副猪嗜血杆菌多价平板凝集抗原的研制

为了建立副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)平板凝集抗体检测方法,试验采用方阵试验方法对15种HPS菌体抗原和阳性血清的交叉凝集反应性进行了研究,从中筛选出能与所有血清型HPS血清发生凝集反应的多价抗原,并测定其特异性。结果表明:各血清型HPS抗原抗体之间均存在不同程度的交叉凝集反应,但没有任何一种血清型的HPS能与全部15种血清型抗体发生凝集反应,由各血清型的交叉凝集谱可见,血清1型、6型、7型等三个血清型抗原能覆盖全部15个血清型抗体,据此选择这三个菌株作为多价抗原生产菌株。将其接种于含NAD的TSA平板上,于37℃培养18 h,用pH值为7.2的PBS洗下菌苔并将菌液浓度分别调整至8×10~9cfu/m L,三种菌液用甲醛灭活后等体积混合即为HPS平板凝集多价凝集原,其能与15个血清型HPS抗体发生75%及以上的凝集反应,能凝集HPS的感染抗体和免疫抗体,不与猪传染性胸膜肺炎等被检的无关疫病的阳性血清发生反应。说明试验制备的多价平板凝集抗原能用于HPS抗体的检测和血清流行病学调查。     

新疆规模化屠宰场猪肺炎支原体感染的检测分析

为了解新疆猪支原体肺炎的流行及其与其他病原混合感染的情况,对新疆5个规模化屠宰场进行了调查,采用28分评分法对913份肺脏进行猪支原体肺炎病变评分,选取其中高于10分的病变肺脏进行猪肺炎支原体(Mhp)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和胸膜肺炎放线杆菌(APP)的检测。结果:913份肺脏中,猪肺炎支原体阳性730份,阳性率为80%(730/913);评分高于10分的肺脏77份,其中Mhp与PRRSV、PCV2或APP的混合感染率为57.1%。检测结果表明新疆地区猪肺炎支原体感染率较高,且存在多种病原的混合感染。     

平顶山地区猪传染性胸膜肺炎的血清学调查

经多年观察 ,认为猪传染性胸膜肺炎对平顶山地区养猪业的影响 ,已由过去的以种猪隐性感染为主发展为应激性急性发病 ,且有群发的趋向。为了进一步掌握该病在该地区集约化猪场的发生情况 ,我们进行了此项血清学调查工作。1　材料与方法1.1　材料猪传染性胸膜肺炎间接血凝诊断抗原及阴性、阳性血清由中国农业科学院兰州兽医研究所提供 ;间接血凝稀释液用0 .15mol/LPBS(pH为 7.2 )加 10mL灭能兔血清 ;待检血清采自平顶山地区叶县等 5个集约化猪场的三元杂交商品猪、仔猪、生长肥育猪和种猪 ,共 4 2 2份 ,试验前灭能。1.2　方法将待检血清作…     

猪气喘病免疫学的研究 琼脂-凝胶扩散试验诊断

在过去实验研究的基础上,1982年应用自制的猪肺炎霉形体浓缩提纯抗原及自制家兔抗猪肺炎霉形体血清,在两个县的四个猪场采用免疫双扩散技术与X射线透视及对流免疫电泳技术作对比,对各种类型的猪进行猪气喘病的诊断试验,共检出阳性反应猪146头,占被检总数206头的70.87％,其中X射线透视阳性猪占阳性猪数的55.5％;免疫双扩散检出阳性猪占89.7％;对流电泳检出阳性猪占78.8％;对8头不同类型阳性反应猪进行了剖检及微生物学检查,均为阳性。试验结果琼扩的检出率最高,对流电泳次之,X射线透视检出率最低。由于琼脂-凝胶免疫双扩散技术操作简便、反应准确、检出率较高,适于猪气喘病的诊断及检疫。     

猪肺炎支原体PCR快速检测方法的建立和应用

根据猪肺炎支原体P36基因序列,设计1对引物,建立了猪肺炎支原体PCR诊断方法,该方法对猪肺炎支原体的扩增结果为阳性,对照菌株扩增结果均为阴性,对猪肺炎支原体检测的灵敏性为1 pg总DNA量。并用建立的PCR诊断方法检测52份猪肺炎支原体疑似病料,检出阳性病例18份,以上结果表明该PCR方法特异性强敏感性高、简便、快速,可用于猪肺炎支原体疾病的诊断。     

无需全群淘汰从肥育猪群中根除猪肺炎支原体

利用疫苗和药物,不需要将猪群全部淘汰将猪肺炎支原体从肥育猪群中根除。对3 243头来自猪肺炎支原体阴性猪群的保育猪在被转入猪肺炎支原体阳性肥育猪群前一次性注射灭活疫苗。在第1群已免疫的猪肺炎支原体阴性猪群被转入猪肺炎支原体阳性猪群时,对阳性猪群使用抗生素类药物。所有猪群按猪舍采用全进全出方法进行管理,猪舍内通风和清粪采用单独的处理系统。之后猪场只从猪肺炎支原体阴性母猪群所生产且没做疫苗免疫的仔猪群引猪。血清学调查结果显示,5年半无猪肺炎支原体抗体阳性。结论:这项无需使用全部淘汰方法建立无猪肺炎支原体猪群的根除计划已经获得成功。     

猪萎缩性鼻炎凝集反应抗原的制备及应用

为快速地诊断猪萎缩性鼻炎及监测其免疫状况,本试验在对支气管败血波氏杆菌保存菌种进行复苏和全面鉴定的基础上,制备了猪萎缩性鼻炎凝集反应抗原,经凝集反应试验表明,该抗原在PBS中不发生自凝,与猪传染性胸膜肺炎、猪喘气病和猪瘟的阳性血清均无凝集反应,而对猪萎缩性鼻炎标准阳性血清的凝集效价高达1∶10 240以上,具有较高的特异性和敏感性;对20份免疫母猪所产仔猪血清样本进行检测,检出率为95%.     

乳胶凝集试验诊断猪囊虫病

采用新鲜痘猪囊内液体，离心，取上清作为抗原原液，加乳胶颗粒，经处理，制成致敏原。分别同患猪血清和脑脊液标本，应用乳胶玻片凝集反应和补体结合试验，检查赤峰地区部分养猪场、肉类联合加工企业采取的371份患猪血清和138份脑脊液，诊断猪囊虫病。以待检血清出现“ ”以上凝集者，对照不凝集判为阳性。通过试验，两者的符合率为86.9%（血清），94.7%（脑脊液）。     

检测猪细小病毒血清抗体乳胶凝集试验方法的建立及初步应用

将猪细小病毒在IBRS-2细胞上同步培养增殖,待出现细胞病变后,反复冻融,收获病毒液,用甲醛灭活。随后用经硫酸胺沉淀、透析后浓缩的细小病毒液进行方阵滴定,选择致敏乳胶的最佳条件,制成细小病毒乳胶凝集试验（LAT）抗原。抗原与细小病毒阳性血清反应出现肉眼可见的凝集颗粒,而与生理盐水、PBS、犊牛血清、猪瘟、衣原体、口蹄疫、伪狂犬病、弓形体及萎缩性鼻炎等阳性血清不出现凝集现象。用所建立的细小病毒乳胶凝集试验（LAT）与血凝抑制试验检测了203份猪血清,其中血凝抑制抗体阳性为161份,阴性为42份,阳性率为79.31％;乳胶凝集抗体阳性为150份,阴性为53份,阳性率为73.89％,两种方法阳性符合率为93.16％,经统计学检验P＞0.05,两者差异不显著。结果表明,乳胶凝集试验可以作为临床上大量血样进行血凝抑制试验前的初筛,具有简便、准确的优点,在检测细小病毒（PPV）抗体上具有较好的应用前景。     

两种灭活方法制备的猪肺炎支原体灭活疫苗的免疫效果比较

为对比使用甲醛、二乙烯亚胺（BEI）两种灭活方法制备的猪肺炎支原体灭活疫苗对猪的呼吸道发病率、肺部病变记分、饲料转化率、日增重、以及猪血清抗体水平等指标的影响,将120头健康仔猪随机分成三个试验组和一个对照组,于7、21日龄对试验组的仔猪进行疫苗接种,所有猪于20、50、80及140日龄采血分离血清,检测血清中猪肺炎支原体抗体水平。结果显示,用BEI灭活的疫苗在呼吸道发病率、肺部病变记分、饲料转化率、日增重、以及猪血清抗体水平等各项指标均好于甲醛灭活的疫苗（P<0.05）,与进口疫苗无显著差异。试验表明,使用BEI灭活方法制备的猪肺炎支原体灭活疫苗的免疫效果好。     

猪肺炎支原体PCR检测方法的建立与应用

根据猪肺炎支原体(Mhp)的P36基因的核苷酸序列,设计一对引物,建立一种猪肺炎支原体PCR检测方法,此方法对对照菌株显示为阴性,对猪肺炎支原体的扩增结果显示为阳性,并对此方法进行了特异性和敏感性试验,结果成功建立了猪肺炎支原体特异且敏感的PCR检测方法。采用已经建立的PCR方法对18份疑似猪支原体肺炎(MPS)样品进行检测,发现有9份呈现阳性,占比50%。试验结果表明,建立的该PCR检测方法可用于猪支原体的临床诊断,能为其以后的防控提供有力依据。     

湖北西南地区猪传染性胸膜肺炎的血清学调查

采用猪传染性胸膜肺炎间接血凝试验(IHA)对恩施州34家具有一定规模猪场的731份血清样品进行血清学调查,结果阳性率高达28.18%.其中被检仔猪血清206份,阳性42份,阳性率为20.39%;被检育肥猪血清237份,阳性67份,阳性率为28.27%;被检种猪血清288份,阳性97份,阳性率为33.68%.     

怎样防制猪支原体肺炎

猪支原体肺炎(MP)俗称猪喘气病,是由猪肺炎支原体引起的一种慢性接触性呼吸道传染病。患病猪主要表现为咳嗽和气喘,生长迟缓,饲料转化率低,体温基本正常。剖检时以肺部病变为主,尤以两肺心叶、尖叶和膈叶出现对称性胰样变和肉样变为特征。发病率高,死亡率低。猪肺炎支原体常与多杀性巴氏杆菌、猪链球菌、副猪嗜血杆菌或猪胸膜肺炎放线杆菌等病菌混合感染引起地方性肺炎,也常与猪蓝耳病病毒、猪圆环病毒2型、猪流感病毒或     

猪支原体肺炎的研究进展

猪支原体肺炎(MPS)又称猪气喘病,是由猪肺炎支原体(Mhp)引起猪的一种接触性呼吸系统传染病,在我国广泛存在,是造成养猪业经济损失最重要的疾病之一.本病由飞沫经呼吸道吸入而感染,一般为慢性经过.病的特征以咳嗽和气喘为主要临床表现,而体温和食欲无明显改变.病变部位主要在肺部,生前X射线和死后解剖检查,均可见心叶、中间叶和尖叶有融合性支气管肺炎变化.     

猪传染性萎缩性鼻炎微量凝集反应诊断抗原的制备

试验制备了猪支气管败血波氏杆菌微量凝集反应用诊断抗原，对延边州内某猪场的64份血清进行了猪传染性萎缩性鼻炎的微量凝集反应。栓出阳性血清26份(40．63％)。应用甲醛灭活的免疫原免疫家兔，制备了抗支气管败血波氏杆菌阳性血清．其抗体效价可达1：l280。     

乳胶凝集法诊断猪钩端螺旋体的研究

自赤峰不同地区中,小型养猪场,个体养猪户采集２０４头份育肥猪血清,１１０头份健康猪血清,用乳胶凝集试验诊断猪钩端螺旋体病,将生长良好的黄疸出血型钩端螺旋体培养物经离心,酸沉淀或过滤浓缩１００,经适当处理,制成致敏原,分别同待检血清,正常血清,生理盐水进行反应,以待检血清出现“”以上凝集,对照不凝集判为阳性,通过试验,凝集的阳性复合率为８３．９％￣９７．９％。     

猪肺炎支原体 MY-99株的致病性

将猪肺炎支原体MY-99株人工培养F100株经鼻腔接种于健康成华×大约克杂交猪,2周后60%的猪出现气喘,个别猪伴有轻微咳嗽;病理切片可见到支气管周围多量淋巴样细胞浸润、肺泡壁增厚等典型的间质性肺炎病变.试验猪平均日增重比对照猪显著降低,接种后0～14 d期间降低了31.05%(P<0.01),15～28 d期间降低了42.01%(P<0.01),29～42 d期间降低了0.1%(P>0.05).试验猪血清中的猪肺炎支原体抗体水平在2周后最高(1∶24.2),4周后降至1∶23.9,6周后最低(1∶22.5),显示猪肺炎支原体MY-99株诱发了急性猪地方流行性肺炎,同时从试验猪肺脏中分离出了猪肺炎支原体.超微切片显示,其菌体大小为0.33～0.48 μm,并缺乏细胞壁;革兰氏染色为阴性类球形菌体,在压力下可以通过0.45 μm的细菌滤膜,菌落呈现煎蛋状.     

刚察地区猪传染性胸膜肺炎血清学调查

猪传染性胸膜肺炎,亦称为猪溶血性嗜血杆菌病,是猪的一种呼吸道传染病,在临床和剖检上出现肺炎和胸膜炎的特征症状和病变。为了摸清刚察地区猪传染性胸膜肺炎的感染情况,2006年我们对刚察地区的118头猪进行了抽检,结果发现阳性病例,现将试验结果报告如下:1材料和方法1.1抗原、标准阴、阳性血清,均由青海省畜牧兽医总站提供。1.2被检血清:为刚察地区的青海湖农场、三角城羊场、黄渔农场、县种畜场及各乡农牧户饲养的猪,抽样采集被检血清118份。1.3稀释液配制:即巴比妥缓冲液(VBD),首先按次序加入各试剂配制巴比妥储藏液(pH7.2-7.3)和明胶水…     

一种猪肺炎支原体阳性血清的制备方法

本试验采用猪肺炎支原体抗原和灭活疫苗,多次免疫大兔来制备猪肺炎支原体阳性血清.本试验结果为鉴定和检测猪肺炎支原体提供了方法,程序简单,操作方便,大大降低了同源动物其他外源病毒的污染风险.该阳性血清的成功制备,为猪肺炎支原体疫苗的研究提供了基础保障.     

猪支原体肺炎的防治

1病原 猪支原体肺炎又称猪地方流行性肺炎,俗称喘气病,是由猪肺炎支原体引起的一种慢性、接触性呼吸道传染病。该病的主要症状是咳嗽和气喘,剖检可见病变的典型特征为心叶、尖叶的对称性实变。该病在世界各地分布很广。