中草药对乳牛乳腺炎主要病原菌的体外抗菌活性试验

采用试管二倍稀释法，测定了金银花、连翘和蒲公英等12种中草药及其复方制剂对乳牛乳腺炎主要病原菌(大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和停乳链球菌)的体外抗菌活性(MIC和MBC)。试验结果表明，金银花、连翘和蒲公英及其复方制剂对这4种病原菌均具有较强的体外抗菌活性。     

连翘酯苷对小鼠的急性毒性及体内诱生IFN-α的研究

测定连翘酯苷对小鼠腹腔注射急性毒性试验的半数致死量(LD50),检测连翘酯苷体内诱生干扰素的效果.腹腔注射连翘酯苷,用改良寇氏法计算半数致死量.眼部采血,ELISA方法测定血清中IFN-α.测得连翘酯苷对小鼠腹腔注射急性毒性的LD50为1 976.5 mg/kg,LD50的95%可信限为1 863.7 mg/kg～2 096.1 mg/kg.连翘酯苷诱生干扰素在48 h达到最高峰845.8 pg/mL±150.92 pg/mL(P＜0.01).表明连翘酯苷为低毒化合物,体内能够诱生IFN-α.     

连翘酯苷药理活性研究进展

连翘酯苷作为中草药连翘中一个主要的有效成分,具有广泛的药理学活性。连翘酯苷不仅能抑制引起感染的各种革兰氏阳性菌和阴性菌,而且还具有较强的抗病毒作用。连翘酯苷通过调控各种细胞因子,发挥免疫调节作用,同时通过清除体内的自由基,发挥抗氧化作用。作者针对连翘酯苷药理学活性进行了综述。     

连翘酯苷对体外培养细胞的毒性研究

探讨了连翘酯苷对体外培养细胞的毒性,以期为人们更好地研究利用连翘酯苷提供实验依据。实验采用细胞病变法观察连翘酯苷对猪肾细胞（PK-15）、猴肾细胞（Mare-145）、鸡胚肾细胞（CEK）、鸡外周血淋巴细胞（PBL）等4种细胞的形态损伤;用MTT法检测连翘酯苷作用这4种细胞后的细胞活性和细胞数量的变化。根据这两种方法的结果计算出连翘酯苷对这4种细胞的半数致死量。实验结果显示高剂量的连翘酯苷可致细胞发生病变,而低剂量组的细胞形态优于对照组。经SPSS16．0统计,连翘酯苷对PK-15、Mare-145、CEK3种细胞的半数致死量分别为137．8、87．1、384．4μg／mL,对PBL应用到中华人民共和国兽药典（2000年版）规定药量的10倍剂量,结果未发现致死性。因此,适当合理的连翘酯苷用量对体外培养的细胞没有毒性,反而有一定的维持细胞形态的营养作用和刺激细胞增殖的作用。     

抑制奶牛乳腺炎致病菌的中药复方筛选及其抗炎效果研究

为研究可有效抑制奶牛乳腺炎主要致病菌的中药复方及其抗炎效果,通过对黄连、黄柏、赤芍、苦参、连翘等5味中药进行正交试验设计组方,采用平板打孔法、试管二倍稀释法分别研究了各单味中药及其复方对金黄色葡萄球菌、停乳链球菌、无乳链球菌和大肠杆菌的体外抑菌效果,同时研究了筛选出的中药复方的不同剂型对二甲苯致小鼠耳肿胀的急性炎症和棉球致肉芽肿的慢性炎症的抑制效果。结果表明,对5味中药的敏感性强弱依次为对无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌;中药方剂3和方剂7对4种细菌的体外抑菌活性较强,且以方剂3的搽剂及膏剂对急、慢性炎症具有良好的抑制效果。     

TLC法检测银翘天甘复方制剂中的连翘苷

银翘天甘复方制剂是由金银花、连翘、天花粉和甘草四味中药组成,具有良好的抗菌、抗病毒、抗炎解热等功效.其中,连翘的主要成分为连翘苷、连翘酯苷、连翘酯素.目前,测定中药复方制剂中连翘苷的含量多采用高效液相色谱法(HPLc).本试验旨在应用薄层色谱(TLC)法对银翘天甘复方制剂中的连翘苷进行测定.     

抑制奶牛乳腺炎主要致病菌的中药复方筛选及其抗炎效果研究

为筛选和研究可有效抑制奶牛乳腺炎主要致病菌的中药复方及其抗炎效果,本文通过对黄连、黄柏、赤芍、苦参、连翘等5味中药进行正交试验设计组方,采用平板打孔法、试管二倍稀释法分别研究了各单味中药及其复方对金黄色葡萄球菌、停乳链球菌、无乳链球菌和大肠杆菌的体外抑菌效果,同时研究了筛选出的中药复方的不同剂型对二甲苯致小鼠耳肿胀的急性炎症和棉球致肉芽肿的慢性炎症的抑制效果。结果表明,4株菌对5味中药的敏感性强弱依次为无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌;中药方3和方7对4种菌的体外抑菌活性较强,且以方3的搽剂及膏剂对急、慢性炎症具有良好的抑制效果。本研究结果为研制防治临床奶牛乳腺炎的药物提供了试验依据。     

黄芩苷、连翘酯苷对肺微血管内皮细胞分泌IFN-α、IFN-γ的影响

为了研究黄芩苷、连翘酯苷对大鼠肺微血管内皮细胞（pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs）分泌IFN-α、IFN-γ的影响,本试验以体外培养的PMVECs为模型,用ELISA法检测这2种中药成分在不同浓度、不同时间点诱导PMVECs分泌IFN-α和IFN-γ的量。结果表明,黄芩苷在10 μg/mL,24 h时诱导PMVECs分泌的IFN-α和IFN-γ的量均最高,连翘酯苷分别在20 μg/mL、12 h时和5 μg/mL、24 h时诱导PMVECs分泌的IFN-α和IFN-γ的量最高。这一结果为体外筛选诱导PMVECs表达干扰素的中药成分提供了参考,为进一步研究中药成分的抗病毒机理奠定了基础。     

8味中药对奶牛乳房炎病原菌的体外抑菌试验

选用金银花、连翘、蒲公英等8味中药分别采用乙醇回流法进行提取,用试管二倍稀释法测定来自奶牛乳房炎的3种主要致病菌(金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌)的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果显示,以金银花和连翘对金黄色葡萄球菌抑菌效果最强,MIC值均为15.63mg/mL,其MBC值为31.25mg/mL和62.5mg/mL;芙蓉花对大肠杆菌和无乳链球菌的效果最强,MIC值为31.25mg/mL和15.63mg/mL,MBC值为62.5mg/mL。本试验结果,对临床用药选取合适的中药有直接的指导意义,同时为体内用药的浓度提供参考依据。     

连翘等8种中药对奶牛乳房炎致病菌的药敏试验结果

为了给治疗奶牛乳房炎的相关中药制剂的开发提供理论依据,选取化脓链球菌、停乳链球菌、表皮葡萄球菌、克雷伯氏菌、化脓棒状杆菌、无乳链球菌等6种奶牛乳房炎致病菌,采用连翘、蒲公英、紫花地丁、瓜蒌、天花粉、白附子、金银花、木鳖子及其复方进行药物敏感度试验,结果表明,对于化脓链球菌,白附子、连翘高敏,紫花地丁、复方中敏;对于停乳链球菌,紫花地丁、瓜蒌、白附子、连翘高敏,蒲公英、复方中敏;对于表皮葡萄球菌,白附子、连翘高敏,金银花、复方中敏,瓜蒌低敏;对于克雷伯氏菌,白附子、复方高敏,连翘中敏;对于化脓棒状杆菌,紫花地丁、瓜蒌、白附子、连翘、复方极敏,蒲公英、金银花高敏;对于无乳链球菌,连翘、白附子极敏,复方、瓜蒌、天花粉、蒲公英、紫花地丁高敏;木鳖子对于6种致病菌均无抑菌效果。     

七种常用渔药及组合对罗非鱼致病性海豚链球菌的抗菌试验

探讨了7种常用抗菌渔药对罗非鱼致病性海豚链球菌的体内外抗菌作用.采用二倍稀释法测定了7种渔药对致病菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);在初筛基础上以MIC为单位,1×MIC、5×MIC、10×MIC和20×MIC下平板抑菌圈直径为参数,分别比较所筛选5种药物抗菌效果并优化最佳参数;利用优化的最佳参数比较5种药物单独用药与联合用药对海豚链球菌的抑菌效果;并通过拌饵投喂给药方式对罗非鱼进行5种药物治疗性给药试验.结果表明,抗菌先锋对海豚链球菌的MIC和MBC最小,分别为6.4、12.8μg/mL,其次是伯乐立康,均为12.8μg/mL;而鱼康和肠炎烂鳃灵即使在1638.4μg/mL下也无抗菌效果.5倍MIC下抑菌圈直径为本试验筛选抗菌药物的最佳参数.5MIC时,海豚链球菌对伯乐立康和抗菌先锋敏感,对菌必清、菌毒康和海鱼安中度敏感.菌毒康与海鱼安的联合抗菌效果最佳.鱼体内抗菌试验结果表明,抗菌先锋和伯乐立康的治疗有效率超过75%,达到了理想的治疗效果,是防治罗非鱼海豚链球菌病的首选药物.     

改良千里光注射液的体内外抗菌作用及安全性

分别用3种不同浓度乙醇进行醇提水沉法渗漉，制备了千里光原液。然后经高浓度乙醇法除去蛋白质、醇溶液调pH值法除去鞣质以及乙醚脱色等步骤进行除杂脱色，制备改良千里光注射液。对改良千里光注射液进行安全性检验、体外抑菌和体内抗感染试验，结果表明，用78％乙醇提取、制备的改良千里光注射液对肠炎沙门氏菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌均有明显的抑制作用，体内抗感染作用显著，而且具有很好的澄明度和安全性。     

黄芪提取物对常见致病菌的体内外抑菌活性测定

为了研究黄芪提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌的抑菌活性,采用试管二倍稀释法,测定黄芪提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌活性;采用相同浓度致病菌灌胃小鼠后,分别用黄芪提取物灌胃治疗,测定小鼠十二指肠、空肠、回肠和盲肠中肠道菌群数量,以确定黄芪提取物的体内抑菌活性.结果表明,无论是在体外还是在体内,黄芪提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均具有抑制作用,对大肠杆菌的抑制作用最强,对沙门氏菌的抑制作用最弱;且通过灌注黄芪提取物,显著降低了各种致病菌致病后小鼠的死亡率.通过研究可以得出,黄芪提取物对常见的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌具有较明显的体内外抑菌作用.     

体外培养对布氏锥虫伊氏亚种药敏性的影响

用小鼠治疗试验和体外药敏试验观察了4个布氏锥虫伊氏亚种虫株在长期体外培养条件下药敏性的稳定性.各虫株的原始群体、连续培养30d和90d的群体对贝尼尔、苏拉灭、安锥赛和硫胂聚氰胺的敏感性基本相同,说明连续培养90d各虫株对上述4种抗锥虫药的敏感性无明显改变.     

Meiosis in bovine oocytes matured in vitro and in vivo

Meiosis in bovine oocytes has; been studied after maturation in vitro or in vivo. Oocytes for in vitro maturation were collected from the ovaries of slaughtered cattle without regard to the phase of the estrous cycle while in vivo maturation was studied in oocytes from gonadotrophin-stimulated heifers at times varying between 6 and 36 h after the beginning of behavioural estrus. Oocytes from slaughtered cattle were classified according to their cumulus complex and ooplasm and were cultured for 6, 12, 18, 24, 36 or 48 h in modified Krebs-Ringer bicarbonate buffer before fixation) for cytogenetic analysis. Oocytes from stimulated heifers were aspirated from follicles or flushed from the oviducts, classified according to cumulus and ooplasm, and fixed within 6 h of collection. Nuclear maturation was more rapid in vitro than in vivo. The largest proportion of oocytes reached maturity (Mil) after 12 to 18 h in culture or 30 to 36 h after the onset of behavioural estrus. Oocytes devoid of cumulus cells or showing signs of vacuolation or degeneration had virtually no capacity for nuclear maturation.     

黄芩抗鸡大肠杆菌作用的研究

通过体外试验和体内试验两种方法研究了黄芩抗鸡大肠杆菌的作用。结果表明，黄芩水煎液对鸡大肠杆菌的最小体外抑菌浓度为2．5g／mL；当药物浓度为5g／mL时可使7日龄雏鸡获得90％以上的攻毒保护；药物浓度为10g／mL时可使100％雏鸡获得攻毒保护，说明黄芩可以对抗鸡大肠杆菌，用于防治鸡的大肠杆菌病。     

奶牛体外受精胚胎的不同培养方法对比试验

以屠宰场奶牛卵巢为试验材料，研究体外、体内培养法对体外受精胚胎发育的影响。①体外受精胚胎分别在加输卵管上皮细胞单层和颗粒细胞单层（2×106个/ml）的体外培养体系的培养液中培养与临时受体绵羊体内培养对比试验。结果显示：在培养的第8 d囊胚发育率无显著差异，体外培养体系囊胚形成主要集中在第8 d（受精日为第0 d）。体内培养体系囊胚的形成多数在第7 d。加体细胞的体外培养体系与体内培养法囊胚生成率无显著差异，但却显著好于不加体细胞的简单体外培养法。②进行2种方法生产的胚胎的程序冷冻、解冻敏感性试验。结果显示：体内培养法和普通体外法生产的胚胎解冻后存活率（90%；60%）和囊胚孵化率(85.7%；44.4%)存在极显著差异（P<0.01）。     

显微注射转基因用猪胚胎获得研究

本文从猪胚胎的体外成熟和体内成熟两方面对显微注射用猪胚胎的获取进行了初步研究。实验结果表明 ;超数排卵母猪的手术冲胚是获取显微注射用猪胚胎的最佳方法 ,该方法获得的胚胎数量多 ,质量好 ,转基因效率高。体外成熟法获得可供显微注射用猪胚胎的效率低 ,基因转移的总效率也很低。     

20味中草药与抗生素联用对猪源链球菌体外抑菌作用的分析

为观察中草药与抗生素联用对猪源链球菌的体外抑菌效果,采用试管二倍稀释法测定20味中草药水提物、醇提物的最低抑菌浓度（ MIC）,用常量棋盘稀释法测定20味中草药水提物、醇提物与抗生素联用对猪源链球菌的部分抑菌浓度（ FIC）。结果显示,所选20味中草药的水提物、醇提物对猪源链球菌均具有一定的抑菌作用,瓜蒌醇提物等对猪源链球菌的体外抑菌作用较强;败酱草水提物等对猪源链球菌的体外抑菌作用较弱。瓜蒌醇提物、乌梅醇提物、乌梅水提物与环丙沙星联合用药的抑菌作用表现为相加作用,板蓝根醇提物等与环丙沙星联合用药的抑菌作用表现为无关作用。     

七种常用渔药及组合对罗非鱼致病性海豚链球菌的体外抗菌试验

探讨了7种常用抗菌渔药对罗非鱼致病性海豚链球菌的体内外抗菌作用。采用二倍稀释法测定了7种渔药对致病菌的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）;在初筛基础上以MIC为单位,1×MIC、5×MIC、10×MIC和20×MIC下平板抑菌圈直径为参数,分别比较所筛选5种药物抗菌效果并优化最佳参数;利用优化的最佳参数比较5种药物单独用药与联合用药对海豚链球菌的抑菌效果;并通过拌饵投喂给药方式对罗非鱼进行5种药物治疗性给药试验。结果表明,抗菌先锋对海豚链球菌的MIC和MBC最小,分别为6.4、12.8μg/mL,其次是伯乐立康,均为12.8μg/mL;而鱼康和肠炎烂鳃灵即使在1638.4μg/mL下也无抗菌效果。5倍MIC下抑菌圈直径为本试验筛选抗菌药物的最佳参数。5 MIC时,海豚链球菌对伯乐立康和抗菌先锋敏感,对菌必清、菌毒康和海鱼安中度敏感。菌毒康与海鱼安的联合抗菌效果最佳。鱼体内抗菌试验结果表明,抗菌先锋和伯乐立康的治疗有效率超过75%,达到了理想的治疗效果,是防治罗非鱼海豚链球菌病的首选药物。