烟草叶片多酚氧化酶的提取及其特性研究

影响烟叶颜色和香味的多酚氧化酶，自新鲜烟叶中提取后，经（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀透析酶活性增高到５．６倍，该酶催化且氧化邻位二元酚和三元酚化合物，但不氧化一元酚，在４０℃以下时，酶活性经２０ｍｉｎ才出现较弱的活性高峰，但持续时间较长；５５℃以上时，酶活性被迅速激活，出现强的活性高峰后迅速下降，持续时间很短，ＰＨ为６时，酶的活性最高，在偏碱条件下，酶活性下降快，增加Ｃｕ＾２＋浓度能增强酶活性，ＥＤＴＡ，     

顶端调控措施对烤烟叶片多酚氧化酶活性和酚类化合物含量的影响

[目的]为改进烟叶品质提供参考依据。[方法]以云烟87为供试品种,设置6个处理:T1不打顶;T2打顶;T3打顶+追施硫酸钾肥;T4打顶+涂抹生长素1次;T5打顶+追施硫酸钾肥+涂抹生长素1次;T6打顶+追施硫酸钾肥+涂抹生长素2次,分析不同顶端调控措施对烤烟叶片多酚氧化酶(PPO)活性和酚类化合物含量的影响。[结果]随着生育时期的延长,PPO活性呈现先升高后下降的趋势,不打顶处理的PPO活性峰值出现较早,打顶处理的PPO活性峰值明显延迟,在成熟期,各处理的PPO活性高低顺序为:T6>T5>T3>T4>T2>T1。各处理的酚类化合物含量则随生育时期的延长逐渐升高,在成熟期的高低顺序为:T3>T2>T5>T4>T6>T1。打顶后在茎断面涂抹生长素并辅施硫酸钾肥,能使烤烟叶片的PPO活性升高,酚类化合物含量适当降低。在打顶后20d之前,酚类化合物含量与PPO活性的相关系数为0.826**,打顶20d后,二者的相关系数为-0.268。[结论]打顶后在茎断面涂抹生长素,并辅施硫酸钾肥,可增强PPO活性,提高大田烟叶质量。     

烘烤过程多酚氧化酶抑制剂对烤烟多酚的影响

 选用4种多酚氧化酶抑制剂处理备烤烟叶,与对照进行烘烤比较试验。通过对烤后烤烟样品总酚、绿原酸、芸香苷含量及烘烤前鲜烟匀浆中多酚氧化酶活性的检测。比较结果显示：常规烘烤条件下4种抑制剂对烤烟多酚含量无明显影响;在不当的烘烤条件下,4种处理样品的多酚含量明显高于对照,其中对烤烟多酚降解抑制作用最强的是NaDiCa,聚乙烯吡咯烷酮相对弱些但无异味,它们可能是防止不当烘烤导致烟叶褐变的有效抑制剂。鲜活烤烟匀浆中4种抑制剂对多酚氧化酶活性抑制作用由强到弱依次为NaDiCa,聚乙烯吡咯烷酮,EDTA和硫脲。匀浆酶活性检测结果与整叶烘烤处理后烤烟样品总酚含量高低顺序不完全一致,可能是不同抑制剂在烟叶组织中渗透性不一致引起,值得进一步研究。     

烤烟烘烤特性与烟草多酚氧化酶活性相关性研究

对8个烤烟品种烟叶分上、中、下3个部位,在烘烤过程中定时取样测定烟叶多酚氧化酶活性。结果表明,多酚氧化酶活性的变化趋势一致,呈抛物线型。变黄后期活性较大,进入定色期后活性逐渐降低。上部叶与中部叶、下部叶之间差异显著,不同品种之间差异明显。烟叶多酚氧化酶活性的大小与品种烘烤特性存在着极为密切的关系。不同品种下部和上部叶多酚氧化酶活性与烤后杂色烟叶比例呈显著正相关,烟叶多酚氧化酶活性的差异可能是品种定色特性不同的主要原因。烘烤过程中平均PPO活性(72 h)中部、下部烟叶在0.3[ΔOD_(520)/(g·min)]以下,上部烟叶在0.4[ΔOD_(520)/(g·min)]以下的品种烟叶定色特性比较理想,耐烤性较好;中部、下部叶在0.4[ΔOD_(520)/(g·min)]以上、上部烟叶在0.5[ΔOD_(520)/(g·min)]以上的品种烟叶不易定色,耐烤性下降,烘烤过程中烟叶易发生棕色化反应。     

烤烟成熟期多酚及其相关酶活性变化的研究

随着烟叶的成熟,烟株体内进行着复杂的生理生化变化,使烟叶向品质方向发展。为此,研究用液相色谱法等在不同成熟期分别测定与烟叶品质相关的主要生理生化特征,探索其动态与规律。结果表明：随着叶片成熟与衰老进程不断加深,绿原酸和芸香苷的含量动态与多酚氧化酶活性动态呈显著正相关,均在适熟时达到最高;抗坏血酸则随成熟进程而提高,其含量与过氧化物酶的活性呈正相关。不同品种的多酚积累含量及其相关酶活性变化趋势相同,量或者活性的值有所差异。根据多酚含量及其相关酶活性的动态变化规律,可正确把握烟叶的适熟采收。     

施肥量对烤烟烘烤过程中多酚氧化酶活性的影响

以烤烟NC102为材料,研究不同的氮肥、磷肥和钾肥施用量对烘烤过程中烤烟各部位烟叶多酚氧化酶活性的影响。结果表明:(1)氮(N)施用量高于5 g/盆对烘烤过程中各部位烟叶PPO活性均有提高作用,低于5 g/盆能够显著降低烘烤过程中中下部烟叶的PPO活性,上部烟叶的PPO活性没有显著降低;(2)磷(P_2O_5)施用量低于7.5 g/盆,能够有效降低前72 h烘烤过程中的PPO活性,高于7.5 g/盆时各处理PPO活性没有显著变化;(3)钾(K_2O)施用量高于15 g/盆,提高下部烟叶的PPO活性,但显著降低烘烤过程中PPO活性的峰值;钾用量高于20 g/盆能显著降低中上部烟叶在变黄后期和定色前期的PPO活性。     

葡萄叶片中多酚氧化酶的研究

玫瑰香葡萄叶片中的多酚氧化酶（ＰＰＯ）氧化邻苯二酚的活性明显高于间苯二酚,对愈创木酚基本无作用。以邻苯二酚为底物时,其氧化产物的最大吸收波长为４００ｎｍ,聚乙烯吡咯烷酮（ＰＶＰ）的加入量与叶片内酚类含量比为１．６：１,与叶片重量比为１：１２．５,ｐＨ为８．０,４０℃时酶的活性最高。     

影响金针菇多酚氧化酶活性因素研究

目的从金针菇中提取多酚氧化酶,并对其特性进行研究．方法采用分光光度法研究温度、pH、抑制剂对金针菇多酚氧化酶活力的影响．结果以邻苯二酚为底物,金针菇多酚氧化酶（Polyphenoloxidase from Flammulina velutipes,FVPPO）的酶促褐变产物在可见光波长295nm处有最大吸收峰;在pH为5．0—6．0范围内酶活力较大;在20—40℃的范围内随着温度升高,酶活性逐渐增强;在40℃时PPO活性最强;抗坏血酸、柠檬酸、EDTA-2Na对金针菇多酚氧化酶的活性都有抑制作用,在同浓度下,对金针菇PPO活性的抑制效果次序为抗坏血酸〉柠檬酸〉EDTA-2Na．结论金针菇多酚氧化酶的最适pH为6．0,最适温度为40℃,抗坏血酸对金针菇PPO活性的抑制作用最强．     

抑制剂对白肋烟叶片多酚氧化酶活性的影响

研究了聚乙烯吡咯烷酮、硫脲、亚硫酸氢钠对白肋烟叶片多酚氧化酶活性的抑制作用。结果表明，以１．０ｍｍｏｌ·ｌ－１聚乙烯吡咯烷酮喷洒叶片对多酚氧化酶活性抑制效果最好，抑制率为５４．５５％；１．０ｍｍｏｌ·ｌ－１硫脲浸泡烟叶抑制效果次之，抑制率为４８．３１％；在喷洒和浸泡两种处理方法中，均以亚硫酸氢钠的抑制效果最低。     

烤烟成熟期多酚及相关氧化酶活性的变化

研究了K326和红花大金元2个烤烟品种成熟期多酚及相关氧化酶活性的变化.结果表明,随着烟叶的成熟,叶片中的多酚和抗坏血酸的含量逐渐升高,打顶后30 d达到最高,此后这2类化合物的含量基本保持稳定.烟叶中多酚氧化酶和过氧化物酶活性在适熟时达到最高,此后迅速降低.K326和红花大金元的多酚含量变化趋势基本相同,但红花大金元的多酚积累量均高于K326,而K326的抗坏血酸含量和POD,PPO活性均高于红花大金元.     

复烤烟叶异地醇化过程中生物活性的变化

以复烤烟叶为试验材料,研究了异地醇化过程中生物活性的变化.结果表明:复烤烟叶异地醇化过程中,醇化初期叶面微生物数量和生物酶活性迅速上升,之后随着醇化的进行而逐渐下降;中部烟叶叶面微生物数量总体大于上部和下部烟叶,并可检出蛋白酶活性,而上部和下部烟叶均未能检出其活性,纤维素酶和淀粉酶活性均为中部＞上部＞下部烟叶,而蔗糖酶活性为下部＞中部＞上部烟叶;同等级复烤烟叶存放于西昌烟叶仓库的生物活性水平高于成都烟叶仓库.     

打叶留花对提高烤烟上部叶可用性的影响

为了提高烤烟上部叶的的可用性,在福建中烟"七匹狼"广顺基地单元进行打叶留花对烟叶质量研究。结果表明,打叶留花的上部叶的颜色、油分、色泽和柔软性有明显改善;总糖和还原糖含量分别提高12.51%和14.82%,烟碱降低了26.75%,其他常规化学成分变化较小;酸性香气成分总量增加51.45%,13种酸性香气成分中有9种增加;中性香气成分总量增加2.40%,22种中性香气成分中有12种增加;评吸质量明显改善,与中部叶质量非常接近,具备中部叶质量特征。     

田间摘除不适用鲜烟叶数量和时期对上部烟叶物理性状的影响

采用正交试验设计,运用极差分析、方差分析、综合评价方法研究了邵阳烟区不适用鲜烟叶的田间摘除叶片数和时期对上部烟叶物理性状的影响。结果表明:摘除下部叶片数量主要影响烤烟上部烟叶的开片度、叶片厚度、平衡含水率、叶质重;摘除下部叶片数和摘除时期以及摘除顶叶片数主要影响烤烟上部烟叶的单叶重和含梗率。邵阳烟区稻田烤烟优化烟叶结构以打顶时摘除下部2片烟叶和倒数第1烤时摘除顶部1片烟叶为最佳。     

湖南浓香型产区上部烟叶化学成分特征与风格特色

目的明确湘中宁乡烟区稻田种植烤烟云烟87上部烟叶的适宜采收成熟度。方法设计习惯采收、延迟5 d采收和延迟10 d采收共3个成熟度,研究采收成熟度对稻田烤烟上部第11~16叶位烟叶外观质量、物理特性、化学成分、感官质量和经济性状的影响;采用模糊评价方法构建烟叶外观质量指数、物理特性指数、化学成分可用性指数、感官质量指数、经济效果指数和综合效果指数评价不同采收成熟度的效应。结果(1) 不同采收成熟度对上部第11~16叶位烟叶质量的影响不同。(2) 随着烟叶采收成熟度的增加,烟叶的单叶质量、叶片厚度和叶面积质量下降,糖含量和烟碱含量增加,产量和产值增加。(3) 延迟5和10 d采收的烟叶外观质量指数较习惯采收分别提高8.58%和15.08%,物理特性指数分别提高0.92%和0.18%,化学成分可用性指数分别提高18.61%和−8.04%,感官质量指数分别提高6.67%和6.40%,经济效果指数分别提高20.08%和28.09%,综合效果指数分别提高7.76%和7.49%。(4) 上部叶以叶片颜色黄绿至变黄50%~70%、主脉全白、支脉变白50%、部分茸毛脱落、叶缘微卷曲、叶尖下勾和叶面出现少量成熟斑为适宜采收成熟度。结论宁乡烟区可适当提高烟叶采收成熟度,以提高上部烟叶可用性和增加烟农收入。     

烤烟烟叶钾含量的配合力和稳定性分析

在河南省的3个地区,以6个重要烤烟品种及其配成的双列杂交材料为试验材料,对鲜烟叶的钾含量进行了配合力和稳定性分析。结果表明,烟叶钾含量的基因型与环境互作效应显著,RG17×潘园黄烟叶钾含量平均值最高,稳定性最好。6个亲本的一般配合力(GCA)、各组合的特殊配合力(SCA)差异均达极显著水平;K326的GCA最高,潘园黄和RG17次之。     

打叶留茎对烤烟上部叶质量和可用性的影响

为了提高烤烟上部叶叶片质量和经济性状。采用田间试验,以常规打顶为对照,设置打叶留茎2节、打叶留茎4节和打叶留茎6节3个顶端调控处理,研究打叶留茎长度对烤烟打顶后农艺性状、上部叶常规化学成分、物理性状及相关生理指标的动态影响。结果表明,和常规打顶相比,打叶留茎降低了烤烟上部叶叶面积、叶质重及叶厚,提高了叶片组织疏松程度;提高上等烟、中等烟及中部化烟叶比例,尤其以打叶留茎4节处理明显,分别增加22.32%、17.56%和191.77%;顶端处理后,3个打叶留茎处理烟株的根系活力降低,钾含量提高,烟碱含量有所下降,其中以打叶留茎4节和打叶留茎6节处理烟叶的烟碱含量降幅最大。3个打叶留茎处理上部叶总糖、还原糖和钾含量以及总糖/烟碱、总氮/烟碱和钾/氯的比值较常规打顶提高,烟叶化学成分协调。打叶留茎4节的烟叶中部化比例和等级较高,上部叶品质较好,工业可用性高。     

烘烤过程中烟叶苹果酸含量及相关代谢酶活性的变化

【目的】分析烘烤过程中烟叶苹果酸及相关代谢酶活性的变化, 为进一步探明烘烤过程中烟叶内在化学成分的变化及调控机制提供理论依据。【方法】以K326、云烟87和豫烟6号为试验材料,研究不同品种烤烟烟叶在烘烤前、烘烤过程中关键温度点（38,42,48,54 ℃）及烘烤结束后苹果酸、总有机酸含量及苹果酸脱氢酶(MDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)及琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的变化,并对总有机酸、苹果酸含量与代谢酶活性的相关性进行分析。【结果】不同品种烤烟的MDH、PEPC和SDH酶活性变化均表现出一定的规律性。烘烤过程中,MDH活性先升高后降低,并在48 ℃达到最大值;PEPC活性呈先升高后下降再上升的走势变化,但整体呈上升趋势;38 ℃之后SDH活性持续下降,54 ℃降至最低;烘烤过程中,丙二酸含量呈上升趋势,且在54 ℃时达到最大值。K326、云烟87和豫烟6号的苹果酸和总有机酸含量在烘烤过程中均呈先升高后降低的趋势,且分别在54,48和42 ℃达到最大值。相关分析表明,不同品种烤烟MDH活性与苹果酸含量相关性不显著;K326和豫烟6号的PEPC活性与苹果酸、总有机酸含量呈正相关,云烟87的PEPC活性与苹果酸、总有机酸含量呈负相关,相关性均不显著;K326和豫烟6号的SDH活性与苹果酸含量呈显著性负相关,云烟87的SDH活性与苹果酸含量相关性不显著。【结论】不同品种烤烟间苹果酸含量差异较大。SDH对苹果酸积累的作用大于MDH和PEPC,相对较高的MDH和PEPC活性与相对较低的SDH活性均能够促进苹果酸的积累。     

烤烟烟碱含量与烟叶物理性状的关联分析

【目的】探讨烟叶物理性状对烟碱含量的影响效果及主次关系,为构建烟碱调控技术体系提供关键的物理性状选择指标。【方法】在我国南北7个主产烟省的12个县,统一栽培品种及栽培措施,采用逐步回归、通径分析和灰色关联度分析方法,对烤烟烟碱含量与物理性状进行关联分析。【结果】单叶重与烟碱含量关系最密切,其次是单叶面积和叶面密度,含梗率和长宽比与烟碱含量的关联度则较小。单叶重和叶面密度与烟碱含量呈极显著正相关,单叶面积对烟碱含量作负效应贡献。【结论】烟草栽培实践中,应根据烟碱的调控目标,确定适宜的单叶重和单叶面积范围,同时也要兼顾各物理性状的协调发展,达到优质适产的目的。     

湖南烤烟烟叶主要物理特性与主要化学 指标间的灰色关联度分析

采集湖南烟区种植的9个不同基因型烤烟,运用灰色关联度分析方法研究了烟叶物理特性与主要化学指标间的关系。结果表明,烟叶物理特性与主要化学指标间的关系在不同部位间具有明显差异。其中,在物理特性的各项指标中,与中下部烟叶总糖含量关联程度较大的是长宽比,而上部烟叶则表现为叶片厚度。与中上部烟叶总氮、烟碱以及与下部烟叶烟碱含量关联程度较大的均是含梗率,与下部烟叶总氮含量关联程度较大的物理特性指标是叶长,双糖差、糖碱比、氮碱比在不同部位间的关联程度不同。叶片厚度是影响上部烟叶主要化学指标的重要因子,中下部烟叶的长宽比决定了烟株光合作用的强弱以及光合产物的累积量,从而间接反映出烤后烟叶品质的优劣。     

木薯叶多酚氧化酶的提取及其酶学性质研究

以木薯叶为原料,研究木薯叶多酚氧化酶PPO的最佳提取条件与酶学性质。结果表明,木薯叶PPO 的 最佳提取条件为磷酸缓冲液PBS的pH 值6.8料液比4 mL/g提取时间6 h;木薯叶PPO 酶促反应产物在399 nm 处有最大吸收峰,以邻苯二酚为底物的酶促反应的米氏常数Km=0.8 mol/L动力学方程为V=2000[S]/0.8+[S]该酶最 适温度为37益,最适pH 值为7.0。