广藿香玻璃化组培苗恢复逆转的培养条件优化

为探究不同浓度外源激素GA3与不同培养基凝固剂对广藿香玻璃化组培苗的影响机制。以广藿香玻璃化组培苗为实验材料,在原增殖培养基(MS+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+5%(体积分数)椰子水)基础上,添加不同浓度外源激素GA3及凝固剂(5.7 g/L琼脂粉, 2.3 g/L植物凝胶),对广藿香玻璃化组培苗恢复处理,并对3种不同形态广藿香[过氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD),过氧化氢酶(CAT)]的酶活性生理指标测定并做比较。结果表明,MS+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+0.1 mg/L GA3+5.7 g/L琼脂粉+30 g/L蔗糖+5%(体积分数)椰子水为最佳配方,能有效地恢复逆转广藿香玻璃化组培苗,其恢复率高达93.12%;且恢复苗SOD、CAT的酶活性升高,POD酶活性降低,与正常苗酶活性接近,近似恢复正常苗。研究结果为解决广藿香组织培养过程中出现玻璃苗化现象困扰提供一定参考依据。     

甜叶菊花药离体培养技术体系的建立

以‘皖甜1号’甜叶菊花蕾为试验材料,利用正交设计L9(34),分别以MS、B5和N6为基本培养基,研究了不同浓度的NAA、6-BA以及蔗糖和低温预处理、暗处理时间等条件,对甜叶菊花药愈伤组织诱导的影响以及不同培养基对甜叶菊花药愈伤组织分化影响。试验得出甜叶菊花药愈伤组织最佳诱导的培养基配方为MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L蔗糖+6 g/L琼脂,低温预处理1 d、暗培养14 d有利于甜叶菊愈伤组织的诱导,甜叶菊愈伤组织分化诱导的最佳培养基配方为MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂,不定芽在不加任何植物生长调节剂的MS培养基上伸长后,接种在1/2 MS+0.1 mg/L NAA+20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂培养基上生根效果好,生根率可达93.33%。该试验初步建立了甜叶菊花药离体培养技术体系,获得了甜叶菊花药培养再生植株,为甜叶菊新种质的创制和新品种的选育提供了帮助。     

甜杨离体再生中玻璃化苗的发生与防治

由于甜杨不定芽的诱导过程中发生了玻璃化现象,为了恢复和逆转甜杨玻璃化苗,本试验采用正交试验设计L_9(3~4)对影响玻璃化现象发生的光照强度、琼脂浓度和蔗糖浓度等因子进行研究。结果表明,琼脂浓度对甜杨玻璃化苗恢复率的影响最大,达到极显著水平,蔗糖浓度和光照强度对甜杨玻璃化苗的恢复率影响不显著。当琼脂浓度为9 g/L,培养光照强度为3000 lx,培养基中蔗糖浓度为20 g/L时,甜杨玻璃化苗的恢复率最高,达到100%。由此可知,培养基中较高的琼脂浓度对甜杨玻璃化苗的防治与逆转有显著作用。     

芦笋组织培养中玻璃化苗逆转的初步研究

为探讨芦笋(Asparagus officinalis L.)玻璃化试管苗的逆转恢复途径,对培养温度、光照强度、蔗糖浓度、琼脂浓度等因素对玻璃化苗逆转效果的影响进行研究。结果显示：玻璃化苗的恢复率随着培养温度的降低而有所升高,培养温度为15℃时,恢复率为33.01%;玻璃化苗的恢复率随光照强度的增强而明显升高,当光照强度为5200 lx时,逆转率可达70.55%;玻璃化苗的恢复率随着蔗糖浓度的升高而逐渐升高,当蔗糖浓度为50 g/L时,恢复率可达48.20%;玻璃化苗的恢复率随琼脂浓度的增加而升高,琼脂浓度为9 g/L时,恢复率达38.18%。说明在4种影响因素中,光照强度对玻璃化苗逆转的影响最大,而培养温度、蔗糖浓度、琼脂浓度对玻璃化苗的逆转也有一定的影响。     

不同培养条件对罗汉果组培苗玻璃化的影响

以广西壮族自治区药用植物因培育的罗汉果新品种永青1号组培苗为研究对象,探讨组织培养过程中蔗糖浓度、琼脂浓度、6-BA 浓度、培养温度以及光照时间对罗汉果组培苗玻璃化的影响.结果表明,适于罗汉果组培苗最大增殖及玻璃化最低的培养条件为:接种于4.5g/L琼脂、25g/L蔗糖、0.5mg/L 6-BA 的 MS 基本培养基,并于26℃,12h/d(日光灯,2000Lx)的条件中培养.     

红水樱桃种子玻璃化超低温保存

从含水量、装载时间、玻璃化时间和种壳4方面探究红水樱桃(Prunus pseudocerasu L. Hongshui)种子玻璃化超低温保存。结果显示,含水量以30%为好;装载以60%PVS_2在4℃下处理20 min为宜;玻璃化以PVS_2室温下处理60 min为宜;种壳决定保存效果,带种壳可获得100%成活率,而去种壳后几乎不萌发,污染严重。种子成活率检测用离体萌发法,经43℃水浴3 min解冻后接种到1/2 MS+1.0 mg/L BA+0.5 mg/L IBA+2.0 mg/L GA+3.0%蔗糖+0.7%琼脂粉培养基上。     

星点设计-响应面法优化丹参花粉离体萌发培养条件的研究

以BK为基本培养基,在单因素试验的基础上,采用星点设计-响应面优化山东丹参、川丹参花粉离体培养,以花粉萌发率为响应指标,研究培养温度、蔗糖浓度、硼酸浓度与萌发率之间的响应面关系,优化花粉离体培养的条件。研究结果:温度、蔗糖浓度和硼酸浓度对山东丹参和川丹参花粉萌发率的影响均达到极显著水平(p0.05),响应面优化后的最佳培养条件为:山东丹参BK+温度21.87℃+蔗糖151.20 g/L+硼酸273.83 mg/L,花粉萌发率的理论值为90.30%;川丹参BK+温度26.28℃+蔗糖133.81 g/L+硼酸237.71 mg/L,花粉萌发率的理论值为68.19%。验证得到二者萌发率分别为89.65%、66.31%。试验确立的数学模型的实测值与预测值相对偏差较小分别为-1.8%、-2.2%,可正确预测培养条件对花粉萌发率的影响,同时验证了星点设计-响应面优化丹参花粉离体培养条件优化方法模型的可靠性。该研究结果为今后进一步开展丹参花粉体外保存、人工控制授粉、选育优良杂交新品种以及川丹参不育机制的研究等提供了理论基础。     

基于正交设计的露薇花组培苗增殖及瓶内开花

以露薇花组培苗为试验材料,采用L9(33)正交试验方法,在MS基本培养基中添加不同浓度的蔗糖、6-BA和NAA,以期筛选露薇花增殖的最适条件;添加不同浓度的6-BA,NAA和GA3,筛选最适露薇花瓶内开花的培养条件。结果表明,露薇花无菌苗最佳增殖条件为MS+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA (蔗糖浓度30 g/L),最高增殖倍数为3.17倍,最适开花条件为MS+1.0 mg/L 6-BA+3.0 mg/L GA3+0.5 mg/L NAA,平均开花率可达70%。本研究为露薇花的高效繁殖和试管花卉的开发提供了理论依据和技术支持。     

半夏悬浮培养细胞分化形成人工种胚的同步化条件

为获得同步化的人工种胚,以半夏疏松愈伤组织为试验材料,采用悬浮培养的方法,探讨温度、咖啡因、蔗糖浓度对半夏悬浮培养细胞分化形成人工种胚的同步化作用,为半夏人工种子制作提供同步化种胚。结果表明:以MS为基本培养基,添加1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+30 g/L sucrose+300 mg/L CH进行悬浮培养,温度为8℃,处理12h,恢复36h,同步化效果最好,细胞分裂指数为13.86%;咖啡因浓度为2.00 mmol/L,处理2 h,恢复48 h,效果较好,细胞分裂指数为9.42%;蔗糖浓度为40 g/L,处理5 d,恢复4 d,效果一般,细胞分裂指数为5.33%。分别先后继代3次于MS+1.0 mg/L IBA+0.5 mg/L 6-BA+30 g/L sucrose+300 mg/L CH进行膨大培养及MS+0.1 mg/L IBA+0.5 mg/L 6-BA+10 g/L sucrose+300 mg/L CH进行分化培养。温度处理组微细胞团为42.33个,种胚分化率为71.11%;咖啡因处理组微细胞团为34.33个,种胚分化率为55.56%;蔗糖处理组微细胞团为40个,种胚分化率为57.78%。因此,半夏悬浮培养细胞同步化形成人工种胚的适宜条件为:MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+30 g/L sucrose+300 mg/L CH,8℃处理12 h,恢复36 h,再转接进膨大及分化培养基继续培养。本研究为半夏人工种子生产提供技术参考。     

小麦茎尖超低温保存处理条件的优化研究

以普通小麦为材料,探讨保护液中不同DMSO浓度、蔗糖浓度及不同冷冻处理时间对超低温保存后小麦茎尖成活率的影响,以获得最优超低温保存方法。重点针对小麦在超低温保存时的各处理条件对小麦茎尖成活率的影响展开了试验。结果表明,当保护液中含16%浓度的DMSO和6%浓度的蔗糖,并将预处理后的小麦茎尖采用梯度降温法:0℃停留存放30 min、-7℃停留存放1 h、-20℃停留存放1 h、迅速转移放入-80℃冰箱停留存放1 h、迅速投入液氮中过夜的超低温保存条件达到最高成活率,从而确定了小麦茎尖超低温处理时保护液中的最佳浓度组合及低温处理的最佳时间。     

不同植物生长调节剂对椰枣玻璃化愈伤组织调控的影响

为探究培养基种类、植物生长调节剂等在调控椰枣玻璃化愈伤组织中的作用,以茎尖生长点为外植体诱导产生的玻璃化愈伤组织为供试材料,探索椰枣玻璃化愈伤组织最佳调控方法。试验发现6-BA、2,4-D对椰枣玻璃化愈伤组织有明显的调控效果,经过调控,原玻璃化的胚性愈伤组织恢复生长,并保持增殖能力,过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶、超氧化物歧化酶的含量趋于正常愈伤组织。结果表明：1/2MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+50 g/L蔗糖为调控玻璃化愈伤组织的最佳培养基,恢复率可达93.33%。     

植物源月季切花保鲜剂的筛选研究

以切花月季"戴安娜"为试验花材,以蔗糖、大蒜水提液和VC为原料,按照L9(34)正交设计配制瓶插液,通过测定瓶插寿命、花径变化率、鲜质量损失率和水分平衡值,研究不同瓶插液的保鲜效果.结果表明:在瓶插寿命指标上,20 g/L蔗糖+大蒜水提液(水提料液比1∶20(g/mL))+100 mg/L VC的配方组合表现最佳.极差分析表明,蔗糖是影响月季切花瓶插寿命的最主要因素,大蒜水提液次之.在鲜质量损失率指标上,10 g/L蔗糖+大蒜水提液(水提料液比1∶40(g/mL))+200 mg/L VC的配方组合表现最优.所有处理对月季切花的花径变化率和水分平衡值无显著影响.     

东方百合试管鳞茎形成条件优化

试管鳞茎培养是百合种球培育的关键技术环节。为探讨不同种类植物生长调节剂和不同浓度蔗糖对东方百合试管鳞茎形成的影响,试验采用正交设计,筛选出最优诱导培养基为MS+0.2 mg/L KT+1 mg/L NAA+40 g/L蔗糖;最优膨大培养基为1/2 MS+0.2 mg/L KT+1 mg/L NAA+15 mg/L PP333,此条件下膨大率可达到80%以上;最优生根培养基为1/2 MS+0.05 mg/L NAA。     

马铃薯未授粉子房离体培养诱导双单体植株初探

以MS培养基为基本培养基,添加不同种类和浓度的生长调节剂,离体培养8个马铃薯普通栽培种（2n=4x=48）品种的未授粉子房,获得了青薯168和青薯7号的双单体小植株。花蕾4℃下预处理24~72 h的愈伤组织诱导率（51.24%~57.08%）比未预处理（9.35%）的明显提高。对青薯168和青薯7号而言,最佳培养基分别为MS+2-4-D 2.0 mg/L+ZT 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L和1/2MS+GA3 0.5 mg/L+2-4-D 0.5 mg/L+KT 2.0 mg/L+BAP 2.0 mg/L+ ZT 0.2 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L。品种对愈伤组织分化形成小植株的影响比培养基的影响要大。     

基于正交设计的铁皮石斛组织培养和耐盐性研究

利用正交设计法研究不同浓度的蔗糖及不同浓度NAA、6-BA、KT等激素对铁皮石斛组织培养的影响,并对铁皮石斛愈伤组织、分化组织、生根苗的耐盐性进行了分析。结果表明:铁皮石斛愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+NAA 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+蔗糖15g/L,分化组织增殖的最佳培养基为MS+NAA 0.4mg/L+KT 1.5mg/L+蔗糖15g/L,分化苗生根最适培养基为MS+活性炭1.0g/L+NAA 0.4mg/L+蔗糖30g/L。铁皮石斛愈伤组织耐盐临界浓度为0.6%,分化组织耐盐临界浓度在0.3%~0.6%之间,生根苗耐盐临界浓度在0.6%~0.9%之间。     

几种保鲜剂对百合切花贮后品质的影响

研究了几种不同的保鲜剂组合对冷藏百合切花贮后品质的影响。结果表明,在瓶插液中加入蔗糖可提高百合切花的观赏品质,50 g/L是最适蔗糖浓度。几种保鲜剂组合中,预处液为2×10-4mol/L硫代硫酸银 + 100g/L蔗糖 + 100mg/L赤霉素, 瓶插液为150 mg/L 8-羟基喹啉硫酸盐 + 50g/L蔗糖 + 20mg/L赤霉素的保鲜剂组合对百合切花的保鲜效果最好。     

基于再生不定芽的蝴蝶兰继代扩繁体系建立

为降低蝴蝶兰通过再生原球茎途径频繁继代培养可能出现的变异及玻璃化风险、减轻继代培养中的褐化,以蝴蝶兰花梗茎段再生的营养芽为试验材料,进行基于再生不定芽的继代扩繁及抗褐化研究。结果显示,以5节花梗的中间腋芽茎段为材料,在VW+ 6-BA 5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L培养基上进行启动培养,能获得最高的营养芽诱导率。继代培养中,TDZ促进再生不定芽的效果比6-BA强。茎芽经过“切叶”处理,在培养基VW+ TDZ 1 mg/L+300 mg/L柠檬酸+10 g/L蔗糖+15%椰汁,或培养基VW+ 6-BA 5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L+ 300 mg/L柠檬酸+10 g/L蔗糖+15%椰汁上进行继代培养,能获得最佳的继代扩繁效果。笔者研究认为初步建立了基于再生不定芽的蝴蝶兰继代扩繁体系。     

非洲紫罗兰组织培养及抗褐化探究

本试验通过植物组织培养的方法,探究不同种类、不同浓度的碳源及植物激素对非洲紫罗兰试管苗增殖和生根的影响,同时对比半胱氨酸、抗坏血酸、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和活性炭(AC)对非洲紫罗兰试管苗抗褐化影响的差异,并结合正交试验数据筛选最优培养方案。结果表明,非洲紫罗兰试管苗增殖诱导最优处理为MS+蔗糖20 mg/L+抗坏血酸100 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.25 mg/L,非洲紫罗兰试管苗生根最优处理为1/2 MS+蔗糖20 g/L+柠檬酸100 mg/L+NAA 0.2 mg/L。     

金毛狗脊原叶体增殖和孢子体转化条件的优化

为探究不同浓度的无机盐、蔗糖、KT、NAA和6-BA等对金毛狗脊原叶体增殖和孢子体转化的影响，采用正交设计实验方法，设置5因素4水平正交试验，筛选金毛狗脊原叶体增殖和孢子体转化的最佳培养基。结果表明，原叶体增殖最佳培养基为1/2MS+2%蔗糖+0.1 mg/L NAA+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT。孢子体转化最佳培养基为1/4MS+1%蔗糖+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA。     

植物生长调节剂对白杜试管苗生长的影响

通过组织培养的方法研究植物生长调节剂对白杜试管苗生长的影响。结果表明:在进行不同浓度植物生长调节剂试验时,以MS为基本培养基,附加BA0.5 mg/L、NAA0.05 mg/L、蔗糖30 g/L、琼脂7 g/L,此时试管苗的增殖效果最佳,培养27 d,有效嫩茎数为3.433;白杜试管苗生根培养基以1/2 MS+NAA1.5 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L为好,培养25 d生根率为86%。