小麦花粉离体萌发培养体系的筛选

为了准确检测小麦花粉活性,以5个常规小麦品种为材料,4种花粉离体萌发培养体系为候选方法,通过比较不同体系花粉萌发率差异,从而找到最佳的小麦花粉离体萌发培养体系。结果表明：小麦成熟花粉在20%蔗糖+10%PEG4000+40mg/LH3BO3+3×10-3mol/LCa(NO3)2+10mg/LVB1中28℃培养30min,通过镜检观察,可诱导萌发频率高达90%以上。同时,经过K型小麦不育系、保持系和F1材料的鉴定,表明上述培养基适合于小麦花粉离体萌发,能够准确检测小麦花粉活性。     

茶树花粉离体萌发条件优化及活力快速检测

以福鼎大白茶(Camellia sinensis cv.Fuding-dabaicha)花粉为研究对象,考虑不同浓度的蔗糖、硼酸、硝酸钙,采用正交试验设计优化茶树花粉离体萌发培养基;通过离体萌发法、TTC染色法的对比,探讨茶树(C.sinensis)花粉活力的快速测定方法。结果表明,硼酸是影响茶树花粉离体萌发效果的主要因素,而不同浓度蔗糖的影响差异不显著,茶树花粉离体萌发最佳培养基为150g/L蔗糖+150mg/L硼酸+100mg/L硝酸钙。离体萌发法和TTC染色法测定茶树花粉活力进行比较,2种方法得到茶树花粉活力最佳分别为90.04%、83.17%,且差异不显著。因此,花粉离体萌发法和TTC染色法都可用于测定茶树花粉活力,10g/L TTC用于快速检测茶树花粉活力效果最佳。     

矾根花粉离体萌发培养基组分及培养条件的优化

为筛选出适宜于矾根花粉萌发的培养条件和离体培养基,本研究以矾根‘红妆魅影’为实验材料,采用单因素实验分别对培养基的pH值、培养温度及培养时间进行优化,然后用正交设计试验进一步优化矾根花粉萌发的离体培养基配方。研究结果表明当培养基pH值为5.5、培养温度为25℃、培养时间达100 min时,萌发效率最高;对矾根‘红妆魅影’花粉萌发的影响程度依次为蔗糖>PEG4000>硼酸>氯化钙;最优处理组合为A3B1C3D5(11),即在10 %蔗糖+0 mg/L氯化钙+100 mg/L硼酸+20 %PEG4000的处理组合下,矾根‘红妆魅影’的花粉平均萌发率最高达73.2%。本研究优化所得的培养基组分及培养条件可为矾根属植物有关花粉活力相关研究奠定基础。     

培养条件及贮藏方式对郁香忍冬离体花粉萌发的影响

花粉是植物有性生殖遗传物质传递的载体,其活力直接影响遗传物质传递的效率,花粉正常萌发是保证受精作用顺利进行的前提,人工模拟柱头中的花粉萌发环境,是检测花粉活性最可靠的方法。本研究以郁香忍冬离体花粉为试验材料,研究了不同蔗糖浓度(15%~45%)、硼酸浓度(100~300 mg/L)、不同培养温度(9℃,12℃,15℃,18℃)及贮藏方法对花粉萌发率的影响。结果表明:郁香忍冬花粉在30%蔗糖+100 mg/L硼酸溶液中,12℃条件下培养,萌发率最高。花粉短期贮藏的最佳方式为冷冻(-20℃)贮藏,冷藏(5℃)次之,而室温条件不适宜郁香忍冬花粉贮藏。该结果可为忍冬属植物人工杂交育种工作的开展提供参考依据和技术支撑。     

椰枣花粉离体萌发及花粉贮藏方法分析

本研究以椰枣雄株花粉为材料,采用L9(34)正交设计法筛选最佳观察椰枣花粉萌发时间和适宜椰枣花粉离体萌发培养基;研究椰枣花粉干燥时间、贮藏温度和贮藏时间对花粉萌发率的影响。结果表明,椰枣花粉萌发最佳观察时间段为2～4 h;处理1培养基50 g/L蔗糖+0.1 g/L硼酸+0.05 g/L氯化钙效果最佳,其中3因素对椰枣花粉萌发影响大小依次为硼酸、蔗糖、氯化钙;花粉在35℃中干燥8 h最适宜贮藏;当贮藏时间为10～50 d时,常温贮藏的花粉萌发率低甚至无萌发的现象,低于4℃条件下贮藏花粉萌发率均保持较高,无显著差异;当在4℃条件下,10、20、30 d花粉萌发率均无显著差异,当在-20℃,-80℃条件下,10、20、30、40 d花粉萌发率均无显著差异,花粉均保持较高的萌发率,在低温贮藏中随着贮藏时间的延长花粉萌发率逐渐下降。本研究可为椰枣花粉活力检测和贮藏提供技术支撑,同时为今后在椰枣引种推广中的花粉贮藏和人工授粉提供科学依据和实践意义。     

烟草花粉离体萌发液体培养基的筛选和优化

以云烟97和红花大金元花粉为试验材料,研究了液体培养基配方、花粉浓度对花粉离体萌发的影响.结果表明,浓度配比10％～15％蔗糖、25 mg/L硼酸的液体培养基为最佳培养基;培养基中的花粉浓度以2.5 g/L为宜.     

大丽花花粉活力及离体萌发研究

为筛选大丽花花粉活力有效的测定方法,了解大丽花不同品种的花粉活力,以大丽花栽培品种为试验材料,采用4种方法检测大丽花花粉活力,在此基础上,采用单因素试验和正交设计试验分别对大丽花花粉的离体萌发培养条件及培养基组分进行优化,得到最优方案后进一步检测、比较不同品种之间的花粉活力。研究结果显示,TTC染色法不能使花粉着色,I₂-KI和孢粉染色法不能有效区分有活力和无活力花粉,离体萌发法效果良好,可准确直观地反映大丽花花粉活力状况, 是测定大丽花花粉活力的有效方法。当培养条件为pH 6.0、温度25℃、培养时间2.5 h时,花粉萌发率最高。培养基组分对大丽花花粉萌发的影响程度依次为PEG>蔗糖>硼酸,实际最佳处理组合为A₃B₄C₂,即PEG4000 25 g/L、蔗糖60 g/L、硼酸50 mg/L的处理组合下,大丽花花粉萌发率最高达62.1%。采用上述获得的最优方案检测22个大丽花品种的花粉活力,花粉萌发率为11.75%~78.72%,不同品种的花粉萌发率差异大,其中,‘兰花公主’的花粉萌发率最低,‘波彻儿’最高。大丽花品种的花粉活力多样性丰富,所测定的22个大丽花品种有14个品种正常可育,杂交时可用作父本;8个品种为半不育或低不育,杂交时更适合作母本。     

水稻花粉的离体萌发

选出适合于水稻花粉萌发的液体培养基： 20%蔗糖+10%PEG4000+40 mg.L-1H3BO3+3m mol/L Ca(NO3)2+10 mg.L-1VB1, 得到80%的萌发频率。 离体萌发时, 花粉管生长很快, 在30 min内可达700 μm。 最适萌发的温度范围较宽, 27～33℃都可以得到较高的萌发频率。     

辣木花粉离体萌发研究

为筛选出适宜不同辣木材料花粉的离体萌发培养基,本研究以辣木花粉为试材,采用单因素试验和正交试验研究氯化钙、蔗糖及硼酸浓度对辣木花粉萌发的影响,并观测不同辣木材料的花粉萌发率。研究结果表明,各试验因素对辣木花粉萌发的影响程度依次为蔗糖>氯化钙>硼酸,蔗糖和氯化钙浓度对辣木花粉萌发率的影响显著,而硼酸浓度影响不显著;辣木花粉在175 g/L蔗糖,400 mg/L氯化钙,150 mg/L硼酸的培养基中,花粉平均萌发率显著高于其他处理。对不同辣木材料的花粉萌发率进行测定,发现美国种源的辣木花粉活力较高,肯尼亚种源的花粉活力较低。本研究结果可为辣木杂交育种的父本选择提供参考,提高人工杂交授粉的效率。     

油松花粉离体萌发及萌发特征研究

为了加强油松有性杂交,为种子园育种研究奠定基础,对油松花粉离体萌发的适宜条件及萌发特征进行了系统研究。结果表明,油松花粉在无蔗糖培养基中仍具一定萌发能力,蔗糖的添加可显著促进花粉萌发,但高浓度蔗糖可抑制花粉管的生长;油松花粉管易形成分枝,蔗糖浓度与分枝花粉频率呈正相关;硼酸的添加在培养初期可有效加速花粉萌发,但过高浓度的硼酸对花粉萌发具抑制作用;Ca2+对花粉萌发的影响较小,不同浓度Ca2+处理均可获得较高的萌发率;培养温度对花粉萌发的促进作用明显,但温度的持续升高将抑制花粉萌发。综合萌发率、花粉管生长及分枝花粉管频率,油松花粉萌发的最适液体培养基组成为：2.00%蔗糖+0.075%硼酸+0.005% Ca2+,26℃下光照培养,72 h时萌发率可达(96.10±0.47)%。     

威灵仙黑斑病的病原鉴定及防治药剂的离体活性筛选

为明确威灵仙黑斑病的致病菌并筛选出有效的防治药剂,采用形态特征及菌株的ITS序列分析方法进行病原菌鉴定,通过平皿菌丝生长抑制法测定杀菌活性,结果表明威灵仙黑斑病病原菌为Alternaria alternata (Fr.)Keissler;25%溴菌腈可湿性粉剂、72%霜疫力克可湿性粉剂、30%爱苗乳油、80%绿亨2号可湿性粉剂和10%世高水分散粒剂对菌丝抑制率均达90％以上。此研究结果可为该病害的有效控制提供前期研究基础。     

星点设计-响应面法优化丹参花粉离体萌发培养条件的研究

以BK为基本培养基,在单因素试验的基础上,采用星点设计-响应面优化山东丹参、川丹参花粉离体培养,以花粉萌发率为响应指标,研究培养温度、蔗糖浓度、硼酸浓度与萌发率之间的响应面关系,优化花粉离体培养的条件。研究结果:温度、蔗糖浓度和硼酸浓度对山东丹参和川丹参花粉萌发率的影响均达到极显著水平(p0.05),响应面优化后的最佳培养条件为:山东丹参BK+温度21.87℃+蔗糖151.20 g/L+硼酸273.83 mg/L,花粉萌发率的理论值为90.30%;川丹参BK+温度26.28℃+蔗糖133.81 g/L+硼酸237.71 mg/L,花粉萌发率的理论值为68.19%。验证得到二者萌发率分别为89.65%、66.31%。试验确立的数学模型的实测值与预测值相对偏差较小分别为-1.8%、-2.2%,可正确预测培养条件对花粉萌发率的影响,同时验证了星点设计-响应面优化丹参花粉离体培养条件优化方法模型的可靠性。该研究结果为今后进一步开展丹参花粉体外保存、人工控制授粉、选育优良杂交新品种以及川丹参不育机制的研究等提供了理论基础。     

黄刺玫花粉离体萌发的特性

为明确黄刺玫的花粉萌发特征,采用花粉离体培养法,研究蔗糖、H_3BO_4、CaCl_2、NAA、GA浓度及培养温度、采集时间、贮藏方式对黄刺玫花粉萌发的影响。结果表明:培养温度、培养基中蔗糖、H_3BO_4、CaCl_2、NAA、GA浓度均显著影响黄刺玫花粉萌发,一天中不同的采集时间和不同的花粉贮藏方式黄刺玫的花粉萌发率不同。在25℃、15%蔗糖的培养基上萌发效果最好,花粉萌发率达67.51%。基本培养基上分别添加H3BO4150 mg/L、CaCl_2 20 mg/L、NAA 20 mg/L、GA 20 mg/L时花粉萌发率较高。在室温带花、室温离体、0℃~2℃带花、0℃~2℃离体4种条件下贮藏花粉,5 h、10 h后培养,各处理间差异不显著,但在室温下,带花贮藏比离体贮藏效果好;0℃~2℃下,离体贮藏比带花贮藏的萌发率高。花粉于10:00~14:00时段采集较好,12:00时采集萌发率最高。本试验探讨不同条件对黄刺玫花粉萌发的影响,为其杂交育种及理论研究提供依据。     

大麦幼胚离体培养优良基因型的筛选

大麦幼胚离体培养优良基因型的筛选顾德峰，杨伟光，王晓丽，刘宝（吉林农业大学长春１３０１１８）（东北师范大学长春１３００２４）大麦愈伤组织的诱导和再生植株，不仅与培养条件及外植体类型相关，而且基因型的差异对此亦有很大影响。为此，本试验对３４种基因型纯合...     

棉花再生的离体筛选

本试验用代表不同物种和适合不同农艺条件的12个棉花基因型来进行了离体再生筛选，结果，三因子完全随机设计分析发现，由基因型、外植体和培养基引起的方差是显著的；互作效应也是显著的。在供试的4个物种中，即在G．herbaceum(2x)中的愈伤组织诱导频率最高，     

通过花粉离体操作生产杂交水稻种子

通过花粉离体操作生产杂交水稻种子浙江农业大学舒庆尧，夏英武，柳更在杂交水稻制种技术研究上，我国已取得许多成果，其中以“三系七圃法”最为完整。但由于制种时需要同一田块种植不育系和恢复系，因此插秧、收获等农事操作需要人工完成，无法采用机械化操作；由于不育...     

桃花粉活性检测和离体萌发特性的研究

果树花粉活力直接影响授粉、受精乃至座果。为了解果树品种的花粉生活力,给引种栽培和杂交育种工作创造有利条件,以桃花粉为试验材料,采用染色方法检测花粉的活性。试验结果表明,含有蓝墨水的花粉培养基,花粉萌发率可以达到64.67%,与对照相比差异不明显,因此该方法比较适合于快速检测花粉活性;固体培养基培养2个品种桃花粉,萌发率比液体培养基培养分别高25%和20%。另外温度、花粉密度、培养基中蔗糖及硼酸浓度都对花粉萌发率和花粉管长度有影响,在温度为24℃、1粒花药/100 μL、10%的蔗糖或100 mg/L的硼酸的条件下,均有利于花粉萌发和花粉管生长。     

北沙参花粉形态特征、活性及萌发条件研究

为了认识北沙参的花粉粒形态特征和生理特性,利用离体培养法测定花粉粒活性,并对培养条件(蔗糖的质量分数、硼酸的质量浓度和氯化钙的质量浓度)进行筛选,同时与碘-碘化钾(I2-KI)、氯化三苯基四氮唑(TTC法)和亚甲基蓝等花粉活性测定方法进行比较,建立测定北沙参花粉活性的最适宜方法,利用离体培养法进一步检测保存时间、温度和湿度等对北沙参花粉活性的影响,应用扫描电镜观察花粉粒的大小形态等特征。结果表明,亚甲基蓝法适于北沙参花粉粒活性测定,I2-KI法和TTC法不适合。北沙参体外萌发的最适培养基是20%蔗糖+0.1%mg·mL^-1硼酸+0.1%mg·mL^-1氯化钙,萌发率可达72.9%。北沙参花粉在湿度15%~52%,25℃条件下活性最好,4℃、-20℃的低温或大于60%的湿度都会导致花粉活性降低。北沙参花粉粒形态为超长方形,具3个狭长萌发沟,表面为网状。     

仁用杏离体培养技术

本项目主要研究仁用杏离体培养技术,为仁用杏遗传转化提供良好的再生体系。本试验以仁用杏品种‘围选1号’和‘优一’为试验材料,在仁用杏休眠期对其1年生枝进行短截和长放两种修剪处理。分别于5月、6月、7月、8月、9月上旬采集外植体,研究修剪、外植体采集时期、以及外源激素等因素对仁用杏离体培养的影响。结果表明:5、6月份采集外植体,仁用杏品种‘围选1号’和‘优一’的茎段腋芽的诱导率较高,同时短截处理茎段腋芽的诱导率高于长放处理;8、9月份采集外植体,茎段腋芽的诱导率较低,同时短截处理与长放处理相比较,茎段腋芽的诱导率无明显差异。外源激素6-BA、NAA有利于仁用杏品种‘围选1号’和‘优一’茎段腋芽的诱导、生长与分化。培养基中添加1.0 mg/L 6-BA、0.1 mg/LNAA时,茎段腋芽诱导率最高,组培苗生长最健壮。本研究结果为仁用杏离体培养提供科学数据,进而为仁用杏的基因工程育种提供帮助。     

培养基组分及pH对油茶花粉离体萌发的影响

为探究培养基组分及pH对油茶花粉离体萌发的影响,本试验以信阳地区主栽长林系列4个油茶品种为试验材料,采用半固体培养进行单因素试验,研究不同浓度的钙、镁、钾、尿素及pH对油茶花粉离体萌发率和花粉管伸长的影响。结果表明：钙对长林系列油茶花粉的萌发率和花粉管伸长均有显著影响(P<0.05),在浓度为100 mg/L时对萌发率促进效果最佳,在浓度为2 400 mg/L时对花粉管伸长促进效果最佳;长林系列油茶的花粉管长度随镁、钾浓度的增加整体呈先增加后降低的趋势,镁在浓度为2 400 mg/L时对花粉管长度及花粉萌发率均表现出强烈的抑制效果,钾对‘长林3号’‘、长林4号’‘、长林40号’的花粉萌发率的影响均不显著;pH对长林系列4种油茶品种的花粉管长度均有显著影响;尿素对长林系列4种油茶品种花粉萌发的影响相较其他因素较小。培养基中钙浓度为2400mg/L,镁浓度在200～400mg/L,钾浓度在200～400 mg/L,尿素浓度为200 mg/L,p H值为6.5时适合油茶花粉管伸长;钙浓度为100 mg/L,镁浓度为200 mg/L时适合花粉萌发。本研究结果为油茶人工授粉和促进油茶花粉萌...