乳酸片球菌对断奶仔猪生长性能及肠道微生物的影响

本试验旨在研究日粮中添加乳酸片球菌制剂对断奶仔猪生长性能、消化代谢及肠道菌群的影响,为乳酸片球菌在断奶仔猪生产上的应用提供科学依据。试验选用120头28日龄体重相近的健康状况良好的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,随机分为4组,每组3个重复,每个重复10头仔猪,对照组饲喂基础日粮,试验组Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ分别在基础日粮中添加0. 01%、0. 15%和0. 30%的乳酸片球菌制剂(乳酸片球菌≥1. 0×10~9CFU/g)。结果表明:试验组仔猪平均日增重比对照组分别提高了8. 82%、15. 06%和11. 53%,料重比分别降低了6. 77%、10. 53%和8. 27%,差异显著(P <0. 05);试验组仔猪的粗蛋白、粗纤维和磷的消化率均得到显著提高(P <0. 05)。乳酸片球菌使仔猪腹泻情况得到明显改善,试验组腹泻率显著降低(P <0. 05),比对照组降低了51. 08%、69. 09%和55. 84%,腹泻指数也显著下降(P <0. 05),肠道中有益微生物乳酸菌增多而有害微生物大肠杆菌减少。综上,乳酸片球菌能够改善断奶仔猪肠道健康,提高生长性能,日粮中乳酸片球菌的添加量以0. 15%效果最佳。     

16S rRNA鉴定乳酸片球菌分离株

根据乳酸片球菌的16S rRNA基因序列,设计2条特异性引物,以PCR方法扩增从酸白菜中分离得到的具有抑制单核细胞增多症李氏杆菌作用的乳酸片球菌菌株的16S rRNA基因序列,经克隆和测序后,与以往发表的基因序列进行比较,同源性99%,从基因水平上进一步证明该菌株为乳酸片球菌。     

乳酸片球菌产谷氨酸脱羧酶的相关酶学性质研究

为研究乳酸片球菌谷氨酸脱羧酶（GAD）的性质,采用比色法测其酶活。结果表明：当底物L-MSG的浓度为100 mmol.L-1时,GAD的活力达到最大。GAD的浓度为3.16%,最适温度为37℃,最适pH为5.0,PLP浓度为0.1 mo.lL-1时,GAD酶活力最大。Mg2＋和Mn2＋使GAD活力提高10%左右,KCl...     

60日龄内玉山黑猪小肠形态学发育的研究Ⅰ.小肠绒毛的密度、高度、宽度和杯状细胞数量的变化

应用定量组织学方法对0、3、20、40、43、45、46、47、50、53、56和60 d玉山黑猪的十二指肠近端、远端、空肠及回肠的形态学变化进行观察比较。结果表明,玉山黑猪各小肠段的绒毛密度出生时最大,随着日龄的增长均呈下降趋势,断奶后2 d密度变化差异极显著;在0~60 d各小肠段的绒毛高度变化差异极显著,其中十二指肠近、远端绒毛于20 d高度达到最大,空、回肠绒毛于3 d达到最高;在0~60 d各段小肠绒毛的宽度变化差异极显著,其中十二指肠绒毛宽度于40 d达到最宽,空、回肠绒毛宽度于43 d达到最宽。断奶对绒毛密度、高度、宽度等指标有短暂的影响,但2~3 d后就迅速恢复。     

乳酸粪肠球菌的分离鉴定与系统进化分析

分离鉴定一株疑似乳酸粪肠球菌.通过对表型特性包括培养特性、形态学观察、生化试验等鉴定,同时结合16S rDNA系统进化分析;结果该株革兰氏阳性菌能在10℃和45℃生长.接触酶阴性,发酵葡萄糖产酸不产气,可生长于6.5%NaCl和pH9.6的环境等,16S rDNA系统进化分析与粪肠球菌有最高同源性.结论表明分离株为乳酸粪肠球菌.     

氧化锌和纳米氧化锌对小鼠肠道肠球菌耐药性的影响

为评估在饲料中添加氧化锌(ZnO)和纳米氧化锌(ZnO NPs)对小鼠肠道肠球菌耐药性的影响,本研究将试验小鼠分为A(对照组)、B、C组,A组饲料不做处理,B组饲料添加500 mg·kg^-1 ZnO NPs, C组饲料添加1 600 mg·kg^-1 ZnO,在饲喂25、30和50 d时采集小鼠粪便进行肠球菌的分离鉴定,测定肠球菌的药物敏感性、耐药基因检出率和基因突变率.结果表明：在饲料中添加ZnO和ZnO NPs可逐步提高肠球菌对红霉素、四环素、利福平、环丙沙星和亚胺培南等抗生素药物的耐受性,逐步提高erm(A)、erm(B)、tet(L)和tet(M)等耐药基因的检出率;两株环丙沙星耐药肠球菌出现gyrA和parC基因的单点突变.综上,高锌饲喂会提高小鼠肠道肠球菌的耐药性.     

灌饮鸡脾转移因子对蛋雏鸡肠黏膜机械屏障发育的影响

为研究不同剂量鸡脾转移因子(TF)对蛋雏鸡肠黏膜组织学屏障发育的影响,选取200只体重和生长情况基本一致的5日龄SPF蛋雏鸡,随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组和对照组,每组50只。给蛋雏鸡分别灌饮低(0.10 mL/只)、中(0.25 mL/只)、高(1.00 mL/只)剂量的TF,用药1周,停药1周,间歇给药,分别于12、26、40日龄取材肠道组织,石蜡切片,HE染色,比较不同TF剂量组肠道组织学结构的变化。结果表明使用不同剂量的TF后,与对照组相比:12日龄时TF应用组小肠绒毛高度均有所升高,隐窝深度降低,尤其二者比值变化显著:十二指肠中、高剂量组分别显著增加26.00%、26.96%,空肠高剂量组显著增加29.45%,回肠各剂量组均显著增加(19.74%～29.32%);26日龄,肠黏膜结构变化与12日龄相似,十二指肠中、高剂量组绒毛高度和隐窝深度比值显著增加9.46%、9.90%,空肠只有高剂量组显著增加12.99%;回肠各剂量组显著增加(17.07%～25.60%);40日龄,十二指肠中、高剂量组比值分别显著增加17.97%、22.19%;空肠高剂量组显著增加28.68%;回肠各剂量组均显著增加(17.04%～25.56%)。因此,给蛋雏鸡灌饮高剂量TF可显著增加小肠绒毛高度和隐窝深度比值,且与应用剂量呈正相关,能够有效改善小肠的消化吸收功能。     

响应面法优化乳酸片球菌TK530发酵红枣浆工艺

[目的]通过响应面法优化发酵红枣浆工艺条件,为开发一种富含益生菌活性的枣浆饮品提供参考依据.[方法]以活菌数和感官评分为考察指标,在料液比、发酵温度、接种量和发酵时间等单因素试验的基础上,采用Box-Behnken对乳酸片球菌TK530发酵红枣浆工艺进行优化,确定最佳发酵工艺,并对发酵前后的红枣浆营养指标和抗氧化能力进行测定分析.[结果]红枣发酵饮料活菌数(Y1)与料液比(A)、接种量(B)和发酵时间(C)的二次回归方程模型为:Y1(活菌数)=8.60+0.1150A+0.0288B+0.0038C-0.0525AB-0.0175AC+0.0100BC-0.4165A2-0.1790B2-0.1090C2(R2=0.9978),该模型拟合度较好,其中接种量与发酵时间的交互作用对产品活菌数有极显著影响(P<0.01,下同).红枣发酵饮料感官评分(Y2)与料液比(A)、接种量(B)和发酵时间(C)的二次回归方程模型为:Y2(感官评分)=92.52+0.96A+0.49B+0.48C+0.45AB-3.43AC-1.93BC-7.51A2-5.01B2-3.58C2(R2=0.9924),该模型拟合度也较高,其中料液比与发酵时间、接种量与发酵时间的交互作用对产品感官评分有极显著影响,料液比有显著影响(P<0.05,下同).红枣发酵饮品的最佳发酵工艺条件为:料液比1:6、发酵温度37℃、接种量6%、发酵时间24 h,在此条件下,发酵红枣浆中的活菌数为8.61 logCFU/mL,感官评分95.1分,与预测值接近.发酵后的红枣浆pH 3.67,多酚含量0.84±0.014 mg/g,粗多糖含量0.22±0.018 mg/mL,总黄酮含量1.28±0.014 mg/mL,乳酸含量4.995±0.013 mg/mL,铁离子还原力8.94±0.06 mg/100 mL,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率77.5%,2,2-联氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)自由基清除率64.3%,其中铁离子还原力和ABTS自由基清除能力较发酵前红枣浆显著增强,DPPH自由基清除能力无显著变化(P>0.05).[结论]通过响应面试验优化发酵工艺制得的发酵红枣浆饮品酸甜可口,色泽均匀,赋予产品特有的乳酸风味,同时具有一定的抗氧化和自由基清除能力.     

一株乳酸乳球菌对棒曲霉素的去除作用

以筛选得到的可有效去除棒曲霉素的食品生产用菌株乳酸乳球菌MG1363为实验材料,通过改变环境温度、pH对其降解特性进行研究,并通过灭活菌体、提取粗酶液等手段,对乳酸乳球菌MG1363降解棒曲霉素的机理进行初步探究。结果表明,温度、pH对乳酸菌去除棒曲霉素活力的影响显著(P<0.05),去除棒曲霉素的较佳反应环境为30 ℃、pH值5.5~6.0。乳酸乳球菌MG1363既能物理吸附棒曲霉素,也能通过酶解作用降解棒曲霉素,且发挥降解活性的酶为胞内酶。乳酸乳球菌MG1363酶解棒曲霉素为其自身固有的特性,但棒曲霉素可诱导乳酸乳球菌的降解活性。     

不同谷物对断奶马驹肠道发育的影响

为探究饲喂不同谷物对马驹肠道发育的影响,选择平均体重为(112.39±7.50) kg、5月龄断奶的哈萨克马公马驹为研究对象,马驹均在2019年3月出生(±5 d),7月31日统一人工干预断奶,且健康状况良好。将18匹断奶的马驹根据补饲谷物不同随机分为3个组,分别为玉米组(6匹)、燕麦组(6匹)和大麦组(6匹)。在马驹精料补充料中淀粉摄入量相等条件下,按照马驹每千克体重补喂2 g淀粉(干物质)来计算玉米、燕麦和大麦的实际补喂量,进行60 d的饲养试验。在试验结束后将马驹进行屠宰,分别取十二指肠、空肠、回肠、盲肠和结肠等肠段的中段组织5 cm,迅速置于4%多聚甲醛固定液中保存,用于后续组织形态测定。结果表明,十二指肠隐窝深度,玉米组马驹比燕麦组显著降低21.06%(P<0.05);十二指肠绒毛高度与隐窝深度比值(V/C),玉米组马驹比燕麦组极显著提高36.45%(P<0.01),比大麦组显著提高18.22%(P<0.05);玉米组可提高马驹空肠和回肠绒毛高度、V/C值与黏膜厚度,降低空肠隐窝深度(P>0.05)。盲肠黏膜厚度,大麦组马驹分别比玉米组和燕麦组显著增加...     

屎肠球菌细胞外囊泡对小鼠生长性能、肠道形态和粪便菌群的影响

【目的】探究屎肠球菌细胞外囊泡（Enterococcus faecium extracellular vesicles,Efm-EV）对小鼠生长 性能、免疫、肠道形态和粪便菌群的影响,为屎肠球菌作为微生物饲料添加剂在动物生产中的推广应用提供理论依 据。【方法】将 20 只雄性 C57BL/6 小鼠随机分为对照组和试验组,每组 10 个重复,每个重复 1 只小鼠。试验期为 5 d,试验组小鼠每隔 1 d 灌胃含有 500 μg 的 Efm-EV 悬液,每只灌胃 150 μL;对照组小鼠灌胃等量 PBS 溶液。记 录小鼠每天的采食量、试验开始和结束时的体重,计算小鼠的平均日增重、平均日采食量、料重比 。【结果】与 PBS 处理相比,Efm-EV 处理小鼠的终末体重 、平均日增重、平均日采食量、料重比没有显著变化。Efm-EV 处理 小鼠的血清 IgA 和 IgG 水平与 PBS 处理小鼠相比显著下降（P ＜ 0.05）,而小鼠血清 IL-10 水平显著提升（P ＜ 0.05）, TNF-α 无显著变化。与 PBS 处理相比,Efm-EV 处理小鼠十二指肠绒隐比显著提高（P ＜ 0.05）,而小鼠十二指肠 绒毛高度、隐窝深度,空肠和回肠的绒毛高度、隐窝深度、绒隐比无明显变化。灌胃 Efm-EV 处理小鼠粪便菌群在 门水平上提高了厚壁菌门（Firmicutes）的细菌数量,降低了拟杆菌门（Bacteroidetes）的细菌数量;在科水平上提 高了毛螺菌科（Lachnospiraceae）的丰度,降低了 Muribaculaceae 科的丰度;在属水平上显著提高了小鼠瘤胃球菌 科 UCG009 （Ruminococcaceae UCG 009）的丰度（P ＜ 0.05）。【结论】灌胃 Efm-EV 能够提高小鼠机体的抗炎水 平,改善小鼠十二指肠形态结构,提高瘤胃球菌科 UCG009 的相对丰度。     

树舌发酵浸膏多糖对肉鸡肠黏膜组织结构及肠道免疫细胞的影响

为研究肉鸡日粮中添加树舌发酵浸膏多糖(Polysaccharides from the fermentation concentrate of Ganoderma applanatum(Pers.ex Gray.),GAP)对肉鸡肠黏膜结构及上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量的影响,选用1日龄健康AA肉鸡225只,随机分成5个处理组,每组3次重复,每次重复15只。5个处理组分别为空白对照组(基础日粮)、抗生素阳性对照组(基础日粮+5mg/kg黄霉素)和3个GAP组(基础日粮中分别添加0.05%、0.10%和0.20%GAP),试验期42d。结果表明:1)与对照组相比,日粮中添加0.10%和0.20%的GAP可显著增加肉鸡肠绒毛高度(P0.05),降低隐窝深度(P0.05),提高肠绒毛高度和隐窝深度的比值(V/C)(P0.05);2)与对照组相比,日粮中添加0.10%和0.20%GAP显著升高小肠各段的上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量(P0.05);3)小肠各段上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量随年龄增长而逐渐增多;4)同一日龄各试验组的上皮内淋巴细胞数量从十二指肠到回肠递减,而杯状细胞则呈递增趋势。以上结果提示:在肉鸡日粮中添加GAP可显著改善肉鸡小肠黏膜结构,维持肠道黏膜的正常屏障结构,促进肉鸡健康生长。其中以0.10%GAP添加量效果最好。     

乳酸对仔猪消化酶发育的影响

为了研究乳酸对断奶仔猪消化酶发育的影响,采用144头刚断奶的杜大长商品仔猪,随机分为对照组（基础饲粮）、基础+3 g·kg-1乳酸酸化剂组和基础+6g·kg-1乳酸酸化剂组,试验为期28 d。分别在试验第7,14和28天,每组屠宰9头试验猪,分别取胃和十二指肠内容物、取十二指肠和空肠用于组织切片,用无菌玻片刮取小肠黏膜用于测定黏膜酶活。测定了添加乳酸对饲料pH和缓冲值、仔猪胃和十二指肠内pH、胃内容物胃蛋白酶活性、小肠内容物胰蛋白酶活性和二糖酶活性、小肠绒毛高度和黏膜二糖酶活性。结果表明：添加乳酸降低了饲料和胃内 pH,显著提高仔猪胃内容物胃蛋白酶活性;提高小肠内容物胰蛋白酶和二糖酶活性;提高十二指肠和空肠绒毛高度,提高了小肠黏膜二糖酶的活性。结果表明,添加乳酸能促进仔猪消化酶的发育,并通过胃和小肠多个环节的作用,提高仔猪对饲料营养物质的消化能力,从而促进仔猪的生长。     

戊糖片球菌HS2细胞制备γ-氨基丁酸的研究

采用戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)HS2细胞转化L-谷氨酸一钠制备γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)。通过对转化反应温度、pH值、金属离子、底物浓度、菌体浓度和菌体培养时间等因素对HS2细胞转化法生产GABA的影响进行了考查,确定转化反应体系最优的组成为:采用培养12h的菌体、湿菌体50mg/mL、Ca2+50mmol/L、L-谷氨酸一钠10g/L和L-谷氨酸50g/L。当该体系在pH值4.5、35℃、120r/min搅拌下反应48h,转化液中GABA的浓度达到(39.89±2.12)g/L,摩尔转化率为(97.00±5.16)%。     

重组乳酸乳球菌对模拟胃肠道的耐受力研究

[目的]研究重组菌株在不同p H胃液和胆盐浓度肠液中的生存情况,验证重组菌株能否在肠道中发挥作用,为其制备基因工程活载体疫苗、新型免疫型微生态制剂及功能发酵食品提供理论依据。[方法]人工模拟人体胃肠道环境,研究表达金黄色葡萄球菌纤黏蛋白原凝集素A(Clf A)的重组乳酸乳球菌MG1363/p MG36c-clf A菌株在不同p H胃液和胆盐浓度的肠液中的耐受力。[结果]重组菌株在p H 3.0的人工胃液中处理2 h后,存活率约为88.6%;在0.3%胆盐浓度的人工肠液中处理2和4 h后,存活率约为83.6%和68.2%。[结论]重组菌株对胃肠道环境有较强的耐受力,适合制备基因工程活载体疫苗、新型免疫型微生态制剂及功能发酵食品。     

乳酸菌对Caco-2细胞分泌APRIL和IL-10的影响

【目的】通过检测促炎细胞因子APRIL和抗炎细胞因子IL-10的分泌水平来观察屎肠球菌和乳酸乳球菌对肠上皮细胞先天性免疫应答的调节作用。【方法】Caco-2细胞分别和PBS（CT组,阴性对照组）、Escherichia coli K88（EC组,阳性对照组）,Enterococcus faecium（EF组）或Lactococcus lactis（LL组）共孵育2 h,以及先分别和Enterococcus faecium或Lactococcus lactis共孵育1 h,再和Escherichia coli K88共孵育2 h（EF-EC组和LL-EC组）。试验结束时,用ELISA方法检测细胞培养上清中APRIL和IL-10的含量。【结果】结果表明,2株乳酸菌都促进正常状态下的肠上皮细胞分泌促炎细胞因子APRIL和抗炎细胞因子IL-10,抑制Escherichia coli K88对APRIL分泌的诱导作用,促进Escherichia coli K88感染的肠上皮细胞分泌IL-10。【结论】体外试验条件下,屎肠球菌和乳酸乳球菌能够诱导肠上皮细胞产生先天免疫应答,分泌APRIL和IL-10,抑制大肠杆菌K88引起的促炎反应,表现出抗炎作用。     

中草药添加剂对肉鸡肠道结构的影响

为了研究以白头翁、黄芪、黄连、党参、大黄等药材组成的中草药添加剂对肉鸡肠道结构的影响。本试验选用1日龄健康Rose308肉鸡200只,随机分为5组,每组4个重复。Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮;Ⅱ~Ⅴ组为试验组,在基础日粮中分别添加0.5%、1.0%、1.5%、2.0%的中草药添加剂。试验期42 d。结果表明:(1)Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组均使得肠黏膜上皮结构完整,层次清晰;(2)Ⅳ组十二指肠和空肠绒毛高度均得到提高,21 d和42 d时较对照组分别提高8.92%(P0.05)、9.01%(P0.05)和23.04(P0.01)、8.52(P0.05);(3)Ⅳ组可降低42 d时十二指肠和空肠隐窝深度,较对照组分别降低6.80%(P0.05)和10.28(P0.05);(4)Ⅳ组十二指肠和空肠V/C值均得到提高,21 d和42 d较对照组分别提高12.22%(P0.01)、11.58%(P0.05)和32.02%(P0.01)、15.44%(P0.01);(5)各组肠壁厚度差异不显著(P0.05)。结果显示:肉鸡日粮中添加此中草药添加剂可提高小肠绒毛高度,降低隐窝深度,增加V/C值,改善肠道黏膜形态结构,促进肉鸡健康生产,其中1%~1.5%添加量效果较好。     

戊糖片球菌HM04发酵对无花果浆主要代谢产物及抗氧化活性的影响

为工业化利用无花果,研究无花果浆的成分及生物活性经戊糖片球菌HM04(Pediococcus pentosaceus HM04)发酵的动态变化。以纯培养的菌悬液接种灭菌的无花果浆,利用高效液相色谱仪和顶空固相微萃取—气质联用技术等对发酵过程中的各项指标等进行分析测定,结果表明,戊糖片球菌HM04在无花果浆中生长良好,在24 h时活菌数能达到6.166×108 cfu/g,发酵后葡萄糖、果糖、pH减小,总酸增加,发酵后柠檬酸、苹果酸和酒石酸下降,琥珀酸、乳酸和乙酸增加,富马酸变化不显著。发酵果浆中除具有无花果的特征香气成分苯甲醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、己醛等醛类和芳樟醇、1-辛烯-3-醇等醇类外,又生成了许多新的醇类、醛类、酮类、酯类和酸类,赋予了发酵无花果浆独特的风味。发酵后总酚、没食子酸、绿原酸和阿魏酸显著增加,对香豆酸减少,总黄酮、芦丁显著下降,SOD酶活显著增强,相应的DPPH、ABTS和羟基自由基清除能力较发酵前分别提高23.73%、37.18%和25.01%,总还原力也显著增强。戊糖片球菌HM04展示了较好的发酵无花果浆的特性和能力。     

鸡源戊糖片球菌微胶囊制剂对肉仔鸡生产性能和免疫器官指数的影响

【目的】探讨戊糖片球菌微胶囊的最佳包埋条件及该微胶囊制剂对肉仔鸡生产性能和免疫器官指数的影响。【方法】以从散养成年地方鸡种(草科鸡)公鸡盲肠筛选得到的戊糖片球菌(编号CGMCC No.6566)为对象,设计L9(34)正交试验,筛选制备该戊糖片球菌微胶囊的最佳配方,并检测该制剂对人工胃液的耐受性、肠溶性及贮存稳定性。将120只1日龄健康AA肉鸡随机分成两组,组内3个重复,对照组饲喂基础日粮,饲喂组在基础日粮中以拌料的方式添加1g/kg戊糖片球菌微胶囊,饲喂6周,对肉仔鸡生产性能和免疫器官指数进行测定。【结果】①戊糖片球菌微胶囊包埋产率最高可达80.44%,且产品具有较好的耐酸性与肠溶性,在室温(20℃)下具有较好的贮存稳定性;②饲喂戊糖片球菌显著提高了肉仔鸡的生产性能,全期平均增重较未添加组(对照组)提高13.36%,料肉比降低6.07%,显著提高胸肌率和腿肌率,胸肌率较未添加组提高15.58%,腿肌率提高11.07%,胸腺、脾脏、法氏囊指数与对照组比较差异不显著。【结论】在试验期内持续添加戊糖片球菌微胶囊可提高肉鸡饲料利用率,提高生长性能,同时也能改善肉鸡产肉性能。     

益生菌对肉仔鸭肠道结构的影响

选取1日龄樱桃谷肉鸭250羽,随机分成5组,每组5个重复,每重复10羽。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮中添加0.04%益生菌替代50%抗生素试验日粮。结果表明,替代50%抗生素的地衣芽孢杆菌能显著刺激十二指肠绒毛生长,提高肠道消化能力(P<0.01);空肠结构中,绒毛高度/隐窝深度指数均显著提高(P<0.05);回肠结构中,其隐窝深度变浅,绒毛高度/隐窝深度指数显著增高(P<0.01)。结果显示,肉鸭日粮添加0.04%益生菌替代50%抗生素可提高小肠绒毛高度,降低隐窝深度,增加V/C值,改善肠道黏膜形态结构,促进肉鸭健康生产。