兔出血症病毒分子生物学研究进展

兔出血症是由兔出血症病毒引起的一种急性、高度致死性传染病，病死率可高达100％，给养兔业带来了巨大的经济损失。近年来，随着对其研究的不断深入，在病毒分子生物学方面取得了很大的进展。文章主要从基因组结构及功能、编码的结构蛋白与非结构蛋白、基因疫苗等方面系统阐述了兔出血症病毒分子生物学方面的研究进展，同时，提出了存在的问题和展望。为进一步研制兔出血症病毒基因工程疫苗及诊断试剂提供理论基础，以期能更有效地防治此病。     

一株兔出血症病毒某些性质的研究

采用氯仿,聚乙二醇一硫酸葡聚糖钠盐二相系统和蔗糖密度梯离心法,从患兔出血症死亡兔肝组织中提取,纯化病毒。该病毒粒子无囊膜,呈２０面体对称,直径一般为３３－３７ｎｍ。共三角剖分数Ｔ＝３,共有３２个子粒,每一子粒为中空,外径为９ｎｍ左右的圆形轮廓。     

兔出血症病毒（RHDV）研究进展

兔病毒性出血症 (RHD)是由兔出血症病毒（ RHDV）引起的一种高度接触传染性、急性、致死性传染病，以传染性极强、呼吸系统出血、肝坏死、实质脏器水肿、淤血及出血性变化为特征，其发病率和致死率都很高，是兔的一种毁灭性传染病。目前所有已测的兔的品种（系）都表现出对该病的易感性，但在自然条件下， RHDV只感染年龄较大的家兔， 2月龄以下的仔兔自然感染时一般不发病。该病自 1984年春在我国江苏无锡、江阴等县市首先暴发后，迅速流行蔓延开来，迄今为止，包括台湾地区在内的所有省份都有 RHD的流行报道。此后朝鲜于 1986年开始…     

兔病毒性出血症病毒的分离和诊治

兔病毒性出血症是由兔病毒性出血症病毒引起的高度接触传染性、急性、致死性的传染病,以传染性极强、呼吸系统出血、肝坏死、实质脏器水肿、淤血及出血性变化为特征,其潜伏期短、发病率和死亡率高,是兔的一种毁灭性传染病。本病的传染源是病兔和带毒兔,可经消化道、呼吸道、伤口和黏膜直     

ELISA检测兔出血症病毒抗体的研究

用人“O”型红细胞吸附解脱法提纯制备的兔出血症病毒抗原,成功地建立了ELISA检测兔出血症病毒抗体的方法。实验证明,该ELISA方法敏感、特异,与HI试验结果有极好地相关性。     

兔出血症病毒缺失突变体的构建及鉴定

为研究兔病毒性出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV）衣壳蛋白与病毒侵染性的关系,在RHDV侵染性克隆的基础上,构建了缺失衣壳蛋白（VP60）部分编码基因（5 325-6931 nt）的全长cDNA分子克隆。然后,在体外转录合成RNA,转染RK-13细胞,观察RHDV缺失5 325-6 931 nt区域以后,病毒的侵染性以及病毒复制能力的变化情况。结果表明,5 325-6 931 nt区域缺失以后,病毒的侵染性没有明显改变,但是病毒的复制能力有所下降。可见,该区域含有与病毒复制有关的调控序列或元件。     

兔出血症病毒VP60蛋白真核表达及其免疫原性研究

将兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)衣壳蛋白VP60基因,克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建pcDNA-VP60,并将其转染Vero细胞.间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测pcDNA-VP60在细胞中的表达情况,同时将pcDNA-VP60免疫实验兔,观察血清中特异性抗体变化情况.试验结果表明,本文构建的pcDNA-VP60不仅能在Vero细胞中表达VP60蛋白,而且能够诱导机体产生免疫应答.     

兔出血症病毒遗传与变异的分子基础

兔病毒性出血症是由兔出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV）引起的一种急性、高度致死性传染病,病死率高达100％。近年来,由于该病毒血凝性、抗原性的变异,病毒感染宿主增多,不仅对该病的防控造成了一定的威胁,更造成了严重的经济损失。国内外研究学者对该病毒的基因组结构、基因组编码的产物和功能,病毒的宿主和受体以及病毒变异等相关进行了大量深入的研究和分析,为该病毒的防控和治疗提供了技术基础。本文就RHDV遗传与变异的分子基础作一综述,希望能为深入了解该病毒,以及日后的防控提供一定的理论支持。     

兔病毒性出血症病毒次要结构蛋白（VP2）的表达和细胞内定位分析

病毒蛋白VP2是兔出血症病毒（Rabbit Hemorrhagic Disease Virus,RHDV）的一种次要结构蛋白。本文旨在构建VP2与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体,进而利用它研究VP2在细胞内的定位情况。首先在大肠杆菌中表达GST-VP2融合蛋白,然后用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备抗VP2的抗血清。对制备的抗VP2抗血清进行特异性分析,再利用该抗体对转染pEGFP-VP2的BHK-21细胞进行检测,以研究VP2蛋白在细胞内的定位情况。结果表明,pEGFP-VP2转染BHK-21细胞后,不仅VP2蛋白得到了成功表达,而且通过检测偶联的绿色荧光蛋白可判断出VP2蛋白主要分布于BHK-21细胞的细胞质。本研究成功构建了VP2与绿色荧光蛋白融合的表达载体,并在真核细胞内实现了表达,通过检测荧光蛋白,发现VP2主要在细胞质内表达并分布,为深入探讨VP2的生物学功能奠定了基础。     

西藏林芝地区首次发现兔出血症病毒血清亚型

经交互保护试验发现,用西藏兔出血症病毒制备的疫苗免疫家兔后能抵抗同源病毒和江苏兔出血症病毒攻击,保护率均为１００％;而用江苏兔出血症病毒制备的疫苗对西藏兔出血症病毒却不能提供有效的保护,保护率仅为３３．３％。交互血凝抑制和琼脂扩散试验表明,两者在血凝素抗原及琼脂扩散抗原上均存在较大差异。首次发现兔出血症病毒血清亚型。     

兔病毒性出血症母源抗体动态与抗病毒感染的关系和对策

兔病毒性出血症疫苗免疫母兔所产６、１５、３０、４５、６０、日龄共１２６只兔的母源抗体随日龄增长而下降，至３０￣４５日龄，４８￣８５％的兔为阴性，其平均值为２＾３。强毒攻击耐过母兔所产的未吃初乳、已吃初乳、１５、３０、４５、６０、９０及１１４日龄以上兔１８６只的母源抗体也随日龄增长而消失，但消失时间长，其平均值至１１４ｄ后才降至２＾３。已吃初乳仔兔抗体平均值比未吃初乳高，未吃初乳兔的抗体与母兔基本持     

NDV小片段多肽F14a的融合表达和应用的研究

将对应NDV强毒株F基因裂解位点附近编码 14个多肽的双链寡核苷酸片段克隆至融合表达载体 pGEMEX 1,构建重组质粒GEMF14a并转化大肠杆菌DE3。将GEMF14a/DE3的融合表达产物免疫兔 ,制备抗多肽抗体。该抗体与NDV强毒株F4 8E9呈ELISA强阳性反应 ,P/N >3 5～ 7 0 ,而与弱毒NDV的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ系呈阴性反应 ,P/N <2 0 ,证明制备的F14a抗多肽抗体是特异的 ,可用于NDV强弱毒株的毒力快速鉴别。     

鸡病毒性关节炎病毒（AVAV）的分离与鉴定

用ＳＰＦ鸡胚细胞培养，从临床上呈现类似鸡病毒性关节炎症状病鸡的趾屈肌组织中分离出一株病毒，电镜观察，病毒直径约为７５ｎｍ，无囊膜，呈六边形，双层衣壳，理化检查，病毒对５－氟脱氧尿核苷、ｐＨ５．０和乙醚耐受，胰蛋白酶对病毒感染价无影响；核酸电泳分析，病毒由１０个核酸片段组成，呈３－３－１－３分布；血清学试验，该病毒与ＡＶＡＶＳ＿（１１３３）株呈交叉反应。上述检查结果表明分离的病毒为鸡病毒性关节炎病毒，结合现场病鸡的临床症状和双份血清抗体检测结果，认定该鸡场此次发生的传染病为鸡病毒性关节炎。     

兔病毒性出血症病毒的提纯及部分特性鉴定

应用建立的SDS—蔗糖密度梯度超速离心法,纯化了从兔肝组织中粗提的兔病毒性出血症病毒。通过血凝、电镜观察、SDS-PAGE、琼脂双向免疫扩散、免疫印迹等试验,证明SDS—蔗糖梯度柱分离的病毒纯度高,具有4种结构多肽。