洋桔梗离体快繁技术研究

[目的]建立洋桔梗高效的快速繁殖体系,为工厂化生产提供可行的操作程序。[方法]以国外进口的洋桔梗F1代种子(品种名称为Polestar yellow)无菌苗的叶片为外植体,对不定芽的诱导、单芽增殖、无菌苗生根等进行了研究。[结果]结果表明:6-BA和IBA组合对洋桔梗叶片不定芽的诱导效果较6-BA和NAA组合好,叶片最佳的分化培养基为MS+6-BA0.6 mg/L+IBA0.04 mg/L,1个月内正常芽平均分化数为8.3;最佳的单芽增殖培养基为MS+6-BA0.8 mg/L+NAA0.04 mg/L,1个月内正常芽的增殖倍数为7.4;无菌苗在含有IBA0.25 mg/L的1/2 MS培养基上,生根率、平均每苗的根数均最大。[结论]该结果为洋桔梗的工厂化生产奠定了基础。     

植物激素在洋桔梗组培快繁中的应用效果

以洋桔梗试管苗为材料,研究不同植物激素及其配比对叶片诱导不定芽、试管苗生长、继代增殖、生根等的影响.结果显示:叶片诱导不定芽阶段,MS培养基中添加BA2.0mg/L IBA0.2mg/L GA30.5mg/L诱芽效果最佳.     

不同培养基及ZT诱导对洋桔梗玻璃化的影响

以洋桔梗叶片为材料,以培养基MS＋6-BA 0．5mg／L＋IBA 0．2mg／L为对照,将在对照培养基上培养的叶盘转接到含不同激素组合（6-BA 0．2—0．5mg,L、IBA 0．05～0．1mg／L、NAA 0．01～0．2mg／L、ZT 0．5～1．0mg／L）的培养基中培养30d;将不同分化时期的愈伤组织每隔3d转接到MS培养基中培养30d,观察洋桔梗不定芽分化情况。结果表明,将已诱导15d的叶盘转接到MS＋6-BA0．3mg／L、MS＋6-BA 0．4mg／L＋IBA 0．05mg／培养基中培养,利于正常不定芽的生长,分化总芽数和正常芽总数、平均每叶盘正常芽数明显高于对照,正常苗率与对照相差不明显。此外,将现芽点6d以前的不同分化程度的愈伤组织接到MS培养基中,则不利于正常不定芽的诱导分化;将现芽点第6d的愈伤组织转接到MS培养基中继续培养,其总分化芽数、正常芽总数、平均每叶盘正常分化芽数均高于对照而正常苗比率与对照相差不明显．显,说明现愈伤后不定芽的分化还继续需要外源激素的参与,以减少不定芽的玻璃化。     

洋桔梗高频再生系统的建立及其卡那霉素敏感性测定

以Double Mariachi Pink洋桔梗叶片为外植体,研究了切割方式、培养基中6-BA与NAA配比对其不定芽分化的影响以及叶片不定芽分化对卡那霉素(Km)的敏感性。结果表明:五刀切与三刀切对不定芽分化数量的影响无显著性差异;MS 1.0 mg/L6-BA为叶片不定芽分化的最适培养基,不定芽分化率达100%,在1.0 cm×1.0 cm叶块上的不定芽分化数平均达25.4;25 mg/L Km为抑制叶片不定芽分化的最低浓度。     

洋桔梗组培苗玻璃化原因及恢复的研究

为了找出能够克服或降低洋桔梗组培苗玻璃化的最适培养条件,以YELLOW和PINK2个洋桔梗品种为试材,研究MS培养基中添加的激素、蔗糖、活性炭及温度对洋桔梗组培苗玻璃化的产生和恢复的影响.结果表明:品种、6-BA、NAA对洋桔梗玻璃化芽的产生均有影响,玻璃化率随6-BA及NAA浓度的增大而升高;适宜浓度的蔗糖对洋桔梗玻璃化芽的恢复有促进作用,但添加0.5 g·L~(-1)的活性炭及15 ℃的低温培养没有明显地促进作用.     

吉林省主栽亚麻品种组织培养再生植株

本试验主要选用吉林省主栽亚麻品种进行组织培养,均获得了再生植株。研究结果:吉亚4号无菌苗下胚轴上半部分不定芽诱导率为47%,下半部分不定芽诱导率达到90%;IAA对不定芽状态影响明显,1.0 mg/L为适宜浓度,与0.5 mg/L BA组合外植体玻璃化现象较轻,不定芽诱导率为100%,约2 cm高不定芽转到生根培养基,再生植株移栽成活率为80%。不同亚麻品种诱导不定芽能力差别不大,诱导率均可以达到90%以上,但是不同品种外植体培养过程中玻璃化程度有差异,玻璃化外植体诱导的不定芽呈玻璃化状态,不能正常生长。     

河北杨和新疆杨离体叶片诱导不定芽研究

对河北杨和新疆杨离体叶片诱导不定芽的方法进行了研究。结果表明,适合河北杨和新疆杨离体叶片不定芽诱导的最适培养基为:1/2M S+0.25 m g/L 6-BA+0.01 m g/L TDZ+0.25 m g/L IAA;在此培养基中,叶片分化率河北杨可达70%,新疆杨可达52%;平均分化芽数河北杨为6.84个,新疆杨为5.32个。6-BA单独使用对叶片不定芽诱导没有效果,NAA作用不明显。叶片刻伤方式对两种杨树叶片诱导不定芽影响显著,沿中脉横切效果优于去除叶边缘,诱导的不定芽数前者比后者约多3个。光照显著影响叶片不定芽产生的时间,不定芽在3~5 d暗培养后转至16 h/d光照下培养比全程16 h/d光培养发生早15 d左右;光照对分化率和平均分化芽数无显著影响。     

沙棘叶片不定芽再生的研究

以"实优1号"沙棘枝条水培芽叶片为试材,研究了叶片着生节位、同一叶片不同部位、不同浓度比值的6-BA与IAA对愈伤组织产生和不定芽再生的影响.结果表明,适宜水培叶片愈伤组织产生的外植体材料为水培茎尖上部与中部叶片的基部和中部,适宜诱导不定芽的外植体为下部叶片与中部叶片;同一叶片不同部位对不定芽再生率影响研究表明叶片中部为首选材料;可迅速高效的诱导不定芽发生的培养基为1/2MS 6-BA 0.7 mg/L IAA0.5 mg/L,平均每外植体分化不定芽数达到6.75个.     

桔梗叶片愈伤组织诱导分化研究

以桔梗叶片作为外植体,采用酒精和氯化汞组合消毒,研究不同消毒时间对消毒效果的影响,并比较不同浓度激素下愈伤组织诱导及分化的变化。结果表明,桔梗外植体最适合的消毒方案为:酒精消毒30 s后氯化汞消毒6 min;桔梗叶片愈伤组织诱导的最适培养基为:1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;桔梗叶片诱导分化的最适培养基为:1/2MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.2mg/L,此培养基培养,桔梗不定芽的诱导分化率能达到37%,且不定芽数量多,芽强壮。     

洋桔梗701品种组培快繁技术研究

以洋桔梗701品种腋芽为试验材料,MS为基本培养基,探讨不同植物生长调节剂对洋桔梗外植体诱导培养以及增殖和生根培养的影响。通过比较KT与BA两组实验对洋桔梗的增殖效果,得出增殖效果最好的配方为：MS＋6-BA0.2毫克/升＋NAA0.1毫克/升,增殖率可达到345%,植株长势好粗壮,叶片浓绿。但较高6-BA浓度,会使洋桔梗组培苗叶片出现玻璃化现象。通过比较NAA与NAA＋BA两组实验对洋桔梗的生根效果,得出生根效果最好的配方是MS＋NAA0.8毫克/升,其根数多,较健壮。     

皇家嘎拉苹果试管苗叶片再生不定芽的试验

以皇家嘎拉苹果试管苗叶片为试材,采用正交试验设计,研究了氮形态比例(NH4+∶NO3-)、6-BA浓度、NAA浓度对叶片再生不定芽的影响.结果表明:3因素对叶片再生不定芽影响的顺序依次为:氮形态比例(NH4+∶NO3-)>NAA浓度>BA浓度,其中氮形态比例对叶片再生不定芽的影响达到显著水平.3因素水平的最佳不定芽再生组合为:氮形态比例(NH4+∶NO3-)=2∶0,6-BA 2.0 mg/L,NAA 0.1 mg/L的MS培养基.在氮形态比例(NH4+∶NO3+)=2∶0的基础上,进行6-BA、NAA小梯度筛选,结果显示,皇家嘎拉苹果试管苗叶片再生不定芽较高再生频率的培养条件为:6-BA 2.0 mg/L,NAA 0.15 mg/L的改良MS培养基.     

西瓜组织培养的研究

为建立西瓜顶芽培养与子叶培养的实验流程,以西瓜子叶、顶芽为外植体,进行了不定芽的诱导、芽的伸长,生根以及再生植株的移栽与嫁接试验,结果表明,顶芽诱志不定芽的诱导率高于子叶,苗龄４－５ｄ,刚刚由黄色较浅绿色的子叶诱导不定芽的诱导率最高,苗龄８￣９ｄ的顶芽诱导产生的不定芽最多;用子叶诱慰定芽的适宜培养基为ＭＳ＝１．０ｍｇ／ＬＢＡ,用顶芽诱导不定芽的适宜培养基为ＭＳ＋３．０ｍｇ／ＬＢＡ＋０．２ｍｇ／ＬＩ     

农大5号钙果叶片芽诱导及其植株再生研究

采集定植于温室中苗木上的叶片和组培瓶中农大5号钙果分化苗、壮苗叶片,进行离体叶片再生芽诱导及其植株再生体系研究。结果表明,温室叶片诱导不定芽的最佳培养基为1/2MS+IAA 0.1 mg/L+NAA0.05 mg/L+6-BA 0.8 mg/L,培养基中全部元素减半;组培分化苗叶片和壮苗叶片诱导不定芽的最佳培养基为1/2MS+IAA 0.05 mg/L+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.8 mg/L,培养基中大量元素减半;辅助因子以培养基中添加AgNO_3 0.2 mg/L、全光照、叶片反放和带叶柄的叶基部等措施配合取得了最高的芽诱导率。     

不同类型细胞分裂素对扇蕨不定芽诱导和植株再生的影响

以扇蕨品种铁扇无菌苗的叶片为外植体,研究了不同类型细胞分裂素对不定芽诱导、增殖和成苗的影响。结果显示:在附加2.0 mg/L 6-苄基氨基嘌呤(BAP)、激动素(KT)、苯基脲类细胞分裂素(CPPU)的改良MS培养基上,叶片均诱导产生不定芽,不定芽的诱导率分别为25.0%、40.6%和35.7%。转到添加0.5 mg/L CPPU的培养基上继代增殖,不定芽生长正常,芽繁殖系数达5.0以上;转到附加0.5 mg/L BAP、KT的培养基上继代增殖,不定芽生长受阻,转而诱导产生绿色小球,绿色小球的诱导率达95%以上,绿色小球的繁殖系数为5.0左右。不定芽和绿色小球在附加吲哚丁酸(IBA)0.2 mg/L的培养基上,成苗率达100%,发育成具有根、茎、叶的完整小植株。     

辣椒叶片离体培养与植株再生

以辣椒无菌苗叶片为外植体，就激素对其不定芽分化及植株再生的影响进行了研究。结果表明，ＢＡ对叶片不定芽的诱导效果最好，ＺＴ次之，ＫＴ不能有效地诱导叶片形成不定芽；ＩＡＡ与ＢＡ相配合使叶片不定芽分化频率明显提高；ＩＢＡ或ＮＡＡ与ＢＡ的激素组合使叶片不定芽分化频率有所不降；２，４－Ｄ对叶片不定芽分化有明显的抑制作用。在分化培养基中添加１．０ｍｇ／ＬＧＡ３有利于不定芽的伸长。不定芽伸长后在不含激素的ＭＳ或ＭＳ＋ＭＡ培养基上诱导生根，形成完整植株。     

南方红豆杉离体胚培养诱导不定芽研究

以南方红豆杉Taxus chinensis var. mairei成熟胚为外植体,筛选出外植体灭菌途径,研究了基本培养基、生长调节剂等因子对其离体胚生长的影响。结果表明：最优灭菌处理为25.0 g·L^－1的次氯酸钠（NaClO）溶液真空灭菌10 min,其污染率仅为6%,出苗率可达86%;木本植物培养剂（WPM）为胚培养的最适基本培养基;细胞激动素（KT） 0.1 mg·L^－1和玉米素（ZT）1.0 mg·L^－1最有效于不定芽的诱导,不定芽为丛生芽;6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）和异戊烯基腺嘌呤（2iP）诱导不定芽较少;噻苯隆（TDZ）不能诱导不定芽;以萌动种胚为外植体对不定芽的诱导优于未萌动种胚。图3表7参11     

青岛百合高效离体快速繁殖体系的建立

以青岛百合及麝香百合的鳞片和茎尖为试验材料,研究了外植体的放置方式、鳞片的不同部位、不同的激素浓度及活性炭对百合再分化的影响,成功建立了青岛百合的高频再生体系。结果表明两种百合的最佳外植体部位为中层鳞片的基部,放置方式为凸面接触培养基,青岛百合的最适再生培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L,麝香百合的最佳再生培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,两种百合的最高再生率均达到100%。     

菊花2个品种高效再生体系的建立

以地被菊花2个品种‘铺地金’和‘北林红’的叶片为外植体,以MS为基本培养基,以不同浓度配比的6-BA,NAA为生长调节物质进行离体培养,直接分化出不定芽获得再生植株.试验表明:‘铺地金’叶片外植体再生的最适培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 1.0 mg/L,再生率高达96%,其叶柄在此培养基上的再生率为90%;‘北林红’再生的最适宜培养基为MS 6-BA 1 mg/L NAA 0.5 mg/L,再生率为96%,但其茎段和叶柄在此培养基上不能高效再生.‘铺地金’腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.01 mg/L,每腋芽外植体平均增殖不定芽数达到5.5个.‘北林红’腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.05mg/L和MS 6-BA 0.5mg/L NAA 0.01mg/L,腋芽外植体平均增殖不定芽数达到6.3个和5.6个,二者之间的差异不显著.     

车前不定芽直接诱导及再生体系的建立

[目的]建立车前高效离体植株再生体系,为车前快速扩繁奠定基础。[方法]以车前无菌苗的下胚轴和子叶为外植体,以MS为基本培养基,研究了6-BA、NAA不同配比的培养基对车前下胚轴和子叶不定芽诱导的影响。[结果]MS培养基添加6-BA2 mg/L,5～7d的下胚轴不经过愈伤组织诱导阶段便可直接形成不定芽,不定芽诱导率为80%,每个外植体可产生7～8个不定芽。培养基中添加NAA促进不定根的分化,但影响不定芽的诱导。6-BA与NAA配合使用时,外植体易分化愈伤组织。在添加NAA的MS培养基上,再生苗诱导生根频率为100%。将再生植株移栽于盆土中,可获得100%存活率,且生长良好。[结论]6-BA促进车前下胚轴直接分化不定芽,而NAA则影响不定芽的诱导,在不定芽诱导培养基中应避免添加NAA。