一种棉花DNA快速高效简便的提取方法

探索了一种提取棉花DNA的简便方法,利用该方法提取的棉花总DNA经过分光光度计、琼脂糖凝胶电泳和随机SSR引物PCR扩增检测,结果表明,利用本方法提取的棉花总DNA纯度高,无降解现象,适用于进行常规PCR扩增以及高精度要求的SSR扩增。     

4种快速提取棉花总DNA方法的比较

通过对 4种提取棉花总DNA的方法 :氯仿—异戊醇法、CTAB法、β 巯基乙醇法 (暂定名 )及PVP法分析比较 ,得出CTAB法较为理想 ,能大量、快速提取棉花总DNA。     

棉花DNA提取方法综述

棉花是我国重要的经济作物之一,富含棉酚、多糖、单宁等其他干扰物质,因此其DNA的提取和纯化较其他作物更为困难。文中对棉花DNA提取方法进行了讨论,其中SDS法和CTAB法是常用的2种提取方法,而CTAB法及其改良法提取的效果最好。     

棉花DNA提取方法的探讨

就提取棉花基因组DNA的两种基本方法及其相应的改进方法作了系统比较研究.结果表明:改进的SDS法和CTAB法分别优于原SDS法和CTAB法,两种改进方法提取棉花基因组DNA效果一致.DNA的得率与提取方法有关,还与棉花的取材部位有关.改进的CTAB法DNA得率高于改进的SDS法;采用改进的CTAB法提取棉花不同部位基因组DNA,其DNA得率的高低依次为花药>花瓣>叶片>纤维.由改进方法提取的棉花基因组DNA能完全双酶切,能满足SSR和AFLP等后续分子生物学研究的需要.     

改良SDS法提取棉花基因组DNA研究

通过在目前常用的SDS法的DNA提取液中加入抗氧化剂(PVP40和β-巯基乙醇)排除棉酚等次生物质干扰,进行了棉花基因组DNA的提取方法研究,结果表明,改良后的SDS法能够解决棉花DNA提取质量不高且容易褐变等问题。     

棉花DNA提取方法的优化及SSR标记在多态筛选的应用

对棉花DNA的提取方法进行了优化,通过改良方法所提取的棉花总DNA的质量得以提高.为了进一步证实改良的总DNA提取方法的效果,对所构建的抗黄萎病QTL定位群体的双亲进行了SSR-PCR检测,得到了清晰的多态性SSR标记,为研究分子标记在棉花育种的应用打下了基础.     

基于棉花BAC文库的线粒体DNA的提取方法

以棉花的黄化苗为材料，根据棉花自身的特点，利用差速离心的方法分离线粒体后再经低熔点琼脂糖包埋裂解提取了完整的mtDNA。其质量完全可以满足BAC文库构建中限制性酶切、PCR检测、分子杂交筛选等实验的要求。     

棉花基因组DNA快速提取方法改良

选择2种简化的棉花基因组DNA提取方法并进行适当精简改良后与传统CTAB提取法进行实验对比的结果显示,改良SDS-CTAB法所提DNA得率较高,纯度好,但其操作步骤相对复杂。改良CTAB法操作更加简捷,但DNA得率相对较低,所得DNA溶液浑浊度较高。相对于传统的CTAB提取法,两种改良方法都能够更加快捷的得到足量且纯净的基因组DNA,完全能够满足转基因后代PCR筛选检测的要求。     

柰基因组DNA的提取与纯化

以榇嫩芽为材料．对Dellaporta等用CTAB制备植物基因组DNA的方法进行改良，结果表明，加入质量分数ω=10％PVPP与材料充分研磨，将提取缓冲液的β-巯基乙醇体积分数降低为1％，能有效地去除材料中的多酚类物质；用氯仿／异戊醇(24：1)抽提裂解液2次所获得的上相．加入1／10体积的65℃的NaCl／CTAB溶液混匀，再用氯仿／异戊醇(24：1)连续抽提2次，并在DNA粗提液中加入适量高浓度NaCl和无水乙醇沉淀DNA，可以有效地去除多糖的干扰．获得比较纯净的DNA样品；PCR特异性扩增的结果表明，以改良法的DNA为模板可获得PPO基因保守区约600～800bp特异条带．且扩增条带较亮、无引物二聚体出现。     

马蹄金总DNA的快速提取

利用E .Z .N .A微量植物DNA提取试剂盒 ,在 1h内可快速可靠地从马蹄金 (DichondrarepensForst)植物样本或组织中提取纯度较高的总DNA。这套系统利用速度和多变的旋转技术来结合DNA吸附旋转柱中基质的核酸内容物 ,从而除去植物组织中的多糖、酚化合物、酵素抑制剂。所得DNA产物纯度高可直接用于PCR ,RAPD、AFLP等各种下游分析技术     

棉花DNA导入苎麻的RAPD验证

为了寻找通过超干胚浸泡法已经将湘棉１２号ＤＮＡ导入苎麻湘苎３号基因组中的分子证据,对所产生的变异后代进行了ＲＡＰＤ验证,所用８０个随机引物中,有６个引物检测出变异材料９７－２４与受体的ＤＮＡ多太 ,３个引物检为异材料９７－２８与受体的多太,４个引物检为异材料９７－４与受体的多态性,并且有２个引物在变异后代中扩增出供体特异带,这些结果说明棉花ＤＮＡ导入苎麻后引起了后代基因组的变异。     

猪肾组织中DNA提取的研究

对血液中提取基因组DNA的方法加以改进,获得了一种提取猪肾组织中DNA的有效方法。试验表明DNA在不同浓度的电解质中溶解度不同。     

棉花总RNA的快速提取方法

介绍了一种适合于棉花各种组织的RNA提取方法。它具有简便、快速等特点，且所提取的RNA样品质量较高，可直接用于cDNA合成、RNA dut blot等分子生物学操作。     

棉花DNA导入苎麻引起变异的研究

 80年代以来,外源DNA直接导入植物的分子育种技术在国内得到迅速发展。就该技术本身而言,供、受体范围不断扩大,已达40余种〔1〕,但主要集中在禾本科和锦葵科的一年生大花作物;导入方法也在不断创新和改进,仍以周光宇创导的花粉管通道法为主,但对于多年生无性繁殖的小花作?..     

蜜蜂DNA提取纯化与RAPD反应体系的建立

以意大利蜜蜂为材料，研究了蜜蜂DNA的提取以及对RAPD分析的影响因素，包括模板浓度、Mg^2 、dNTP和引物，建立了适于蜜蜂RAPD分析的PCR反应体系，即20μL反应体系中，包括10mmol／L Tris—HCl(pH8．3)、50mmol／L KCl、20～60ng DNA、3．0mol／L MgCl2、0．2mmol／L dNTP、0．5μmol／L随机引物和1．5unit Taq聚合酶。扩增程序为：94℃预变性5min，94℃变性1min，36℃退火1min，72℃延伸2min，40个循环：最后在72℃延伸10min．     

植物种子DNA快速提取新方法

本研究提出了一种提取植物种子DNA的快速、简便、有效的新方法。基本过程包括选取饱满植物种子3-5粒并研成细粉．用提取缓冲液提取、离心分离、异丙醇沉淀、TE缓冲液保存得到的DNA。结果表明：所获得的DNA浓度和质量均较高．经扩增与琼脂糖凝胶电泳后得到了非常清晰的DNA谱带，特别适合序列特征扩增区段（Sequence-Characterize Amplified Region，SCAR）检测。     

一种快速提取番茄叶片DNA的方法

以番茄的幼叶为实验材料提取总DNA,经0.8%的琼脂糖凝胶电泳检测结果发现：DNA质量较好,所得的DNA可用于RAPD等技术。此法具有提取速度快、质量高和经济实用等优点。     

棉花的外源DNA导入技术与分子育种

外源DNA导入植物是植物分子育种的一条较为简易的技术途径,它是通过DNA片段的杂交达到改变植物遗传基础的目的。     

奶牛瘤胃胃液微生物总DNA的提取和纯化

本研究建立了从奶牛瘤胃液中提取混合微生物总DNA的方法，对现有的方法进行改进使其适合于瘤胃混合微生物总DNA的提取。粗提后的瘤胃DNA可以直接扩增出16SrDNA。提取效率为每毫升瘤胃液的DNA提取量为0.1～0.3μg。通过SiO2回收进行纯化，纯化回收率达到34%～50％；用clean-up试剂盒纯化，纯化率可达到85％以上。经过纯化后的DNA可进行其它的分子生物学操作。