核桃青皮抑真菌物质的分离鉴定与抑菌活性

[目的]分离鉴定出核桃(Juglans regiaL.)青皮中对植物病原真菌起抑制作用的化合物,并评价其抗菌活性.[方法]采用生长速率法依次测定核桃青皮乙醇粗提物,石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取物以及石油醚相分离流分和活性化合物对葡萄蔓枯病菌(Cryptosporella viticola)等植物病原真菌的抑菌活性;结合抑菌活性追踪,采用硅胶柱层析、制备薄层层析分离纯化活性组分,核磁共振波谱(NMR)对活性物质进行结构鉴定.[结果]核桃青皮乙醇粗提物和3种萃取物以及石油醚萃取相的分离流分,分别对供试的10种、4种和3种植物病原真菌有抑制活性;流分Fr1-4和Fr1-5对葡萄蔓枯病菌(Cryptosporella viticola)、葡萄溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea)和辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici)3种病原真菌的抑制率显著高于其他4个流分,流分Fr1-4对葡萄蔓枯病菌的抑制率达70.08％;分别从Fr1-4和Fr1-5鉴定出1个环状二芳基庚烷化合物胡桃素和4,8-二羟基-1-四氢萘酮(胡桃酮);胡桃素对供试的葡萄蔓枯病菌和辣椒疫霉病菌均显示出抑制活性,对其菌丝生长抑制中浓度(EC50)分别为0.060、0.124 mg/mL.[结论]核桃青皮乙醇粗提物及其石油醚、三氯甲烷萃取物均对供试的植物病原真菌有良好的抑制活性,从中分离获得的胡桃素对葡萄蔓枯病菌有显著抑菌活性,对辣椒疫霉病菌有中等的抑菌活性.     

核桃青皮提取物对四种植物枯萎病菌的抑菌作用

为了研究核桃青皮提取物对4种植物枯萎病菌的抑菌作用,笔者采用甲醇、氯仿、石油醚对核桃青皮进行提取,并对抑菌活性最高的提取物（甲醇提取物）进行初步萃取分离,测定了不同溶剂粗提物和甲醇提取物不同溶剂萃取液对茄子枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、辣椒枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的抑菌活性。结果表明,核桃青皮甲醇粗提液对4种供试枯萎病菌的抑制效果最好,浓度为4.0 mg/mL时,对黄瓜、茄子、辣椒枯萎病菌的抑制率均在60%以上,对西瓜枯萎病菌也为37.9%;核桃青皮甲醇提取物石油醚萃取物对西瓜枯萎病菌的抑制效果最好,抑制率为65%,对菌丝生长的EC50为4.45 mg/mL;氯仿萃取物对黄瓜、茄子枯萎病菌的抑制率最高,分别为65%、62.3%,对菌丝生长的EC50分别为4.46、3.51 mg/mL;甲醇萃取物对辣椒枯萎病菌的抑制效果较好,抑制率为63.94%,对菌丝生长的EC50为4.23 mg/mL。     

核桃青皮提取物对4种植物枯萎病菌的抑菌作用研究

为了研究核桃青皮提取物对4种植物枯萎病菌的抑菌作用,笔者采用甲醇、氯仿、石油醚对核桃青皮进行提取,并对抑菌活性最高的提取物(甲醇提取物)进行初步萃取分离,测定了不同溶剂粗提物和甲醇提取物不同溶剂萃取液对茄子枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、辣椒枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的抑菌活性。结果表明,核桃青皮甲醇粗提液对4种供试枯萎病菌的抑制效果最好,浓度为4.0mg/mL时,对黄瓜、茄子、辣椒枯萎病菌的抑制率均在60%以上,对西瓜枯萎病菌也为37.9%;核桃青皮甲醇提取物石油醚萃取物对西瓜枯萎病菌的抑制效果最好,抑制率为65%,对菌丝生长的EC50为4.45mg/mL;氯仿萃取物对黄瓜、茄子枯萎病菌的抑制率最高,分别为65%、62.3%,对菌丝生长的EC50分别为4.46、3.51mg/mL;甲醇萃取物对辣椒枯萎病菌的抑制效果较好,抑制率为63.94%,对菌丝生长的EC50为4.23mg/mL。     

核桃青皮中次生代谢物质的化感活性研究

以核桃青皮水提液及各萃取物为材料,对其化感活性进行了研究,结果表明:(1)核桃青皮水提液对绿豆、萝卜、油菜及小麦幼苗生长均有较强的抑制作用.(2)核桃青皮水提液的各萃取物及水相萃余物在供试浓度为 0.05 g·mL-1时,对4种供试植物的生长均有较好的化感抑制作用,且对4种植物幼根生长的抑制作用均大于对幼芽生长的抑制作用.乙酸乙酯萃取物的抑制效果最好.(3)核桃青皮中水溶性化感活性物质主要集中在乙酸乙酯相,随着乙酸乙酯萃取物浓度的降低,其抑制作用逐渐减弱.     

石楠拟盘多毛孢致病毒素的初步分离纯化

为了获得引起草莓根腐病的石楠拟盘多毛孢(Pestalotiopsis photiniae)产生的致病毒素组分,利用中压硅胶柱层析、高效液相C-18制备柱层析和sephadex LH-20层析对粗毒素进行了分离纯化,以离体叶盘针刺法检测分离所得组分的致病活性。结果显示:经中压硅胶柱层析和高效制备液相色谱得到了FrⅢ1和FrⅢ2两个组分,其中FrⅢ1有较强活性;用sephadex LH-20对FrⅢ1进一步纯化后又得到了两组活性组分FrⅣ1-2和FrⅣ3-4,其中组分FrⅣ3-4的活性明显强于组分FrⅣ1-2;HPLC分析发现这两组组分又分别含有2个和5个组分,7个组分均在C-18柱层析过程中出峰时间较早,说明该毒素的极性较大。     

问荆活性物质的提取及对番茄灰霉病菌的抑制作用

通过活性物质跟踪的方法,研究了问荆中的活性成分对番茄灰霉病菌的抑菌活性,结果表明:3种溶剂提取物中,氯仿提取物对番茄灰霉病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制率最高,EC50分别为0.52和0.21mg/mL;对氯仿提取物萃取分离得到的4种不同溶剂萃取物中,乙酸乙酯组分对灰霉病菌菌丝和孢子萌发的抑制效果最佳,EC50分别为0.37和0.28mg/mL;经柱层析分离得到的12个流分中,L9流分的抑制菌丝生长作用最强,EC50为0.22mg/mL,L9流分处理灰霉病菌后发现菌丝生长稀疏,菌体细胞膜渗透性增大,电镜图片显示菌丝变形,有瘤状突起。因此,问荆提取物对灰霉病菌具有很强的抑制效果,为新型植物源农药的开发提供了一定基础。     

鹊肾树叶石油醚萃取物及其组分抗肿瘤作用研究

[目的]研究鹊肾树（Streblus asperLour.）叶石油醚萃取物及其组分的体外抗肿瘤活性。[方法]采用MTT法检测鹊肾树叶石油醚萃取物以及经硅胶柱层析分离各组分的体外抗肿瘤活性。[结果]80μg/ml鹊肾树叶石油醚萃取物对宫颈癌细胞Hela、人胃癌细胞SGC-7901、口腔上皮癌细胞KB作用48 h的抑制百分率分别达到58.6%、53.5%和75.5%。进一步分离纯化鹊肾树叶的石油醚萃取物,所得的FrⅡ组分（80μg/ml）对Hela、SGC-7901和卵巢癌细胞Ca-cell的48 h抑制率分别达到69.7%、64.6%和60.2%,FrⅢ组分对Hela、SGC-7901和Ca-cell的48 h抑制率分别达到73.1%、66.1%和52.8%。[结论]鹊肾树叶石油醚萃取物具有一定的抗肿瘤作用,经进一步分离所得的FrⅡ、FrⅢ组分对体外肿瘤细胞增殖呈明显的抑制作用。     

凤尾菇发酵液抗细菌组分分离及其活性研究

以发酵培养的凤尾菇发酵液为材料,浓缩后经乙酸乙酯和正丁醇分级萃取,采用薄层层析和硅胶柱层析分离得到数个组分,研究了各组分对供试细菌的抗菌活性,并对部分活性组分进行GC-MS化学成分分析。结果表明:凤尾菇发酵液乙酸乙酯萃取物硅胶柱洗脱组分Epsc1、2及正丁醇萃取物硅胶柱洗脱组Npsc1、2具有抗菌活性,其中组分Npsc1对金黄色葡萄球菌抑制作用最强。     

核桃青皮中的低极性组分对几种植物种子萌发及幼苗生长的影响

研究了核桃青皮水提液石油醚萃取相对供试作物的化感活性,结果表明:(1)核桃青皮水提液在供试浓度为30 mg·mL-1时,对6种供试植物(绿豆、小麦、萝卜、油菜、黑麦草及高羊茅)的发芽率和幼苗生长均有较好的化感抑制作用.(2)核桃青皮水提液石油醚萃取相中的活性物质对植物幼苗生长的抑制有一定的选择性.对小麦、油菜和高羊茅幼根的抑制大于对幼芽的抑制;对绿豆、萝卜和黑麦草幼芽的抑制大于对幼根的抑制.(3)不同浓度处理液对小麦、油菜和黑麦草的化感抑制作用随石油醚萃取相浓度的增大而增强.(4)小麦是进一步研究的良好受体.     

核桃青皮的化感作用Ⅰ次生物质对几种植物幼苗生长的影响

用核桃青皮提取物及其萃取物处理6种植物幼苗的结果表明:①核桃青皮乙醇提取物对6种植物幼苗生长都有较高抑制作用.②醇提物的乙酸乙酯萃取相对6种植物的幼根、幼芽生长都有很好的抑制作用,效果显著.③核桃青皮中化感物质对植物幼根的抑制作用大于对幼芽的抑制作用.     

木荷活性成分的分离及其对稻瘟病菌的室内毒力

采用大孔树脂柱层析、硅胶柱层析、RP-18柱层析对木荷活性级分进行分离,并采用菌丝生长速率法测定了木荷各活性级分对稻瘟病菌的室内毒力.结果表明:分离得到的各级分在试验浓度下对稻瘟病菌菌丝的生长具有不同程度的抑制作用,其中M2IGR5的EC50值为16.4143 μg/mL,EC90值为76.1582 μg/mL;M2IGR5R1、M2IGR5R2、M2IGR5 R3、M2IGR5R4上清液成分EC50值分别为62.8415、13.1103、18.5500、29.6187μg/mL,EC90值分别为210.7384、51.9870、74.4309、217.1198 μg/mL;M2IGR5R2、M2IGR5R3、M2IGR5R4沉淀物EC50值分别为9.1313、8.7662、9.6927μg/mL,EC90值分别为17.6899、17.5825、205.3981 μg/mL.各活性级分中M2IGR5R2、M2IGR5R3沉淀物EC50和EC90值最小,抑菌活性最强,具有开发成植物源农药的潜力.     

细辛对番茄早疫病菌的抑制作用及其活性成分的分离

以番茄早疫病菌为供试植物病原菌,采用生物活性追踪法和活体盆栽试验法评价了细辛提取物的抑菌活性,并探索了细辛的杀菌活性成分。结果表明:细辛氯仿粗提取物在96和48 h对供试菌的菌丝生长和孢子萌发都有较强的抑制作用。其中对菌丝生长和孢子萌发的半效应浓度EC50分别为1.69和0.41 mg/mL。细辛氯仿粗提取物经萃取分离得到的石油醚、氯仿和甲醇组分中,石油醚组分对供试菌孢子萌发具有强抑制作用,处理48 h后抑制率达到100%;但处理96 h后对菌丝生长的抑制率仅有40%。氯仿组分对供试菌的菌丝生长和孢子萌发均具有较好的抑制作用,分别为72.27%和83.42%。对氯仿组分进行硅胶柱层析分离,得到4个高活性流分,在96 h对供试菌菌丝生长的抑制率达到85%以上。在盆栽试验中,4 mg/mL细辛氯仿提取物对番茄早疫病的保护和治疗作用达70%以上,与化学农药处理无显著差异。试验显示细辛对番茄早疫病菌具有较好的防治效果。     

冬青卫矛内生真菌2QR1菌株代谢产物的杀菌活性

为寻找天然植物源新的具有农药活性的先导化合物,从冬青卫矛根皮中分离到1株内生真菌,编号为2QR1,初步鉴定其为半知菌亚门,曲霉属(Aspergillus)。室内活性测定结果表明,2QR1菌株发酵液的杀菌活性远高于菌丝体的杀菌活性。该菌株发酵液乙酸乙酯萃取物对小麦根腐病菌、小麦赤霉病菌、苹果炭疽病菌、玉米大斑病菌、番茄叶霉病菌、烟草赤星病菌和马铃薯干腐病菌菌丝生长抑制的有效中质量浓度EC50值分别为53.6,63.1,63.3,98.2,106.5,115.9和166.3μg/mL;对玉米大斑病菌、小麦根腐病菌、烟草赤星病菌和马铃薯干腐病菌抑制孢子萌发的有效中质量浓度EC50值分别为94.8,139.1,146.6和180.1μg/mL;在质量浓度为500μg/mL时,对枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径在16 mm以上。盆栽试验结果表明,2QR1菌株发酵液乙酸乙酯萃取物在质量浓度为2 000μg/mL时,对小麦白粉病的保护作用和治疗作用分别为61.9%和81.6%。选用硅胶柱层析,以杀菌活性追踪为指导,对该菌株发酵液乙酸乙酯萃取物进行了杀菌活性成分的分离,得到化合物B9。化合物B9对玉米大斑病菌、烟草赤星病菌、小麦根腐病菌和马铃薯干腐病菌抑制孢子萌发的有效中质量浓度EC50值分别为0.8,1.4,3.3和5.0μg/mL。     

杠柳叶的化学成分及其粗提物杀虫活性研究

通过对杠柳叶的化学成分系统预试,检测出杠柳叶中存在酚性成分、有机酸、皂苷、黄酮类及其苷类、植物甾醇、三萜类化合物。同时以生物活性跟踪法测定了杠柳叶萃取物对三龄粘虫和菊小长管蚜的杀虫活性。结果表明,乙酸乙酯萃取物的活性最高。乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析分离后F3组分的触杀活性最高,72 h对粘虫触杀LC50是2.903 2 mg.mL-1,24 h对蚜虫触杀的LC50为0.526 3 mg.mL-1。     

黄皮生物碱的提取及对芒果细菌性角斑病菌抑制作用初探

以海南本地黄皮种子为试材,采用乙醇浸提、酸提碱沉的方法提取黄皮总生物碱,以硅胶柱层析的方法进行初步分离,并测定各组分对芒果细菌性角斑病菌的抑制活性。结果表明,2.46kg黄皮种子共得到生物总碱71.2g,进一步纯化后有效生物碱组分为30.7g,占样品干重的1.25%,中等极性段占组分比61.9%;分离得到的7个组分中Fr.4和Fr.5表现出抑菌活性,抑菌圈大小分别为11.2mm、10.1mm,可作为制备植物源杀菌剂的先导材料。本研究旨在为黄皮资源的开发利用和更深层次的研究提供参考。     

九里香层析物的抑菌活性及成分分析

以石油醚为洗脱液，对九里香氯仿萃取物进行硅胶柱层析分离，得到27个组分。采用生长速率法测定九里香层析物对5种供试病原菌的抑制作用。结果表明，在质量浓度为0.5 g/L时，组分26对5种供试病原菌有较好的抑制活性，对香蕉炭疽菌的抑制率达到89.46%，对香蕉炭疽菌的EC50为0.078 6 g/L。GC-MS分析表明，组分26的主要成分是7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素，占92.00%。     

菊科4种植物萃取物对核桃病原真菌的抑菌活性研究

以菊科4种植物为实验材料,分别用石油醚和乙酸乙酯对菊科4种植物的提取物进行萃取,采用生长速率法测定了不同萃取物对5种核桃病源的抑菌活性,通过SPSS 19软件计算了不同的萃取物对5种核桃病原真菌的毒力回归方程和半抑制浓度。结果表明:菊科4种植物的有机溶剂萃取物对5种核桃病原真菌的生长均有不同程度的抑制效果。小飞蓬石油醚萃取物对壳梭孢、壳二孢、炭疽菌的抑制效果最好,抑制率到达了77.5%、81.6%、79.5%,EC50值分别为1.31、1.34、0.71 mg/mL。波斯菊石油醚萃取物对叶点霉病原菌抑制效果最好,抑制率为74.1%,EC50值为0.56 mg/mL。小飞蓬乙酸乙酯萃取物对拟茎点霉病原菌的抑制效果最好,抑制率为61.8%,EC50值为3.63 mg/mL。     

紫茉莉种子中对草地贪夜蛾的杀虫活性成分及杀虫机制

为了研究紫茉莉种子中对草地贪夜蛾的杀虫活性成分,对紫茉莉种子石油醚萃取物进行硅胶柱层析分离和气相色谱-质谱法(GC-MS)分析,采用浸虫法测定各馏分及化学成分对草地贪夜蛾的杀虫活性。结果表明,采用硅胶柱层析法分离紫茉莉种子石油醚萃取物,共得到20个馏分,其中馏分2对草地贪夜蛾3龄幼虫的校正死亡率最高,第7 d时为82.00%。经GC-MS分析,馏分2的主要化学成分为十三烷(9.59%)、亚油酸乙酯(51.14%)和油酸乙酯(34.26%)。这3种化学成分对草地贪夜蛾3龄幼虫处理后第7 d,LC₅₀分别为15.06 mg/ml、5.70 mg/ml和18.42 mg/ml,亚油酸乙酯的杀虫活性最好。随亚油酸乙酯质量浓度的增加,乙酰胆碱酯酶(AChE)活性呈现先抑制后激活再抑制的趋势,羧酸酯酶(CarE)活性呈现先抑制后激活的趋势,Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性呈现先激活后抑制的趋势。综上,紫茉莉种子石油醚萃取物中杀虫活性最好的化合物为亚油酸乙酯,可为新型植物源杀虫剂的开发利用提供理论依据。     

滩涂盐生植物碱蓬化学成分提取及酪氨酸激酶抑制活性的试验

对滩涂盐生植物碱蓬中有效成分的提取及酪氨酸激酶抑制活性进行了初步研究.碱蓬全草乙醇提取物经萃取,硅胶柱层析的方法分离提取,并进行酪氨酸激酶抑制活性的试验.结果显示,超声波法的提取效果较索氏提取法好;碱蓬中的提取物能够抑制酪氨酸激酶的活性,IC50值为1.57 mg/mL.     

核桃根与叶中化感物质对魔芋、半夏及马铃薯生长的影响

核桃是毕节地区重要的经济林树种，当地核桃林下常间作魔芋、半夏、马铃薯。为合理利用核桃的化感作用发展核桃林间作套种模式提供依据，以100 mg/mL、50 mg/mL、25 mg/mL、10 mg/mL、2 mg/mL共5个浓度梯度的核桃根、叶浸提液及清水（对照）对魔芋、半夏、马铃薯作种植前的浸种与出苗后的浇灌处理，测定3种受体植物的生长指标。结果表明：1）各浓度核桃根、叶浸提液处理的魔芋出苗率均高于对照，从柄高、柄围、冠幅等生长指标来看，100 mg/mL、10 mg/mL的叶浸提液，25 mg/mL、2 mg/mL的根浸提液，相较其他浸提液可在一定程度上促进魔芋地上部分生长。从魔芋球茎生长情况看，100 mg/mL、25 mg/mL、10 mg/mL的叶浸提液、25 mg/mL、10 mg/mL、2 mg/mL的根浸提液更有利于魔芋地下球茎生长。2）除100 mg/mL根浸提液外，其他各浓度核桃根、叶浸提液处理的半夏出苗数均高于对照；100 mg/mL叶浸提液与2 mg/mL、25 mg/mL的根浸提液不仅能提高半夏出苗率，还能促进半夏苗生长，其他浓度的根、叶浸提液对半夏生长既无促进...