fl(2)d单等位基因的敲除显著降低小菜蛾的生殖力和育性

【目的】RNA甲基化是基因转录后水平表观修饰的主要形式,参与了众多重要的细胞学过程。小菜蛾（Plutella xylostella）是危害十字花科蔬菜的重要寡食性害虫,与RNA甲基化相关基因的功能尚未见报道。本研究通过克隆小菜蛾的RNA甲基化蛋白同源基因fl(2)d,鉴定其表达模式,并敲除该基因以探究其生物学功能。【方法】通过小菜蛾基因组网站查找fl(2)d基因序列,PCR扩增其蛋白质编码序列（CDS）;采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术,检测小菜蛾不同发育阶段个体以及成虫生殖腺中fl(2)d的相对表达量;运用CRISPR/Cas9结合卵的显微注射技术,对小菜蛾fl(2)d进行编辑;将fl(2)d被编辑过的成虫与野生型成虫杂交,并对其产生的后代进行近交,筛选fl(2)d突变品系;观测并比较突变体与野生型个体遗传特性、生物学参数和表型的差异,明确fl(2)d的功能。【结果】克隆得到长度为912 bp的fl(2)d CDS,fl(2)d在雌蛹、雌成虫和卵中的表达量较高,雄成虫和雄蛹的表达量较低,幼虫期的表达量最低,成虫卵巢中表达量显著高于精巢。通过向小菜蛾的卵注射靶向fl(2)d的向导RNA（sgRNA）和Cas9蛋白的混合物,对所产生的阳性后代进行10代的单对近交筛选,获得3种杂合的移码突变品系,分别缺失了4个（Δfl(2)d213-4）、5个（Δfl(2)d213-5）和7个（Δfl(2)d214-7）碱基。在上述品系的筛选过程中,发现了6只缺失4个碱基的纯合突变个体,2只缺失5个碱基的纯合突变个体;缺失4个碱基的纯合个体成功配成了两对,近交未产卵;剩余的2只缺失4个碱基的雄性纯合个体和2只缺失5个碱基的雄性纯合个体分别与同世代的雌性杂合突变个体近交后仍未产卵。说明fl(2)d纯合突变的个体存活率极低,且可能无法产生后代。通过分析后代基因型的分离比,发现杂合突变个体近交以及杂合突变个体与野生型个体杂交产生的后代中,杂合突变个体与野生型个体的比例分别略小于2和1,说明fl(2)d杂合突变会影响小菜蛾正常的生长发育,并导致部分个体死亡。杂合突变体后代中含有突变的雌雄个体比例接近1﹕1（P<0.05）,推测小菜蛾fl(2)d可能与性别决定无关。只要是有突变品系小菜蛾所参与的交配,雌成虫产卵量和卵的孵化率均显著低于野生型（P<0.01）,所产的卵多数发育异常,表现为失水皱缩、不能正常孵化。通过对成虫的生殖腺进行解剖,发现在野生型雌成虫与突变体雄成虫交配后,卵巢内卵的附着量较未交配的个体明显减少;未交配的突变体雌成虫卵巢内卵的附着量亦少于野生型,而突变体雄成虫的精巢未见明显异常。部分能够孵化的杂合突变个体在整个发育过程会发生不同程度的畸变,导致不能正常完成整个世代;另外一些杂合突变个体未见异常,可以将突变类型遗传给后代。根据上述发现,提出了基于fl(2)d的小菜蛾遗传防控模型。【结论】fl(2)d参与小菜蛾的生殖过程和胚胎发育,突变后显著影响后代种群数量,是开展小菜蛾遗传控制的理想靶标。     

中蜂与意蜂营养杂交对工蜂苹果酸脱氢酶Ⅱ的影响

本研究以中华蜜蜂(Apis cerana cerana)和意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)为实验材料,进行中华蜜蜂与意大利蜜蜂营养杂交,然后应用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳(IEF-PAGE)技术检测亲本和营养杂交后代的工蜂苹果酸脱氢酶Ⅱ的基因型、基因型频率、等位基因频率、杂合度和纯合度,结果表明:经过营养杂交后,杂交后代工蜂的苹果酸脱氢酶基因型发生了变化,并且苹果酸脱氢酶条带位置朝着对方蜂种偏移。     

新淮猪培育过程中近交效果的初步分析

近亲交配是一项有利于基因纯合,固定某些优良性状的繁育方法.在猪育种的实践中,经常采用近亲交配.国内外著名猪种的育成史上,均有不同程度的近交.然而.对于猪的近交效果,说法尚不一致.在新淮猪培育的早期,曾对近交效果作过初步探讨.本文旨在进一步分析新淮猪培育各阶段,特别是自群繁育阶段的近交效果,探明影响近交效果的因素,为开展品系繁育提供依据.     

甘蓝型油菜显性纯合两用系和临时保持系同源化策略

显性纯合两用系转育同源临保系和临保系转育同源显性纯合两用系,两者的选育策略完全不同.纯合两用系转育同源临保系是以纯合两用系可育株作轮回亲本,选显性杂合不育株作定向回交的母本,经高代定向回交,后代自交选择隐性纯合可育株即为同源临保系.临保系转育同源纯合两用系是以隐性纯合可育株作轮回父本,选单基因或双基因杂合体作定向去雄回交的母本,经高代定向回交,后代选育育性分离的株系进行兄妹交,用临保系测显性基因的纯合性而选育出同源纯合两用系.不同遗传模式下的临保系和纯合两用系同源化的选育方法有所不同.该文详细阐述了不同遗传方式下临保系和纯合两用系同源化的技术路线及其遗传模式.     

甘蓝型油菜两种纯合中芥酸基因型的分离和鉴定

本研究从中国高芥酸甘蓝型油菜品种华油8号与加拿大无芥酸品种Altex杂交的后代中,分离和鉴定出了两种不同的纯合中芥酸基因型,它们在一个基因座位上具有纯合的有芥酸基因E.在另一座位上具有纯合的无芥酸基因c,其基因型组成可分别用E_AE_Ae_Ce_C和e_Ae_AE_CE_C表示。二者的芥酸含量均为27%左右,基本上等于双亲的平均值。这两种基因型的杂交后代和回交后代的分离结果表明,其遗传行为与无芥酸和高芥酸杂交后代的结果相同,这再次证实了芥酸的遗传假说,同时也证实了这两种基因型的遗传组成。文后讨论了这两种基因型的可能用途。     

近交对中国美利奴羊的影响及其克服和预测方法的研究

本文对中国美利奴羊(军垦型)应用多变量线性模型方法,分析近交对生产性能的影响,在各主要经济性状中,遗传力高的性状近交衰退较小,遗传力中等和低的性状近交衰退较大。选择能有效地克服近交的影响,对遗传力高的性状,加强选择克服近交衰退较强。采用指数选择克服近交衰退效果较好。利用双亲亲缘系数估测后代生产性能可早期预测近交衰退。     

民猪保种群近交程度分析与亚群优化选配方案设计

通过全面整理兰西保种场自建场以来民猪种群的留种与产仔资料，在理清系谱关系的基础上，对民猪保种群的近交程度作了系统分析，依此采取分亚群轮换进行纯繁与杂交的方法保护该种群。根据各亚群平均近交程度的变化，以后代平均近交系数最小或经济价值最大为目标，采用0-1线性规划法，有针对性地制订优化选配方案，从而有计划地对民猪保种群实施保种与选育相结合的保种战略。     

闭锁鸡群的近交试验

本试验在闭锁的星布罗肉用种鸡三个家系中研究了近交对受精率、孵化率、雏鸡成活率、早期生长速度、饲料转换率、屠宰率、胸肌营养成分以及血清蛋白、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、胆碱酯酶和胆固醇等血液生化指标的影响。结果表明,对于上述生产性状而言,近交的效果视其共同祖先和亲本的性能而定。早期生长速度快的家系其后代表现较好,半同胞交配时退化的幅度也较小,有的性状,如受精率、饲料转换率甚至还有所提高;共同祖先和亲本早期生长速度慢的家系,其后代表现较差,半同胞交配退化的幅度也较大。血清清蛋白和胆固醇的含量在近交后代中表现出下降的趋势。作者认为,在闭锁群中围绕着优秀个体选择其优秀后代有计划地近交可能是防止和延缓近交退化的有效措施之一。     

优质肉鸡肌苷酸与肌内脂肪含量相关基因聚合效应研究

【目的】探讨多基因聚合在优质肉鸡分子育种中的可行性。【方法】运用PCR-SSCP和测序技术检测ADSL、GARS-AIRS-GART和A-FABP3个基因的优势纯合基因型(CCAAMM)。【结果】研究结果显示,3个基因的优势纯合基因型聚合后代完全也是优势纯合基因型(CCAAMM),在后代个体中优势纯合基因型个体的肌苷酸含量显著高于其他非完全有利聚合基因型个体(P<0.05)。除了CCBBMM型,CCAAMM型的肌内脂肪含量显著高于其他聚合基因型(P<0.05)。【结论】推测CCAAMM聚合基因型可作为大恒优质肉鸡肉质性状有效的候选标记。     

五指山猪3个近交家系内微卫星等位基因的遗传变化

 【目的】探索五指山猪近交3个不同家系F14-F18等位基因的遗传学规律,为大型动物近交系培育提供依据。【方法】利用14对微卫星DNA引物,以五指山小型猪（Wuzhishan Miniature pig,WZSP）F13-F18世代的3个近交家系为研究对象,通过估算基因杂合度（H）、多态信息含量（PIC）和等位基因数（N）等参数,检测近交3个家系微卫星等位基因的纯合度,以及随近交代数的推进每个星座上等位基因的变化规律。【结果】WZSP近交系Ⅰ系F14-F16的14个微卫星座平均每个位点等位基因数为2个、平均杂合度为0.40、多态信息含量为0.26;Ⅱ系F15-F18的平均等位基因数为1.92,平均杂合度分别为0.32,多态信息含量为0.25;Ⅲ系F14-F17的平均等位基因数为2.17,平均杂合度为0.44,平均多态信息含量为0.32。【结论】随近交代数的推进,每个星座上等位基因数越来越少,基因的纯合度越来越高,但WZSP近交系微卫星等位基因的纯合度有一定的限度,与近交鼠有所不同;在近交系3个家系各个世代中有少数几个基因座,如Sw874和Sw936等一直处于高度杂合状态,这可能与WZSP近交家系的种质特异性有关,推测与这些基因座处于同一连锁群的某些功能基因在维持极高近交水平下WZSP的基本生存能力中起着关键作用。3个近交群体间的分化系数在0.07以上,已各自成为独立家系;3个家系的近交程度不完全一致,基因的纯合度亦不同,Ⅱ系最高、14个微卫星座中7个纯合,其次为Ⅰ系和Ⅲ系。     

松嫩平原漫川岗农田种植系统调控技术的探索与实践

运用系统分析方法,对松嫩平原漫川岗生态农业系统结构进行优化调整和系统的输出与输入调控。总结和论述了系统工程理论应用于农业生态综合发展实践的方法和作用。     

关于陆地棉品种(系)吐絮进程的分析

本研究采用吐絮进程分析了陆地棉品种(系)的熟性。结果表明,吐絮进程是比较稳定的性状、品种(系)间的吐絮进程可能是显著不同的。     

我国管巢蛛属(Clubiona)—新种记述(蜘蛛目:管巢蛛科)

本文描述了产自我国的管巢蛛属一新种即福州管巢蛛 Clubiona fuzhouensisn.sp.,新种蜘蛛标本于1984年春采自福建福州金山。该种蜘蛛栖息在一种小型竹子上(Bambusa sp.),以蛛丝缀合两片竹叶做成居留室,蜘蛛在白天匿藏于其中。本文对新种蜘蛛的外部形态及生殖器官的内部构造作了较详细的描述,并附有14幅插图。福州管巢蛛 Clubiona fuzhouensis 与褶管巢蛛 Clubiona corrugata Boes.etStr.1906相似,但雌蛛从下述特征可以相区别:(1)福州管巢蛛外雌器中部可明显见到一对大型球状构造,而褶管巢蛛在中部只能隐约见到两条弯曲的褐色刺状构造。(2)福州管巢蛛两交配管短而稍直,褶管巢蛛长而弯曲。(3)福州管巢蛛两受精管位于两对受精囊之间,褶管巢蛛则位于两对受精囊的外侧。雄蛛的区别特征是:(1)福州管巢蛛触肢胫节末端的表皮突短,弯曲度大,末端钝,褶管巢蛛长,几乎不弯曲,末端呈锥形。(2)福州管巢蛛插入器弯曲度大,几乎达到跗舟的外缘,褶管巢蛛弯曲度小。     

Polymorphism in Isopropyl Alcohol

Evidence for two polymorphic forms of isopropyl alcohol is presented. Three transformation reactions were observed. The transformation temperatures for pure isopropanol were 185.27(7) degrees K and 183.65(2) degrees K. The purity of the alcohol was found to be 99.98(5) percent ( calculated as moles).     

新疆主栽骨干棉花品种指纹图谱构建及纯度鉴定

【目的】构建新疆主栽骨干棉花品种的指纹图谱,分析棉花品种纯度,为棉花品种提供分子鉴定依据。【方法】以典型代表性的新疆北疆早熟棉花主推骨干棉花品种为材料,利用SSR分子标记技术从1 000多对SSR引物中筛选出稳定性好、多态性高的25对核心引物构建指纹图谱,从核心引物中筛选10对引物作为标记,分析4个棉花品种的纯度。【结果】检测到等位基因数70个,每个标记检测到的等位基因数介于2~7个,平均2.8个;引物多态信息量(PIC)值介于0.169 0~0.872 9,平均值为0.688 3;利用4个特征引物将4个棉花品种一次性完全区分开,构建供试品种的指纹图谱;利用10对引物检测4个品种的纯度,新陆早6号纯度变化范围85%~100%,系62纯度变化范围95%~100%。【结论】构建了4个棉花品种的指纹图谱及鉴定纯度,系62号纯度最高,为99.5%,新陆早6号纯度最低,为92.0%。     

利用微卫星标记鉴定金优207杂种纯度技术研究

利用微卫星分子标记,对杂交组合金优207的双亲及F1之间的多态性进行引物筛选和检测技术研究.结果如下：在已筛选的232对引物中,有32对引物显示稳定的多态性,杂种表现为父母本互补的带型.用表现多态性的两对引物分别对人为掺假的金优207进行纯度鉴定,能将掺入组合中的假种子区分开.目前采用的方法,具有准确可靠、多态性高、稳定性好、易于操作等特点.     

关中灌区种植制度的系统发展论

本文用系统发展的观点,论述了关中灌区种植制度的历史演变和改革进程,从早最的谷物单一种植,到传统种植制度的形成,再到集约种植制的发展,经历了一个从简单到复杂,从低级到高级的发展过程。了解其来龙去脉,掌握其发展规律,有助于推动种植制度沿着健康道路继续向前发展。     

关于玉米生长、糖分输运和干物质分配的数学模型

把一个植株看成是由几个隔室组成的动态系统,并对各隔室的光合产率和化学反应速率作出合理的假设,就可根据物质守恒原理对此系统建立一个以隔室体积 V_i 和糖浓度 C_i为因变量的动力学方程式组。用欧拉法对此方程式组进行数值积分,就可以一举而模拟出植株生长、蔗糖输运、蔗糖浓度分布和干物质分配等随时间而变化的历程。试算结果说明,只要适当地调整方程式中的参数值,就可以在计算机上生长出合理的株型和果穗,其它各方面的情况也与实际情况定性地符合。     

利用EST-SSR标记鉴定大白菜杂交种纯度的研究

利用EST-SSR分子标记技术,选用自主开发的3对EST-SSR引物,对13个大白菜品种的总DNA进行了PCR扩增。结果表明:EST-SSR标记可以体现品种内的一致性、亲本间以及品种间的多态性,具有共显性、稳定性和可重复性的特点;EST-SSR标记可以快速、准确地鉴别大白菜品种的真实性和杂交种纯度,为大白菜种子质量的高效检测提供科学依据。     

RAPD鉴定番茄一代杂种遗传纯度的研究

以番茄优良一代杂交种毛粉８０８、毛粉８１８和强选一号为材料,提取ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析,在３００个ＲＡＰＤ随机引物中筛选出了可鉴定３个品种一代杂种遗传纯度的特异性引物。其中Ｓ１０１９,Ｓ１３８８和Ｓ１４２２可用于这３个品种的纯度鉴定;Ｓ１０７２用于毛粉８０８和毛粉８１８的纯度鉴定;Ｓ１３８８用于区分３个品种的父本和子代。