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简单、高效的抽提DNA是进行分子生物学研究的基础。选取三种不同海藻纲中的条斑紫菜、条浒苔、钝顶螺旋藻为材料,通过采用改良的CTAB法、LiCl法及试剂盒法抽提基因组DNA并进行比较,以找出适用于各种藻类DNA提取的快速有效方法。结果表明适当提高裂解液与样品比能有效降低材料中多糖与蛋白质、酚类等杂质,提高DNA纯度和得率。经过修改后,三种方法都能有效抽提DNA,其中试剂盒法省时,所得到的DNA纯度最高,但得率较低且成本高。CTAB法与LiCl法也均能得到高质量的DNA,但LiCl法相对而言更简捷有效。此外,抽提前的材料预处理对DNA质量有明显影响。 相似文献
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甘薯薯块富含淀粉、酚类等物质,不利于DNA提取。为了研究甘薯薯块DNA提取的最佳方法,采用经典CTAB法、改良CTAB法一、改良CTAB法二和SDS提取法,对甘薯薯块总DNA提取效果进行比较,以试剂盒法提取结果作对照。结果表明:采用经典CTAB提取法和SDS提取法获得的薯块DNA含有较多杂质,且降解严重,样品质量低;CTAB改良法一能降低DNA样品中多糖等物质的含量,但DNA存在一定程度降解,且耗时较长;CTAB改良法二提取效果最佳,杂质含量低且DNA降解少,与试剂盒提取效果最接近,是一种较为理想的甘薯薯块DNA提取方法。 相似文献
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黄芩高质量DNA提取方法研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用4种方法对富含多酚、多糖和小分子杂质的黄芩新鲜叶片进行了基因组DNA的提取,通过比较得到了一种以改良的SDS法为基础的分离高质量完整DNA的简便方法.结果表明.使用该方法从黄芩新鲜叶片中提取的基因组DNA可直接用于RAPD分析,可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量DNA. 相似文献
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[目的]寻求高质量枸杞DNA的有效提取方法,为开展我国枸杞种质资源准确的分子鉴定评价提供试验基础。[方法]针对枸杞组织中多糖严重干扰基因组DNA提取质量的问题,比较了常规十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和改良CTAB法的处理效果。[结果]常规CTAB法提取DNA难以除去多糖类杂质,溶液极黏稠,致使移液枪吸取困难,取量不准;改良CTAB法提取DNA产率高,无明显降解,杂质少,OD260nm/OD280nm比值在1.80左右,表明DNA纯度高,污染少。通过基因组DNA—AFLP指纹图谱分析,改良CTAB法完全满足试验要求。并对改良CTAB法的关键步骤作了分析讨论。[结论]为枸杞DNA的有效提取提供了方法依据。 相似文献
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药用植物白术DNA提取方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为从白术叶片中提取高质量的基因组DNA,在传统CTAB法的基础上,采取先破碎细胞,将存在于细胞质中影响DNA提取质量的多酚等次生代谢物质去除后再裂解细胞核,经分离纯化,提取的DNA通过A260/A280比值测定,琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增检测,结果表明改良CTAB法提取的DNA纯度高,可作为ISSR分子标记的模板及用于后续分子生物学的研究。 相似文献
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甘蔗是重要的糖料及能源作物之一。甘蔗基因组DNA的提取是甘蔗分子生物学研究的前提。试验以甘蔗的嫩叶为材料,通过对前人的CTAB提取方法进行改良,建立了甘蔗基因组DNA的CTAB提取方法Ⅲ。该方法具有成本低、操作简单、省时和量多等特点,并且得到的DNA经核酸蛋白质分析仪测得A260/A280值处于1.673~1.929之间、A260/A230集中处于1.903~2.358,经琼脂糖凝胶电泳检测各样品具有一条分子量大于23.37kb的明亮主带并无拖尾现象,经RAPD-PCR检测各样品均能扩增出清晰而多态性丰富的条带,说明方法Ⅲ提取得到的DNA完整性好,纯度高,可以直接用于各种分子标记。 相似文献
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提取蕨类植物DNA方法比较 总被引:4,自引:2,他引:4
[目的]研究蕨类植物DNA提取的方法,为进一步的遗传多样性以及分类学的研究提供基础。[方法]通过改变试剂的用量以及操作方法对CTAB法提取DNA方法进行了改进。[结果]改良的CTAB提取法能够提取出高质量的蕨类植物的DNA。[结论]改良了蕨类植物DNA提取的方法。 相似文献
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2种大豆总RNA提取方法的改良 总被引:3,自引:0,他引:3
对大豆总RNA的提取方法T rizo l法和异硫氰酸胍法进行了改良,比较了改良前后2种方法的提取效果。结果表明,2种改良方法提取的大豆总RNA质量较高、完整性较好,完全可以满足后续研究要求,RNA产率均超过220μg/g。改良T rizo l法适用于大豆根、茎、叶及生长点总RNA的提取,而改良异硫氰酸胍法适用于大豆根、茎及生长点总RNA的提取。 相似文献
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对高质量螺旋藻基因组DNA的制备方法及其影响因素进行了研究.结果表明:以含水量约为10%的冷冻藻泥为材料,采用CTAB缓冲液及二次沉淀提取法,可获得高质量和高得率的螺旋藻基因组DNA. 相似文献
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棉花DNA提取方法的探讨 总被引:26,自引:0,他引:26
就提取棉花基因组DNA的两种基本方法及其相应的改进方法作了系统比较研究.结果表明:改进的SDS法和CTAB法分别优于原SDS法和CTAB法,两种改进方法提取棉花基因组DNA效果一致.DNA的得率与提取方法有关,还与棉花的取材部位有关.改进的CTAB法DNA得率高于改进的SDS法;采用改进的CTAB法提取棉花不同部位基因组DNA,其DNA得率的高低依次为花药>花瓣>叶片>纤维.由改进方法提取的棉花基因组DNA能完全双酶切,能满足SSR和AFLP等后续分子生物学研究的需要. 相似文献
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盐碱土中放线菌分离方法研究 总被引:6,自引:0,他引:6
研究了不同分离培养基及样品预处理(热处理和化学处理)对盐碱土中放线菌分离效果的影响。结果表明:(1)碱土中放线菌的总数、属数和链霉菌类群数极显著地高于盐土;(2)高氏1号琼脂为最佳的基础培养基,精氨酸-甘油琼脂次之;(3)A3培养基(高氏1号琼脂,N aC l 0.5 g/kg,pH 9.0)为碱土的最佳分离培养基;A1培养基(高氏1号琼脂,N aC l 50 g/kg,pH 7.0)为盐土的最佳分离培养基;(4)盐碱土用无菌的20 g/kg腐殖酸溶液浸泡,于40℃下振荡20 m in,可提高放线菌的出菌率并抑制杂菌生长。 相似文献
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夏威夷菠萝高效再生体系研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用菠萝试管苗的叶片、叶鞘、茎段和茎薄片作外植体,以MS或1/2 MS为基本培养基,应用正交试验设计方法研究了不同浓度的2,4-D、6-BA、NAA和AgNO3对夏威夷菠萝不定芽的诱导效果,并在添加不同激素组合的培养基中进行芽的增殖和生根培养研究.结果表明,茎段为诱导不定芽的最佳外植体,6-BA是影响不定芽产生的最主要因素.其中MS 6-BA 5.0 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L NAA 0.3 mg/L AgNO3 2.0 mg/L为不定丛芽诱导的最佳培养基,诱导率为83.3%;MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.05 mg/L为芽增殖的最佳培养基,可分化成绿色小苗;1/2 MS IBA 1.0 mg/L NAA 0.5 mg/L为小苗生根的最佳培养基,生根粗壮,生根率达100%. 相似文献
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花生幼胚RNA提取方法研究 总被引:13,自引:2,他引:13
花生(ArachishypogaeaL.)幼胚体积很小,不易剥取且富含多糖、酚类等化合物,因此以花生幼胚为材料提取RNA时会遇到很大困难.采用改进的Trizol法和异硫氰酸胍一步法成功提取出了高质量的花生幼胚总RNA,后续实验证明具有良好的逆转录活性.介绍了花生幼胚快速剥取的方法. 相似文献