含促生微生物饼肥对烤烟农艺性状与经济性状的影响

为研发烟草含促生微生物饼肥专项技术,研究了含促生微生物饼肥对烤烟农艺性状及经济性状的影响。结果表明,与普通饼肥相比,不同含促生微生物饼肥处理的烟株生育期基本一致;产值、均价、上等烟率、上中等烟率等经济性状以饼肥+枯草芽孢杆菌、饼肥+枯草芽孢杆菌+地衣芽孢杆菌的处理表现较优;烟叶各化学成分以饼肥+枯草芽孢杆菌表现较好。     

茅台酒致香微生物对烟叶致香成分影响

为探明茅台酒致香微生物在烟叶醇化中的应用效果,采用单因素法,进行烟叶不同部位(上部烟叶,中部烟叶,下部烟叶)、不同温度(30℃,40℃,50℃)和不同发酵时间(10d,15d,20d,25d)的单菌液(枯草芽孢杆菌)和混合菌液(枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉酶芽孢杆菌)发酵试验,研究不同处理对烟叶致香成分含量的影响。结果表明:烟叶的致香成分含量上部烟叶以复合菌处理的较高,中部和下部烟叶以单菌处理的较高;发酵温度控制在30~40℃较为适宜,30℃时复合菌处理烟叶的致香成分含量最高,40℃时单菌处理的最高;发酵时间控制在20~25d较为适宜,20d时以单菌处理的致香成分含量最高,25d时复合菌处理的最高。以茅台酒致香微生物对烟叶进行发酵处理,上部烟叶选择复合菌处理,30℃发酵25d致香成分含量较高;中部和下部烟叶选择单菌,40℃发酵20d致香成分含量较高。     

烟田土壤改良复合微生物菌剂对烟叶产质量的影响

在减量施肥的基础条件下,研究烟田土壤改良复合微生物菌剂对烟叶产量与质量的影响。结果表明,以芽孢杆菌+菌糠处理表现最好,芽孢杆菌+有机肥处理表现次之,具体表现为团棵期烟株长势好,平顶期具有较高的株高及叶片数,且烟株对病毒病具有较高的抗性,上等烟及中上等烟比例高,烟叶均价高,产值提高。     

不同施肥处理对烤烟的影响

选用不抗花叶病(TMV)的烤烟品种云烟85,通过田间施用干牛粪、废弃菌渣对比试验,观测其对烤烟产质量、主要病害发生情况的影响,结果表明:增施干牛粪、废弃菌渣能保持烟株后期较强的长势,在一定程度上提高烤烟的抗病性,提高产量和上等烟比例,改善烟叶的外观品质,但对协调化学成分效果不明显,田间没有发现花叶病株。在废弃菌渣中检测出花叶病病毒,建议在施用前喷施抗病毒剂。     

废弃鲜烟叶综合利用途径探索

[目的]探索废弃鲜烟叶的综合利用途径.[方法]基于现代烟草农业对绿色、环保、可持续发展的要求以及当地烟区部分农村拥有沼气生产设施的实际情况,选取风石堰镇龙湾村为试验地,探索废弃鲜烟叶沼气发酵的合理途径.[结果]试验显示,废弃鲜烟叶在投入沼气池前进行切碎处理和池外堆沤发酵有利于改善沼气发酵过程的pH环境,降低结壳量,并能有效提高产气量和产气速率.[结论]研究可为废弃鲜烟叶的有效处理、合理利用提供参考途径.     

含促生微生物饼肥对烤烟农艺与经济性状的影响研究

目的：为了研发烟草促生微生物饼肥专项技术,促进大田移栽烟苗的扎根立苗、均衡营养,提高烟株农艺与经济性状,本研究采用A （CK,普通饼肥）、）A1（饼肥加枯草芽孢杆菌）、A2（饼肥加巨大芽孢杆菌）、A3（饼肥加枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌）、A4（饼肥加胶冻样芽孢杆菌）等5种含促生微生物饼肥处理试验,对不同处理的烟株生育期、株高、叶数、叶面积、茎围、产量、产值、均价、上等烟率、上中等烟率及烟叶总氮、还原糖、烟碱、氯、钾含量等烤烟化学成分进行了比较分析,获得了如下主要结果：与对照（CK）处理比较,不同含促生微生物饼肥处理的烟株生育期基本一致;A3处理移栽35d与55d的株高、叶数、叶面积、茎围等农艺性状均表现最好;A1、A3处理的产值、均价、上等烟率、上中等烟率等经济性状表现最好,A2处理的各经济性状表现次之;A1处理的烟叶各化学成分表现最好,A3处理的烟叶各化学成分表现较好。     

不同菌剂发酵菌渣有机肥对烤烟产量及抗病性的影响

为食用菌菌渣的综合利用及发酵菌渣有机肥在烤烟生产上的合理应用提供参考,以食用菌废弃菌渣为原料,添加EM菌剂及EM菌剂+20%光合细菌发酵制成有机肥,采用田间大区对比试验研究施用不同菌剂发酵菌渣有机肥对烤烟农艺性状、产量及抗病性的影响。结果表明:施用添加EM菌剂+20%光合细菌发酵有机肥对促进烤烟生长发育、增加烟叶产量、提高上等烟叶比例和降低植株发病率等方面的效果均优于施用添加EM菌剂(CK)发酵有机肥的烟株,且烟叶产量比CK提高11.88%,上等烟叶比例增加25%,烤烟黑胫病和花叶病的发生率降低5百分点。施用添加EM菌剂+20%光合细菌发酵菌渣的有机肥有利烤烟生长发育、提高烟叶产质量和增强烟株抗病能力。     

高效芽孢杆菌对烤烟生长及产质量的影响

为了改善烤烟生长发育水平,进一步提升烟叶品质,采用田间对比试验,对高效芽孢杆菌在烤烟上的应用效果进行了研究。结果表明：施用高效芽孢杆菌灌根处理烟株田间长势较好,在高浓度水平下上部叶开片优于常规生产,其烤后烟叶均价以及上等烟比例等经济性状较高,B1F和B2F等级烟叶的比例得到了提升,改善了上部叶的等级结构水平。在烟叶质量方面,施用高效芽孢杆菌处理后烟叶油分有增加趋势,上部烟叶烟碱含量有下降趋势,化学成分相对协调,改善了烟叶香气质和香气量感官评吸水平。综合结果表明,高效芽孢杆菌在高浓度水平下(T1和T2)灌根施用较适宜烤烟生产应用。     

高碳基肥与微生物菌剂配施对土壤肥力及烟叶产质量的影响

采用随机区组试验设计，研究了高碳基肥配施不同微生物菌剂对土壤肥力及烟叶产质量的影响。结果表明，高碳基肥与解淀粉芽孢杆菌或绿色木霉菌剂配施较常规施肥对照（T1）可提高土壤细菌和真菌数量以及烤烟株高、茎围、最大叶面积、干物质积累量、产量、产值和中上等烟比例，其中常规施肥+高碳基肥+解淀粉芽孢杆菌+绿色木霉（T5）处理对烟叶产量和品质的改善效果最优，产量、产值和中上等烟比例比T1处理分别提升25.96%、35.69%、12.13%。与T1相比，T5处理还可以提高土壤含水率、有机质含量、铵态氮含量、有效硫含量以及土壤微生物的生物量碳、氮和磷含量。由此可知，高碳基肥与解淀粉芽孢杆菌和绿色木霉生物菌剂配施能有效改善烟田土壤生物学特性，提升烟叶产量和品质。     

三种芽孢杆菌菌剂对烤烟育苗效果的影响

为深入了解微生物菌剂在烟草育苗期的作用,探究其对烟草幼苗根系生长发育和烤后烟叶品质的影响,在烟草育苗时期,向漂浮育苗营养液中分别添加3种微生物菌剂：侧孢芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌,研究微生物菌剂对烟草幼苗农艺性状、根系活力、抗氧化酶相关指标以及烤后烟叶化学成分的影响。结果表明,使用微生物菌剂对烤烟农艺性状、根系活力、抗氧化酶相关指标和烤后烟叶化学成分均有影响。随着烟苗的生长,3种微生物菌剂处理中,添加侧孢芽孢杆菌较对照显著提高了烟苗的根鲜重、根长度、根表面积、根体积及SOD、POD 和CAT活性,显著增强了根系活力,增加了可溶性蛋白含量,降低了MDA含量,烤后烟叶化学成分更加协调。因此,在实际生产中,推荐在烟草漂浮育苗营养液中添加侧胞芽孢杆菌促进烟苗根系发育,培育壮苗,提升烟叶品质。     

昆明烟区育苗点烟草花叶病毒初侵染源的检测与分析

烟草花叶病毒在烟草种植上为害严重。在烟草育苗前期,对育苗基质、水源、漂盘残根、育苗棚周围植物及烟草种植区病株残体、土壤用烟草花叶病毒TAS-ELISA试剂盒检测。结果表明,在水源、漂盘残根、烟草种植区病株残体、土壤中均可检测到烟草花叶病毒,在育苗棚周边8个科的14种植物中检测到烟草花叶病毒,此类毒源可能成为苗期烟草花叶病发生蔓延的初侵染源。     

烟草花叶病毒弱毒株的筛选及其交互保护作用

采用高温、亚硝酸及两者的复合处理对烟草花叶病毒 (TMV)强毒株进行诱变 ,均可有效提高突变频率 ,而且复合处理还有较好的协同效应 .经生物学接种鉴定及血清学方法筛选 ,从中获得了 TMV- 0 17和TMV- 15 2 2个弱毒株 .用正交设计法考察病毒接种浓度、接种间隔时间、接种部位以及普通烟生育期等因素对弱毒株交互保护作用的影响 ,发现以烟株生育期和接种间隔时间两因素影响最大 .本试验结果表明 ,在烟草团棵期 ,弱毒株和强毒株接种间隔时间为 17d时 ,交互保护作用效果最好     

植物诱导抗病剂组合应用对烟草花叶病的防控效果

[目的]探讨植物诱导抗病剂组合对烟草花叶病的防控效果。[方法]在模拟病圃环境下,研究了6种植物诱导抗病剂的不同组合对烤烟栽培品种红花大金元的烟草花叶病的防控效果。[结果]多肽保与AHO 2种诱导剂的组合应用对控制TMV有良好效果,能明显推迟带毒隐症烟株TMV的发病时间,移栽后70 d对以清水和东旺毒消为对照的大田期烟株TMV的平均防效分别达到69.64%和43.25%,且在株高、叶数方面表现出明显优势,叶片生长发育状况良好。烟苗携带TMV病毒与症状能否表现无直接相关性,带毒隐症烟苗只有在发病条件适宜时才会表现症状。带毒隐症烟苗栽后19 d内是TMV发病的高峰期,在育苗阶段与大田期施用有效药剂,以及移栽后促进烟苗早生快发是控制其发病的关键措施。[结论]为制定烟草花叶病的防控措施提供了理论依据。     

β-氨基丁酸诱导烟草抗烟草花叶病毒系统侵染的研究

[目的]研究阻氨基丁酸（BABA）对烟草抗烟草花叶病毒（TMV）系统侵染的影响。[方法]以烟草普通栽培种为研究对象,用BABA进行处理．处理后所有的烟苗均放入保湿袋中保湿24h。然后用组织化学法鉴定BABA诱导烟草产生的过敏反应,并进行产生H2O2,原位检测以及活性氧和丙二醛测定。（结果]BABA处理后叶片中的,β-1,3-葡聚糖酶活性升高,1MV接种后叶片中该酶活性也进一步升高。10mmol／LBABA喷洒处理能显著诱导氧进发,引起过敏性反应,叶面局部细胞坏死。处理叶片中的过氧阴离子自由基、丙二醛含量增加。10mmol／LBABA有效激发植株的系统抗性,限制TMV的侵染,增强了烟草对TMV的抗性。[结论]BABA可增强普通烟草栽培品种抗TMV系统侵染的能力。但其诱抗能力要受其浓度的影响。     

壳寡糖席夫碱对感染烟草花叶病毒烟株叶绿素含量的影响

测定5种壳寡糖席夫碱3个浓度对烟草花叶病毒的抑制效果,结果显示,壳寡糖席夫碱对烟草花叶病毒(TMV)具有一定的诱导抗病效应,其中100μg/mL的3,5-二氯水杨醛壳寡糖席夫碱药剂的效果最好。并用该药剂对豫烟5号进行处理,测定了其对烤烟叶片中叶绿素含量变化的影响。结果表明,壳寡糖席夫碱可以有效诱导烟草抗烟草花叶病毒活性,处理后的烟草叶片中的叶绿素和胡萝卜素含量较阳性对照有较大的提高。     

中草药中抗植物病毒TMV活性物质PZ_1作用机理研究

以烟草花叶病毒 (TMV) /烟草为测试体系 ,研究了天然物 PZ1抗病毒 TMV作用机理。在离体及活体条件下 ,PZ1均可抑制病毒核酸与植物核糖体结合。在活体条件下 ,PZ1抑制 TMV- RNA及 TMV蛋白质合成。实验结果表明 PZ1的主要作用靶标为 TMV- RNA     

植物病毒复制抑制物的提取和其抗性测定

用烟草花叶病毒接种抗性植物心叶烟后,采用离心和ZnAc₂沉淀的方法提取植物胞间液中的病毒复制抑制物(IVR).5%～15%的不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳测定IVR的分子量为26000.对IVR进行的抗性检测实验表明,IVR对三生NN烟原生质体内TMV的复制抑制率达78%,对植物体内病毒的抑制率达47%～70%.     

PtWRKY14 基因转化烟草及对 TMV 的抗性影响研究

PtWRKY14 是从毛白杨中获得的WRKY 基因,为研究PtWRKY14 基因对植物抗病性的影响,构建了毛 白杨PtWRKY14 基因的植物表达载体pBI121-W14,通过农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草,PCR 与Southern 杂交 进行转基因烟草鉴定。对获得的转基因烟草植株进行烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV）的接种试验,结果表 明PtWRKY14 基因的转化使烟草对TMV 的抗性增强。荧光定量PCR 检测结果表明,TMV 接种后,转基因烟草中 PtWRKY14 的表达量显著上调,同时转基因烟草中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD）、过氧化物酶(Peroxidase,POD）、过氧化氢酶(Catalase,CAT）的表达量均高于对照组。因此,PtWRKY14 可能通过上调SOD、POD、 CAT 的表达从而增强植物抗病性。     

烟草种质资源TI203对烟草花叶病的抗性特点

[目的]系统了解烟草种质资源TI203抗烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的特点,为烟草抗病育种的亲本选择提供更丰富信息.[方法]以烟草种质资源TI203为材料,采用TMV病毒接种、病情调查、病毒外壳蛋白累计量检测、TMV复制水平测定及日灼现象观察等方法,研究TI203对TMV的抗性特异性、TI203接种TMV普通株系(TMV-U1株系)后的症状、病毒复制水平等.[结果]TI203只对TMV表现无症状的抗病特点,接种马铃薯Y病毒(PVY)和黄瓜花叶病毒(CMV)则表现出典型症状.接种TMV-U1株系后14 d,Western blotting检测结果显示,TI203叶片病毒复制水平明显低于对照品种;用表达GFP的TMV侵染性克隆浸润接种发现,TI203对TMV的抗性发生在病毒复制水平.在高温和强日照条件下,TI203生长迅速的中上部叶片会发生日灼现象,且难以恢复.[结论]TI203只对TMV表现无症状,其对TMV的抗性发生在病毒复制水平.     

黏质沙雷氏菌次生代谢物对TMV的抑制机理

【目的】分离、纯化和鉴定黏质沙雷氏菌2A2次生代谢物中具有抑制TMV侵染力的活性成分,明确其对TMV的抑制机理。【方法】通过病毒生物学测定,确定黏质沙雷氏菌2A2菌株对TMV的抑制效率。为明确黏质沙雷氏菌2A2发酵液次生代谢物中抑制TMV侵染力的活性成分,通过TLC和硅胶柱层析对其发酵液进行了分离纯化,获得主要的次生代谢物,通过局部枯斑法测定各代谢物的生物学活性,筛选可显著抑制TMV侵染活性的物质,经NMR分析,确定其成分结构,进而确定物质组分。为进一步揭示代谢物对TMV的抑制机理,利用透射电子显微镜探索代谢物对TMV粒体形态的影响,TMV粒体与代谢物甲醇溶液混合30 min后,于透射电子显微镜下观察TMV粒体形态。同时,用代谢物甲醇溶液喷施处理寄主下部3片叶,共设5个处理：处理Ⅰ,喷施代谢物24 h后,接种TMV;处理Ⅱ,代谢物与等体积TMV汁液混合30 min后,接种叶片;处理Ⅲ,先接种TMV,24 h后喷施代谢物;处理Ⅳ,宁南霉素（50 μL•mL-1）与等体积TMV汁液混合30 min后,接种下部叶3片做阳性对照;处理Ⅴ,无菌水与等体积TMV汁液混合30 min后,接种下部叶3片做空白对照。分别在次生代谢物诱导和TMV侵染后1、3、5、7、9 d,取未经任何处理的上部叶,TRIZOL法快速提取总RNA并反转录cDNA,利用real-time RT-PCR分析样品PR基因和TMV的RNA相对表达量,进而明确代谢物处理寄主对寄主PR基因表达的影响和对TMV在寄主体内复制增殖的抑制作用。【结果】黏质沙雷氏菌2A2菌株对TMV具有显著的抑制作用。对其发酵液进行分离纯化,获得3种主要代谢物,通过局部枯斑法测定,编号为BJH-2的代谢物可显著抑制TMV的侵染活性,经NMR分析,确定了该代谢物为灵菌红素（prodigiosin）。透射电子显微镜结果显示灵菌红素可显著破坏TMV粒体,使TMV典型的杆状病毒粒体降解断裂成排列紊乱的短杆状。real-time RT-PCR结果表明,灵菌红素处理植株后,处理Ⅰ、处理Ⅱ、处理Ⅲ可诱导寄主体内PR基因表达随着时间逐渐上调,第7 天左右,三者处理的寄主体内PR1、PR2、PR4、PR5表达上调至高峰,显著高于空白对照,亦高于处理Ⅳ的阳性对照,从而提高系统抗性;灵菌红素处理植株后,处理Ⅰ、处理Ⅱ、处理Ⅲ寄主体内TMV RNA的表达量随着时间上调减缓,在接种TMV后的第9天,三者处理的寄主体内的TMV RNA含量分别是空白对照的11.98%、5.23%、15.90%,显著低于空白对照,亦低于处理Ⅳ的阳性对照。【结论】灵菌红素既对TMV在寄主体内的复制增殖具有抑制作用,又可诱导寄主产生系统抗性,整体效果高于宁南霉素,可作为防治植物病毒新的生物制剂。