毛细管胶束电动色谱法检测饲料中防腐剂

建立了同时分离测定山梨酸(SA)、苯甲酸(BA)、对羟基苯甲酸甲酯(MP)、对羟基苯甲酸乙酯(EP)、对羟基苯甲酸丙酯(PP)、对羟基苯甲酸丁酯(BP)6种防腐剂的胶束电动毛细管色谱方法。以十二烷基硫酸钠(SDS)-磷酸盐-硼砂缓冲体系为缓冲液,pH为7.73,电压为20 kV,于245 nm波长下对样品进行检测。结果表明,6种防腐剂均在14 min内实现很好分离,SA、BA的线性范围分别为0.5～150μg/mL和15～200μg/mL,MP、EP的线性范围均为2～200μg/mL,PP的线性范围为5～200μg/mL,BP的线性范围为1～200μg/mL,线性相关系数为0.9987～0.9995,平均回收率为89.7%～96.7%,RSD≤5.91%,检测限为0.25～10μg/mL。     

高效液相色谱-DAD法同时测定饲料中6种防腐剂

本实验建立了同时分离检测饲料中苯甲酸(BA)、山梨酸(SA)、对羟基苯甲酸甲酯(MP)、对羟基苯甲酸乙酯(EP)、对羟基苯甲酸丙酯(PP)和对羟基苯甲酸丁酯(BP)6种防腐剂的高效液相色谱-二极管阵列检测器(DAD)法。以甲醇和0.1 mmoL/L甲酸铵溶液(pH5.5)为流动相,结合溶剂梯度和流速梯度,在220~300 nm为提取最大吸收波长的条件下对这6种防腐剂进行分离与检测。结果表明,6种防腐剂在6 min内实现了基线分离,线性相关系数在0.9896~1.0000,BA和BP的检出限分别为0.1μg/mL和0.025μg/mL,SA、MP、EP和PP的检出限均为0.05μg/mL。样品加标平均回收率为85.5%~95.2%,相对标准偏差(RSD)为1.47%~3.25%(n=5)。     

程序升温-气相色谱技术同时检测饲料中10种防腐剂

实验采用DB-5MS毛细管柱结合程序升温技术的气相色谱法在7 min内同时分离和检测了饲料中丙酸（PA）、山梨酸（SA）、苯甲酸（BA）、脱氢乙酸（DHA）、对羟基苯甲酸甲酯（MP）、对羟基苯甲酸乙酯（EP）、对羟基苯甲酸丙酯（PP）、对羟基苯甲酸丁酯（BP）、对羟基苯甲酸异丙酯（IPP）、对羟基苯甲酸异丁酯（IBP）等10种防腐剂。结果表明,10种添加剂的线性相关系数r≥0.9989,检测限为0.1～5μg/mL,样品平均回收率为81.5%～90.0%,相对标准偏差小于5.0%。     

高效毛细管电泳法同时检测饲料中六种抗氧化剂

实验以25 mmol/L硼砂-硼酸(Na2B4O7-H3BO3)和10 mmol/L十二烷基硫酸钠(SDS)的混合液(pH=7.00)作为缓冲液,采用高效毛细管胶束电动色谱法测定样品中丁基羟基茴香醚(BHA)、二叔丁基甲基苯酚(BHT)、特丁基对苯二酚(TBHQ)、没食子酸异丙酯(PG)、没食子酸辛酯(OG)、乙氧基喹啉(EQ)六种抗氧化剂。该方法在15 min内实现了六种抗氧化剂的分离;TBHQ和BHA的线性范围为50～500μg/mL,PG、EQ、OG和BHT的线性范围分别为10～200、20～200、25～400μg/mL和25～500μg/mL,线性相关系数≥0.996。TBHQ、PG、BHA、OG、EQ、BHT的检测限分别为30、5、25、15、10、10μg/mL;样品平均回收率为81.8%～102.0%,相对标准偏差≤6.5%。     

高效液相色谱法测定酸奶和液体奶中对羟基苯甲酸酯类的研究

本文建立了酸奶和液体奶中对羟基苯甲酸酯类防腐剂中的对羟基苯甲酸乙酯（EP）和对羟基苯甲酸丙酯（PP）的高效液相色谱（HPLC）分析方法。样品用甲醇溶解后用超声波进行提取,采用紫外检测器检测,检测波长256nm,2种防腐剂在10min之内完全分离。各组分的回收率为96．9％～102％,检出限为1mg／kg,线性范围为1．0—40ug／mL。     

五氯柳胺混悬液中对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯含量的HPLC测定

建立高效液相色谱法(HPLC)测定五氯柳胺混悬液中防腐剂对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的含量。色谱柱采用Hypersil BDS C18(150 mm×4.6 mm;5μm),流动相为0.025 mol/L无水磷酸氢二钠溶液(磷酸调pH 6.5)∶乙腈=65∶35,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,进样量为20μL,柱温为25℃。结果表明,对羟基苯甲酸甲酯在0.923μg/mL^9.230μg/mL线性范围内,对羟基苯甲酸丙酯在0.615μg/mL^6.15μg/mL线性范围内均具有良好的线性关系,相关系数均达到1.000,平均回收率分别为100.03%和100.33%,平均RSD分别为0.087%和0.077%。结果表明,该方法具有操作简单,灵敏度较高、结果准确等特点,适用于五氯柳胺混悬液中对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的检测。     

HPLC法检测乳品中对羟基苯甲酸酯类和纳他霉素

建立了乳制品中的对羟基苯甲酸酯类和纳他霉素的高效液相色谱分析方法.样品用甲醇提取后,使用C18反相色谱柱分离,以甲醇-醋酸水溶液为流动相,紫外检测器检测,检测波长256nm和305nm条件下5种防腐剂在35min之内完全分离.在一定条件下各组分的相关系数均大于0.9990,线形范围1～100mg/kg,回收率为83.7％～103％.     

鸡组织中对羟基肉桂酸残留的UPLC检测方法研究

建立了鸡组织(肌肉、肝脏、肾脏)中对羟基肉桂酸(PCA)超高效液相色谱检测方法。组织样品用无水乙醚提取,提取液50℃氮气吹干,20%的甲醇溶液复溶,用0.22μm滤膜过滤。以C18为色谱柱,甲醇-1%乙酸溶液(20/80,v/v)为流动相,检测波长310 nm,流速0.3 mL/min,用超高效液相色谱检测。对羟基肉桂酸标准品工作液在5～400 ng/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.9996);组织中药物添加浓度分别为20、50、100μg/kg时,其样品中药物平均回收率分别98.46%～103.66%、85.09%～107.15%和80.27%～97.63%;日内、日间变异系数均≤10%。在该检测条件下,PCA在鸡肌肉、肝脏、肾脏中检测限分别为1μg/kg、2μg/kg和1μg/kg。定量限分别为2μg/kg、4μg/kg和2μg/kg。该方法样品处理简单,且准确度和精密度均符合残留检测方法要求,可以作为对羟基肉桂酸在鸡组织内的残留检测方法。     

高效液相色谱法同时测定复合有机酸化剂中5种成分的含量

建立高效液相色谱法同时分离测定复合有机酸化剂中的烟酸、乳酸、柠檬酸、苯甲酸、水杨酸含量.采用Agela-ASB(r)C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);盐酸溶液(0.02%,V/V,A)和乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;流速1.0mL/min;检测波长210 mn;柱温:(35±2)℃.在此色谱条件下,5种有机酸分离良好,它们的峰面积响应与浓度分别为烟酸1～20 μg/mL;乳酸100～2000 μg/mL;柠檬酸100～2000μg/mL;苯甲酸2.5～50μg/mL;水杨酸2.5～50μg/mL,线性关系良好(r>0.9995).平均加样回收率均分别为99.1%,98.2%,97.2%,96.3%,96.0%;RSD 小于1.0%.该方法操作简便易行,系统适用性良好,方法准确可靠.     

高效液相色谱法同时测定饲料中多种酚类抗氧化剂和尼泊金酯类防腐剂

实验建立了同时测定饲料中4种酚类抗氧化剂(没食子酸丙酯、丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、特丁基对苯二酚)和3种尼泊金酯类防腐剂(尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯)的高效液相色谱方法。样品以甲醇-乙腈溶液(30∶70,V/V)超声提取后经Inertsil ODS-sp C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,用甲醇/乙酸铵溶(pH=3.5)作流动相梯度洗脱,分别在波长256 nm和280 nm进行检测,外标法定量。结果表明,7种物质浓度为0.1～100.0μg/mL时与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均大于0.9999,检出限(3S/N)为0.027～0.102 mg/L,平均回收率为79.62%～112.29%,相对标准偏差(n=6)为2.65%～8.38%。     

高效液相色谱法测定饲料中的氯烯雌醚

试验建立了饲料中氯烯雌醚的反相高效液相色谱测定方法。经乙腈提取饲料中的氯烯雌醚,以C18固相萃取小柱进行纯化后,用反相高效液相色谱法检测。氯烯雌醚在0.5～100μg/ml范围内线性关系良好,回归方程Y=138222509X+19447,r=0.9999,饲料中氯烯雌醚的最低检测量为35μg/kg。高、中、低3个浓度的平均加样回收率分别为100.2%、99.10%、99.13%,RSD在0.88%～1.11%范围内。     

硒增强二十二碳六烯酸在脂多糖诱导巨噬细胞炎性反应中的抗炎作用

为了探究硒是否影响二十二碳六烯酸(DHA)在脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞炎性反应中发挥的抗炎作用。小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞分别经10μg/m L DHA、10μg/m L DHA+0.05μmol/L亚硒酸钠、1μg/m L LPS、10μg/m L DHA+1μg/m L LPS、10μg/m L DHA+1μg/m L LPS+0.05μmol/L亚硒酸钠诱导24 h,同时设置无添加的正常组。采用半定量反转录PCR检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)mRNA表达量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定培养液上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10含量。结果显示,添加亚硒酸钠(0.05μmol/L)不仅显著或极显著增强了DHA(10μg/m L)对LPS(1μg/m L)诱导RAW 264.7细胞中促炎细胞因子TNF-αmRNA表达(P0.05)和IL-1β生成(P0.01)的抑制作用,还极显著增强了DHA(10μg/m L)对LPS(1μg/m L)诱导RAW264.7细胞中抗炎细胞因子IL-10 mRNA表达的促进作用(P0.01)。由此提示,硒可增强DHA在LPS诱导巨噬细胞炎症反应中的抗炎作用。     

长链n-3多不饱和脂肪酸对肠上皮细胞促炎细胞因子基因mRNA表达的影响

本试验旨在探讨长链n-3多不饱和脂肪酸(LC n-3 PUFA)对肠上皮细胞促炎细胞因子基因mRNA表达的影响.试验选用大鼠肠上皮细胞系IEC-6细胞为模型,分为4个处理,分别为对照、脂多糖(LPS,1μg/mL)、LPS(1μg/mL)+二十二碳六烯酸(DHA,100 μmol/L)和LPS(l μg/mL)+二十碳五烯酸(EPA,100μmol/L),每个处理3个重复,每孔为1个重复.细胞先用DHA、EPA或等量二甲基亚砜(DHA和EPA的溶剂,对照)预处理48h,再用LPS处理3h,收集细胞提取总RNA,采用实时定量PCR方法分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的基因mRNA表达水平的差异.结果表明:LPS极显著上调了细胞中TNF-α、IL-1 β和IL-6的基因mRNA表达水平(P＜0.01),EPA均极显著或显著削弱了细胞内LPS诱导的TNF-α(P＜0.01)、IL-1β(P ＜0.01)和IL-6的基因mRNA水平(P＜0.05)的上调,而DHA仅显著削弱了细胞内LPS诱导的IL-1β的基因mRNA水平的上调(P＜0.05).结果提示,LC n-3 PUFA在肠上皮细胞中具有抗炎作用,且在本试验条件下EPA的抗炎效果要优于DHA.     

富铜酵母发酵条件优化的研究

利用酵母菌具有较强的富集微量元素的特性,试验研究了酵母菌富集微量元素铜的条件优化。从6株酵母菌中筛选出耐铜能力和富集铜能力均较强的J5作为试验菌株。试验结果显示:500ml摇瓶中装入50ml培养基,pH值为4.0～5.5,接种量为4%,30℃条件下摇床培养,最适宜的无机铜源为氯化铜,适宜氯化铜浓度120μg/ml。在此条件下培养所得酵母菌体生物量能达到1.00g/100ml以上,有机铜含量能够达到5000μg/g左右。     

富铬酵母发酵条件优化的研究

 利用酵母菌具有较强的富集微量元素的特性,试验对产朊假丝酵母富集微量元素铬的条件进行了优化。从6株酵母菌中筛选出耐铬能力和富集铬能力均较强的CJ2作为试验菌株。试验结果表明：500 mL三角瓶中装入75 mL发酵培养基,采用一次性加铬的方式,适宜的CrCl₃·6H₂O浓度为50 μg/mL,pH值为5.5,接种量为6%,摇床转速180 r/min,28~30 ℃下培养24 h,获得的富铬酵母生物量能达到1.30 g/100 mL,铬含量能达到2 000 μg/g左右,转化率能达到50%左右。同时CJ2菌株发酵罐培养,铬酵母生物量能达到1.80 g/100 mL,铬含量能达到2 500 μg/g左右。并对普通酵母和富铬酵母中的氨基酸组成了分析。     

高效液相色谱法测定鱼饲料中甲基睾丸酮含量的研究

试验建立了鱼饲料中17α-甲基睾丸酮的液相色谱检测方法。该方法以甲醇提取样品中的甲基睾酮,3β-甲基-17β-羟基-5-雄烯-7-酮为内标;梯度洗脱,流动相分别为水-乙腈溶液(80:20,V/V),流速0.5 ml/min;柱温40℃,DAD检测器检测,内标法定量,甲基睾酮的平均保留时间为11.29 min(R.S.D=0.20%),内标为8.68 min(R.S.D=0.19%)。结果表明,在7.5～60.0μg/ml范围内线性关系良好,拟合度为0.999 8,回收率在94%～100%之间,相对标准偏差为1.97%～3.21%。     

Effect of zinc bacitracin and phytase on growth performance,nutrient digestibility,carcass and meat traits of broilers

A total of 336 one‐day‐old Hubbard broiler chickens were randomly distributed among 8 groups, each containing six replicates (7 chickens/replicate). From 1 to 40 days of age, the groups fed the same starter, grower and finisher diets. The control group was unsupplemented; zinc bacitracin (ZnB) group received the antibiotic at 0.5 g/kg; fungal phytase (FP) groups received 250, 500 and 1000 U/kg diet of Aspergillus niger phytase (FP_250, FP_500 and FP_1000 groups), respectively; bacterial phyatse (BP) groups received 250, 500 and 1000 U/kg diet of Escherichia coli phytase (BP_250EP, BP_500EP and BP_1000EP groups) respectively. Considering the whole experimental period, body weight gain was unaffected by ZnB and different concentrations of bacterial and fungal phytase; however, the feed conversion ratio of the group fed a diet supplemented with 500 U of BP was better (p < 0.01) than those fed with a diet supplemented with 500 U of FP. BP_250 group had a higher (p < 0.05) apparent digestibility of ether extract compared to FP_250 group. In conclusion, bacterial phytase at 500 U may enhance performance of broiler chickens fed during days 1–40 of age and yield similar growth performance and economic efficiency to those of eB‐supplemented groups.     

水杨酸和脱落酸浸种对低温下扁蓿豆种子萌发和幼苗生长的影响

为筛选出提高低温下扁蓿豆（Medicago ruthenica）种子发芽能力的处理措施,本研究选取水杨酸（salicylic acid,SA）和脱落酸（abscisic acid,ABA）分别对扁蓿豆进行了7种不同浓度的浸种处理,测定了2种外源物质对低温下扁蓿豆种子发芽势﹑发芽率﹑发芽指数﹑活力指数、根长和芽长的影响。结果表明,2种外源物质浸种处理下扁蓿豆种子的发芽势﹑发芽率﹑发芽指数﹑活力指数,根长和芽长均呈先升高后降低的趋势,初次发芽天数无变化。供试处理中,低浓度的SA（0.1～10 μmol·L^-1）和ABA（0.001～0.5 μmol·L^-1）对扁蓿豆种子萌发﹑根长和芽长均有促进作用,且对根长和芽长的促进效果较种子萌发好,高浓度的SA（>20 μmol·L^-1）和ABA（>1 μmol·L^-1）显著抑制了种子萌发及根和芽的伸长（P<0.05）。通过模糊数学隶属函数的综合评价,0.05 μmol·L^-1的ABA浸种处理是低温下促进扁蓿豆种子萌发和幼苗生长的最佳浓度。     

中药复方提取物对细胞抗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染能力的影响

中药复方提取物经临床验证对预防猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型等引起的疾病有效。本试验测定细胞安全浓度范围内中药复方提取物对细胞抗PRRSV感染能力的影响。试验用中药主要成分为虎杖、女贞子、杠板归等。提取方法为水浸,旋转蒸发干燥。制成生药原液浓度为25mg／mL,稀释成2500、1250、625．0、312．5、156．25、78．13、39．06、19．53、9．77、4．88ug／mL。培养细胞选用Marc-145。试验方法：1）细胞培养液中加入0．1mL中药提取物培养2h后加入PRRSV病毒液0．1mL,培养72h;2）细胞培养液中加入病毒液0．1mL培养2h后加入中药提取物0．1mL,培养72h;3）同时将各浓度中药提取物0．1mL和病毒液0．1mL加入细胞培养液中;3种加药方式均设细胞对照和病毒对照,每个浓度设4～6个重复。结果表明,第1种加药方式下,19．53—2500ug／mL效果显著,其中39．06ug／mL效果最好;第2种加药方式下,156．25～2500ug／mL效果显著,1250ug／mL效果最佳;第3种方式下,19．53—2500ug／mL效果显著,2500ug／mL效果最好。这可能是中药复方提取物预防PRRSV感染的作用机制之一。