植物组培产业化生产中污染防控技术研究

对浙江省植物组培产业生产中心的主要污染微生物的防控技术进行了研究,从11个杀菌剂和消毒剂中筛选出了对污染细菌德氏假单胞菌（Pseudomonas delafieldii）、丁香假单胞菌（Pseudomonas syringae）、蜡状芽胞菌（Bacillus cereus）和污染真菌指状青霉（Penicillum digitatum）、黑曲霉（Aspergillus niger）预防效果好,且对组培植物安全的药剂为乙蒜素和链·土霉素。乙蒜素可以在培养基分装前加入,与培养基同时灭菌使用;而链·土霉素在培养基使用前加入可有效预防污染物生长,该药剂对组培器皿和环境也有较好的消毒效果。     

植物组织培养操作技术

植物组织培养的重点在于操作,操作规范与否决定了组培工作的成败,该文就溶液配制、培养基制作、灭菌技术、接种及造成污染的原因进行分析总结,并提出了相应的解决方法,对组培日常工作起到一定的指导作用。     

洋葱外植体的组织培养方法与对策

以洋葱鳞茎盘、种子、未开花薹、未开花蕾为外植体,以MS为基础培养基,探讨洋葱愈伤诱导和单倍体研究中具体组培操作方法;同时,对实验中外植体材料取样、接种方式、消毒方法等造成的真菌和细菌性污染进行了分析。结果显示,花薹外植体污染率最低,适合作为愈伤诱导外植体;接种后期出现的污染主要是因封口膜破裂造成的真菌性污染,可采用高温灭菌后的塑料膜封口。本研究结果可为洋葱快繁、转基因、基因编辑等研究提供基础。     

丛生紫荆培养基厚度、灭菌时间对抗污染及组培苗的影响

培养基的分装厚度和灭菌时间是培养基抗污染的关键，直接影响组培苗的生长和生产，对降低污染意义重大。通过不同灭菌时间及不同分装厚度丛生紫荆培养基抗污染效果试验、不同分装厚度培养基对丛生紫荆组培苗生长发育的影响试验，筛选出MS丛生紫荆培养基最佳灭菌时间为20 min、最佳分装厚度为2.0 cm。本试验可降低组培过程中受污染的风险，降低组培苗成本，减少经济损失，为丛生紫荆规模繁育、工厂化生产提供良好的技术平台。     

降低彩色马蹄莲组培初代培养污染因素的筛选

[目的]筛选降低彩色马蹄莲组培初代培养污染率的最佳方法。[方法]以正在萌芽的红色、黄色马蹄莲1年生小球茎为培养材料,选取水浴温度、表面消毒时间、表面消毒剂种类、防腐剂种类4个因素进行正交设计,培养10 d后统计每个组合的污染率、褐变率。[结果]选取的4种因素对污染率均有极显著影响(P<0.01),其中水浴温度、表面灭菌时间、表面消毒剂种类对褐变率有显著影响(P<0.05)。从单个因素来看,水浴温度40℃时污染率较低,0.1%HgC l2处理的污染率较低,无防腐剂处理的污染率较低;水浴温度45℃时褐变率较低,表面灭菌时间短的处理减少褐变率的效果较好。[结论]水浴温度50℃、0.1%HgC l2处理20 m in、无防腐剂培养基的污染率最低。     

蝴蝶兰抗菌组培试验

为降低蝴蝶兰组培苗生产成本,简化组培程序,以自主研发的抗菌剂进行蝴蝶兰类原球茎扩繁、继代和增殖苗壮苗生根的抗菌组培(开放组培)试验。结果表明:附加适当浓度抗菌剂能有效抑制培养基污染,类原球茎扩繁培养后增重倍数与对照(高压灭菌培养基)差异不显著。类原球茎在抗菌培养基继代培养2次(合计培养150 d),增重倍数与对照无明显差异。增殖苗在含香蕉汁培养基壮苗生根,2个适宜浓度抗菌剂的培养基污染率与对照基本相同;瓶苗成活率、叶片数、根数都与对照相同,平均苗高、平均根长均与对照无明显差异。所以该抗菌剂应用于蝴蝶兰的抗菌组培是可行的。     

降低软枣猕猴桃初代培养污染率的研究

[目的]筛选降低软枣猕猴桃外植体初代培养污染率和提升外植体诱导率的处理方法。[方法]采用半木质化的软枣猕猴桃新梢作为外植体,根据外植体灭菌时间和氨苄青霉素培养基浓度差异组合,分析降低软枣猕猴桃外植体初代培养污染率和提升外植体诱导率的因素,筛选出最适宜的处理方法。[结果]增加外植体75%乙醇灭菌时间至10 s可降低软枣猕猴桃初代培养污染率,培养基中氨苄青霉素浓度为100~150 mg/L时,软枣猕猴桃初代培养污染率随培养基中氨苄青霉素浓度的增加而降低。增加外植体灭菌时间和培养基中氨苄青霉素浓度均能增加软枣猕猴桃外植体诱导率。[结论]污染率低且诱导率高的处理方法为1/2MS+100 mg/L氨苄青霉素、1/2MS+150 mg/L氨苄青霉素、外植体75%乙醇灭菌10 s+0.1%升汞灭菌8 min和外植体75%乙醇灭菌10 s+0.1%升汞灭菌10 min。     

艾叶、苍术在香蕉组培苗工厂化生产车间的空气消毒应用研究

采用我国特有的中草药艾叶、苍术对香蕉组培生产培养车间进行空气熏蒸消毒灭菌试验。结果显示,艾叶用量为1．0～3．0g／m^3时的灭菌率为57．1％～59．5％,苍术用量为2．0g／m^3时的灭菌率为62．5％,消毒前后室内含菌量差异显著;艾叶对霉菌的灭杀效果比对细菌的好,而苍术对细菌的灭杀效果则优于对霉菌的效果;连续4年的生产应用证明,艾叶熏蒸消毒灭菌技术对香蕉组培苗工厂化生产的污染控制效果明显,4年中香蕉组培苗的污染率降低了60．9％。试验结果表明,艾叶、苍术熏蒸灭菌消毒技术是目前常用消毒方法理想的替代品,是植物组培生产中又一种新的空气熏蒸消毒技术。     

安顺缫丝花组织培养中的污染及防控对策

安顺缫丝花是贵州特有的物种,其果具有较高的经济价值,其组培育苗成活率较低。为探索安顺缫丝花在组织培养过程中造成污染的原因,提高组培成活率,从污染来源进行研究,通过试验对比分析,发现造成安顺缫丝花组培污染的途径有外植体、培养容器、接种工具、培养基、接种室和培养环境、接种人员的操作等,应根据不同的污染途径采取相应的措施进行预防和控制。     

组培工厂化生产污染的发生与防止

试管繁殖过程中 ,不可避免地有污染 ,污染是组培中既影响速度又增加成本的有害因素 ,一般工厂化生产时污染率都应控制在 5 %以内。赵惠祥 (1996)报道一座珠美海棠试管苗工厂因管理不善、污染严重而倒闭。在试管繁殖的前期更应予以足够重视。Ｋｅａ -ＹｏｅｕｐＲａｅｋ等 (1993)报道繁殖非洲菊和灯台花 6万株试管苗 ,若在第一个阶段 ,低污染率一年中损失 0 4 12美元 ,而高污染率则造成 2 75 6万美元的损失。一个年产 2 0 0万株有效香蕉苗的试管苗工厂 ,生产过程中需要灭菌培养基 80万瓶左右 (其中 4 0万瓶为分化芽培养基 ,4 0万瓶为生根培…