ACC合成酶和ACC氧化酶基因家族在番茄乙烯？…

利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和核酸保护分析（ＲＰＡ）检测了番茄ＡＣＣ合成酶（ＡＣＳ）和ＡＣＣ化酶（ＡＣＯ）基因家族在番茄突变体Ｅｐｉｎａｓｔｉｃｓ（Ｅｐｉ）果实中的表达特性,同时了Ｅｐｉ果实自动催乙烯合成系统的特性,ＥＰＩ等位基因的突变诱导了ＬＥＡＣＳ２和ＬＥＡＣＯ１两个基因的过表达,这是Ｅｐｉ果实的乙烯过表达的主要成因,ＥＰＩ突变同时显著抑制了ＬＥＡＣＳ４和ＬＥＡＣＯ３的表达强度 ,这些结果初步的乙     

反义ACC氧化酶基因的导入对番茄乙烯生成的抑制作用

将反向克隆的ＡＣＣ氧化酶基因通过Ｔｉ质粒导入到番茄基因组中，转基因番茄植株叶片和果实中ＡＣＣ氧化酶活性和乙烯产生速率均受到显著抑制，显示出反义基因能抑制靶基因（ＡＣＣ氧化酶）的表达。子代抗性标记基因的分离结果表明呈单基因遗传。     

番茄ACC合成酶反义cDNA转化及转基因番茄果实贮藏生理特性研究

ＡＣＣ合成酶ｃＤＮＡ被反向插入载体ＰＭＯＮ３１６，通过三亲交配，将表达质粒转移到农杆菌中，采用叶盘法转化番茄子叶。经卡那霉素筛选及分子杂交检测，表明，反义ＡＣＣ合成酶基因已在ｍＲＮＡ水平表达。对转基因番茄果实的成熟生理指标测定结果说明，转基因番茄果实成熟受到严重抑制，乙烯的峰值仅为正常番茄的２５％￣３０％，ＰＧ活性有所下降，果实在室温下可贮藏１个多月，品质和其他性状与正常番茄相近。     

番茄乙烯形成酶基因的克隆及其反义基因的表达载体构建

从成熟的番茄果实中提取总ＲＮＡ,进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增合成乙烯形成酶ｃＤＮＡ,并将其克隆至载体Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ的ＥｃｏＲＶ位点,经限制酶谱分析,构建亚克隆进行全序列测定和序列分析。将所克隆基因以反义基因的形式定向重组到载体ｐＳＰＲＯＫ上,同时将带有完整启动子和终止子的标记基因ＢＡＲ基因引入ｐＳＰＲＯＫ中,最终获得表达乙烯形成酶反义基因和ＢＡＲ基因的植物表达载体ｐＢＡＲ－ＥＦＥ。     

用吖啶橙处理法制备猪高分辨G带染色体

用吖啶橙处理法制备猪高分辨Ｇ带染色体熊统安赵雅心李奎李明军彭中镇（华中农业大学畜牧兽医学院，武汉４３００７０）ＨＩＧＨ－ＲＥＳＯＬＵＴＩＯＮＧ－ＢＡＮＤＩＮＧＣＨＲＯＭＯＳＯＭＥＳＯＦＰＩＧＳＢＹＵＳＩＮＧＴＨＥＡＣＲＩＤＩＮＥＯＲＡＮＧＥＴＲＥＡ...     

UV－B辐射对农垦58s某些生理特性和育性的影响

ＵＶ－Ｂ辐射对农垦５８ｓ某些生理特性和育性的影响李合生１）岳兵１）曾汉来１）戴秋杰２）（１）华中农业大学农学系，武汉４３００７０；２）江苏省农科院，南京２１００１４）ＥＦＦＥＣＴＯＦＵＶ－ＢＲＡＤＩＡＴＩＯＮＯＮＳＯＭＥＰＨＹＳＩＯＬＯＧＩＣＡＬＣＨ...     

植物体细胞无性系变异的机制

植物体细胞无性系变异的机制胡尚连（东北农业大学农学系哈尔滨１５００３０）ＴＨＥＭＥＣＨＡＮＩＳＭＯＦＳＯＭＡＣＬＯＮＡＬＶＡＲＩＡＴＩＯＮＩＮＰＬＡＮＴ￥ＨｕＳｈａｎｇｌｉａｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＡｇｒｉｎｏｍｙ，ＮｏｒｔｈｅｒａｓｔＡｇｒｉｃ...     

不同方法提取两种鱼类病原菌脂多糖的化学成分分析

不同方法提取两种鱼类病原菌脂多糖的化学成分分析陈昌福李静吴志新（华中农业大学水产学院，武汉４３００７０）ＡＮＡＮＡＬＹＳＩＳＯＮＣＨＥＭＩＣＡＬＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＯＦＥｄｗａｒｄｓｉｅｌａｆｕｊｉａｎｅｎｓｉｓＡＮＤＣｙｔｏｐｈａｇａｃｏｌｕｍ...     

一种更适合培养的番茄叶肉原生质体

一种更适合培养的番茄叶肉原生质体杨华杰吴定华（华南农业大学园艺系，广州，５１０６４２）ＡＫＩＮＤＯＦＭＯＲＥＳＵＩＴＡＢＬＥＭＥＳＯＰＨＹＬＬＰＲＯＴＯＰＬＡＳＴＦＯＲＣＵＬＴＵＲＩＮＧＯＦＴＯＭＡＴＯＳＰＥＣＩＥＳＹａｎｇＨｕａｊｉｅＷｕＤｉｎｇｈ...     

茶胚胎发育研究的历史沿革

茶胚胎发育研究的历史沿革彭海峰严学成（华南农业大学生物技术学院，广州，５１０６４２）ＲＥＳＥＡＲＣＨＡＤＶＡＮＣＥＳＯＮＴＨＥＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴＯＦＥＭＢＲＹＯＩＮＣａｍｅｌｉａｓｉｎｅｎｓｉｓＰｅｎｇＨａｉｆｅｎｇＹａｎＸｕｅｃｈｅｎｇ（Ｃｏｌ...     

丙烯和1-MCP处理对采后柿果实ACS和ACO基因表达的影响

 【目的】研究丙烯、1-甲基环丙烯（1-MCP）处理对采后柿果实中与乙烯合成相关的ACS、ACO基因特异表达的影响。【方法】以中国涩柿的优良品种‘富平尖柿’为试材,于初熟期采收后将果实分别用丙烯、1-MCP处理,在常温下贮藏,定期检测乙烯释放速率及分组织提取RNA进行Northern分析。【结果】丙烯处理促进ACS、ACO基因表达进而促进内源乙烯合成;1-MCP处理抑制ACS、ACO基因的表达从而抑制内源乙烯合成。不过,二者对ACS、ACO基因表达的作用效果在不同组织中差异较大：1-MCP处理对ACS、ACO基因表达的抑制作用在果皮中最明显,其次是果肉、果心部位,果蒂着生部位处最低;丙烯对ACS、ACO基因表达的促进作用表现为果肉、果心、果皮、果蒂着生部位递增。另外,ACS、ACO基因家族各成员在不同组织的表达也不同,DKACS3基因只在果蒂着生部位表达在其它组织中没有表达,DKACS2基因在丙烯处理果中的4个组织中均有表达。【结论】丙烯处理促进ACS、ACO基因表达,1-MCP处理抑制ACS、ACO基因的表达;ACS、ACO基因在不同组织中的表达差异较大;ACS、ACO基因家族各成员在不同组织中的表达也不同。     

Regulation of Propylene and 1-Methylcyclopropene on Expressions of ACS and ACO Genes in Persimmon Fruits

The regulation of postharvest treatment with propylene and 1-MCP on ethylene release rate and expressions of 1- aminocyclopropane-l-carboxylic acid synthase （ACS） and 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase （ACO） genes in Fuping Janshi persimmon （Diospyros kaki L.） fruit were investigated. Fruits were treated with propylene and 1-MCP, then stored at 20℃, ethylene release rate of the treated fruits was measured at regular intervals and RNA was extracted for Northern blotting analysis. The results suggested that treatment with propylene accelerated the expressions of ACS and ACO genes and then enhanced the ethylene biosynthesis, while treatment with 1-MCP inhibited the expressions of two genes and their ethylene biosynthesis. Furthermore, different effects on expressions caused by treatments with propylene and 1-MCP existed in various fruit tissues, the inhibitory effect on ACS and ACO genes by 1-MCP was the strongest in pericarp, followed by pulp and core tissues, in the area near fruit stalk, the inhibitory effect was the weakest. While the enhanced effect on ACS and ACO genes by propylene increased from pulp, core, and pericarp to the area near fruit stalk. Expression of each member of ACS and ACO families in various tissues was also completely different, in control and propylene treatment, DKACS3 gene just expressed in the area near fruit stalk and did not express in other tissues, but DKACS2 gene expressed in four tissues by treatment with propylene.     

龙眼乙烯合成途径基因鉴定及响应ACC处理的分析

[目的]S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS)、1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(ACS)和1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO)是植物合成乙烯的3个关键酶,从全基因组水平鉴定龙眼SAMS、ACS和ACO(DlSAMS、DlACS和DlACO)基因家族,并进行生物信息学、体细胞胚早期不同阶段及不同浓度1-氨基环丙烷-1-羧...     

‘乔纳金’苹果及其脆肉芽变果实质地发育机理

【目的】研究‘乔纳金’苹果及其脆肉芽变果实发育后期硬度与脆度的变化、果实香气成分含量以及果实软化相关基因的表达差异,旨在为全面认识该脆肉芽变的发育机理提供科学依据,并为进一步丰富苹果果实质地品质发育的理论体系提供基本资料。【方法】以‘乔纳金’苹果及其脆肉芽变苹果发育后期的果实为试材,检测果实硬度、脆度、香气成分含量以及乙烯生物合成基因ACO、ACS和果实软化有关基因PG、PME、β-Gal、α-L-Af、XET、AM、LOX及β-xyl的表达量。【结果】‘乔纳金’苹果及其脆肉芽变果实发育后期的果实硬度与脆度整体均呈下降趋势,其中在采前50-35 d有个快速下降过程,但脆肉芽变的果实硬度与脆度均显著高于‘乔纳金’;‘乔纳金’苹果酯类化合物的种类数与含量分别是其脆肉芽变的1.5倍和1.2倍,而醇类和醛类化合物含量分别仅是其脆肉芽变的15.1%和14.3%;‘乔纳金’苹果ACO基因表达量前后变化很大,在花后120 d有一个明显的表达峰,花后113-120 d表达量（2 995.8）占总表达量（3 039.6）的98.6%,而‘乔纳金’硬肉芽变果实ACS和ACO基因表达量前后变化不大,总表达量仅分别相当于‘乔纳金’的73.9%和1.1%,且表达峰均滞后于‘乔纳金’;‘乔纳金’苹果PG及XET等6个基因在花后113-120 d表达量均占总表达量的35%以上,是引起‘乔纳金’苹果果实硬度与脆度快速下降的主要原因,而‘乔纳金’脆肉芽变果实参试的12个基因总表达量（1 021.9）仅是‘乔纳金’（4 399.1）的23.2%,其中PG、α-L-Af、 XET和β-Gal等4个基因表达量分别是‘乔纳金’的12.5%、62.7%、72.6%和75.3%。【结论】‘乔纳金’苹果酯类成分种类多、含量高,而脆肉芽变醇类和醛类成分种类多、含量高;两份材料果实发育后期果实硬度和脆度的差异及其变化可能是ACS、ACO、PG、β-Gal、β-xyl、α-L-Af和 XET等多种基因协同作用的结果,其中ACO、PG、β-Gal和XET是关键基因。     

蝴蝶兰ACC氧化酶和ACC合成酶融合反义表达载体的构建

为了获得具有超常花期的蝴蝶兰新品系,根据已报道的蝴蝶兰ACC合成酶(ACS)基因和ACC氧化酶(ACO)基因的序列,设计引物从蝴蝶兰总RNA中克隆出ACS保守区的461 bp片段和ACO的333 bp片段,完成2个基因的克隆和测序后,将ACS基因片段和ACO基因片段以反义的方向插入到中间载体pBI221 CaMV启动子...     

乙烯处理对树莓果实呼吸速率及乙烯合成代谢的影响

采集不同成熟期(绿果期、白果期、着色期、成熟期、过熟期)"哈瑞太兹"树莓果实,并利用乙烯利及乙烯抑制剂1-MCP处理白果期果实,测定上述果实不同部位(整果、小核果和花托)乙烯生成速率、呼吸速率、ACC合成酶(ACS)和ACC氧化酶(ACO)活性及RiACS1和RiACO1基因相对表达量变化。结果表明,花托是树莓果实中产生乙烯的主要部位,果实食用部分小核果乙烯生成和呼吸速率在果实发育期间变化平稳,同时结合树莓果实采后无后熟、常温贮存后易腐烂的特性,推测树莓应属于非跃变型果实。乙烯利处理促进树莓果实提前着色,整果、小核果和花托乙烯生成速率短时内增加,ABA含量显著增加,提高ACS和ACO酶活性及RiACS1和RiACO1基因转录水平,而1-MCP抑制此过程。乙烯利处理对呼吸速率影响较小,但1-MCP处理显著抑制小核果和花托中的呼吸速率。     

苹果绵肉与脆肉株系果实质地差异的分子机理

【目的】研究新疆红肉苹果（Malus sieversii脆2号’ f. neidzwetzkyana）与‘富士’苹果品种（M. domestica cv. Fuji）杂交后代绵/脆肉株系果实质地差异的分子机理,旨在为进一步完善功能型苹果育种的理论与技术体系提供科学依据。【方法】以新疆红肉苹果杂交后代‘红绵2号’和‘红脆2号’不同发育时期的果实为试材,检测乙烯释放量、果实硬度与脆度以及ACS1等4个乙烯生物合成基因和PG等30个果实软化相关基因的相对表达量,观察其变化。【结果】‘红绵2号’和‘红脆2号’苹果果实发育期间的硬度和脆度均呈下降趋势,但‘红脆2号’各时期果实硬度和脆度均明显高于‘红绵2号’。‘红绵2号’花后120 d乙烯释放速率明显上升,并出现明显的乙烯释放峰;而‘红脆2号’花后120 d乙烯释放速率上升不明显,且无明显的乙烯释放峰。‘红苹果果实各时期的ACS1、ACS3、ACO1和ACO2 4个乙烯生物合成相关基因表达量均明显低于‘红绵2号’;4个乙烯生物合成相关基因的表达模式存在明显差异,其中‘红绵2号’ACS1、ACO1和ACO2三个基因在果实发育后期的表达量均在94%以上,而ACS3a在果实发育前、后期表达量分别占50%,表现为组成型表达。所检测的与果实软化相关的30个基因表达的时间顺序存在明显差异,其中PL、AF1、EG2及XET1等15个基因主要在果实发育前期表达,PG、AF3、XET2、XET10和XET11 5个基因主要在果实发育后期表达,基因表达量均占总表达量的70%以上;除PL和AF1等6个基因外,‘红脆2号’PG等24个基因的总表达量均极显著低于‘红绵2号’。【结论】果实发育后期乙烯释放高峰的到来以及果实发育前、后期不同乙烯生物合成与果实软化相关基因的上调表达,是导致‘红绵2号’果实在采收前就已软化变绵及其与‘红脆2号’质地差异的主要原因。     

脂氧合酶在香蕉果实成熟过程中的作用

[目的]探讨脂氧合酶(LOX)在香蕉果实成熟过程中的作用.[方法]选取1 000 μ L·L-1丙烯处理采后不同时间(采后10 h和48 h)的香蕉果实,并分析果皮中MaLOX、MaACS和MaACO等基因表达,LOX活性变化,乙烯释放及其与果实成熟的关系.[结果]采后48 h的香蕉果实,经丙烯处理后果皮中LOX活性及...     

调控果实成熟的基因工程研究进展

阐述了在果实成熟过程中与乙烯生物合成和细胞壁降解相关的酶 (ACC合酶、ACC氧化酶、多聚半乳糖醛酸酶和果胶甲基酯酶 )及其调控果实成熟的基因工程研究进展