不同冷保保护剂在鸡精液冷冻中的作用效果分析

本实验采用一定浓度的甘油，乙二醇，二甲基亚砜（ＤＭＳＯ），二甲基乙酰胺（ＤＭＡ）作为冷冻保护剂，用含冷冻保护剂的称释法液精稀释后常温保存，观察精子活率，比较精子生存指数，并进行输精实验，发现在常温下对精子毒害作用最大的是甘油，其次是ＤＭＳＯ，而ＤＭＡ及乙二醇对精子的毒害作用最小，以一定浓度的４种冷冻保护剂将精液冷冻后观察冻活率，发现以ＤＭＡ作为冷冻保护剂，解冻后精子活率最高。在输精实验中，以ＤＭＡ     

不同冷冻保护剂在鸡精液冷冻中的作用效果分析

本实验采用一定浓度的甘油、乙二醇、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）、二甲基乙酰胺（ＤＭＡ）作为冷冻保护剂，用含冷冻保护剂的稀释液将精液稀释后常温保存，观察精子活率，比较精子生存指数，并进行输精实验，发现在常温下对精子毒害作用最大的是甘油，其次是ＤＭＳＯ，而ＤＭＡ及乙二醇对精子的毒害作用最小。以一定浓度的４种冷冻保护剂将精液冷冻后观察解冻活率，发现以ＤＭＡ作为冷冻保护剂，解冻后精子活率最高。在输精实验中，以ＤＭＡ作为冷冻保护剂采用深阴道输精，取得了５０％的受精率。浅输精取得了４０％的受精率。     

不同冷冻保护液和解冻温度对猪精液冷冻效果的影响

在BF5稀释液中分别添加不同水平的牛血清白蛋白(BSA)(0.5,1,1.5 g/L)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)、甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)(1,2.5,5 g/L),对成年健康猪精液进行冷冻保存,于不同温度(37,50,70℃)解冻后分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、项体完整率、线粒体活性.结果显示,0.5 g/L BSA组冷冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性均高于其他组,但差异不显著(P0.05).1% DMA组冷冻后精子活率和活力显著优于1.5%DMA组(P＜0.05),同时也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著.不同质量浓度CLC组冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比差异不显著.50℃和70℃解冻组精子的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻组的精子;50℃解冻组精子的活力和质膜完整率显著高于其他2组.因此,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,且以1%DMA,50℃解冻最佳.     

东方蜜蜂微孢子虫孢子冷冻保存后对意蜂工蜂的侵染性

东方蜜蜂微孢子虫是成年蜜蜂的重要传染性病原真菌。试验对10%的甘油、乙二醇、二甲亚砜及水在-80℃低温下冷冻保存东方蜜蜂微孢子虫孢子5个月后,孢子对意蜂工蜂的侵染性进行了考查。每只初出房工蜂接种3×104个孢子,结果发现,接种后15天,各组的孢子量无显著差异(P>0.05),产孢量为3.05⁴.13×107个/只。10%甘油和10%二甲亚砜2种保存孢子感染工蜂的22 d累计死亡率分别高达74%和68%,而水保存的累计死亡率仅12.5%。所以得出结论,10%甘油和10%二甲亚砜是比水更好的孢子冷冻保护剂。     

制备鸡冻精的方法

人们一般常将用甘油、乙二醇、二甲亚砜等低温保护剂用于家禽精液的低温保存。但是,其中每一种都有自已的不足之处。有些研究者将NN—乙酰替二甲胺(MAA)作为冷冻红血球、血小板、粒性白细胞、牛羊精液的低温保护剂使用,经使用未发现MAA有优于甘油之处。     

传统稀释液配方中添加不同保护剂对藏羊精液冷冻效果的影响

为探索在传统稀释液配方中添加保护剂对藏羊精子的冷冻保存效果,在传统稀释液配方(果糖-蔗糖-柠檬酸钠-甘油)中,由Tris(三羟甲基氨基甲烷)代替柠檬酸钠,乙二醇代替甘油,在果糖-蔗糖-Tris-乙二醇基础上添加维生素B12、维生素E、维生素C、复合维生素B等,以增强精子缓冲力,减少毒性,提高精子活力、顶体完整率及受精力。结果表明:精液冷冻保存稀释液中添加Tris比添加柠檬酸钠有更好的冷冻保存效果,能有效改善冻后精子活力和顶体完整率;精液冷冻保存稀释液中添加维生素B12对精子有良好的保护作用;用等体积乙二醇代替甘油作为防冻剂,对精子冷冻时的保护作用不亚于甘油;藏羊细管冷冻精液的制作中,用果糖-蔗糖-Tris-乙二醇-维生素B12组合稀释液配方进行2次稀释,8 min冷冻,其冷冻效果最佳,顶体完整率最高。     

冷冻保护剂对家畜精液冷冻保存的研究进展

家畜精液冷冻保存可以实现在不同时间、不同地点的人工授精,能有效提高优良种公畜的利用率,扩大其基因传播范围,同时也是家畜遗传资源易位保存的主要方法之一。在精液冷冻保存过程中,选择合适的稀释液成分对解冻后精子品质的影响十分重要。精子对低温非常敏感,在稀释液中加入冷冻保护剂可有效提升精子解冻后活力。文章综述了近几年渗透性冷冻保护剂(甘油、乙二醇、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜)和非渗透性冷冻保护剂(卵黄、大豆卵磷脂、蔗糖、脱脂乳)在猪、牛、羊、鸡、兔以及骆驼上的应用与研究,旨在为进一步深入研究家畜精子冻融损伤机制提供理论依据。     

巴马香猪精液冷冻保存研究

利用甘油和二甲基亚砜（DMSO）作为冷冻保护剂,以精子存活率为评价指标,研究了冷冻保护剂对香猪精液冷冻保存效果的影响。试验分工、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个试验组和1个对照组。以解冻后的精子活力、活率为判断标准,比较了4种冷冻保护液对香猪精液冷冻保存的影响。结果表明,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组精子活率显著高于Ⅲ组（含5％甘油）（P〈0．05）;试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组之间差异不显著（P〉0．05）;Ⅰ组精子活率最高,达到53．10％。     

不同冷冻保护剂对犬精子冻存的影响

本试验通过对比冷冻保护剂和冷冻程序,优化犬精液冷冻保存方法,比较了不同甘油、乙二醇浓度、不同平衡时间对犬精子冷冻复苏率及精子顶体完整率的影响。结果发现,甘油作为冷冻保护剂时,其对精液冷冻保存后的效果明显优于乙二醇,当甘油浓度为4%时,平均冷冻复苏率最高;冷冻平衡时间为1 h最佳。因此,犬精液在冷冻保存时,甘油浓度为4%,平衡60 min,可获得平均39.21%±0.013%的冷冻复苏率,且比较稳定。     

不同保护剂对藏羊冷冻精液品质影响的研究

本实验研究了不同保护剂对藏羊细管冷冻精液的品质影响。结果表明:含T ris的柠檬酸盐缓冲液可以提高冷冻-解冻后的精子活率(0.41±3.23)和精子顶体完整率(74.45±1.45),以等体积乙二醇替代甘油作防冻剂制作的细管冷冻精液,解冻后的精子活率(0.41±2.87)和顶体完整率(81.23±1.45)。稀释液中添加维生素B12对提高冷冻后精子活率(0.44±3.26)与保护顶体完整率(83.33±1.93)具有良好的作用。     

不同抗冻剂组合对4℃负压保存的猪精液质量的影响

本实验旨在探究猪精液4℃负压保存条件下,利用乙二醇和甘油组合来延长猪精子的存活时间、维持精子质量的效果。通过在Modena基础稀释液中分别添加0%+0%、0.5%+0.5%、0.75%+0.25%、0.25%+0.75%、0.00%+1.00%、1.00%+0.00%的甘油和乙二醇,保存13d,检测精子活率、精子路径速度、畸形率等参数。结果表明:1.00%+0.00%组精子活率在9～13 d高于除0.25%+0.75%之外的其他各组(P<0.05),1.00%+0.00%组在1～13 d的路径速度和直线速度高于其他各组(P<0.05),1.00%+0.00%组在11～13 d的精子畸形率低于其他各组(P<0.05),1.00%+0.00%组在13 d的鞭打频率高于0.25%+0.75%组(P<0.05)。综上,在4℃负压下,Modena基础稀释液添加1%甘油对猪精液保存最有利,甘油与乙二醇分子间的相互作用关系需要进一步研究。     

中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

辽宁绒山羊细管冷冻精液研究

本实验研究了辽宁绒山羊细管冷冻精液的稀释液及制作工艺。结果表明:离心洗涤去精清可以提高冷冻-解冻后的精子活率,与不去精清的对照组相比差异显著(P<0.05);以等体积乙二醇替代甘油作防冻剂制作的细管冷冻精液,解冻后的精子活率和顶体完整率显著(P<0.05)高于甘油作防冻剂的对照组。实验还证明,含Tris的柠檬酸盐缓冲液对提高冷冻后精子活率与顶体完整率具有良好的作用。     

不同浓度的甘油和DMSO对蒙古羊精子活力的影响

研究由两个实验组成:实验一探讨添加不同浓度的甘油(1%、3%、5%、7%,V/V)对冷冻精子活率的影响,实验二探讨在37℃或5℃下添加不同浓度的二甲基亚砜(DMSO)(1%、1.25%、1.5%、1.75%,V/V)对冷冻精子活率的影响.通过实验组获得蒙古羊的最优的甘油浓度稀释液条件下,测定精子解冻后的活力、直线运动率、成活率及顶体完整率.同样用DMSO代替甘油测定精子活率、直线动动率、成活率和顶体完整率,实验结果显示前一项指标得到显著的改善(P＜0.05),且在37℃添加7%甘油效果最好.但是顶体完整率随着甘油或DMSO浓度的增加而出现下降趋势,也就是顶体完整率在5℃下添加1%的甘油或1.75%的DMSO效果较好(P＜0.05).实验中在37℃中增加DMSO顶体完整率显著下降(P＜0.05),此外,在5℃时添加1%DMSO时精子顶体完整率优于其他实验组.实验中在37℃条件下加入1.75%的DMSO比在5℃下精子活力好,在37℃添加7%的甘油比在5℃下添加7%的甘油效果显著(P＜0.05).研究结果表明,对于蒙古羊甘油仍是较好的精子冷冻保护剂.     

应用液氮冷冻保存伊氏锥虫

作者采含伊氏锥虫量达1.5～3×10~7/ml的大白鼠心血,以4:1添加2%柠檬酸钠生理盐水抗凝,再以1:1冷冻保护剂(20%甘油阿氏液;8%二甲亚砜阿氏     

添加低剂量大豆卵磷脂稀释液低温保存绵羊精液的优化研究

本实验旨在探讨添加低剂量大豆卵磷脂稀释液对绵羊精液低温保存效果。实验一采用6个浓度(0%、0.25%、0.5%、0.75%、1.0%、1.25%)大豆卵磷脂替代TRIS专利稀释液中卵黄低温保存绵羊精液,在第0、1、4、7、10、12、18天检测精子活率、顶体完整率;实验二选用实验一中最优添加组(0.5%组)和TRIS专利稀释液制成粉剂低温保存绵羊精液,在保存第0、1、4、7、10、12天对精子活率和顶体完整率进行测定,并在保存第10天对绵羊进行人工授精。结果表明:实验一中,0%组从第1天精子活率低于其他组(P<0.05),0.25%组精子活率观测值从第10天开始低于0.25%以上浓度组(P<0.05),0.5%、0.75%、1.0%、1.25%组保存第10天精子活率均大于50%,0.5%组保存第18天精子活率高于1.0%、1.25%组(P<0.05);各组顶体完整率缓慢下降,各时间点均无显著性差异;实验二中,0.5%组与TRIS组在各时间点的精子活率、顶体完整率与受胎率均无显著性差异,保存第10天精子活率均高于50%;0.5%组受胎率为65.49%,略低于TRIS组67.65%(P>0.05)。本实验条件下,绵羊精液低温保存稀释液中添加0.5%大豆卵磷脂替代卵黄效果最佳。     

牛精液新型冷冻保护剂的研究

通过对不同浓度的甘油和乙二醇对牛精液冷冻保存效果的测定,探讨冷冻保护剂乙二醇与传统冷冻保护剂甘油的冷冻效果,并通过对葡萄糖和卵黄及Tris等成分的调整进一步分析了主要营养成分和缓冲体系对牛精液冷冻保存的影响程度。试验表明:1GL和EG对牛精子均有良好的冷冻保护能力,解冻后6h的活力GL组中以GL1.2和GL1.4的活力最高,均为0.50;EG组中以EG0.7的活力最高,达到0.53,高于0.35以上的国标。2其他营养成分的变化对GL和EG保护精子的效果有一定影响,特别是卵黄的作用比较明显;3在同等条件下,GL对精子的冷冻保护效果优于EG,EG组的活力衰竭快于GL组。     

公猪精液的冷冻(摘要)

一、稀释液成分、保护剂种类和解冻方法对精子活率的影响 S.Salamon,I.Wilmut和C.Polge 为了探讨糖和多元醇(肌醇、卫矛醇)、甘油、低分子多元醇和细胞“非渗透”剂(Cellnon-permeating”agents)等结晶保护剂以及解冻方法对颗粒冷冻精液解冻后精子活率的影     

几种常用营养试剂对波尔山羊精子活率的影响

研究了常用的几种营养试剂对波尔山羊精子活率的影响。在25℃时,第1组（果糖、葡萄糖、蔗糖组）精子活率最高（0.92）;第2组（鲜牛奶、卵黄组）精子活率最低（0.70）;第3组（果糖、葡萄糖、蔗糖、鲜牛奶、卵黄组）精子活率居中（0.81）,差异极显著（P<0.01）;在-196℃时,第3组精活率最高（0.51）;第1组精子活率最低队（0.30）;第2组精子活率居中（0.48）,差异极显著（P<0.01）。结果表明,对于采精后立即实施人工授精或短时间保存精液（25℃）,使用糖类试剂最好;若长时间保存精液（-196℃）,糖类和奶类及卵黄混合试剂最好。     

海藻糖、二甲乙酰胺对公猪精液冷冻保存效果的研究

采用5% 二甲乙酰胺(DMA)(V/V)完全替代甘油,比较乳糖、海藻糖对精液冷冻保存效果的影响。结果表明,海藻糖显著提高了冷冻——解冻后精子成活力(49.32%±1.52%)与顶体完整性 (47.33%±1.16%)(P<0.05)。然后利用海藻糖替代乳糖,评价不同浓度的DMA对公猪精液冷冻保存的影响。结果表明,当DMA添加量为4%时,解冻后精子活率、成活力、顶体完整率分别为(45.17±0.56)%、(50.33±0.67)%、(48.30±1.44)%,均显著高于3% DMA、6% DMA添加组(P<0.05),精子活率显著高于5% DMA添加组(P<0.05),但精子成活力、顶体完整性与其差异不显著(P>0.05)。因此,当利用海藻糖作为冷冻保存基础稀释液,DMA最适添加量为4%。