小豆种质资源对大豆花叶病毒病抗性的初步研究

大豆花叶病毒（SMV）病是危害大豆的最主要病毒病之一,在我国不同地区普遍发生且各地生理小种都有不同。小豆病毒病近年来在各地发生具有加重的趋势,但小豆病毒侵染来源等相关研究不甚清楚。利用大豆花叶病毒流行生理小种对来自国内不同地区的小豆品种进行接种侵染研究,接种SMV于137份小豆品种,调查发病情况发现50个品种发病,症状包括花叶、矮缩、坏死,说明大豆花叶病毒也可侵染小豆,且大多数症状为花叶,破坏寄主的叶绿体功能。2个SMV株系的发病品种数量无明显差异,说明病毒的侵染范围与病毒的致病力强弱无必然联系,只与寄主的“基因－基因”识别有关。该发现为国内首次相关报道,为小豆病毒病的研究打下了相关基础。     

大豆对SMV3号株系的抗性遗传分析

利用高抗东北SMV3号株系的大豆品系95-5383与4个感病品种(系)HB1、铁丰21、Amsoy、williams和抗病品种PI486355配制5个杂交组合,对各组合的F1、F2代接种SMV鉴定抗性.结果表明,95-5383与各感病品种杂交组合的F1代表现为感病,F2群体分离比例为3感(花叶+顶枯)1抗,表明95-5383对SMV3号株系的抗性受一对隐性基因控制.95-5383×PI486355的F2代接种后有感病植株分离,表明二者对SMV3的抗性基因不等位.利用BSA法对95-5383×HB1的F2代进行鉴定,筛选出RAPD引物OPN11在95-5383和抗池扩增出OPN11980片段,在HB1和感池扩增出OPN111070片段,在F1同时扩增出OPN11980和OPN111070.用该引物分析95-5383×HB1的F2个体,共显性的RAPD标记OPN11980/1070与95-5383抗病基因的遗传距离为2.1cM.     

大豆品种接种SMV叶片POD同工酶的研究

研究采用成株感 SMV1号、 3号株系大豆品种合丰 2 5、丰收 12 ,抗 SMV1号而感 SMV3号株系品种东农 81- 4 3、铁 6 915(东农 ) ,抗 SMV1号、 3号株系品种东农 93- 0 4 6、东农 92 - 0 70 ,在隔离网室内采用盆载试验 ,于对生真叶期采用人工汁液摩擦法分别接种 SMV1号、3号株系 ,以未接种健株为对照 ,在大豆鼓粒初期测定分析叶片 POD同工酶。结果表明 ,抗感品种未接种健株叶片 POD同工酶谱带没有明显差异 ,POD活性品种间略有差别 ,但 POD活性与抗性没有相关。分别接种 SMV二个株系后 ,各品种 POD同工酶谱带数目不变 ,一些酶带活性发生变化。合丰 2 5、丰收 12接种 SMV后 ,叶片 POD同工酶活性增强 ,且接种 3号株系增加得大。说明 SMV毒性越强 ,植株感病越严重 ,POD活性变化越大。因此 ,叶片 POD活性的增强是植株感病的生化症状。东农 81- 4 3、铁 6 915接种 SMV1号株系后 ,叶片 POD同工酶和活性没有明显变化 ,接种 SMV3号株系后 ,叶片 POD同工酶活性增强。说明同一品种对二个株系的抗性不同 ,POD的变化也不同。东农 93- 0 4 6和东农 92 - 0 70接种二个株系后 ,POD同工酶没有明显变化 ,接种 SMV3号株系后 ,POD活性略降低     

大豆对SMV数量抗性的表现形式与种质鉴定

 在发现大豆对SMV具有数量抗性的基础上，选用96份大豆品种材料研究其在接种Sa、SC8、N1、N3等4个SMV株系条件下的发病率、病级、潜育期和病害扩展速度等4个数量抗性组分的变异。结果表明，品种间4个组分均存在明显差异；溧水中子黄豆、沛县天鹅蛋、诱变30等品种虽然对4个株系均感染，但在4个组分上均表现出较强抗性，且不同株系间差异较小，说明这些品种对大豆花叶病毒具有广谱数量抗性。研究证实以往报道的一些抗感染品种如溧水中子黄豆、AGS-19,其实是抗扩展的数量抗性品种。邳县茶豆、淮阴秋黑豆等品种对SMV的抗性可能属于数量抗性与质量抗性的叠和。大豆对SMV的数量抗性是曾被学术界忽视而又值得利用的一类抗性，它一般比质量抗性具有更宽的抗谱和更好的持久性。     

大豆对SMV株系SC10的抗性遗传及抗病基因的定位研究

【目的】明确大豆对SMV株系SC10的抗性遗传方式以及不同抗源所携带的抗病基因间的等位关系,并对科丰1号所携带的抗SC10基因进行标记定位。【方法】利用抗中国南方大豆产区流行株系SC10的科丰1号、晋大74、大白麻、汾豆56、中作229、徐豆1号、邳县茶豆、Kwanggyo、跃进4号配制部分抗抗杂交组合并与感病品种南农1138-2和8101配制抗感组合,在接种SC10的条件下,调查各组合后代的抗感反应;并利用科丰1号×南农1138-2的F2群体和分离群体分组分析法（BSA）及SSR标记对抗病基因进行标记定位。【结果】科丰1号、晋大74、大白麻、汾豆56、中作229和徐豆1号与感病品种杂交的F1表现抗病,F2呈3抗﹕1感分离比例,F2:3家系呈1抗﹕2分离﹕1感病的分离比率;晋大74×汾豆56、徐豆1号×邳县茶豆的F1表现抗病、F2未发现感病株。科丰1号×Kwanggyo、汾豆56、中作229,晋大74×中作229、Kwanggyo,大白麻×汾豆56、科丰1号和跃进4号×Kwanggyo的F1表现抗病,F2呈15抗﹕1感的分离比例,F2:3家系符合7抗﹕4分离（15抗﹕1感）﹕4分离（3抗﹕1感）﹕1感的分离比例;D1b连锁群上的SSR标记Satt558、Sat_254、Satt634、Gm020580、Gm020584、Gm020562和Gm020546与抗病基因RSC10连锁,遗传距离分别为6.1、2.0、0.9、0.8、2.0、4.6和9.2 cM。【结论】科丰1号、晋大74、大白麻、徐豆1号、汾豆56、中作229各有一个显性基因控制对SC10株系的抗性;晋大74与汾豆56,徐豆1号与邳县茶豆的抗病基因是等位的或紧密连锁的;科丰1号与Kwanggyo、汾豆56、中作229携带的抗SC10株系的基因处于不同位点,晋大74与中作229、Kwanggyo携带的抗SC10株系的基因处于不同位点,大白麻与汾豆56、科丰1号携带的抗SC10株系的基因处于不同位点,跃进4号与Kwanggyo携带的抗SC10株系的基因处于不同位点;科丰1号对SC10株系的抗病基因RSC10位于D1b连锁群。     

不同抗性大豆品种（系）感染SMV后叶绿素和光合速率变化分析

测定不同抗性大豆品种（系）接种ＳＭＶ不同株系后的叶绿素和光合速率，分析它们在大豆不同生育阶段的变化，阐明大豆感染ＳＭＶ后一些光化学活性特点：叶绿素ａ含量减少－－叶绿体进行光合作用的原初反应中心受到伤害，光合速率降低，最终引致产量下降。ＳＭＶ对大豆叶绿素、光合速率及产量的影响因品种的抗性及ＳＭＶ毒系的致病力不同而有所差异。     

大豆对SMV3号株系的抗性遗传分析及抗病基因的RAPD标记研究

 利用高抗东北 SMV3号株系的大豆品系 95 - 5 383与 4个感病品种 (系 ) HB1、铁丰 2 1、Am soy、William s和抗病品种 PI486 35 5配制 5个杂交组合 ,对各组合的 F1 、F2 代接种 SMV鉴定抗性。结果表明 ,95 - 5 383与各感病品种杂交组合的 F1 代表现为感病 ,F2 群体分离比例为 3感 (花叶 +顶枯 )∶ 1抗 ,表明 95 - 5 383对 SMV3号株系的抗性受一对隐性基因控制。 95 - 5 383× PI486 35 5的 F2 代接种后有感病植株分离 ,表明二者对 SMV3的抗性基因不等位。利用BSA法对 95 - 5 383× HB1的 F2 代进行鉴定 ,筛选出 RAPD引物 OPN11在 95 - 5 383和抗池扩增出 OPN11980 片段 ,在HB1和感池扩增出 OPN111 0 70 片段 ,在 F1 同时扩增出 OPN11980 和 OPN111 0 70 。用该引物分析 95 - 5 383× HB1的 F2 个体 ,共显性的 RAPD标记 OPN11980 /1 0 70 与 95 - 5 383抗病基因的遗传距离为 2 .1c M。     

大豆花叶病(SMV)新抗性基因的初步鉴定

【目的】鉴定出携带特异抗性基因的种质。【方法】利用美国的6个SMV株系(G1~G3,G5~G7)对来自26个国家和地区的254份大豆种质进行人工接种鉴定。【结果】158份材料感所有病毒株系;95份材料抗某些病毒株系;只有7份种质兼抗所有6个鉴定株系:中国种质3份(‘Kaigen’s kingenzu’PI 88486,PI 62202和PI 407733),法国种质1份(‘ItoSan’PI 189920),韩国种质1份(PI 84549),日本种质2份(‘Shirome choutan’PI 417329和‘Tousan 101’PI 507439)。14份材料对6个株系表现抗病或幼苗早期抗病,推测可能携带Rsv4基因;50份材料对6个株系的反应型与已报道的抗性等位基因类似,推测其中携带Rsv1抗性基因材料2份,Rsv1-k22份,Rsv1-y16份,Rsv1-t1份,Rsv3 10份。25份材料对6个SMV株系表现型特殊,可能携带Rsv1,Rsv3,或Rsv4位点新的等位基因。【结论】这些新的抗源可以用于SMV抗病育种的亲本。     

大豆花叶病毒（SMV）侵染大豆种胚的研究

采用大豆、健株正反交和病、健株自交的方法，以间接ＥＬＩＳＡ检测其后代种胚的带毒率。试验结果表明：♀（Ｓ）×、♀（Ｓ）×♂（Ｈ）两组合子代的种胚毒率较高，在结荚初期均超过６０％；♀（Ｈ）×♂（Ｓ）子代种胚带毒率较低，仅２５％左右；在自交组组合中未检测到病毒。说明胚珠在发育早期受到病毒的侵染可能是种子带毒的主要因素，而带毒的花粉使种胚受到的病毒侵染的作用较小。对大豆花前期病、健株子房组织进行免疫胶体金     

黑龙江省大豆SMV的采集与分布研究

根据2002年和2003年在黑龙江省各市县地区所采集的大豆花叶病毒病(SMV)样品所表现的症状,利用MVSP3.1.2版本的软件分别对其进行聚类分析,研究大豆花叶病毒在黑龙江省各市县地区的症状表现规律以及分布规律.聚类结果表明:黑龙江省的各地区SMv表现的主要症状为皱缩型,其次为黄化型的,只有极少数表现为畸形.在2003年的223份样品中有一半的样品表现为皱缩,在2002年的126份样品中有80%的样品表现为皱缩.这些说明黑龙江省的大豆花叶病毒主要以1号株系为主.为进一步研究黑龙江省各地区的发病情况,将黑龙江省划分为东、西、南、北四大块.分别对各部分的病毒样品的症状进行聚类分析,结果表明:各地区也基本以皱缩型SMV为主,大致规律与黑龙江省的整体发病规律相吻合.     

不同土壤大豆接种根瘤菌剂反应的研究

不同土壤多点接种试验表明,土壤中土著大豆根瘤菌的群体数量影响着接种菌的竞争结瘤,土著菌数分别在低于１００个／ｇ土、１００－１０００个／ｇ土间和超过１０００个／ｇ土时,接种菌的占瘤率分别为５０．９５％、２０．３７％和１６．８４％。大豆自然结瘤性状Ｃ值与接种菌率和接种产量反应分别呈显著负相关,占瘤率与接种效果呈显著正相关,当大豆自然结瘤性状Ｃ值为１４以下和占瘤率超过２５％时,接种效果产１０％左右。所研     

大豆灰斑病接种体来源及接种条件的研究

比较种子带菌和土壤带菌作为接种体来源的田间试验,结果证明,土壤带菌是田间接种体的主要来源。不同带病水平的种子,即使100%带病,引起病害的严重度没有多大差别,在发病初期调查,连作地的平均病指为2.98%,而与玉米轮作的地块仅为0.98%,病害降低了67.11%。室内进行的接种条件研究证明,接种体的浓度以每毫升悬浮液中含40000个孢子为宜。接种后,应立即保湿。孢子落到叶片上,没有足够湿度的情况下,6天后便失去侵染活力。孢子在饱和湿度下,2小时亦能侵入,2～8小时侵染率都很低,以保湿24小时的效果较好。     

辽宁省大豆新品种对SMVⅠ号和Ⅲ号病毒株系的抗性鉴定

为了辽宁省大豆产业振兴与发展,近5年来对辽宁省内选育的大豆新品种进行了全面抗大豆花叶病毒鉴定,采用人工摩擦接种毒液法,对178份大豆品种进行SMVⅠ号和Ⅲ号病毒株系的抗性鉴定。结果表明,50%以上参鉴品种对SMVⅠ号和SMVⅢ号病毒株系均表现出抗性,并筛选出兼高抗2种病毒株系的大豆品种共21份,可直接在大豆生产中应用和推广。     

南瓜病毒病接种条件和抗性生理生化指标的研究

通过单因素试验,研究了接种浓度、温度、苗龄对南瓜病毒病接种效果的影响,筛选出南瓜苗期最佳抗性鉴定方法,即植株在子叶期或1片真叶期,25℃,稀释2倍时接种最好,用此法对55份试验材料进行抗性鉴定,筛选出抗性材料5份,17份中抗材料。用一份中抗材料南瓜苗期接种西瓜花叶病毒2号(WMV-2),分析电导率、多酚氧化酶(PP0)、叶绿素含量的变化。结果表明,接种后电导率、PPO活性均是接种植株高于健康植株,而叶绿素含量是接种植株低于健康植株。     

大豆花叶病毒（SMV）的侵染对大豆叶片过氧化物酶及其同功酶的影响

研究了对ＳＭＶ抗性不同的３个大豆品种在接种ＳＭＶ－ａ株系后叶片过氧化物酶活性及其同功酶的动态变化。结果表明，侵染的早期（接种后３ｄ），抗病品种科丰１号的过氧化物酶活性急剧上升，出现了新的ＰＩ为４．４０和９．７３的同功酶；感病品种徐豆１号和１１３８－２的变化则相对较小。侵染的中后期（接种后６ｄ和９ｄ），感病品种的过氧化物酶活性迅速上升，且徐豆１号也出现了ＰＩ为４．４０和９．７３的同功酶；抗病品种过氧化物酶活性略有下降，ＰＩ为４．４０和９．７３的同功酶消失。ＳＭＶ侵染早期，抗病品种过氧化物酶活性的急剧增加以及ＰＩ为４．４０和９．７３的同功酶的出现可能与抗病性密切相关。