二色胡枝子黄酮抗氧化活性的研究

通过二色胡枝子黄酮(Lespedeza bicolor flavonoids,LBF)清除羟自由基、超氧阴离子的效果及抑制猪油、菜油、和亚油酸的自氧化来研究二色胡枝子黄酮的抗氧化活性.其研究结果表明,二色胡枝子黄酮对清除自由基有显著性作用,且清除率随黄酮浓度的增加而增大;能够极显著地抑制猪油、菜油、亚油酸的自氧化(P＜0.01),抑制作用随浓度的增大而增强.作为天然的抗氧化剂,二色胡枝子黄酮具有一定的开发利用价值.     

二色胡枝子总黄酮提取及富集工艺研究

[目的]研究二色胡枝子黄酮的最佳提取工艺与富集参数。[方法]选取分布于内蒙古自治区的二色胡枝子为试验材料,通过单因素试验研究乙醇浓度、料液比、提取时间和提取温度对其总黄酮提取的影响,通过L16（4^4）正交试验确定该黄酮的最佳提取工艺。采用SP700大孔吸附树脂对其进行纯化与富集,通过L9（3^3）正交试验确定该黄酮的最佳富集参数。[结果]二色胡枝子叶中黄酮含量高于茎中黄酮的含量。影响黄酮提取率的因素大小依次为乙醇浓度〉料液比〉温度〉时间。该黄酮的最佳提取工艺为40％乙醇、温度70℃、料液比1：30、时间3．0h。提取率为5．228％。该黄酮的最佳富集参数为进样速度1．5ml／min、80％乙醇洗脱、洗脱速度2．0ml／min。[结论]该研究为进一步开发二色胡枝子资源提供参考依据。     

二色胡枝子种子硬实特性的研究

二色胡枝子种子硬实性与种子形态差异有明显相关。黑色种子粒级大，千粒重高，种子硬实率达６０．０％，褐色种子粒级小，千粒重低，种子硬实率为２５．３９％。采用多种方法解除硬实效果表明，９０℃热水浸泡种子３０ｍｉｎ左右能起到解除硬实，提高发芽率的效果，硬实解除后黑色种子发芽率（９５．０％）高于褐色种子发芽率（８５．０％），初步认为，种子颜色差异是种子成熟度不同造成的，或者是色素在种皮中的堆积度不同造成的。     

二色胡枝子扦插繁殖育苗技术研究

为了推广二色胡枝子的优良无性系,对其扦插繁殖育苗技术进行了研究.结果表明:嫩枝扦插是二色胡枝子无性繁殖的主要方式.春末夏初选择当年生枝条的稍部作为插穗,100 mg·L-1NAA处理插穗2 h,扦插过程在自动间歇喷雾条件下进行,二色胡枝子嫩枝扦插成活率可达87以上.二色胡枝子硬枝扦插较为困难,清水处理的插穗成活率为0,采用NAA 200 mg·L-1处理插穗,成活率达到40.     

张家口地区二色胡枝子优良种源选择及栽培技术研究

[目的]筛选出适合张家口地区种植的二色胡枝子种源。[方法]以引自美国乔治亚州（A1）和河北宣化县（A2）的二色胡枝子为试材,通过播种栽培试验筛选出了适宜当地栽种的二色胡枝子。[结果]8月中旬后A1生长迅速,其株高超过A2。A1在试验地区的株高生长表现好于A2。无论是A1还是A2,间作1行和间作2行的株高和地径生长差异不显著。无论是间作1行还是间作2行,年底时A1的株高生长优于A2,但其地径生长差异不明显。A1间作1行的单丛叶生物量最高,达85.9g。A1间作1行和2行的单位面积叶生物量分别为286.5和464.9kg/hm2,A2的分别为148.1和257.7kg/hm2。与间作1行相比,A1间作2行的叶产量提高了62%。A1和A2的粗蛋白和能量含量差异不显著。[结论]在冀西北地区利用二色胡枝子发展饲料生产,目前最宜于选择的种源是美国乔治亚州种源。     

达乌里胡枝子黄酮抗氧化活性研究

【目的】探讨达乌里胡枝子黄酮(Lespedeza davurica flavonoids,LDF)的体外抗氧化作用。【方法】分别采用Fenton反应法、邻苯三酚自氧化法和碘-硫代硫酸钠滴定法,测定达乌里胡枝子黄酮对羟自由基、超氧阴离子的清除作用及对猪油、菜油、亚油酸氧化酸败的抑制作用。【结果】达乌里胡枝子黄酮对羟自由基、超氧阴离子有较强的清除作用,在一定范围内,清除效果随质量浓度的升高而加强。当添加的达乌里胡枝子黄酮的质量浓度为1.0mg/mL时,其对羟自由基的清除作用达到最大,为97.44%;当质量浓度为0.48mg/mL时,其对超氧阴离子的清除作用最大,可达97.89%;达乌里胡枝子黄酮对猪油、菜油、亚油酸也有极强的抗氧化作用,能够极显著地抑制猪油、菜油过氧化值(POV)的升高(P<0.01)和亚油酸的氧化(P<0.01),这种抑制效果随着达乌里胡枝子黄酮质量浓度的升高而增大。【结论】达乌里胡枝子黄酮具有显著的抗氧化活性,其药用价值值得关注。     

尖叶胡枝子黄酮抗氧化活性的研究

通过尖叶胡枝子黄酮(Lespedeza hedysaroides flavonoids,LBF)清除羟自由基、超氧阴离子的效果及抑制猪油、菜油、和亚油酸的自氧化来研究尖叶胡枝子黄酮的抗氧化活性.结果表明,尖叶胡枝子黄酮对羟自由基和超氧自由基有较强的清除作用,清除率随黄酮浓度的增加而增大,分别达到98.85和100,且能够明显抑制猪油、菜油、亚油酸的自氧化,抑制作用随浓度的增大而增强.作为天然的抗氧化剂,尖叶胡枝子黄酮具有一定的开发利用价值.     

二种化合物对二色胡枝子形态分化的影响

试验以组织培养为试验手段,以二色胡枝子播种得到的无菌苗作为试验材料,以头孢霉素、氯化钠2种化合物为添加剂,设置不同的浓度梯度,分别添加于二色胡枝子子叶节分化、茎段增殖、茎段生根培养基。结果表明:子叶节分化能力大于茎段,较低浓度的化合物对子叶节分化的影响不大,子叶节分化能力随化合物浓度增大而减弱。2种化合物对茎段增殖抑制作用明显,但随浓度变化不明显。2种化合物对茎段生根的抑制作用较子叶节分化、茎段增殖强。     

二色胡枝子种子硬实特性的研究

二色胡枝子种子硬实性与种子形态差异有明显相关。黑色种子粒级大，千粒重高，种子硬实率达６０．０％，褐色种子粒级小，千粒重低，种子硬实率为２５．３９％，采用多种方案解除硬实效果表明，９０℃热水浸泡种子３０ｍｉｎ左右能起到解除硬实，提高发芽率的效果，硬实解除后黑色种子发芽率（９５．０％）高于褐色种子发芽率（８５．０％），初步认为，种子颜色差异是种子成熟度不同造成的，或者是色素在种皮中的堆积度不同造成的。     

尖叶胡枝子总黄酮含量测定方法(比色法)的优化

采用NaOH-Al(NO3)3-NaNO2比色法对尖叶胡枝子的总黄酮含量进行测定。以芦丁为对照品,检测波长为510nm。结果表明,在0~1g·L-1范围内,芦丁吸光度与其质量浓度呈良好的线性关系(r2=0.999 8),对测定方法的稳定性、精密度、重现性及回收率进行试验,相对标准偏差(RSD)为0.199%~1.023%。根据拟合的线性回归方程对尖叶胡枝子不同提取液中总黄酮进行定量,所得测定数据分别为0.029 0、0.024 0、0.315 0、0.379 0和0.012 4g·L-1。该方法简便、快速、准确,可作为尖叶胡枝子中总黄酮含量的测定方法。     

黄土丘陵区白羊草与达乌里胡枝子混播草地生产力与土壤水分利用研究

为合理利用黄土丘陵区优良乡土草种,并寻求利用其进行人工草地建设的最佳混播比例组合,选取白羊草(Bothriochloa isaemum)和达乌里胡枝子(Lespedeza davurica)为研究材料,采用生态替代法,按照二者行比设置7种混播比例组合(即0∶10,2∶8,4∶6,5∶5,6∶4,8∶2和10∶0),比较研究混播比例对草地植株株高、地上生物量和水分利用效率等的影响。结果表明:混播草地中白羊草与达乌里胡枝子的株高均明显高于各自单播草地;混播草地的地上生物量和水分利用效率均显著高于二者各自单播草地;草地地上生物量和水分利用效率以白羊草和达乌里胡枝子混播比例为6∶4的显著最高,单播达乌里胡枝子草地(即0∶10比例组合)显著最低。表明,白羊草与达乌里胡枝子存在混播互补效应,其中比例组合为6∶4的草地在生物量和水分利用效率方面具有比较优势。     

天山雪莲SikP基因提高类黄酮质量分数的研究

通过分子克隆技术人工调控天山雪莲类黄酮代谢过程,以提高其类黄酮质量分数。采用农杆菌介导法将SikP基因的植物表达载体转入天山雪莲叶片,成功获得转SikP基因天山雪莲抗性愈伤组织及从生芽;提取并检测对照组和转SikP基因天山雪莲的类黄酮,结果显示,转SikP基因天山雪莲的类黄酮质量分数明显提高,是对照组天山雪莲类黄酮质量分数的9.63倍。说明,天山雪莲Myb转录调控因子SikP基因对天山雪莲次生代谢具有重要的调控作用,能够有效地提高天山雪莲类黄酮的质量分数。     

绞股蓝总黄酮的提取工艺及抑菌性质

以陕西道地药食两用的中药材绞股蓝为研究对象,以乙醇回流提取为基础,增加溶剂浸泡的考查,通过单因素试验和Box-Behnken响应面法对绞股蓝总黄酮提取工艺进行优化。结果表明：绞股蓝总黄酮的最佳提取条件为乙醇浓度80.0%,提取温度59.40℃,料液比1∶10.10,浸泡时间30 min,回流时间120 min,在此条件下绞股蓝总黄酮的提取率平均值为3.80%（RSD=94.88%）,经验证,绞股蓝总黄酮提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、伤寒杆菌、黑曲霉、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌8种测试菌均有抑制活性。     

福赛斯坦纳菌体外培养实验技术的研究

目的 探索福赛斯坦纳菌生长繁殖的基本条件,比较N-乙酰胞壁酸及不同营养因子对其生长繁殖的影响,筛选该菌体外培养的最佳营养条件,建立其体外培养的技术方法。方法 （1）培养基制备：在血平板中加0.005% N-乙酰胞壁酸形成改良培养基;制备血平板与不同浓度（0.5、3、10、50、100 mg/L）的N-乙酰胞壁酸形成的培养基;制备10 mg/L N-乙酰胞壁酸与氯化血红素、酵母提取物、维生素K₃、脱纤维羊血组合形成不同组别的培养基。（2）接种培养后,用磷酸盐缓冲液将细菌洗脱,并用酶标仪（OD₆₀₀）测定其吸光度。结果 福赛斯坦纳菌在含N-乙酰胞壁酸的培养基中生长更好,浓度为10 mg/L时促进作用最明显且细菌形态更为典型。在组3培养基中生长最快。结论 N-乙酰胞壁酸能促进福赛斯坦纳菌的生长繁殖,浓度为10 mg/L时促进作用最明显;N-乙酰胞壁酸及氯化血红素、维生素K₃、酵母提取物和脱纤维羊血组合能使其生长周期明显缩短。     

超声波辅助黄芩总黄酮提取及抗氧化性能研究

研究采用超声辅助法对黄芩中的黄酮类化合物进行提取并考察其抗氧化性能。探索了乙醇浓度、提取温度、料液比等工艺参数变化对黄酮收率的影响。当以60%的乙醇、1∶40的料液比、70 ℃提取1.5 h、超声辅助提取时间为40 min时,获得最高黄酮提取率为8.53%。黄芩黄酮具有抗氧化性且存在浓度依赖。     

胡椒木叶片离体培养与植株再生

探讨了胡椒木(Zanthoxylum piperitum)叶片的离体培养.选取胡椒木幼嫩叶片作为外植体,接种在不同激素组合的培养基上进行诱导培养,结果表明,最适的诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.7 mg/L,分化率为91.7%,最适的增殖继代培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.7 mg/L,所产生的不定芽在1/2MS+ NAA0.4 mg/L的培养基上可全部生根,长成完整植株.首次证明以胡椒木的叶片为外植体可以进行快速离体培养.     

异源表达菊芋HtHCT基因对受体植物木质素相关生理生化指标的影响

羟基肉桂酰辅酶A:莽草酸/奎宁酸羟基肉桂酰转移酶（HCT）是木质素合成过程中的关键酶之一。本研究构建了菊芋HtHCT基因的植物表达载体pCAMBIA1390-HtHCT,分别对拟南芥和本氏烟进行遗传转化,并对转基因植株进行生理生化指标测定。PCR和RT-PCR结果表明,HtHCT基因已经插入到受体植物基因组中,并能进行转录;转基因植株生理生化指标检测表明,HtHCT基因能够调节拟南芥和本氏烟中木质素的含量及组成,并对受体材料的类黄酮合成亦有一定的影响。     

小檗碱体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性的研究

目的 研究小檗碱体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）活性。方法 运用琼脂扩散法、液体稀释法测定并分析小檗碱对MRSA的抑菌环大小、最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）;运用96孔酶标板结晶紫法测定并分析小檗碱对MRSA的最小生物膜清除浓度（MBEC）。结果 与DMSO比较,小檗碱与氯霉素（阳性对照药物）可显著增加MRSA的抑菌环半径（P<0.01）,小檗碱对MRSA的MIC为0.2 mg/mL,MBC为0.4 mg/mL;小檗碱对MRSA的MBEC为0.2 mg/mL。结论 小檗碱对MRSA有比较明显的抗菌、抑菌作用,其效应机制可能与其抑制细菌生物膜的形成有关。     

粪肠球菌益生特性的体外评价

通过体外法研究粪肠球菌的生长特点、耐酸性、耐胆盐性和抑菌性等，以评价其益生效果。结果表明：①粪肠球菌在培养2 h后进入对数期，8 h到达稳定期；② 经pH 2、3、4的人工胃液处理3 h后，粪肠球菌极显著降低至2.71×10⁵、1.03×10⁷和5.65×10⁷CFU/mL（P<0.01）；③粪肠球菌经含质量分数为0.2%和0.3%的胆盐溶液处理3 h后，极显著降低至1.46×10⁶和1.37×10⁶ CFU/mL（P<0.01）；④粪肠球菌对大肠杆菌O₁和O₇₈均在混合培养至10 h时表现极显著的抑制作用（P<0.01）。可见，粪肠球菌生长繁殖速度快，能耐受胃肠道环境，对大肠杆菌O₁ 和O₇₈有一定的抑制作用，适合作为微生态制剂的生产菌种。