培养基、激素和添加物对大花蕙兰原球茎诱导增殖的影响

本试验较系统地研究了培养基、激素6-BA和添加物对大花蕙兰“红翡翠”原球茎的诱导、增殖效果的影响。明确了最佳原球茎诱导培养基配方；筛选出较理想的原球茎继代增殖的培养基、6-BA浓度、添加物的配比参数值：1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋100/L椰乳＋3％蔗糖、0．3％活性炭、1．0％琼脂。     

培养基、激素和添加物对大花蕙兰原球茎诱导增殖的影响

较系统地研究了培养基、激素6-BA和添加物对大花蕙兰"红翡翠"原球茎的诱导、增殖效果的影响.明确了最佳原球茎诱导培养基配方,较理想的原球茎继代增殖培养基、6-BA浓度、添加物配比参数值分别为1/2MS 6-BA 1.0 mg/L NAa0.1 mg/L 100g/L椰乳 3%蔗糖、0.3%活性炭、1.0%琼脂.     

大花蕙兰原球茎增殖分化影响因素研究

大花蕙兰在供试的MS、1/2MS、KC和VW4种培养基中.其原球茎增殖倍率没有明显差异,在3.51～3.89倍之间,发芽率在MS培养基中最佳,达16.1%.Ad、KT、6-BA等细胞分裂素处理中,以6-BA最有利于原球茎增殖倍数的提高,6-BA浓度在0.1～1.0mg/1范围内对大花蕙兰原球茎增殖没有明显的影响,对幼苗的分化则有一定的影响.原球茎增殖培养基中加入0.5～1mg/1 NAA有利于原球茎增殖倍数与生根率的提高.继代周期以4～6周为宜,培养基中宜加入20～30g/1的蔗糖、10%的椰乳、0.5g/1的活性碳.     

大花蕙兰原球茎增殖条件研究

采用原球茎（PLB）进行繁殖是大花蕙兰-种重要的再生方式。本研究以大花蕙兰原球茎为外植体进行研究,比较不同基本培养基（1／3MS、1／2MS、MS）、有机添加物（椰乳、香蕉泥、苹果汁）、活性炭和植物激素（6-BA、NAA）等因子对大花蕙兰原球茎增殖效果的影响。结果表明：1／2MS为基本培养基有利于PLB的增殖;有机添加物对PLB的增殖也有影响,其中,以椰乳的增殖效果最好,其次为香蕉泥、苹果汁;1．5g·L。活性炭可以有效减少褐变的发生;低水平的NAA（O．2mg·L-1）和较高水平的6-BA（1．0mg·L-1）对大花蕙兰PLB的增殖具有显著的促进作用。     

大花蕙兰原球茎的诱导和增殖研究

通过对大花蕙兰茎尖和茎段的组织培养,建立了大花蕙兰原球茎的无菌繁殖体系。结果表明:芽诱导的最适培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+100 mg/mL VC;原球茎诱导培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+2.5 mg/L 6-BA+100 mg/mLVC;原球茎诱导增殖培养基为1/2MS+0.3 mg/L NAA+3.0 mg/L 6-BA+100 mg/mL VC;适宜原球茎增殖培养的外植体为原球茎。     

大花蕙兰原球茎增殖影响因素的研究

[目的]为探明组培过程中大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了MS培养基浓度、BA浓度及培养方式对原球茎增殖和生长的影响。[结果]1MS基本培养基适合大花蕙兰原球茎培养;在振荡培养时MS培养基中加入BA1．5mg／L时,原球茎生长良好,显著好于其他浓度处理;在液体培养基中培养原球茎明显优于在固体培养基中培养,液体培养基培养的原球茎鲜重和增殖系数均为固体培养的1．75倍。[结论]培养基配方为Ms＋BA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖30g／L且振荡培养时,大花蕙兰原球茎增殖及生长效果较好。     

大花蕙兰原球茎诱导培养影响因素及褐化防治的研究

[目的]研究大花蕙兰茎尖外植体原球茎诱导及增殖培养、褐化污染的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖作为外植体,研究无菌系建立、诱导培养的灭菌方法与褐化防治、原球茎诱导培养初始培养基的筛选、原球茎增殖培养的影响因素。[结果]结果表明:解决茎尖内生菌污染及褐化严重的问题,两段式灭菌(75%酒精30 s+0.1%升汞10 min+剥去幼叶+0.05%升汞5 min)优于单一式的灭菌;原球茎诱导培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;原球茎增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭+10%马铃薯。[结论]该研究可为大花蕙兰的茎尖快速繁殖及工厂化生产提供技术依据。     

大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及其解剖结构研究

通过诱导根状茎上的休眠芽萌发,以其茎尖和幼茎段材料为外植体进行组织培养,建立了大花蕙兰(Cymbidium hynridum)的无菌繁殖体系,并筛选出大花蕙兰无菌繁殖的最佳培养基组成。原球茎诱导的较适宜的培养基为MS 1.5 mg.L-16-BA 0.1 mg.L-1KT 0.05 mg.L-1NAA,诱导率达15%;原球茎增殖培养基在诱导培养的基础上添加150 g.L-1香蕉泥,其增殖系数1个月内可达15~35。原球茎是由顶端分生组织后面的薄壁细胞脱分化,形成胚性细胞,经球状胚发育而来。     

接种密度、培养基中蔗糖和活性炭浓度对生物反应器内大花蕙兰原球茎增殖的影响

为了探明生物反应器内大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素,为大花蕙兰种苗生产中大量培养繁殖材料提供理论依据,以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了接种量、蔗糖浓度、活性碳浓度对5 L气升式反应器内原球茎增殖和生长的影响。结果表明,大花蕙兰原球茎在5 L反应器内增殖时,接种量为20 g的处理原球茎鲜重显著优于10 g和30 g接种量处理;添加蔗糖30 g/L处理对大花蕙兰增殖生长有促进作用;活性炭浓度0.25 g/L处理原球茎的生长良好,高于0.25 g/L抑制原球茎的生长,增殖系数为7.5。利用5 L气升式生物反应器培养原球茎,接种量为20 g、蔗糖浓度为30 g/L、活性炭浓度为0.25 g/L时,大花蕙兰原球茎增殖较快,生长较好。     

大花蕙兰原球茎增殖、分化与离体保存的研究

以大花蕙兰原球茎为材料,从培养时间、基本培养基、糖浓度、培养方式及切割方式5个方面探讨了原球茎增殖、分化及离体保存的问题。结果表明,2个月内随着培养时间的延长,原球茎增殖与分化越显著,但培养2个月后,原球茎增殖不明显,分化却持续增加;1/2MS基本培养基利于原球茎增殖与分化,而3MS基本培养基利于原球茎保存;糖浓度的高低对原球茎增殖与分化影响显著,20 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎保存,50 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎增殖,而原球茎分化成苗应选用30 g·L~(-1)白糖;在3种培养方式中,固体培养利于原球茎分化,液体振荡培养利于原球茎增殖,液体静置培养利于原球茎离体保存;片状切割法利于原球茎增殖与分化,整体剥离接种法利于原球茎保存。即以2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA为激素组合时,以片状切割法接种原球茎于1/2MS+50 g·L~(-1)蔗糖的培养基中并以液体振荡方式培养时利于原球茎增殖;以片状切割法接种原球茎于1/2MS+30 g·L~(-1)白糖的培养基添中并以固体方式培养时利于原球茎分化成试管苗;以整体剥离法接种原球茎于3MS+20 g·L~(-1)蔗糖培养基中并以液体静置方式培养时利于原球茎保存。上述结论为大花蕙兰试管苗快速繁殖与离体保存提供了有效的技术支持。     

大花蕙兰种子的液体保藏研究

大花蕙兰是一种具有极高观赏价值的兰属植物,其主要的育种方法是杂交育种。杂交后得到的种子很多,每个果实中有种子数万粒,需进行无菌播种才可以萌发。即便在低温下,种子在空气的保藏时间也很短。把种子放在按照MS培养基配方配制的液体中,pH5.4,蔗糖30g/L,每毫升保藏液中保藏种子数量在50粒以上,环境温度控制在15℃左右,光照约2000lux,保藏液每天早晚震荡两次,每次2h,即可获得理想的保藏效果。     

大花蕙兰(Cymbidium hybridium)离体快速繁殖技术

以大花蕙兰茎尖和茎节段作外植体进行了离体快速繁殖技术研究。结果显示:茎尖诱导芽的效果优于茎节段;适宜诱导培养基为MS BA4.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC0.6g·L-1,茎尖在该培养基上芽的诱导率为71.4%;丛芽增殖适宜培养基为MS BA2.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC03.g·L-1,增殖率为3.79;原球茎增殖、分化的适宜培养基为MS BA1.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC0.3g·L-1,增殖率为6.1,分化率为71.1%;生根和壮苗的适宜培养基为MS NAA0.5mg·L-1 AC0.3g·L-1,试管苗生根率达100%。     

有机添加物对大花蕙兰原球茎及幼苗生长发育的影响

[目的]探讨有机添加物对大花蕙兰原球茎及其再生幼苗生长发育的影响。[方法]以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为材料,探讨不同有机添加物对原球茎及其分化幼苗生长发育的影响。[结果]结果表明,单独添加6种有机物时,0．2g/L水解酪蛋白对原球茎增殖的效果最佳,增殖系数迭13．10,其次分别为椰子汁、蛋白胨、土豆泥、香蕉泥、番茄汁;添加混合有机物时,50．0ml／L香蕉泥与50．0ml／L土豆泥混合物的增殖效果最佳,增殖系数这16．61;100．0ml／L椰子汁对原球茎分化的效果最佳,原球茎分化芽数达11．37个／g,蛋白胨、香蕉泥,土豆泥、水解酪蛋白及番茄汁对原球茎分化具有抑制作用;添加50．0ml／L香蕉泥、2．0g/L蛋白胨与50．0ml／L土豆泥混合物的培养基更适宜大花蕙兰幼苗生长发育。[结论]该研究结果为提高大花蕙兰种苗大规模工厂化生产效率提供技术参考。     

激素和添加物对大花蕙兰组培快繁的影响

为了实现大花蕙兰优良个体的快速繁殖,本文采用外源激素配合肌醇与椰汁的方法研究了大花蕙兰茎段的不定芽分化、增殖及试管苗的生根。结果表明：MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．5mg／L＋肌醇100mg／L＋活性炭1g／L＋蔗糖3％有利于大花蕙兰不定芽的分化,并可实现一步成苗;在1／2MS＋6-BA0.3mg／L＋NAA...     

不同EC值营养液对大花蕙兰生长及开花的影响

以大花蕙兰大花品种金门和小花品种红祖为材料,研究了不同EC值营养液对大花蕙兰生长及开花的影响.结果表明:大花品种金门以营养液EC值为1.4～2.8 mS/cm时植株生长发育较好,开花品质最佳,其中EC值为2.1 mS/cm时效果最好,平均单株花箭数为6.15枝,平均花箭长度达到60.28 cm,平均单枝小花数达到13....     

大花蕙兰原球茎一步成苗快速繁殖研究

[目的]筛选适宜原球茎一步成苗的培养基,探讨原球茎试管苗的快繁移栽技术。[方法]以大花蕙兰(Cymbidium grandiflorum)幼嫩芽为外植体进行组织培养研究。以MS为基本培养基附加不同的激素,分别设计5种配方的原球茎诱导培养基和3种配方的原球茎一步成苗培养基,原球茎一步成苗的最适培养基。用农用链霉素稀释2500～3500倍对原球茎试管进行消毒后,栽入不同的基质,研究原球茎试管苗的移栽技术。[结果]大花惠兰在MS+6!BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L配方培养基上诱导原球茎效果最好。试管苗的快繁以MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L的培养基为最适,21d后原球茎大量增殖和分化,诱导出丛生芽并生根。在腐殖土中适当使用农用链霉素有利于练苗成功。[结论]该试验探究出原球茎从增殖,诱导分化到生根只用一种培养基,大大缩短生产周期,但其生根率只有75%,需做进一步研究。     

8种大花蕙兰抗寒性指标的筛选及评价

以组培出瓶10个月的8个品种大花蕙兰植株为试材,观测在10℃/0℃(日温/夜温)低温胁迫、25℃/15℃(日温/夜温)适温恢复条件下寒害指数、初始荧光值(F_0)、PSⅡ系统最大光化学量子产量(F_v/F_m)、相对电导率、丙二醛(MDA)含量、可溶性糖含量和可溶性蛋白含量的变化,并对其抗寒性进行评价.结果表明:(1)随着低温胁迫时间的延长,不同品种大花蕙兰的F_0、F_v/F_m、MDA含量、相对电导率和可溶性蛋白含量显著上升,可溶性糖含量先上升后下降,且随着抗寒性品种的不同其变化幅度和速度有所不同;(2)F_v/F_m与F0、MDA含量、相对电导率、可溶性蛋白含量均呈极显著相关,与可溶性糖含量显著相关,尤其与寒害指数的相关系数达94.4%,可作为抗寒性筛选的可靠指标之一;(3)8个品种大花蕙兰抗寒性强弱为:‘金玉满堂’‘天之骄子’‘马可’‘黄金岁月’‘红梅’‘红霞’‘翠玉’‘福娘’.