中药对柔嫩艾美尔球虫感染鸡外周血T细胞亚群的影响

为研究中药对柔嫩艾美尔球虫感染鸡免疫水平的影响,本实验采用流式细胞技术检测柔嫩艾美尔球虫感染鸡外周血CD4+T细胞亚群,以及CD8+T细胞亚群数目的动态变化。结果表明,接种球虫后,感染给中药组鸡CD4+、CD8+T细胞亚群数目及百分比(CD4+T/CD8+T)均高于感染不给药组,9d时,感染给中药组最高,分别为9.77和7.53,与感染不给药组差异显著(p0.05)。感染球虫组CD4+T/CD8+T比值均低于不感染组,感染给中药组在接种后第6d和第9d均高于感染不给药组。感染给中药组、不感染给中药组和不感染不给药组CD4+T/CD8+T平均值均在2-1之间,分别为1.11、1.33和1.25,而感染不给药组仅为0.93。     

传染性法氏囊病病毒超强毒感染SPF鸡免疫器官中CD4+和CD8+T淋巴细胞动态分布

利用免疫组织化学染色对传染性法氏囊病病毒（IBDV）超强毒LX株感染SPF鸡免疫器官中CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞的动态分布进行了研究。超强毒LX株接种2周龄SPF雏鸡，在其法氏囊、脾脏、胸腺、盲肠扁桃体、骨髓和哈氏腺中均可检出IBDV抗原的存在和CD4^ 与CD8^ T淋巴细胞的数量改变。在法氏囊中，CD4^ 淋巴细胞主要存在于淋巴滤泡间隙和滤泡皮质，而CD8^ T淋巴细胞则丰在于整个淋巴滤泡和滤泡间隙，并且CD8^ T淋巴细胞数量明显多于CD4^ T淋巴细胞，在接种后14d仍未见CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞数量减少。脾脏中CD4^ T淋巴细胞主要存在于外周小动脉淋巴鞘或散在，而CD8^ T淋巴细胞则多存在于外周小动脉淋巴鞘和红髓。接种后胸腺中CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞在皮质中减少，但在髓质增多，尤其是CD8^ T淋巴细胞数明显多于CD4^＋T淋巴细胞。盲肠扁桃体中CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞主要存在于发生中心，尤其是CD8^ T淋巴细胞数比CD4^ T淋巴细胞明显多。骨髓和哈氏腺中也可见CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞，而且CD8^ T淋巴细胞更多。在这些淋巴器官中，病毒损伤部位出现CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞的迁入聚集，表明T淋巴细胞可能参与IBDV超强毒的免疫致病过程。     

中药"球康"对E.tenella感染鸡肠道CD4+和CD8+T细胞的影响

本试验采用免疫组化方法检测球虫感染鸡肠道组织中CD4^＋、CD8^＋T细胞数量,探讨中药“球康”抗球虫的作用机理。试验共设不感染不给药组、不感染给“球康”组（2％拌料）、感染给“球康”组和感染不给药组共4组。感染球虫后第2、4、5、7和9天,每组随机捕杀4只鸡,采取盲肠中段进行检测。结果,雏鸡感染球虫后,盲肠组织中CD4^＋、CD8^＋T细胞数量显著高于不感染组,感染给中药“球康”组鸡CD4＋T细胞数量在第2,4,5和9天均高于感染不给药组,在第4天和第5天差异显著（P＜0．05）;CD8＋T细胞数量在第2,5,7和9天高于感染不给药组,第5天差异显著（P＜0．05）,第7天达到最高峰。说明中药“球康”通过增加球虫感染鸡肠道黏膜CD4^＋、CD8^＋T细胞数量,提高细胞免疫水平,以增强机体对球虫的抑杀作用。     

外周血中CD4+、CD8+T、CD4+CD25+Treg在绵羊接种布鲁氏菌M5-90弱毒疫苗后的动态变化

为研究绵羊接种布鲁氏菌弱毒M5-90株后外周血中CD4+、CD8+T、CD4+CD25+Treg细胞的动态变化规律,本研究选择11只健康绵羊,每10 d免疫一次,共免疫3次,分别在免疫前、免疫后10d、20 d、30 d利用流式细胞术检测外周血中CD4+、CD8+T、CD4+CD25+Treg淋巴细胞亚群.在免疫后的第20 d,CD4+T、CD8+T细胞百分含量达到最高水平(P＜0.05)后均缓慢下降;在第10d,CD4+CD25+Treg细胞缓慢升高,至20 d、30 d均显著升高(p＜0.05);在布鲁氏菌M5-90疫苗免疫应答过程中CD4+CD25+Treg细胞参与了机体的免疫反应调控,对CD4+T、CD8+T淋巴细胞的比例进行调节,并且维持CD4+/CD8+比值稳定,起到平衡Th1/Th2细胞间反应的作用.     

川楝素对妊娠小鼠子宫组织中CD4+/CD8+T细胞和F4/80+巨噬细胞的影响

为探讨CD4+、CD8+ T淋巴细胞和F4/80+巨噬细胞在流产发生机制中的意义,研究中药单体成分川楝素诱导小鼠流产的作用及机理,本试验给妊娠5 d小鼠连续3 d腹腔注射不同剂量的川楝素溶液,对照组以等量的蒸馏水代替,于妊娠9 d处死.在给药后发现随着注射川楝素剂量的增加,小鼠的流产率逐渐上升,CD4+、CD8+ T淋...     

猪圆环病毒2型感染小鼠脾脏内CD4~+CD25~+调节性T细胞的动态变化

为分析猪圆环病毒2型(PCV2)感染小鼠后脾细胞中CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)占CD4+T细胞比例的动态变化,探讨Tregs与PCV2感染的关系,本研究选择清洁级昆明小鼠60只,随机分成实验组和对照组,实验组腹腔接种PCV2,分别在接种后第0 d、5 d、10 d、20 d、30 d和60 d取脾脏制备单细胞悬液,用FITC-CD4和PE-CD25单克隆抗体标记Tregs,采用流式细胞仪检测Tregs占总CD4+T细胞百分比的动态变化。结果表明感染组小鼠脾细胞中Tregs百分比从第5 d开始逐步上升,第20 d达峰值后逐渐下降,感染组Tregs百分比第10 d、20 d、30 d时显著高于对照组(p0.05),但第60 d两组间差异不显著(p0.05)。试验结果证明PCV2感染昆明小鼠后,可在小鼠脾脏内诱导明显的Tregs增殖,这些增殖的细胞可能在PCV2感染中发挥免疫抑制作用。     

米糠多糖对免疫抑制鸡外周血CD4~+和CD8~+ T淋巴细胞亚群的调节作用

为探讨米糠多糖对免疫抑制鸡免疫功能的调节作用,采用流式细胞技术检测了环磷酰胺和传染性法氏囊病毒诱导免疫抑制鸡在服用米糠多糖(剂量为150 mg/kg)和不服用米糠多糖情况下,外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群数量的动态变化。结果显示,米糠多糖能够抑制环磷酰胺和传染性法氏囊病毒处理鸡外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞数量的降低;提高健康雏鸡外周血中CD4+T淋巴细胞比率,对CD8+T淋巴细胞作用不明显。     

增免散对鸡脾T淋巴细胞CD4^＋和CD8^＋亚群的影响

将300只1日龄雏鸡随机分为中药增免散组、环磷酰胺组、环磷酰胺＋左旋咪唑组、环磷酰胺＋增免散组和正常对照组，6日龄时用鸡新城疫LaSota疫苗点眼滴鼻免疫，14、21、28、35日龄时测定鸡血液NDV抗体效价，脾器官指数，脾组织中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞浓度和脾细胞凋亡率，观察脾的组织结构变化。结果显示，14、21日龄增免散组抗体水平高于其他各组（P〈0．01）；14、21、28日龄增免散组脾指数高于其他各组，增免散组脾CD4^＋细胞浓度、CD4^＋／CD8^＋比例高于其他各组，差异极显著（P〈0．01）；14、21、28日龄增免散组脾细胞凋亡率低于其他各组，差异极显著（P〈0．01）；14、21日龄时，增免散组脾白髓和红髓内网状细胞和中淋巴细胞较多，脾小体比对照组略有增加。表明，中药增免散不仅能促进鸡脾的发育，增高脾组织中CD4^＋／CD8^＋比例，而且对环磷酰胺的免疫抑制有一定拮抗作用。     

紫锥菊、黄芪对感染IBDV雏鸡胸腺、小肠中CD4+、CD8+T淋巴细胞动态分布的影响

将14日龄雏鸡随机分为3组,A组灌服1 mL的紫锥萄、黄芪合荆,B、C组灌服生理盐水,连续灌服7 d.21日龄时A、B组雏鸡接种传染性法氏囊病病毒(IBDV),用免疫组化法观察雏鸡胸腺、小肠中CD4+、CD8+T淋巴细胞动态分布的变化.结果表明,用药组和攻毒对照组相比较,CD4+T淋巴细胞差异显著(P<0.05),但是CD8+T淋巴细胞差异不显著(P>0.05),与空白对照组相比CD4+淋巴细胞显著增多.胸腺、小肠中24日龄时CD4+、CD8+T细胞数量较其他日龄差异显著(P<0.05).总试验期胸腺中CD4+、CD8+含量是所测总数的60%.表明紫锥菊、黄芪对机体免疫有显著增强作用,以胸腺中CD4+、CD8+含量多于小肠,能显著降低IBDV对机体造成的损伤.     

营养限制及补偿对羔羊体重及外周血液CD4+和CD8+T淋巴细胞的影响

本试验旨在研究羔羊营养限制期(第1～60天)和营养补偿期(第61～150天)体重和外周血液中CD4+和CD8+T淋巴细胞的变化规律.选用80只体况中等、平均体重为(14.72±1.10)kg的3月龄乌珠穆沁羔羊,随机分为对照组(CG)、限制组Ⅰ(RG Ⅰ)、限制组Ⅱ(RGⅡ)和限制组Ⅲ(RG Ⅲ)4个组.营养限制期4组饲粮能氮水平分别为代谢能(ME):10.88、10.88、9.41和8.62 MJ/kg;粗蛋白质(CP):15%、10%、10%和5.7%.营养补偿期各组饲喂同一能氮水平饲粮(ME:9.75 MJ/kg;CP:12%).在试验期每周称重并在第1天、第30天、第60天、第90天和第150天饲喂前从各组羊颈静脉采血,采用流式细胞仪检测羔羊血液中的CD4+和CD8+T淋巴细胞比例.结果表明:1)营养限制结束,RG Ⅰ组、RG Ⅱ组和RG Ⅲ组平均体重均显著低于CG组(P＜0.05).补偿期RGⅢ组平均日增重显著高于CG组(P＜0.05).2)营养限制前期(第1～30天)各组CD4+和CD8+T淋巴细胞浓度均呈上升趋势.补偿期结束时CD4+T淋巴细胞浓度RG Ⅰ组最低RGⅡ组最高,CD8+T淋巴浓度RGⅡ组最低RG Ⅰ组最高,差异均不显著(P＞0.05).结果提示,乌珠穆沁羔羊受不同能氮营养水平限制后体重和免疫机能有补偿效应,而且低能高氮比高能低氮限饲后得到的补偿效果较好,表明限饲蛋白质比限饲能量对补偿生长的负影响更大.蛋白质和能量同时限饲补偿生长最差.     

刺五加多糖对雏鸡脾脏中CD4+ 和CD8+T淋巴细胞定位分布的影响

为了研究刺五加多糖（ASPS）对雏鸡脾脏中CD4+和CD8+ T淋巴细胞定位分布的影响,从组织学角度评价ASPS对脾脏的免疫调节作用,试验将1日龄海兰褐公雏饲养至7日龄时选取150只,随机分为3组：空白对照组、ASPS低剂量组（ASPSL）和高剂量组（ASPSH）,每组50只,所有组每天注射1次,连续注射3天。免疫后的第7、14、21和28天分别取其脾脏制作冰冻切片,采用免疫组织化学方法检测CD4+和CD8+ T淋巴细胞的定位分布。结果显示,与空白对照组比较,免疫注射后21天和28天时ASPSL组和ASPSH组CD4+ T淋巴细胞的数量均显著增加（P<0.05）,而且ASPS能够促进红髓中CD4+ T淋巴细胞向动脉周围淋巴鞘迁移,从而使单个动脉周围淋巴鞘面积较对照组明显增加,而ASPS对脾脏中CD8+ T淋巴细胞的数量和分布无明显影响。由此可知,ASPS能够通过影响脾脏中CD4+ T淋巴细胞的定位分布发挥免疫调节作用,这对于进一步揭示ASPS的免疫调节机制具有重要意义。     

高温下清凉冲剂对鸡免疫器官中CD4+、CD8+ T细胞数量的影响

采用免疫组化方法检测鸡免疫器官中CD4^＋、CD8^＋T细胞数量，探讨高温下清凉冲剂对机体细胞免疫机能的影响及其药理作用。108只农大3号35目龄公雏，随机分为3组，每纽36只鸡，即常温对照组、高温对照组和高温用药组。用药组饲喂中药煎荆（浓度为1g／ml），用药量与饲料量比为1：1000。在试验的第1、4、8、10天各组捕杀5只。分别采取胸腺、脾脏、法氏囊检测。结果高温下。用药组免疫器官中CD4^＋、CD8^＋T细胞数量均高于高温对照组。第8、10天差异极显著（P〈0．01）。表明高温下清凉冲剂可以增加鸡免疫器官中CD4^＋、CD8^＋T细胞数量，有效地提高鸡细胞免疫水平。     

E.tenella初次感染雏鸡外周血T淋巴细胞亚群及增殖能力变化的动态研究

应用流式细胞术（ FCM）和MTS比色法检测雏鸡初次感染柔嫩艾美尔球虫（ E． tenella）后外周血中CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T淋巴细胞及其增殖能力的动态变化。数据显示,E． tenella初次感染雏鸡后7～20 d CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T 淋巴细胞比例明显高于对照组雏鸡（ P＜0．05和P＜0．01）,并且均于12 d时达到峰值。初次感染后7～20 d雏鸡外周血中CD4＋／CD8＋T淋巴细胞亚群的比值明显升高,于感染后16 d时达到1．78。 E． tenella初次感染雏鸡后12～20 d外周血淋巴细胞增殖能力明显高于对照组雏鸡（ P＜0．05）,并于16 d达到峰值。试验表明E． tenella初次感染雏鸡能激活淋巴细胞产生增殖反应,CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T淋巴细胞在抵抗E． tenella初次感染过程中有重要作用。     

禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织CD4+/CD8+细胞及相关细胞因子表达的影响

旨在探讨禽网状内皮组织增生病病毒（reticuloendotheliosis virus,REV）对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织中T淋巴细胞数量以及相关细胞因子表达的影响。将96只1日龄SPF雏鸡随机分为REV感染组和对照组,应用流式细胞术、酸性α-醋酸萘酯酶染色（acid α-naphthyl acetate esterase,ANAE）、荧光定量PCR等方法对上述指标进行检测。试验数据表明,与对照组相比,感染组雏鸡血液CD4⁺T淋巴细胞数量在第7~35天显著降低、CD8⁺T淋巴细胞数量在第7~28天显著升高,CD4⁺/CD8⁺比值在第7~28天显著降低（均P<0.05或P<0.01）;局部淋巴组织哈德尔腺（Hader’s gland,HG）、派伊尔结（Peyer’s patch,PP）和盲肠扁桃体（caecal tonsil,CT）中ANAE⁺T淋巴细胞数量均显著降低（均P<0.05或P<0.01）;GH、PP和CT中细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α 转录量都有不同程度升高。本研究表明,REV感染引起雏鸡血液中CD4⁺ T淋巴细胞数量降低、CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比例失衡、局部淋巴组织中T淋巴细胞数量相对减少及细胞因子TNF-α转录持续升高与REV造成感染雏鸡细胞免疫功能显著降低密切相关。     

雏鸡感染柔嫩艾美尔球虫局部黏膜免疫细胞的动态变化

本试验采用免疫组化法检测柔嫩艾美尔球虫感染雏鸡后盲肠黏膜sIgA+细胞和T细胞亚群的动态变化。结果发现:sIgA+细胞和CD4+T细胞数量在感染球虫后第2天就明显升高,第5天达到高峰,随后逐渐下降。而CD8+T细胞在感染球虫后第4天,才显著增加,感染后第7天达到高峰。表明雏鸡感染球虫后,机体能迅速启动黏膜免疫应答,不同的免疫细胞在抵抗柔嫩艾美尔球虫感染不同阶段发挥不同的作用。     

负载灭活口蹄疫病毒树突状细胞启动的CD8~＋T细胞应答

探讨在体外条件下负载灭活口蹄疫病毒（iFMDV）树突状细胞对CD8＋T细胞的活化效应。用重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rmGM-CSF）和白介素-4（rmIL-4）将小鼠外周血单核细胞诱导分化成树突状细胞（MoDCs）,用信号阻断法从淋巴结T细胞制备CD8＋T细胞,利用负载iFMDV的MoDCs与CD8＋T细胞共培养,以iFMDV＋MoDCs作为对照,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。用蛋白酶体抑制剂处理MoDCs,2h后再负载iFMDV,并与CD8＋T细胞共培养,对照组则用iFMDV＋MoDCs＋CD8＋T细胞,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。结果表明,同对照组相比,在共培养后9,12,24,36,48h,CD8＋T细胞组均产生高水平的IFN-γ。而且,经抑制剂预处理的MoDCs与CD8＋T细胞共培养后,其分泌的IFN-γ量不仅没有降低,反而显著升高。因此得出,MoDCs可与蛋白酶体等加工iFMDV抗原,并通过交叉提呈途径激活CD8＋T细胞。     

Immunization-induced decrease of the CD4+:CD8+ ratio in cats experimentally infected with feline immunodeficiency virus.

In a previous experiment a group of 15 specified pathogen free (SPF) cats were experimentally infected with a Swiss isolate of feline immunodeficiency virus (FIV). A group of 15 SPF cats served as FIV negative controls. Nine cats of each group were vaccinated with a recombinant feline leukemia virus (FeLV) vaccine, six cats in each group with a placebo vaccine. All vaccinated cats developed high antibody titers to FeLV and were protected against subsequent FeLV challenge infection. In both control groups five of six cats became persistently infected with FeLV. Unexpectedly, the primary immune response to the vaccine antigen was significantly higher in the FIV positive group than in the FIV negative. The secondary response was stronger in the FIV negative cats. The goal of the present investigation was to further study the immune response in these 30 cats. They were immunized twice with the synthetic peptide L-tyrosine-L-glutamic acid-poly(DL-alanine)-poly(L-lysine) (TGAL) 21 days apart. Blood samples were collected on four occasions during the immunization process. They were tested for antibodies to TGAL, complete blood cell counts and CD4+, CD8+ and pan-T-lymphocyte counts. The following observations were made: (1) in contrast to the FeLV vaccine experiment, the primary immune response to TGAL was not significantly stronger in the FIV positive cats when tested by enzyme-linked immunosorbent assay (2). The absolute size of the CD4+ lymphocyte population was distinctly smaller in the FIV positive than in the FIV negative cats. The lowest CD4+ values were found in the dually FIV/FeLV infected cats. (3) A population of CD8+ lymphocytes was identified that was characterized by a distinctly weaker fluorescence. The size of this population increased in FIV positive and decreased in FIV negative cats during the TGAL immunization experiment. (4) The CD4+:CD8+ ratio increased in FIV negative cats during TGAL immunization from 1.9 to 2.3. In contrast, in FIV positive animals the CD4+:CD8+ ratio decreased significantly from 1.9 to 1.3 during the same period. From these and earlier data it was concluded that in short-term FIV infection the immune response to T-cell dependent antigens may be increased over that of the controls. Immune suppression develops gradually with duration of the infection. The significant drop of the CD4+:CD8+ ratio over a 5 week immunization period suggests that antigenic stimulation may accelerate the development of immune suppression in FIV positive cats. If this is a general feature, FIV infection may provide a particularly interesting model for studying the pathogenesis of AIDS.     

AA肉鸡血液CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞的变化规律

采用流式细胞仪检测1、3、5、7、14、21、28、35、42、49日龄AA肉鸡血液中的CD3、CD4、CD8阳性T细胞比例。研究结果表明:1～5日龄T细胞逐渐进入血液参与细胞免疫,7、21日龄注射疫苗起免疫应答作用,28日龄后基本形成稳固的细胞免疫水平。     

The Localization Changes of CD4+ and CD8+ T Lymphocytes in Chicken Lung at Different Ages

The aim of this study was to investigate the immune state of chicken lung in different periods.With lung tissue of Hy-line White chicken at different ages,the distribution and quantity changes of CD4⁺ and CD8⁺T lymphocytes in lung were studied using immunohistochemistry staining.The results showed that CD8⁺T lymphocytes appeared firstly in embryonic at 18 d,while CD4⁺T lymphocytes appeared at 1-day-old chicken.At 4-day-old,there were aggregates of lymphocytes at the junction of the primary and secondary bronchi,which formed obvious broncho-associated lymphoid tissue (BALT).CD4⁺T lymphocytes of each age mainly occupied the central area of BALT,while CD8⁺T lymphocytes mainly surrounded the periphery.Since 56 days old,CD8⁺T lymphocytes are distributed in the inner wall of third-order bronchial airway,atrial septum,gas exchange area and interlobular connective tissue,and are distributed throughout the lung.In terms of quantity change,with the growth of daily age,the number of CD4⁺T lymphocytes and CD8⁺T lymphocytes gradually increased,and the number of CD4⁺ T lymphocytes was more than that of CD8⁺ T lymphocytes before 35 days of age,while the number of CD8⁺ T lymphocytes was significantly more than that of CD4⁺ T lymphocytes at the same age thereafter.The results showed that the distribution and number of CD4⁺ and CD8⁺T lymphocytes in the lungs of chickens were correlated with the age,and the changes could reflect that the lungs before the age of 35 days were dominated by humoral immunity,while the lungs after that tended to be cellular immunity.