应用PCR方法鉴别绵羊致病性单核细胞增多症李氏杆菌

动物李氏杆菌病病原主要有两种,分别是单核增多症李氏杆菌和伊氏李氏杆菌(仅引起动物发病),前者是主要的,它是一种危害严重的人畜共患病病原体。人畜感染后主要表现脑膜炎、败血症、流产及单核细胞增多。近几年来,新疆先后有5个地区的3个牧区、4个农区养羊场爆发以神经症状为主要特征的李氏杆菌病,造成1 300余只羔羊死亡,经从绵羊实质器官和饲草中分离培养和形态学观察,初步确定为7株李氏杆菌,分别命名为90SB1、90SB2、90SB5、90SS1、125SL1、G1和饲草李。结合溶血试验、动物试验,再进行PCR特异性扩增,确定前5株为单核细胞增多症李氏…     

新疆绵羊致病株李氏杆菌鉴别试验

李氏杆菌病是由单核细胞增多症李氏杆菌(LM)引起人与动物的一种共患传染病,其中以绵羊的敏感性最强。近几年,本病对新疆养羊业造成严重危害。本研究采用生化反应,溶血试验,致病力试验,对分离的新疆5株绵羊致病株李氏杆菌90SB_1,90SB_2,90SB_5,90SS_1,125SL 进行了种的鉴别测定,试验结果,五株绵羊致病株(野毒株),在生化反应,培养特性,溶血性,致病性等方面表现高度的一致性,属于同一种 LM。     

新疆绵羊致病株李斯特杆菌分离与鉴定

本研究采用生化反应，溶血试验，致病力试验，PCR方法对分离的新疆5株绵羊致病株李斯特杆菌90SB1，90SB2，90SB5，90SS1，125SL进行了种型的鉴别测定，并用RAPD技术对这5株李斯特杆菌及标准株李斯特杆菌进行分型。试验结果，五株绵羊致病株（野毒株），在生化反应，培养特性，溶血性，致病性及溶血素基因特异性等方面表现高度的一致性，属于同一种LM。RAPD实验表明此5株LM指纹图谱相同，属于同一个型。此5株致病性LM与标准LM对照株（从食品中分离到）指纹图谱差异显著，属于不同型。     

不同来源单核细胞增多性李氏杆菌inlB和actA基因的克隆测序分析及基因缺失株的毒力试验

根据GeneBank上发表的单核细胞增多性李氏杆菌(Listeria monocytogenes,LM)的内化素B(internalin B,inlB)和肌动蛋白A(actin A,actA)基因设计特异性引物,对5株不同来源的健康绵羊单核细胞增多性李氏杆菌和一株临床分离的单核细胞增多性李氏杆菌的inlB及actA基因进行PCR扩增,克隆测序分析其序列,并对2株部分基因缺失的单增李氏杆菌进行小鼠攻毒试验。结果表明:5株健康绵羊分离株单增李氏杆菌与临床分离株有较高的同源性,并且发现2株部分基因缺失的单增李氏杆菌;小鼠攻毒试验表明缺失株毒力有降低,但是不明显。     

绵羊李氏杆菌病的诊治

绵羊李氏杆菌病的诊治庄淑珍赵卫东王永生哈提拉（新疆伊犁州畜牧科学研究所，伊宁８３５０００）１９９７年１月中旬，伊犁地区某种羊场的绵羊发病、死亡。根据临床症状、病理解剖、化验室检查，确诊为绵羊李氏杆菌病，现报告如下。１临床症状发病羊离群、消瘦、低头行走...     

新疆绵羊及其环境中李氏杆菌的生态分布多样性调查

对新疆健康绵羊及其相关环境如青贮饲料、饮水、土壤、鸟粪中李氏杆菌(Listeria)种群采用改良国标法(4789.30-2010)进行生态分布多样性调查,并对分离的单核细胞增多性李氏杆菌(L.monocytogenes)采用PCR方法进行溶血素基因(hly)和血清型检测。结果:514份样本中,共检出阳性样本26份,平均阳性率为5.1%,其中羊体分离率为6.2%(22/353),饮水分离率为33%(2/6),鸟粪分离率为3.0%(2/67),其余样本均为阴性;26份阳性样品中,检出单核细胞增多性李氏杆菌5株,塞氏李氏杆菌(L.seeligeries)21株,且5株单核细胞增多性李氏杆菌均检出溶血素基因,血清型为1/2a。     

新疆不同来源单核细胞增生性李斯特氏菌分离株的部分生物学特性及相关性分析

为研究8株来自新疆发病绵羊和健康绵羊的单核细胞增生性李斯特氏菌(LM)分离株的部分生物学特性及相关性,本实验对8株LM分离株进行小鼠致病力检测、多重PCR谱系鉴定、血清型鉴定及InlA基因的PCR-RFLP分析。结果显示,健康绵羊与临床发病绵羊中分离的LM分离株对小鼠具有相同的致病性;除1株临床分离株为血清型4b和谱系Ⅰ外,其余7株均为血清型1/2a和谱系Ⅱ;5株健康绵羊分离株的毒力基因InlA的PCR-RFLP复合基因型均为E型,而3株临床发病绵羊中的分离株为C型或B型。两种不同来源LM在小鼠致病性血清型及谱系上具有一致性及相关性,但其毒力基因InlA存在多样性。初步揭示健康绵羊携带的LM可以经内源性感染而发生李氏杆菌病,表明内源性感染是造成绵羊李氏杆菌病流行的一种传染方式。     

羊李氏杆菌病的诊断与治疗

李氏杆菌病是由单核细胞增生李斯特菌(俗称李氏杆菌)引起的一种散发性人畜共患传染病,绵羊和山羊均易感。近年来李氏杆菌病对羊养殖业造成了一定损失,给养殖户带来了很大困扰,防治李氏杆菌病对养羊业具有重要意义。     

猪李氏杆菌病的诊治

猪李氏杆菌病是由产单核细胞李氏杆菌引起的一种散发性传染病。李氏杆菌不仅可引起猪的李氏杆菌病，而且可引起绵羊、家兔、牛、鸡、鹅等的李氏杆菌病。许多野兽、野禽、啮齿动物(特别是鼠类)也易感染，且常为本菌的贮存宿主。本病在以饭店废弃的剩羹冷饭和洗碗泔水为饲料的小型猪场尤为常见。2002年冬季，本中心共接诊了4例猪李氏杆菌病，报道1例如下。     

羊李氏杆菌病的诊疗

李氏杆菌病又名转圈病,是由产单核细胞李氏杆菌引起的一种急性或慢性传染病。本病可分为子宫炎型、败血型和脑炎型。在家畜中,绵羊的李氏杆菌病最为常见,并几乎全为脑炎型,各种年龄和性别的绵羊都可患病;败血型间或发生于10日龄以下的羔羊;子宫炎型多发生于怀孕最后2个月的头胎绵羊。山羊的病型与绵羊的相同。     

一起山羊李氏杆菌病的诊治

羊李氏杆菌病是由李氏杆菌引起的脑膜脑炎、败血症和母畜流产为主要特征的传染病。李氏杆菌作为致病菌和腐生植物致病菌广泛存在于环境中。目前己证实可感染40多种动物。在牛、绵羊、山羊、猪李氏杆菌最频繁的引起脑膜脑炎、     

绵羊李氏杆菌病病理学观察

李氏杆菌病是由单核细胞增多性李氏杆菌所引起的人、畜共患散发性传染病，广泛分布于全世界。近年来。新疆多个农牧垦区在每年4～5月或10～11月间饲喂青贮饲料较多的绵羊中发现有头顶墙或转圈，头颈表现一侧性麻痹等神经症状的病羊。为此，我们在病理学、细菌学、流行病学等方面进行了观察研究，确诊为绵羊单核细胞增多症性李氏杆菌病。该病在国内已有公开报道。但对病理组织学观察报道甚少，为了对该病在诊断及预防中提供更全面的理论依据，现将结果报道如下。     

绵羊单核细胞增多性李氏杆菌带菌情况的调查研究

对伊犁部分地区健康绵羊的鼻拭子、肛拭子、青贮、土壤进行检测,共检测280个样本,经培养特性、生化特性鉴定,并针对单核细胞增多性李氏杆菌高度保守的hly基因设计的特异性引物进行PCR扩增,同时对扩增产物进行分析,结果有5株分离株为单核细胞增多性李氏杆菌,分布率达1.78%。ERIC-PCR结果表明,此5株单核细胞增多性李氏杆菌与标准单核细胞增多性李氏杆菌对照株指纹图谱有差异,属于不同基因型。     

单核细胞增多性李氏杆菌人工感染绵羊试验

将人从病羊脑分离纯化的单核细胞增多性李氏杆菌经列脉接种于健康得奴绵羊３只,结果被感染绵羊均表现出与自然感染绵羊相同的临床症状和病理变化,并从脑、心血、淋巴结中回收到了单核细胞增钨生李氏杆菌,从而证明了该分离株单核细胞增多性李氏杆菌具有较强的致病性。     

伊犁地区绵羊李氏杆菌病PCR诊断方法的建立

对伊犁部分地区绵羊血液、鼻拭、肛拭、青贮、水源进行检测,共抽检样本280个,经对样本中的细菌分离、纯化,并针对李氏杆菌高度保守的Hly基因设计特异性引物进行PCR扩增,对扩增产物进行分析。结果表明:有5株分离株含有约743 bp大小的李氏杆菌所特有的扩增片段,诊断为李氏杆菌。     

猪李氏杆菌的分离鉴定

猪李氏杆菌病是一种重要的人畜共患传染病,主要由单核细胞增多性李氏杆菌引起。白1926年首次分离到本病原后,现已呈世界性分布,作为致病菌和腐生植物致病菌而广泛存在于环境中。目前已证实可感染40多种动物。在牛、绵羊、猪,李氏杆菌最频繁的引起脑膜脑炎、流产和急性败血病,家禽感染可导致败血症和心肌坏死,实验动物如兔子、小鼠等啮齿类也是主要的易感动物。近年来国内有关动物李氏杆菌病例的报道波及全国十多个省市,涉及动物有绵羊、     

绵羊李氏杆菌病的诊断与治疗

2013年6月内蒙古宁城县三座店乡某养殖户饲养的绵羊出现疫情,经一系列综合诊断后,确诊为绵羊李氏杆菌病,使用头孢噻呋钠及硫酸链霉素对发病羊进行治疗,除1只卧地不起者死亡以外,其余全部治愈。主要对该起病例的诊治经过作一介绍,以期为临床有效诊治绵羊李氏杆菌病提供参考。     

绵羊的李氏杆菌病

引言绵羊的单核细胞增生性李氏杆菌(Listevia monocytogenes)感染伴有脑炎、流产和败血症。近几年来,尽管脑炎和流产很少同时发生,但其发生率却有所增加。由李氏杆菌引起的流产最常见于12～4月,而脑炎的发生率也表现明显的季节性,大多数病例发生于1～5月。发病率增加和本病呈季节性发生同用青贮料作为绵羊的饲料有关,虽然不是所有李氏杆菌病都同饲喂青贮料有关。     

绵羊李氏杆菌病的诊断

李氏杆菌病是由单核细胞李氏杆菌引起的,以绵羊、山羊及牛的发病率高,主要临床症状以神经症状为主.某绵羊养殖户自2004年2月开始至7月间,相继有6头绵羊发病死亡,其生前症状相同,第6头绵羊死后送我校检查,经实验室检查,结合流行病学调查、临床症状和剖检变化等,确诊为李氏杆菌病,现将诊断情况报告如下.     

单增李斯特菌llsB基因克隆及序列分析

试验旨在对新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2单增李斯特菌llsB基因进行克隆及生物信息学分析,以期进一步完善单增李斯特菌溶血素S的功能研究。根据GenBank中单增李斯特菌F2365基因全长序列(登录号为:AE017262)设计其特异性引物,利用PCR方法对新疆分离株LM90SB2的llsB基因进行扩增,回收目的基因与pMD19-T载体连接,采用PCR、双酶切鉴定筛选阳性菌并进行测序,对所获序列进行同源性比对及遗传变异分析。结果显示,新疆分离株LM90SB2的llsB基因序列全长为876 bp,共编码291个氨基酸;LM90SB2分离株llsB基因核苷酸序列与10-0809、81-0592、81-0558、02-1792、NTSN、02-1289不同分离株同源性均为100%,与CIIMS-PH-1、NRRLB-57603株的同源性均为99.9%,与J1816、R2-502株的同源性为44.7%～45.0%。分子进化树显示,LM90SB2菌株llsB基因与血清型为4b的菌株亲缘关系较近,聚类为同一分支。蛋白质二级结构预测表明,LM90SB2 llsB蛋白为亲水性蛋白,无信号肽,不形成跨膜结构。本试验成功克隆了LM90SB2株llsB基因,为深入探讨该基因功能提供全面的理论依据。