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聚合酶链式反应(PCR)技术因其特异性强、灵敏度高以及快速简便等优点,广泛应用于环境监测.综述了改进PCR新技术:逆转录PCR、多重PCR、实时定量PCR、免疫捕捉PCR以及PCR-DGGE的原理及其在环境监测中的应用现状.PCR技术为在分子水平上进行环境微生物监测、污染物的生物损伤作用、群落结构多样性分析提供了有力的试验手段,具有广泛的应用前景. 相似文献
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应用微生物学方法从患病猪分离病原菌,根据病原菌的形态染色特性、培养特性和生化特性,以及动物试验、血清学验、病毒检测,最后确诊为由大肠埃希氏菌引起的仔猪水肿。用自制的仔猪水肿病多价油乳剂灭活疫苗进行预防,取得了良好的临床效果。 相似文献
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聚合酶链式反应技术的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
聚合酶链式反应技术自诞生以来,已在生物学及相关学科中得到了广泛应用,并得以不断的深入和发展。本就近年来研究和发展出现的一些特殊PCR技术,如:逆转录PCR、反向PCR、定量PCR、锚定PCR、重组PCR、长PCR、热起动PCR、免疫PCR、复合PCR、差向显示PCR等作一简这,以供参考。 相似文献
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《(《农业科学与技术》)编辑部》2013,(2)
猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneu-moniae)是引起猪支原体肺炎的重要病原,该病常引起继发感染和混合感染,严重威胁养猪业发展,引起巨大的经济损失。利用PCR技术对猪支原体肺炎早期正确诊断具有非常重要的意义。本文从猪肺炎支原体的特异性靶基因、临床样品采集方法及样品DNA处理方法关键技术因素及普通PCR技术、多重PCR技术、套式PCR技术、荧光定量PCR技术、芯片检测、环介导等温扩增技术等在猪肺炎支原体检测中的研究进展、主要优缺点及应用进行综述,为有效地诊断和防治气喘病提供便利。 相似文献
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根据甘蔗宿根矮化病(RatoonStuntingDisease,RSD)病原细菌(Leifsoniaxylisubsp.xyli,Lxx)16S-23SrDNA基因间隔区核苷酸序列设计的一对特异性引物,建立了甘蔗宿根矮化病PCR检测方法;同时对PCR扩增的目的片段核苷酸序列进行测定与分析。结果表明广东湛江蔗区RSD病菌16S-23SrDNA基因间隔区核苷酸序列与巴西、澳大利亚及美国路易斯安娜州RSD株系基因组相应区段核苷酸同一率接近100%,病菌高度的同源。而与近缘的木质部赖氏杆菌狗牙根变种(Leifsoniaxylisubsp.Cynodontis,Lxc)和形态上相近的马铃薯环腐病菌(Clavibactermichiganensissubsp.Michiganensis)基因组相应区段核苷酸同一率较低,存在明显的分化。 相似文献
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[目的]建立灵敏、特异、稳定的检测弓形虫感染的PCR法。[方法]检测弓形虫急、慢性感染鼠血清及组织中弓形虫速殖子DNA,并对检测感染鼠血清中弓形虫速殖子的灵敏度进行评估。[结果]急性感染鼠接种后18 h,40%的感染鼠被检测为阳性;接种后21 h,80%的感染鼠被检测为阳性;24 h以后100%的感染鼠被检测为阳性。慢性感染鼠接种后18 d可从肝、肺、脾、肾、脑组织中检测到弓形虫DNA。试验中检测到1个弓形虫,相当于0.2 pg的弓形虫DNA含量。[结论]结果为运用PCR法检测弓形虫感染提供了参考。 相似文献
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仔猪水肿病是一种由致病性溶血性大肠杆菌产生的毒素引起仔猪急性高致死性肠毒血症,已成为危害养猪业较严重的疾病之一。一年四季均可发生,尤其在春秋两季较为常发。猪群中营养良好,体格健壮,生长快的仔猪最容易发生。发病率高达15%-35%,发病死亡率较高,早期发现并及时治疗死亡率仍可达50%~60%,晚期治疗死亡率高达90%以上,笔者就2007年景泰县芦阳镇和草窝滩镇养殖户(场)的两例仔猪水肿病诊断及治疗总结如下,供同行参考。 相似文献
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复合RT-PCR检测猪乙脑病毒和猪流感病毒方法的建立 总被引:4,自引:0,他引:4
根据GenBank上已发表的猪乙脑病毒(JEV)的E基因序列和猪流感病毒(SIV)的NP基因序列,设计合成了2对特异引物,分别建立了JEV和SIV的单项RT-PCR诊断方法,通过对扩增条件的筛选,最终成功地建立了JEV和SIV的复合RT-PCR诊断方法,利用一次RT-PCR反应,即可同时扩增JEV的349 bp和SIV 155 bp的特异性片段,而猪瘟病毒(HCV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、正常细胞(PK-15)核酸扩增结果为阴性,对JEV和SIV的最低检出量分别为100和10 pg的cDNA. 该方法适合对JEV和SIV的联合检测和鉴别诊断. 相似文献
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荧光定量PCR技术研究进展及其应用 总被引:3,自引:0,他引:3
荧光定量PCR技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,更以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点而成为分子生物学研究的重要工具,并用于生物特异核苷酸的检测.主要概述了荧光染料法、TaqMan探针法、分子信标法、Lux Primer 4种荧光定量技术的原理、特点以及荧光定量PCR技术在各方面的应用. 相似文献
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