生长调节物质对半夏人工种胚形成的影响

以半夏叶片为外植体,研究了生长调节物质6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、α-NAA(α-萘乙酸)、IBA(吲哚丁酸)对半夏人工种胚诱导和增殖的影响。结果表明,6-BA和2,4-D有利于半夏叶片愈伤组织的诱导和增殖,适宜培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L;6-BA、IBA和NAA对半夏人工种胚的诱导和增殖效果较好,适宜培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 2.0 mg/L或MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L。结果为对半夏人工种胚诱导及工厂化提供了试验依据。     

不同基因型水稻再分化培养的比较研究

采用水稻Ac/Ds插入突变株系及野生水稻种子为外植体,从成熟胚盾片诱导愈伤组织.通过用不同培养基、不同植物生长调节物质浓度配比对愈伤组织进行诱导及再分化试验.结果表明:NMB培养基有利于愈伤组织的诱导;在诱导培养基中添加2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.2 mg/L能明显提高出愈率;再分化率最高的培养基配方为NMB+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,野生型和含Ac/Ds的突变体的种子表现一致.     

高留胚率水稻辽粳294成熟胚组织培养条件的优化

以高留胚率水稻辽粳294成熟胚为外植体,对影响高留胚率水稻愈伤组织诱导、分化的接种方式、培养基中激素水平进行研究。结果表明,用解剖刀在胚上纵切1刀后再将种子接在培养基上,种子灭菌彻底,愈伤组织诱导率高且质量较好。诱导培养基中激素6-BA和KT的浓度对愈伤组织的诱导率有极显著的影响,诱导培养基为N6+2 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT时,诱导率较高,可达90.0%;分化培养基为MS+0.8 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA时,绿苗分化效果好,分化率为73.0%。     

适于悬浮培养的半夏疏松愈伤组织诱导及增殖技术

用半夏叶片或叶柄作外植体,通过调节植物生长调节物质的种类、浓度及培养条件,以获得适于悬浮培养的半夏疏松愈伤组织。结果表明,添加2,4-D较NAA诱导的愈伤组织疏松,将叶片接种于MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L或叶柄接种于MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L上诱导出的愈伤组织长势较好且疏松,诱导率分别达到100%和95.6%,愈伤组织鲜重分别为0.932 g和0.622 g。将上述愈伤组织以MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L培养基连续继代3次,便获得适于建立细胞悬浮培养体系的疏松愈伤组织,从而为半夏人工种子生产必须的同步化高质量人工种胚的培养提供可靠材料。     

越南紫薯胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎形成

【目的】越南紫薯〔Ipomoea batatas（L.）Lam〕品质优良,薯块均匀,商品性好,但产量偏低,产量性状亟待遗传改良,体细胞胚胎发生是快速繁殖和保持种性稳定的基础,对紫薯的遗传改良有重要意义。采用激素处理越南小紫薯外植体,研究越南紫薯的体细胞胚胎再生途径,为通过体细胞无性系变异筛选紫薯高产优质新材料提供新方法。【方法】以市场销售的越南紫薯为材料,以叶片和茎段作外植体,探讨植物生长调节物质种类（6-BA、NAA、2,4-D、ABA）及配比对越南紫薯培养的影响,建立越南紫薯体细胞胚胎发生及再生植株体系。【结果】叶片和茎段诱导愈伤组织培养基相同,难易程度一致,诱导配方为 MS+6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L;在普通愈伤组织诱导形成胚性愈伤组织过程中,2,4-D 起重要作用,其他激素起辅助作用,较好的诱导配方为 MS+6-BA 0.1 mg/L + 2,4-D 2.0 mg/L;在胚性愈伤组织诱导产生体细胞胚过程中,ABA 起着重要作用,并进一步发育和分化的适宜的培养基为 MS+6-BA 0.1 mg/L + NAA 0.2 mg/L + ABA 0.5 mg/L。【结论】叶片和茎段愈伤组织诱导最佳培养基为 MS+6-BA 1.0 mg/L+0.2 mg/L NAA,愈伤组织转化为胚性愈伤最佳培养基为 MS+6-BA 0.1 mg/L +2,4-D 2.0 mg/L;胚性愈伤形成体细胞胚胎最佳培养基为 MS+6-BA 0.1 mg/L + NAA 0.2 mg/L + ABA 0.5 mg/L。     

小菊悬浮细胞辐射育种初步研究Ⅰ.基因型、外植体和诱导愈伤组织培养基的选择

以小菊七月红、金莲、七月蜂黄、矮红、盏黄5个品种的叶片为外植体,用MS+2.0 mg@L-1 2,4-D+0.2 mg@L-1 6-BA诱导愈伤组织培养基和MS+2.0 mg@L-1 6-BA+0.1 mg@L-1 NAA分化培养基,选出分化能力较强的品种七月红.再以七月红的叶片上部、叶片下部、叶柄、茎段为外植体,在不同培养基(B5、MS)上诱导胚性愈伤组织,发现茎段最易诱导出胚性愈伤组织,培养基以B5添加0.5 mg@L-1 2,4-D+0.2 mg@L-1 6-BA,MS添加1.0 mg@L-1 2,4-D+0.2 mg@L-1 6-BA效果较好;在添加2.0 mg@L-1 6-BA和0.1 mg@L-1 NAA的分化培养基(B5、MS)上,茎段再生能力较理想.     

牡丹品种凤丹白子叶离体再生研究

探讨了不同的消毒方式及消毒时间对牡丹成熟胚萌发诱导的影响,以及不同的植物生长调节物质、培养时间和蔗糖浓度对牡丹子叶愈伤组织诱导、增殖分化及分化苗生根的影响.结果表明,牡丹种子的最佳消毒方法是在0.1％ HgCl2中消毒10 min;牡丹子叶在MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg,/L6-BA+ 3％蔗糖配方的培养基中出愈率最高,为93％;牡丹子叶来源的愈伤组织在MS+1.0mg/L2,4-D+0.5 mg/L 6 - BA +3％蔗糖配方的培养基中培养60 d时的分化情况最好,分化率达到78％;在附加了0.2 mg/L6 - BA+1.0 mg/L IBA和2.5％蔗糖的1/2MS培养基中,再生苗的生根率可达56％,平均根数4.25条,平均根长4.31 cm.     

紫玉兰愈伤组织的诱导及胚状体获得试验研究

用正交统计方法,以MS为基本培养基,调节2,4-D、6-BA和NAA之间的配比,对紫玉兰的雌蕊、雄蕊、花被、花萼和带腋芽枝条等组织进行愈伤组织诱导,试验结果表明:雌蕊在MS+2,4-D 4.00 mg/L+6-BA 1.00 mg/L+NAA 4.00 mg/L能够产生浅黄绿色丝状愈伤组织;花萼在MS+2,4-D 4.00 mg/L+6-BA 1.00 mg/L+NAA 2.00 mg/L能够产生淡黄色块状愈伤组织;腋芽在MS+2,4-D 4.00 mg/L+6-BA 2.00mg/L+NAA 4.00 mg/L能够诱导产生浅绿色团状愈伤组织,该组织经转接培养后产生胚状体。     

不同植物生长调节物质对条叶榕组织培养的影响

为了更好地开发利用条叶榕Ficus pandurata var. angustifolia这一畲族习用药用植物,以条叶榕无菌植株为外植体,对影响条叶榕叶片愈合组织诱导、不定芽分化、增殖和壮苗生根的主导因子植物生长调节物质进行了研究。结果表明:叶片在添加不同植物生长调节剂物质（包括6-苄基腺嘌呤6-BA,2,4-二氯苯氧乙酸2,4-D,萘乙酸NAA）和不同质量浓度的培养基中均能诱导愈合组织,且诱导率均达到100%,但愈合组织进一步分化成不定芽较为困难,以MS+1.0 mgL－16-BA +0.2 mgL－12,4-D +0.1 mgL－1NAA分化率最高,为6.67%;不定芽在添加不同植物生长调节物质种类（苯基噻二唑基脲TDZ,6-BA,NAA）和不同质量浓度的培养基中均表现出较好的增殖效果,3种植物生长调节物质对不定芽增殖的作用大小依次为6-BA,TDZ和NAA,以MS+0.3 mgL－1TDZ +1.0 mgL－16-BA +0.3 mgL－1NAA增殖倍数最高,达到8.93;条叶榕生根容易,生根率均达到100%。图1表4参13     

农杆菌介导水稻sbeⅡb基因转化体系的建立

本文对水稻愈伤组织再生体系及其转化影响因子进行了研究.以水稻品种秀水11的幼胚和成熟胚为外植体,以M S+肌醇0.1g/L+2,4-D 2mg/L+6-BA 0.2mg/L+脯胺酸2.8g/L+水解酪蛋白0.3g/L作诱导培养基,愈伤组织诱导率最高为73.45%,愈伤组织在M S+6-BA2 mg/L+NAA 0.5mg/L的分化培养基上,分化频率达53.33%;在此基础上对农杆菌介导水稻愈伤组织转化的因子进行了优化,获得较高转化频率的条件为:预培养时间3d,在OD600值为0.6农杆菌菌液中感染10min,共培养3d.     

山核桃幼胚不定芽的诱导

以山核桃Carya cathayensis花后60,75和100 d的幼胚为外植体,金属硫蛋白（MT）复合维生素+ 20 g·L-1葡萄糖+10 mg·L-1腺嘌呤+500 mg·L-1水解酪蛋白作为基本培养条件,研究山核桃幼胚的不同发育时期,不同植物生长调节物质及基本培养基对山核桃不定芽诱导的影响。结果表明,山核桃花后60 d的幼胚培养56 d后未形成不定芽,花后100 d的幼胚比花后75 d的幼胚诱导产生的不定芽多而且长;植物生长调节物质对山核桃不定芽诱导以0.010 0 mg·L-1 4-氨基-3,5,6-三氯吡啶羧-酸（Picloram） + 3.0 mg·L-16-苄氨基腺嘌呤（6-BA）为启动培养基较佳;当6-BA质量浓度一定时,随Picloram质量浓度增加不定芽数量差异不显著;当Picloram质量浓度一定时,随6-BA质量浓度增加,产生不定芽数逐渐上升,但当6-BA达10 mg·L-1时,不定芽出现明显玻璃化现象;2,4-D的添加不利于外植体不定芽产生;MS（Murashige and Skoog）是最佳基本培养基。图1表2参16     

正交试验优化红颜草莓离体再生体系

[目的]优化红颜草莓离体再生体系。[方法]采用正交试验,研究不同培养基、植物生长调节剂的种类及浓度对红颜草莓叶片不定芽再生的影响。[结果]IBA是影响叶片不定芽增殖的重要因素;最适诱导培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L,诱导率为90.00%;最佳分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L,分化率为8.1%;最适增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2mg/L,平均每个不定芽的增殖倍数为7.67;最适继代培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,每个处理的平均苗高5.98 cm;最适生根培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,每个处理的平均根数为4.5根。[结论]为进一步研究草莓的遗传转化奠定了基础。     

杨树叶片离体再生系统的构建

以杨树叶片为外植体,MS为基本培养基,使用不同激素不同浓度配比,建立了杨树叶片离体培养植株再生体系。结果表明：叶片的最佳诱导培养基为：MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L;不定芽培养基为：MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L。NAA与BA对愈伤组织诱导有调控作用,NAA/BA比值增大有利于不定芽的诱导,但不能超过4∶1;BA与2,4-D关系比较复杂,当2,4-D和6-BA的浓度均为1.0mg/L时,愈伤组织诱导效果最好。     

不同植物生长调节物质处理对吴茱萸组织培养的影响

以吴茱萸Euodia rutaecarpa雌株再生苗叶片为材料,研究了不同植物生长调节物质处理对其组织培养过程的影响。结果表明：添加1.0 mg·L^－16-苄氨基腺嘌呤（6-BA） 和1.0 mg·L^－1 6-BA ＋ 0.1 mg·L^－1 α-萘乙酸（NAA）等2种处理均可诱导叶片叶柄端形成愈合组织,随后分化出不定芽。而其余处理只能诱导愈合组织而未见不定芽的分化,其中以添加2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）诱导的愈合组织最佳。单独添加NAA不能诱导不定芽分化,但与6-BA同时添加时可增强6-BA的诱导效果;随着6-BA质量浓度的提高,不定芽分化率表现出先升高后下降的趋势;类似的现象也发生在不定芽的增殖和壮苗过程中,适当质量浓度的6-BA有助于增殖和壮苗,但质量浓度过高容易导致玻璃化。随着NAA质量浓度的升高,吴茱萸再生植株生根速度加快,根变粗,侧根增多,生根率和移栽成活率均提高,但NAA质量浓度过高不利于侧根生长和移栽。获得的吴茱萸再生植株移栽到大田1.5 a后即可成熟开花。图1表4参10     

山核桃幼胚不定芽的诱导

以山核桃Carya cathayensis花后60,75和100d的幼胚为外植体,金属硫蛋白（MT）复合维生素＋20g·L^-1葡萄糖＋10mg·L^-1腺嘌呤＋500mg·L^-1水解酪蛋白作为基本培养条件,研究山核桃幼胚的不同发育时期,不同植物生长调节物质及基本培养基对山核桃不定芽诱导的影响。结果表明,山核桃花后60d的幼胚培养56d后未形成不定芽,花后100d的幼胚比花后75d的幼胚诱导产生的不定芽多而且长;植物生长调节物质对山核桃不定芽诱导以0.0100mg·L^-14-氨基-3,5,6-三氯吡啶羧-酸（Picloram）＋3.0mg·L^-16-苄氨基腺嘌呤（6-BA）为启动培养基较佳;当6-BA质量浓度一定时,随Picloram质量浓度增加不定芽数量差异不显著;当Picloram质量浓度一定时,随6-BA质量浓度增加,产生不定芽数逐渐上升,但当6-BA达10mg·L^-1时,不定芽出现明显玻璃化现象;2,4-D的添加不利于外植体不定芽产生;MS（Murashige and Skoog）是最佳基本培养基。     

H.11648麻离体培养与植株再生的研究

以H.11648麻组培苗叶片为外植体,研究了不同生长调节剂对诱导愈伤、不定芽的分化、增殖及生根的影响。结果表明:在MS+0.5 mg/L 2,4-D+4.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.23%植物凝胶(pH值5.8)培养基上诱导出愈伤组织为佳;在MS+3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA培养基中,愈伤组织不定芽分化率最高;将小苗移栽至基质配比为土壤∶椰糠=2∶1的育苗盆中,成活率达96%。     

84K杨基因转化受体系统的建立

以84K杨为研究对象,通过建立叶片再生系统及卡那霉素敏感性试验,确立了稳定高效的基因转化受体系统。结果表明,以MS培养基为基本培养基,0.5～1.0mg/L6-BA+0.01～0.1mg/LNAA组合时,叶片出芽率不到50%,每叶平均生芽数5～6个;1.0～1.5mg/L6-BA+0.02mg/L2,4-D组合时,叶片出芽率达90%～100%,每叶平均生芽数约20个。用后者附加不同质量浓度梯度卡那霉素,确定叶片外植体芽诱导卡那霉素临界筛选质量浓度为20mg/L。利用对84K杨芽生根效果较好的培养基GMS+0.01mg/LNAA+0.25mg/LIBA,附加不同质量浓度梯度卡那霉素,筛选出芽生根卡那霉素临界质量浓度亦为20mg/L。     

金丝小枣愈伤组织诱导植株再生及染色体变异的研究

以金丝小枣枣头为外植体,用改良MS培养基为基本培养基,附加不同浓度的2,4—D、IBA诱导愈伤组织.IBA有利于致密的Ⅰ型愈伤组织形成,2,4—D易诱导出疏松的Ⅱ型愈伤组织,黑暗条件下诱导愈伤组织比光照条件下更有效.愈伤组织继代繁殖时,2,4—D的浓度影响了愈伤组织类型和染色体数目变异.两种愈伤组织再分化能力不同,Ⅰ型有6—BA分化出不定芽,而Ⅱ型未分化出芽.在IBAO.2 6—BAI时诱导出大量胚状体.选择了30个芽丛再生植株无性系进行继代繁殖,其中有1个四倍体,其余为二倍体.0.3ppmIBA最有利于生根.     

灰绿藜愈伤组织的诱导·继代及植株再生研究

［目的］通过诱导愈伤组织分化,建立灰绿藜植株再生方法。［方法］以灰绿藜茎和叶为材料,研究不同种类、不同浓度的植物生长调节剂对灰绿藜愈伤组织诱导和继代、不定芽分化及再生植株生根与移栽的影响。［结果］NAA、2,4 D、IAA在单独使用时,一定浓度范围内均有愈伤组织产生,利用不同的外植体,最佳的诱导组合培养基分别是茎为MS＋NAA 4.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L,叶为MS＋2,4-D 4.0 mg/L＋6-BA 0.2 mg/L,光照有利于愈伤组织的诱导。在优化灰绿藜愈伤组织继代培养条件时,发现5.0 mg/L的抗坏血酸（VC）对于灰绿藜愈伤组织的褐变有良好的抑制作用,继代培养基中较好的组合为MS＋2,4 D 0.5 mg/L＋6 BA 0.5 mg/L。愈伤组织不定芽分化培养基为MS＋6 BA 2.0 mg/L＋NAA 0.05 mg/L,根分化的培养基为1/2 MS＋NAA 0.2 mg/L。［结论］该研究为灰绿藜组织培养中适宜的培养基选择提供了科学依据。