA表达的变化和Western blot检测蛋白表达的变化。结果：随着DA剂量的增加．PC12细胞存活率降低凋亡明显增加．且par-4mRNA表达及蛋白表达亦增加。结论：在DA诱导PC12细胞凋亡过程中par-4可能起重要作用。     

黑骨藤对PC12细胞氧化损伤的保护研究

[目的]研究黑骨藤提取物对H2O2诱导的PC12氧化损伤的保护作用。[方法]使用H2O2氧化压力诱导PC12出现氧化损伤,检测黑骨藤乙醇提取物对PC12细胞的保护作用。[结果]与模型对照组相比,黑骨藤乙醇提取物浓度在16~128μg/mL时,能显著提高PC12细胞的存活率,呈典型的量效关系。[结论]黑骨藤乙醇提取物具有抗氧化损伤作用。     

黄茂甲营和三七总皂营中主要有效成分 抗PC 12细胞氧化损伤的配伍研究

目的探索黄茂甲葺和三七总皂葺中主要有效成分人参皂葺Rgl、人参皂葺Rbl、三七皂葺R1抗CoCh 诱导的PC12细胞氧化损伤的有效配伍剂量、方法采用CoCh诱导PC12细胞氧化损伤模型,以细胞乳酸脱氢酶 (LDH)漏出率为指标,研究4种有效成分对PC12细胞氧化损伤的有效机制浓度〔在此基础上按UH*(8s)均匀设计实 验,确定4种有效成分的有效配伍剂量〔结果4种有效成分都能抑制CoCI,诱导的PC12细胞LDH的漏出,与损伤组 相比差异有统计学意义(P<0.05 )、且随着药物浓度的增加,对LDH漏出率的抑制作用增强、黄茂甲葺和人参皂葺Rbl 在50 }e,mol儿,人参皂葺Rgl和三七皂葺R1在100 }e,mol儿浓度时LDH漏出抑制率约为80%} UH*(8s)均匀设计实验 多元逐步回归分析得:4种有效成分的8个不同浓度配伍都能抑制CoCI,诱导的PC12细胞LDH的释放,与损伤组相 比差异有统计学意义(P<0.05 )〔人参皂葺Rgl 50 }e,mol儿、黄茂甲葺0.781 25 }e,mol儿、人参皂葺Rbl和三七皂葺R1 各1.562 5 }e,mol/L配伍时抗PC12细胞氧化损伤的效应最强〔结论人参皂葺Rgl 50 }e,mol/L、黄茂甲葺0.781 25 }e,mol儿、人参皂葺Rbl和三七皂葺R1各1.562 5 }e,mol儿配伍组方为抗PC 12细胞氧化损伤的有效配伍剂量〔     

荷叶总黄酮对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用

为了探讨荷叶总黄酮对H_2O_2诱导的PC12细胞损伤的保护作用及机制,建立以H_2O_2诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)为氧化应激损伤模型,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测正常细胞的存活率与损伤程度,用试剂盒测定不同浓度荷叶总黄酮对H_2O_2刺激PC12细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力、丙二醛(MDA)、蛋白质羰基含量的影响并检测Caspase-3活力的变化;Real Time PCR检测胞浆内Bcl-2与Bax的基因mRNA的表达。结果表明荷叶总黄酮能显著提高H_2O_2损伤的PC12细胞存活率,显著减少H_2O_2刺激的PC12细胞中MDA与蛋白质羰基的生成,显著提高CAT活性,但对提高SOD活性不显著。PC12细胞损伤可增加凋亡相关蛋白Bax mRNA的表达,加入荷叶总黄酮后有降低作用;同时H_2O_2使Bcl-2 mRNA的表达降低,加入荷叶总黄酮后有提高作用。荷叶总黄酮在给药浓度较低的情况下,对H_2O_2损伤的PC12细胞发挥着明显的保护作用,其作用机制可能与抑制线粒体途径的细胞凋亡有关。     

药用真菌脂溶性提取物对PC12细胞氧化应激损伤保护作用的研究

利用PCI2细胞氧化应激损伤模型,对6种药用真菌的49个脂溶性提取物进行筛选,研究表明,灵芝等药用真菌均具有氧化应激保护作用,其中桑黄和北虫草活性显著.29个样品在5～150 mg/L对PC12氧化应激损伤的保护作用呈剂量依赖性增长.药用真菌脂溶性提取物对PC12细胞氧化应激损伤保护作用与药用真菌的种类密切相关,并且药用真菌的不同菌株对PC12细胞氧化应激损伤保护作用也是不同的.     

玫瑰花对β-淀粉样蛋白诱导PC12神经细胞毒性的抑制作用

[目的]研究玫瑰花提取物对β-淀粉样蛋白（Aβ25-35）诱导的损伤PC12细胞的保护作用。[方法]PC12细胞加入Aβ25-35共同孵育后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测PC12细胞活力,比色法检测细胞内丙二醛（MDA）含量,酶联免疫法检测细胞内Nf-κb水平。[结果]玫瑰花提取物对PC12无显著细胞毒性,可以显著抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞毒性。与模型组相比,添加玫瑰花乙酸乙酯萃取物的样品组能降低PC12细胞内MDA浓度和Nf-κb表达。[结论]玫瑰花提取物对β-淀粉样蛋白致PC12细胞损伤具有一定的抑制作用,其作用机理可能与降低Aβ25-35所致的PC12细胞内的氧化应激有关。     

文山三七中As分配规律及其对皂苷和黄酮含量的影响

[目的]探讨文山三七中As分配规律及其对皂苷和黄酮含量的影响.[方法]通过野外大田调查和室内分析相结合的方法研究云南文山三七主要种植区不同年份三七（二年生和三年生）不同部位（主根、须根、剪口）As分配规律,探讨As元素对三七主要药效成分黄酮和皂苷含量的影响.[结果]砷含量在三七各部位分布依次为：须根＞剪口＞主根.三七须根中As含量最高,为0.31 ～ 0.33mg/kg.3年生三七须根和主根的砷含量较2年生高.三七中黄酮含量为3.45 ～ 11.10 mg/g,2年生三七黄酮含量大于3年生三七.三七须根中黄酮含量与须根中As含量呈显著的负相关关系.总皂苷和单体皂苷含量在剪口和主根中较高,三七总皂苷含量为4.08％ ～13.51％,人参皂苷占总皂苷的90.53％～97.79％.3年生三七的总皂苷和单体皂苷含量大于2年生三七.须根中三七皂苷R1含量与须根中As含量呈显著的正相关关系;剪口中总皂苷含量、Rg1含量和Rb1含量均与剪口中As含量呈显著的负相关关系.[结论]因此,三七As含量对药效成分的影响与不同部位和不同皂苷类型有关,As能导致须根中皂苷含量的累积,须根中黄酮和剪口中皂苷含量的下降.     

三七总皂甙的液相色谱分析及其稳定性研究

[目的]建立三七总皂甙的液相色谱定量分析方法,研究三七总皂甙的稳定性。[方法]以三七总皂甙为考察指标,采用高效液相色谱法,探讨不同pH值、温度对三七总皂甙稳定性的影响。色谱条件如下：色谱柱为KromasilC18（4．6mm×250mm,5μm）;流速为1．00ml／min;检测波长为197nm;柱温为室温,采用二元梯度洗脱,流动相为乙腈-水。[结果]三七总皂甙液相色谱定量方法具有较强的针对性和准确性。三七总皂甙在pH值〉4,低温条件下,比较稳定,而在强酸高温下受影响较大,在pH值为3时,总皂甙含量降低约32．5％,在100℃下,总皂甙含量降低约12．5％。[结论]三七总皂甙在弱酸弱碱,低温条件下,比较稳定,而在强酸高温下受影响大。     

三七提取工艺的筛选

目的:优选三七的最佳提取工艺.方法: 采用正交试验法, 以提取液中三七总皂苷含量为评价指标.结果:选用回流提取法对三七进行提取,最佳工艺条件为:选用50%乙醇,总量为药材的8倍,浸泡时间40 min,热回流2次,每次2 h.结论:三七总皂苷得率高,稳定性好,适合于工业生产.     

5种皂甙对小鼠免疫功能的影响对比试验

测定了人参皂甙、黄芪皂甙、党参皂甙、三七皂甙、绞股蓝总皂甙对小鼠免疫器官指数、血清溶血素的影响。结果表明,人参皂甙、绞股蓝皂甙、三七皂甙能显著增加小鼠免疫器官指数,提高小鼠血清溶血素的含量,且三者之间无明显差异。不同科属的皂甙对小鼠免疫器官具有不同的刺激能力,这种刺激能力可以作为筛选提高动物免疫的绿色饲料添加剂的指标。     

不同培养基对三七花粉愈伤组织皂甙含量的影响

[目的]探讨不同培养基上三七花粉愈伤组织培养过程中总皂甙含量的变化情况。[方法]以MS培养基为基本培养基,添加不同的激素(IAA、NAA、KT、6-BA、GA2、,4-D、HL)和营养物质(蔗糖、琼脂)配制成5种不同的培养基,研究不同培养基对三七花粉愈伤组织中皂甙含量的影响。[结果]不同培养基培养的三七花粉愈伤组织中总皂甙的含量不同,5种培养基中总皂甙含量最高的为3.45%,最低的为0.02%,两者相差172.5倍。[结论]培养基中添加2,4-D有可能会促进三七花粉愈伤组织中皂甙的合成,增加总皂甙含量。     

西洋参特有成分--拟人参皂苷F11的分离、鉴定与含量测定

为了筛选西洋参的特有成分，以利对西洋参生药及其制品的定性鉴别和含量测定，为研制开发新药提供理论依据，本试验采用大孔树脂法和硅胶柱层析分离法对西洋参甲醇提取物进行分离纯化，将所得单体应用质谱、^13C-核磁共振谱、电子轰击质谱（EL-MS）鉴定，并用高效薄层层析法比较了人参、西洋参和三七的甲醇提取物，用薄层扫描法对西洋参各部位拟人参皂苷F11的含量进行了测定。结果表明：西洋参特有皂苷成分为拟人参皂苷F11,在西洋参的花蕾、花柄、果肉、茎叶和根中的含量依次为2．34％，1．93％，1．54％，0．97％和0．28％。     

高效液相色谱法测定不同年限三七根中皂苷含量

[目的]测定不同年限三七根中皂苷的含量。[方法]利用高效液相色谱法,对云南文山产区的三七主根中皂苷含量进行了测定,并探索了不同种植年限样品中皂苷含量的变化情况。色谱条件:色谱柱为Kromasil ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,紫外检测器检测波长为203 nm,柱温25℃。[结果]随着种植年限的增加,皂苷含量也相对增加,最佳种植的年限为3～4年。[结论]该方法简单易行,可用于不同年限三七根中皂苷的含量测定。     

抗氧化中药复方浸提液对PC12细胞铅中毒的防护作用

研究了由茯苓、熟地黄、山茱萸、枸杞及麦饭石组成的复方(PRMFM)的浸提液对PC12细胞铅中毒的防护作用。结果表明:PC12细胞暴露在500 mmol/L的醋酸铅环境中时,细胞的膜脂过氧化程度增大,活性氧(O-2,H2O2)含量增多,抗氧化酶(Superoxide dismutase, SOD; Peroxidase, POD; Catalase, CAT)活性降低。若在细胞遭受铅中毒之前用PRMFM浸提液预处理,可抑制由铅引起的细胞膜脂过氧化程度的增大、活性氧(O-2,H2O2)含量的增多及抗氧化酶(SOD, POD, CAT)活性的降低。表明该中药复方对铅中毒的细胞有明显的防护作用。