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应用鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)作免疫原建立了8株分泌抗ILTV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。这8株McAb均具有荧光抗体的特性,没有中和病毒的能力,分别属于IgG2a,IgG3和IgM,应用异硫氰酸荧光素标记McAb,建立了直接荧光抗体试验,用其检测ILTV抗原与分离病毒的符合率为92.8%。 相似文献
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抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体中和株的建立 总被引:6,自引:1,他引:5
将纯化的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)组织毒免疫的BALB/c鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用ELISA,病毒中和试验检测分泌抗体,获得了6株稳定分泌抗IBDV单隆抗体的杂交瘤细胞,命名为NIB-1,NIB-2,NIB-3,NIB-4,NIB-5,NIB-6;6株MCAb均具ELISA特性和免疫沉淀特性,亚类鉴定表明,前4株属于IgG2a,后2株属于IgG1。杂交瘤细胞冻存6个月后复苏,均 相似文献
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将鸡病毒性关节炎病毒(AVAV)鸡胚毒J─1株适应于鸡胚细胞和Vero细胞,经连续传代,通过40.5℃、37℃、32℃的交替升降培养温度培养,筛选出1株毒力较弱的克隆株,该克隆株蚀斑大小为2.7~3.1mm。以105.725TCID50注射于1日龄敏感雏鸡的足掌皮下和以104.725~106.725TCID50注射于1日龄敏感雏鸡胸部肌肉内,对雏鸡无致病性。该克隆株在敏感雏鸡内连传3代,无毒力返强现象。这一结果表明,本试验筛选出的AVAV弱毒株对雏鸡具有良好的安全性和遗传稳定性。 相似文献
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5株已适应鸡胚细胞的AVAV在Vero细胞上传2~5代后各毒株均能产生明显的CPE和较高的病毒滴度,而2株非鸡胚细胞适应株(分别为鸡胚毒和野外组织毒)在Vero细胞上盲传7代,仍无明显的CPE出现。这一结果初步表明Vero细胞能用于已适应鸡胚细胞的毒株的增殖。而不能用于病毒的分离。吸附时间与冻融次数明显影响病毒的适应进程,以吸附1小时、冻融2次以上为佳。AVAVJN-1株能在Vero细胞上产生蚀斑,大小为2.7~4.4mm,出斑时间为接种后4~5天,Vero细胞用于中和试验,测得S(1133)株免疫鸡血清的小和效价为1:80。 相似文献
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巢式PCR快速鉴定鸡传染性支气管炎病毒的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
鸡传染性支气管炎病毒(IBV)经鸡胚增殖后,直接用尿囊液提取RNA后反转录成cDNA,用IBV基因3’端的UTR1-/UTR2+和UTR3-/UTR4+两对引物进行巢式PCR,所检测的4个IBV标准参考株和16个IBV野毒株均得到了预期的174bp大小的片段,而鸡新城疫病毒(NDV),鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)及正常鸡胚尿囊液经同样处理没有可见片段出现。本试验不需纯化册毒只需05ml病毒尿囊液即可在24小时内得到准确的试验结果。这表明与其它IBV鉴定方法相比,该法具有快速、灵敏、特异的优点。 相似文献
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建立了抗禽脊髓炎病毒(AEV)的单克隆抗体(MAb)VR9-1。接种AE鸡胚适应毒Van Rockcl株、2种疫苗株和2种野毒株的雏鸡脑冰冻切片、鸡胚成纤维细胞和鸡胚脑细胞,用间接免疫荧光和免疫过氧化物酶染色检查,结果,均可与MAb VR9-1起反应。该MAb也可用于石蜡包埋切片的抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶染色。试验结果表明,该MAb可认别AEV毒株的一个共同抗原决定簇,可用于AEV检测和定 相似文献
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利用鸡包涵体肝炎自然病例的肝组织,通过SPF鸡胚传代和鸡胚肾原代细胞培养,分离到一株鸡包涵体肝炎病毒Hb株。该病毒株的复制可被5-溴尿嘧啶-2′脱氧核苷抑制,对乙醚和氯仿有低抗力,说明Hb株的核酸型为DNA,无脂质囊膜。Hb株对酸有抵抗力,对热敏感。电镜观察表明,病毒粒子呈球形,直径约80~90nm。用AAV-2、3、4、5、8型的分型高免血清进行中和试验,证明Hb株为血清型8型。回归试验表明Hb株具有较强的致病性 相似文献
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将每组8只1日龄白洛克鸡的几个组,分别以新城疫病毒(NDV0B-1和VG/GGA珠点眼免疫;部分鸡到17日龄时进行二免。对免疫过1次或2次的8组鸡,到30日龄时以速发型嗜内脏型新城疫强毒(vvNDV)Calif-1083株进行肌注或点眼攻毒。一组未免疫的对照组进行点眼攻毒。攻毒结果:8只未免疫的对照鸡全死亡;经B-1株免疫的16只鸡中有2只死亡;而经VA/GGA株免疫的16只鸡中却无一死亡。攻毒前 相似文献
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抗鸡传染性喉气管炎病毒单克隆抗体的研制及在诊断上的应用 总被引:2,自引:1,他引:1
鸡传染性喉气管炎王岗株病毒(ILTV)经SPF鸡肾细胞增殖,差速离心及蔗糖密度梯度离心纯化;电镜观察,以纯化的病毒4次免疫BALB/c鼠,按常规方法进行细胞融合,采用有限稀释法克隆,经ELISA筛选出3株(8E2、13G6,9C4)分泌抗ILTV特异McAb的杂交瘤细胞,特异性试验表明经闪与鸡的传染性支气管炎,痘病毒,新城疫病毒马立克氏病病毒,白血病病毒及鸡肾细胞均无交叉反应。在获得三株单抗建立单 相似文献
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鸡传染性喉气管炎病毒SA2疫苗株免疫效力的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)疫苗株尿囊膜乳剂原液经点眼接种2、7和15日龄雏,2日龄雏鸡组在接种后第7天有20%(1/5)鸡出现眼睑肿胀和流泪等眼部反应,7日龄和15日龄雏鸡组无明显临床变化。用该疫苗株乳剂原液点眼接种1月龄以上鸡眼部无明显反应,但通过气管接种后,26.7%(4/15)鸡表现出ILT临床症状。试验用SA2株点眼接种免疫1月龄以上鸡,免疫组保护率为100%(20/20),对照组发病率为100%(10/10)、死亡率为40%(4/10)。2、7和15日龄雏鸡点眼毒力试验的3组鸡,于接种后21~34天用王岗株ILT强毒攻击,100%得到保护,而对照组鸡100%发病。试验结果表明,SA2疫苗株是一株毒力温和、副作用小而且免疫效力好的疫苗用毒株 相似文献
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用某鸡场发生减蛋综合征病鸡的输卵管组织接种10-12日龄鸭胚盲传,分离到一株EDS-76·EXK2病毒。自第3代起至第10代,均从鸭胚尿囊液中检出血凝素,凝集鸡红细胞的特性可被EDS-76阳性血清所抑制。鸭胚分离毒不能凝集免红细胞。应用第3和第4代鸭胚尿囊液混合毒经口腔、鼻腔和眼途径人工感染健康产蛋鸡,成功地复制了EDS-76。攻毒后35天内11只试验鸡的总产蛋数无明显变化,产蛋率为85~94%, 相似文献
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将鸡病毒性关节炎病毒鸡胚毒J-1株适应于鸡胚细胞和Vero细胞,经连续传代,通过40.5℃、37℃的交替升降培养温度培养,筛选出1株毒力较弱的克隆株,该克隆株蚀斑大小为2.7-3.1mm,以10^5.725TCID50注射于1日龄敏感雏鸡的足掌皮下和以104.725-10^6.725TCID50注射于1日龄 敏感雏鸡胸部肌肉内,对雏鸡无致病性,该克隆株在敏感雏鸡内连传3代,无毒力返强现象。这一结果 相似文献
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采用腹腔的接种1次脾内注射禽呼肠孤病毒(ARV)蛋白免疫小鼠,经3次融合后,共筛选8株分泌抗禽呼肠孤病毒(单克隆抗体杂交瘤细胞株,这8株McAb均可与ARVS1133株,FDO株发生反应,而与IBDV,MDV,EDS-76病毒不发生反应,经亚类鉴定,AE7,AF8,BD1,DH10,EE5为IgG1;AD6,CG4为IgC2a,AG7为IgG2b。腹水效价在10^3~10^5之间。 相似文献
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鸡败血霉形体SC克隆致弱株免疫原性试验 总被引:2,自引:0,他引:2
在透明塑料隔离器中进行了鸡败血霉形体人工发病试验,结果30日龄SPF来航鸡在NDV、IBV弱毒诱导和70/1000000(质量分数)氨环境刺激的联合作用下,致病率可达100%(7/7)。经鸡败血霉形体S6克隆致弱株SCF156代培养物点眼、滴鼻免疫后10,20,30d的SPF来航鸡再以MG强毒攻毒,结果,保护率分别达80.0%(4/5),75.0%(3/4)和87.5%(7/8)。近期免疫效果证明,鸡败血霉形体S6克隆致弱株SC有良好的免疫原性。 相似文献
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从病鸡肾脏分离到一株病毒,电镜观察病毒粒子呈圆形,直径100nm左右,有典型的冠状纤突。SPF鸡胚传代,鸡胚发育迟缓。气管环组织培养法测定TCID50为10^6.4/ml。分离毒对乙醚敏感,不耐热,56℃水浴15min失活。病毒无血凝特性,但径兔A型魏氏梭菌培养液处理后出现血凝性,HA效价为3Log2。血清交叉中和试验结果表明,分离毒的血清型不同于已有的Massachusetts、Connecti 相似文献
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鸡传染性法氏囊病Vero细胞弱毒疫苗病毒滴度为10^7.3-10^8.3TCID50/0.05ml。疫苗经皮下,肌肉,点眼-滴鼻和口服途径免疫接种雏鸡,均表现出良好的免疫原性。皮下接种14日龄雏鸡,免疫后8,14和21天攻毒,保护数分别为2/6,6/6和5/6,如在35日龄再加强免疫一次,于二免后70天和115天攻毒,其保护数分别为6/6和5/6。疫苗的最小免疫剂量为10^5TCID50/只,用1 相似文献