产细菌素乳酸菌的筛选及其发酵牛奶的工艺优化

为获得高产细菌素乳酸菌,应用于动物生产中,以大肠埃希氏菌ATCC25922、鼠伤沙门氏菌CMCC50115、金黄色葡萄球菌ATCC25923为指示菌,通过打孔法排除有机酸和过氧化氢的干扰及通过蛋白酶敏感性试验,得到优产细菌素菌株S-1,并以10%脱脂乳为基础培养基进行发酵工艺优化。结果表明:葡萄糖和酵母浸粉的最佳添加量分别为10 g/l和6 g/l,最佳发酵条件为:接种量4%,起始pH值为6,发酵温度36℃,发酵时间48 h。此研究提供一种动保用乳酸菌素产品发酵方案,经济实用。     

自然发酵酸菜汁中乳酸菌的分离鉴定及抑菌活性的分析

为了检测乳酸菌的抑菌活性,试验从自然发酵酸菜汁中分离、纯化出10株乳酸菌,通过体外试验筛选出4株产酸力较强的乳酸菌,经生理和生化鉴定分别为植物乳杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和短乳杆菌。牛津杯抑菌试验结果表明:4株乳酸菌对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌均有明显的抑菌作用,而对肺炎克雷伯菌和白色念珠菌无效;产酸量大的菌株抑菌作用也强,推测其抑菌作用与低酸环境有关。说明研究和开发乳酸菌抑菌产品具有广阔前景。     

柴胡皂苷a对金黄色葡萄球菌基因转录表达谱的影响

探讨柴胡皂苷a对金黄色葡萄球菌的抑菌活性,确定亚抑菌浓度的柴胡皂苷a对金黄色葡萄球菌基因转录表达谱的影响。按NCCLS推荐的试管肉汤倍比稀释法测定柴胡皂苷a对32株临床分离的金黄色葡萄球菌和标准菌株ATCC25923的最小抑菌浓度(MICs),绘制标准菌株ATCC25923的生长曲线,用定制的Affymetrix基因芯片检测1/2×MIC(4mg.L-1)柴胡皂苷a对标准菌株ATCC25923基因表达谱的影响。结果表明,柴胡皂苷a对33株金黄色葡萄球菌的MICs为1～32mg.L-1;基因表达谱分析有26个上调基因,68个下调基因,其中1个编码超氧负离子压力反应蛋白基因被大幅度地上调,13个毒力基因被诱导,并且都被抑制;这表明柴胡皂苷a对32株临床分离的金黄色葡萄球菌及标准菌株都有抑菌活性。基因芯片分析表明,柴胡皂苷a的抗菌作用能够同时影响金黄色葡萄球菌不同的途径基因。     

仔猪粪便中乳酸菌的分离、鉴定及其抑菌特性的研究

从健康仔猪新鲜粪便中分离到3株乳酸菌,并对其进行了属和种的生化鉴定,结果显示,菌株La与Lt均为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus),Ls为乳酸乳杆菌(Lactobacillus lactis)。对分离的3株乳酸菌的代谢产物进行了体外抑菌试验研究,结果表明,3株乳酸菌的代谢产物对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌都有较明显的抑制作用;对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好,沙门氏菌次之,对大肠杆菌的抑菌效果相对较弱。     

中药单体化合物光甘草定的体外抗菌活性研究

选取传统中药甘草提取单体化合物光甘草定,通过MABA药物敏感性实验方法研究其对结核分枝杆菌H37Rv(ATCC27294)和H37Ra(ATCC25177)的体外抗菌活性,并通过NCCLS标准方法测定了光甘草定对金黄色葡萄球菌ATCC25923和ATCC29213、粪肠球菌ATCC29212和大肠杆菌ATCC25922的最低抑菌浓度(MIC)。结果表明:单体化合物光甘草定对结核分枝杆菌H37Rv(ATCC27294)和H37Ra(ATCC25177)有很好的抗菌活性,最低抑菌浓度均为25μg/m;光甘草定对实验中检测的金黄色葡萄球菌、粪肠球菌和大肠杆菌也有抗菌活性,并且对革兰氏阳性杆菌的抗菌活性高于革兰氏阴性杆菌。本研究为光甘草定的进一步开发利用和抗菌机制研究打下了基础。     

一株高产酸乳酸菌的分离、鉴定及高密度发酵研究

为获取产酸能力强、发酵性能好、具有强抑菌能力的乳酸菌,本试验以35日龄断奶健康仔猪粪便为菌源,对其乳酸菌进行筛选、分离、鉴定,并对分离菌株进行发酵性能研究。从35日龄断奶健康仔猪粪便中分离得到6株目标菌株,经产酸测试及抑菌试验后,得到一株产酸能力强、抑菌效果良好的筛选菌株,命名为RSJ-5。通过对RSJ-5菌株的菌落与菌体形态观察、生理生化鉴定试验、糖醇发酵试验,确定其为嗜酸乳杆菌。利用50 L发酵罐接种RSJ-5菌株厌氧发酵36 h,发酵液活菌数达158 CFU/mL,乳酸钙含量为85 mg/mL,pH4.2,发酵液对大肠杆菌、沙门氏菌有较强抑菌作用。结果表明RSJ-5嗜酸乳杆菌具备优良乳酸菌发酵剂的性能,探索了发酵工艺的可行性,为液体饲料(乳酸菌发酵液)大规模发酵生产提供参考。     

抗菌肽与喹乙醇体外抑菌效果的比较及对断奶仔猪生产性能的影响

为研究肠杆菌肽与喹乙醇体外抑菌效果以及替代喹乙醇对断奶仔猪生长性能的影响,体外试验选用大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌为指示菌测定抗菌肽与喹乙醇的抑菌效果。体内试验挑选28日龄左右,144头健康断奶仔猪,分为2个处理组,每组4个重复,每个重复18头,研究两组之间生产性能和腹泻率的差异。体外试验结果显示,以大肠杆菌ATCC25922为指示菌株,0.5%肠杆菌肽与50%喹乙醇最低抑菌浓度均为400μg/mL,而相对于沙门氏菌CVCC50094,0.5%肠杆菌肽的最低抑菌浓度低于50%喹乙醇最低抑菌浓度。体内试验结果表明,300g/t抗菌肽替代喹乙醇后,日采食、日增重有所增加,腹泻率明显降低,肠道中大肠杆菌数量降低。     

一株优良乳酸菌的分离鉴定与特性研究

利用乳酸菌分离专用培养基-MRS培养基从发酵40 d的酸菜汁中分离得到一株乳酸菌,利用经典分类法对所分离的乳酸菌菌株进行了系统的细菌学鉴定和生物学特性研究。结果该菌株被鉴定为乳杆菌属、植物乳杆菌。对其进行生长曲线、pH及酸度的测定,结果显示分离乳酸菌的对数生长期较长;培养以后pH下降达到稳定;酸度较高的产酸时间为前20 h。抑菌试验表明：该菌株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用。由于该菌具有生长快、产酸量高并具有抑菌活性等特点,因而适合作为微生态制剂的优良菌种开发利用。     

不同乳酸菌和饲料添加剂体外抑菌效果研究

本试验采用牛津杯扩散法,通过抑菌圈的大小分别研究不同乳酸菌及饲料添加剂的体外抑菌效果,为乳酸菌及饲料添加剂的筛选提供初步参考。试验结果表明：嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌对大肠埃希氏菌有抑制作用,嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌对鼠伤寒沙门氏菌有抑制作用,所有菌株对金黄色葡萄球菌没有抑制作用。不同乳酸菌株复配后也表现出一定的抑菌作用。饲料添加剂中,水解单宁酸的抑菌效果最好,对3株菌均有抑制作用（除浓度500 mg/L对金黄色葡萄球菌没有抑制作用外）,且随着单宁酸浓度的增加,抑菌圈越大,抑菌效果越好。葡萄糖氧化酶的抑菌效果次之,200、300 mg/L葡萄糖氧化酶对金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌有抑制作用。苯甲酸、肠杆菌肽、溶菌酶对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌没有抑制作用。不同饲料添加剂复配也表现出一定的抑菌效果。体外试验结果表明,乳酸菌、单宁酸、葡萄糖氧化酶均表现出较好的体外抑菌效果。 [关键词] 乳酸菌|饲料添加剂|抑菌效果|体外     

抗菌肽JH-3对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌和抗炎作用研究

为研究抗菌肽JH-3对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicilin-resistant Staphyloccocus aureus,MRSA)ATCC25923的杀菌和抗炎作用,本研究通过琼脂扩散和最小抑菌浓度(MIC)检测了抗菌肽JH-3对ATCC25923的抑菌作用,结果显示JH-3对ATCC25923具有良好的杀菌作用,1 MIC的JH-3在20 min内可使ATCC25923活菌数降低1 000倍;利用结晶紫染色和电镜观察检测JH-3对ATCC25923生物膜形成的影响,结果显示较低浓度的JH-3(0.5 MIC)可以显著降低ATCC25923生物被膜的形成;通过细胞毒性试验和RT-PCR在细胞水平上评价了JH-3对ATCC25923介导的LDH和细胞因子释放的影响,结果显示JH-3(50μg/mL)可以显著降低ATCC25923介导的A549细胞LDH的释放,同时JH-3还具有剂量依赖性的降低ATCC25923诱导的A549细胞炎症相关细胞因子(IL-1β、IL-2和IL-6)的表达;对其他8株不同的MRSA进行抑菌性测定,结果显示JH-3对这些菌株均有很好的杀菌作用,20 min内均可使活菌数降低至10~3cfu/mL～10~7cfu/mL。本研究首次证实了JH-3能够有效杀灭MRSA及抑制MRSA介导的炎症作用,为新型抗菌药物的研发奠定基础。     

杭白菊、普洱茶复合酸奶的研制

研究杭白菊、普洱茶复合酸奶的生产方法,确定最佳的添加配比和工艺条件。结果表明:牛奶中杭白菊添加量为4g/100mL、普洱茶添加量为10g/100mL、糖5g/100mL、菌种接种量2%、发酵时间5h,将茶叶放入牛奶中浸煮5min,获得的菊普酸奶茶香浓郁,与牛奶有较好的相溶性,与普通酸奶相比,有一种独特的清香。     

正交试验优化清汁红枣乳酸饮料工艺

以红枣为原料进行乳酸发酵,生产具有红枣和乳酸发酵特有风味与营养功能的红枣乳酸饮料.通过单因素试验和正交试验确定红枣乳酸发酵最佳工艺条件为:菌种保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌的复合比2∶1、发酵时间1d、发酵温度38℃、复合菌剂接入量6％、牛奶添加量3mL/100mL、葡萄糖添加量0.5g/100mL,产酸量达7.5g/L.饮料调配最佳工艺条件为100mL饮料中添加红蔗糖2g、白蔗糖5g、NaCl 20mg,乳酸含量为0.5g.对4种乳酸发酵醪抗氧化功能分析发现次等红枣发酵醪在清除DPPH自由基和总抗氧化能力方面与优质红枣发酵醪相当,而高于苹果汁、红心红薯2种发酵醪.     

藏灵菇发酵乳生产工艺优化及其功能特性

为研究藏灵菇功能特性,以滴定酸度和感官评价为指标,通过单因素试验对藏灵菇脱脂发酵乳工艺条件进行初步优化,并通过体外实验对藏灵菇脱脂发酵乳抗氧化能力和降胆固醇能力进行测定。结果表明：确定藏灵菇接种量6%、发酵温度37 ℃、发酵时间7.5 h为藏灵菇脱脂发酵乳的最优工艺条件,此条件下制得的脱脂发酵乳酸度适宜、口感细腻、质地均匀,具有独特风味,乳酸菌数为1.48×108 CFU/mL,硬度为178.43 g,高于传统发酵乳,黏附性为－103.52 g·s,且非脂乳固体含量、蛋白质含量和滴定酸度均符合发酵乳标准GB 19302—2010《食品安全国家标准 发酵乳》,品质较好;藏灵菇发酵乳抗氧化能力虽与传统发酵乳差异不显著,但具有较好的降胆固醇能力,藏灵菇脱脂发酵乳胆固醇去除率高达37.98%,藏灵菇全脂发酵乳胆固醇去除率高达40.68%。     

豆基发酵乳的制备及过程机理分析

以轴流磨工艺所制豆浆、白砂糖、乳糖、葡萄糖、乳酸菌为原料制备豆基发酵乳,工艺设计实验结果表明：豆浆1000mL、白砂糖90g、乳糖10g、葡萄糖2g、乳酸菌0．2g,42℃发酵76h,产品品质佳。该豆基发酵乳产品在4℃、24h冷藏保质期内,活菌数平均值达3．0×10^CFU／g,蛋白质3．6％,脂肪2．5％,酸度90．05。T,pH4．52,大肠菌群79个／mL,脲酶阴性,致病菌未检出,符合国标GB19302-2010《发酵乳》要求。同时,该豆基发酵乳具有新鲜、操作方便、适合商业生产应用等优点,具有广泛的商业前景。     

Characterization of bacteriocin produced by Streptococcus bovis J2 40-2 isolated from traditional fermented milk 'Dahi'

A bacteriocin-producing strain Streptococcus bovis J2 40-2 was isolated from traditional fermented milk 'Dahi' in Bangladesh. Despite its narrow antimicrobial spectrum, it showed strong antimicrobial activity against extremely challenging and problematic organisms in foods, such as Listeria monocytogenes . Bacteriocin was sensitive to several proteolytic enzymes and showed antimicrobial activity over a wide pH range of 2.0–10.0. It was stable when heated to 110°C for 20 min, but lost 25% of its activity when heated to 121°C for 15 or 20 min. Optimum bacteriocin production (5600 AU/mL) was achieved when the strain was cultured at 37°C for 24 h in MRS medium rather than in TYLG, GM17, or skim milk medium. Bacteriocin was partially purified by ammonium sulfate precipitation (80% saturation), dialysis (cut-off MW: 3500) and gel filtration chromatography. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis revealed that bacteriocin had a molecular weight of approximately 4.5 kDa.     

清汁苹果乳酸饮料的研制

通过单因素及正交试验,对清汁苹果乳酸饮料工艺进行优化研究。结果表明：苹果乳酸饮料发酵工艺条件：保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌菌液按体积比2：1：2复配,温度38℃、复合菌剂接种量6%、牛奶添加量11mL/100mL、发酵时间11d,此时乳酸产量达13.85g/L;澄清条件：壳聚糖添加量0.3g/L、温度40℃、时间2h,该条件下透光率达96.167%。饮料配方为：100mL饮料中,乳酸含量0.5g、蔗糖添加量6g、氯化钠添加量60mg、蜂蜜添加量0.05g。苹果乳酸发酵醪的总抗氧化能力为42.68mg/mL,100μL时对DPPH自由基清除率达52.186%。     

In vitro safety assessments and antimicrobial activities of Lactobacillus rhamnosus strains isolated from a fermented mare's milk

Safety and probiotic characteristics such as antimicrobial activities of three Lactobacillus rhamnosus strains, FSMM15, FSMM22 and FSMM26, previously isolated as potential probiotics from fermented mare's milk were investigated. The three FSMM strains were susceptible to ampicillin, gentamycin, kanamycin, streptomycin, tetracycline and chloramphenicol, whereas they were resistant to erythromycin (minimal inhibitory concentration (MIC) = 4?8 µg/mL) and clindamycin (MIC = 4 µg/mL); bioconversion of bile salts, hemolytic activity and mucin degradation activity were negative; enzymatic activities of α‐chymotrypsin and β‐glucosidase were detected, but those of α‐galactosidase, β‐glucuronidase and N‐acetyl‐β‐glucosaminidase, were undetectable. Among the strains, strain FSMM15 was chosen as a safer probiotic candidate due mainly to the lack of plasminogen binding ability. Despite lower acid production of strain FSMM15 than others, its cell‐free culture supernatant inhibited growths of Salmonella Typhimurium LT‐2, Shigella sonnei , Listeria monocytogenes , and Escherichia coli O157 with comparable levels of ampicillin, suggesting a favorable aspect of strain FSMM15 as a probiotic strain.     

核桃酸奶加工工艺研究

以牛奶为主要原料,添加适量的核桃碎等辅料,利用保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌作为发酵剂,确定对核桃发酵乳的制作工艺条件。通过单因素试验和L9（34）正交试验确定最佳核桃酸奶生产工艺流程及工艺参数为：100mL牛奶和10g/100mL白砂糖→灭菌（63℃,30min）→接入5g/100mL发酵剂→35℃恒温发酵12h→加入5g核桃碎→后发酵24h（5～7℃）。利用此工艺制备的核桃酸奶风味独特、营养价值较高,在0～6℃时的货架期可达10d左右。     

Effect of milk fraction on concentrations of cephapirin and desacetylcephapirin in bovine milk after intramammary infusion of cephapirin sodium

Clinical mastitis in dairy cows is commonly treated with intramammary (IMM) antimicrobial agents. Pharmacokinetic data are used to design treatment regimens and determine withholding times. In some pharmacokinetic studies, investigators measure antimicrobial concentrations in foremilk, whereas in others, they use bucket milk or do not specify the milk fraction sampled. Our objective was to compare antimicrobial concentrations in foremilk, bucket milk, and strippings after IMM treatment of six healthy Holsteins. One mammary gland/cow was infused with 200 mg of cephapirin (CEPH) after each of the two milkings, using different milking frequencies and treatment intervals in a randomized crossover design. Treated glands were sampled at the first milking following each infusion. Antimicrobial concentrations in milk were measured using HPLC/MS/MS. CEPH concentration was higher in foremilk (geometric mean 44.2 μg/mL) than in bucket milk (15.7 μg/mL) or strippings (18.5 μg/mL), as it was true for desacetylcephapirin (DAC) (59.5, 23.0, and 30.2 μg/mL, respectively). This finding, which was based on milk samples collected at the first milking after IMM infusion, suggests that pharmacokinetic data based on drug concentrations in foremilk may be misleading. Strippings were more representative of bucket milk than foremilk. The relationship between milk fraction and antimicrobial concentration should be investigated for other IMM antimicrobial agents. Meanwhile, it is essential that pharmacokinetic and residue studies report the fraction of milk that was analyzed.     

菊花发酵乳饮料工艺优化

以菊花提取液和鲜牛奶为主要原料，杀菌后接种乳酸菌进行乳酸发酵，通过单因素与正交试验确定原料的配比、发酵条件及产品的配方。结果表明，原料最佳配比为菊花提取汁20％、蔗糖8％、鲜牛奶40％；制备该乳饮料的最佳发酵工艺条件为接种量3％、发酵时间4h、温度42℃。