利福昔明在人工胃/肠液和大鼠肠道菌群及组织样品中的稳定性初步分析

为初步分析利福昔明(Rifaximin)在人工胃/肠液和肠道菌群及动物组织样品中的稳定性,将利福昔明分别与空白人工胃液(pH=1.3,不含酶)、空白人工肠液(pH=6.8,不含酶)、人工胃液(pH=1.3,含胃蛋白酶)、人工肠液(pH=6.8,含胰蛋白酶)、SD大鼠(雄性)肠道菌群及不同组织样品的匀浆液等共孵育不同时间后,采用高效液相色谱法(HPLC)检测剩余利福昔明百分比的变化。结果表明:1)在空白人工胃液中,随孵育时间的增加,剩余利福昔明百分比虽有下降,但仍在90%以上;在人工胃液中孵育6 h,其剩余百分比为84.03%;而在空白人工肠液和人工肠液中孵育6 h后,其剩余百分比则分别降至81.14%和78.12%。2)利福昔明在SD大鼠肠道菌群中孵育12 h后,虽发生部分降解,但剩余百分比仍在90%以上,总体呈稳定的趋势。3)利福昔明在空白SD大鼠的胃、肝、小肠和大肠及内容物的匀浆液中分别孵育6 h后,其剩余百分比分别为92.09%、75.95%、78.24%和83.90%。综上,利福昔明在酸性条件下较稳定,而在碱性条件下,胰蛋白酶、胃蛋白酶和肠壁、肝脏代谢酶等对其稳定性的影响亦较为有限。本研究将为兽用利福昔明口服制剂的开发提供数据支持。     

草本植物效素在模拟人工胃液中的解酒试验研究

通过模拟人工胃液和肠液的环境,采用单因素和正交试验探讨草本植物效素对酒精分子的掩饰现象。在55ml人工胃液,30ml草本植物效素,250ml酒精度50%白酒,40min条件下酒精度可达1.7%。通过SAS软件,精度可达0.2%。在上述条件下添加人工肠液150ml,未测出其酒精度,SAS软件预测结果为0.0017%。因此,草本植物效素具有解酒功效。     

大豆凝集素在模拟猪胃肠环境中的稳定性研究

为研究大豆凝集素在体外模拟猪胃肠环境中的稳定性,将纯品大豆凝集素设为1,2,3,4,5 mg/mL 5个浓度梯度,分别与等体积的模拟胃液或模拟肠液混合(37℃),按时间梯度15,30,60 s和2,4,8,15,30,60 min准确记时并终止反应,采用SDS-PAGE凝胶电泳和间接抑制ELISA方法定量检测反应体系中剩余的大豆凝集素.结果表明:大豆凝集素在胃蛋白酶反应体系中的剩余量随底物浓度和反应时间的不同都呈显著性变化(P<0.05).胃蛋白酶降解大豆凝集素主要发生在反应的初始阶段,随着反应时间的延长降解速率逐渐变慢,但反应一直在进行;随着大豆凝集素浓度的增加,降解速率增大,但彻底降解所需的时间延长,底物浓度从1 mg/mL增加到5 ng/mL,完全降解的时间为9.5～23 min.胰蛋白酶对完整的大豆凝集素不产生降解作用.大豆凝集素在猪消化道内有一定程度的降解,但与大豆凝集素的浓度和通过胃的时间密切相关.     

养殖密度对墨吉明对虾肠道和生物絮团菌群的影响

运用Miseq高通量测序技术,分析高、中、低3种养殖密度(700、300、100尾/m3)下墨吉明对虾肠道和其养殖系统中生物絮团的菌群结构。结果显示：对虾肠道菌群中,高密度组的丰富度和多样性均最高,丰富度随放养密度的增大而增加,而在生物絮团菌群中,高密度组的丰富度最低;在门水平上,肠道和絮团样本菌群均以变形菌门(相对丰度49.25%~80.33%)、放线菌门、拟杆菌门、绿弯菌门为主,但丰度差异较大;在属水平上,优势菌属的组成和所占比例明显不同,梭菌属、Spongiibacter、Faecalibacterium、Rhodovulum、Blautia仅在肠道样本中存在,Coccinimonas仅在絮团样本中存在;肠道样本中,中密度组弧菌属的相对丰度最小,为5.23%,高密度组弧菌属的相对丰度最大,为23.39%,絮团样本中,低密度组弧菌属的相对丰度最大,为16.15%,中、高密度弧菌属的相对丰度均较小,分别为5.51%和4.20%;随养殖密度增大,肠道样本中拟杆菌属的相对丰度减小,分别为1.36%、0.41%、0.02%,而不同密度絮团样本拟杆菌属的相对丰度差异不明显。可见,生物絮团养殖模式下,养殖密度对墨吉明对虾的肠道和絮团菌群的影响较大。     

亚成体胡兀鹫肠道菌群分离及生物特性分析

为探究胡兀鹫肠道菌群多样性,本研究利用5种培养基进行胡兀鹫肠道菌分离、培养、鉴定、耐药性试验及抑菌测定。结果表明：共分离到27株肠道菌,隶属于2门8属12种;这些菌株对3～22种抗生素及抗菌药物具有耐药性;屎肠球菌对5种常见肠道致病菌具有一定的抑制作用,粪肠球菌仅对大肠杆菌有抑制效果。     

三颗针提取物对仔猪生长及肠道菌群和挥发性脂肪酸的影响

【目的】探讨饲料中添加中草药三棵针提取物对断奶仔猪生长发育的影响。【方法】将64头三元杂交断奶仔猪(杜×长×大)随机分为2组,每组4个重复,每重复8头猪,分别饲喂含100 mg/kg土霉素和500 mg/kg三颗针提取物的饲粮,研究三颗针提取物对仔猪生长、肠道pH、肠道菌群和肠道挥发性脂肪酸的作用效果。【结果】与添加土霉素相比,三颗针提取物能显著提高仔猪日增重(P<0.05)、降低仔猪料重比(P<0.05)和腹泻率(P<0.05),显著增加空肠、回肠和结肠中的乳酸杆菌数量(P<0.05),降低空肠、回肠、盲肠中的大肠杆菌和回肠中的总需氧菌数量(P<0.05),显著增加仔猪空肠乙酸和总挥发性脂肪酸的含量,显著增加结肠乙酸、丙酸、丁酸、戊酸及总挥发性脂肪酸的含量(P<0.05),具有降低仔猪不同肠段pH的趋势(P>0.05)。【结论】断奶仔猪日粮中添加三颗针提取物,可以达到甚至超过添加土霉素的促生长效果,能够抑制肠道有害菌的生长,促进有益菌生长并提高仔猪肠道总挥发性脂肪酸的含量,改善仔猪肠道内环境。     

改善水体和生物肠道菌群结构的菌剂及其在罗非鱼养殖中的应用

以蛭弧菌、光合细菌、乳酸链球菌、保加利亚乳杆菌、水产生物肠道有益菌作为1种微生物制剂,以泼洒的方式应用于罗非鱼养殖水体中,探究其对水产养殖环境、养殖生物肠道菌群结构、罗非鱼生长的影响。结果表明:与对照相比,革兰氏阴性、阳性菌群以及本土革兰氏阴性、阳性菌群数量均明显减少;与对照相比,试验组保加利亚乳杆菌、乳酸链球菌、光合细菌、有益菌数量均增加,本土微生物留下的生态灶由有益菌填补,维持了菌群平衡。该微生物制剂具有改善水体和生物肠道菌群结构以及促进养殖动物生长的作用。     

基质效应在生物样品质谱分析中的优化措施研究

高效液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)由于其高灵敏度和高选择性现阶段被广泛应用于食品检测、环境评估等方面的样品定量分析。然而,由于实际样品特别是复杂样品分析中基质效应的存在,样品分析进程以及检测结果的特异性、灵敏度和准确度都会受到影响。本文立足于实际的生物样品质谱分析,阐述了基质效应的产生原因、检测及评定方法,其优化措施包括四个方面,即样品前处理的优化、色谱条件的优化、质谱条件的优化以及同位素内标的选择。     

加压液体萃取技术在生物样品分析中的应用

改进生物样品的前处理技术,可以提高分析速度,改善分析效果,使被分析物快速、有效的检出.加压液体萃取技术(PLE)是采用高温高压进行样品分离的前处理技术,具有省时省溶剂、自动化的优点.本文就PLE在生物样品分析中的应用进行了评述.包括与其他萃取技术的比较、去除脂肪的方法和应用实例.     

转植酸酶基因玉米中植酸酶蛋白在模拟消化液中的稳定性研究

植酸酶作为应用最为广泛的重要饲料酶制剂之一,明确其在动物消化道环境中的稳定性对于其应用及作用方式的研究具有重要意义。本研究在体外建立了胃、肠两种模拟消化体系,取不同消化时间的样品进行Western杂交,结果显示在模拟胃液中植酸酶蛋白经60 min处理未被消化,而在模拟肠液中处理15 min内被全部消化,表明转植酸酶玉米种子中的植酸酶蛋白在模拟胃液中极难被消化,可稳定存在,在模拟肠液中可被消化。     

模拟人体胃肠道环境对儿茶素稳定性的影响

为研究模拟人体胃肠道环境对儿茶素稳定性的影响，利用高压液相色谱技术测定了不同时点儿茶素在不同pH溶液及人工模拟体胃液与肠液中的含量．结果表明，儿茶素在pH5．8时最稳定，人工模拟胃液对儿茶素具有较强的破坏力，而人工模拟肠液对儿茶素的稳定性影响相对较小；胃蛋白酶、胰蛋白酶以及缓冲溶液中盐类物质并不影响儿茶素的稳定性．     

酵母培养物对雏鸡肠道菌群及免疫机能的影响

本试验旨在研究酵母培养物对海兰褐蛋雏鸡肠道主要菌群及免疫机能的影响.选用180只7日龄健康无病的海兰褐蛋雏鸡,随机分成3组,每组3个重复,每个重复20只鸡.对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ组分别在基础日粮中添加2.5%和5%的酵母培养物.于21、35、49日龄测定雏鸡肠道中大肠杆菌、双歧杆菌和乳酸杆菌的数量,并且通过Ea玫瑰花环试验、淋巴细胞转化试验和测定血清IL-2水平评价其细胞免疫功能.结果表明:①在日粮中添加酵母培养物后可以显著降低蛋雏鸡肠道大肠杆菌的数量(P＜0.05),提高双歧杆菌和乳酸杆菌的数量(P＜0.05);②酵母培养物可以提高蛋雏鸡Ea玫瑰花环形成率、淋巴细胞转化率以及血清中IL-2的水平,提高蛋雏鸡机体的免疫机能;③综合考虑,蛋雏鸡日粮中添加2.5%的酵母培养物效果较好.     

壳聚糖铜对断奶仔猪生产性能、肠道菌群及黏膜形态的影响

 【目的】研究壳聚糖铜对断奶仔猪生产性能、肠道菌群和肠道黏膜形态等方面的影响,为壳聚糖铜的利用提供科学依据。【方法】选择120头体重(7.8 ± 0.2 kg)的“杜长大”三元杂交断奶仔猪随机分为4组。分别饲喂4种日粮：基础日粮组不添加外源铜(对照组),其它组在基础日粮基础上分别添加50、100 mg?kg-1壳聚糖铜(CS-Cu)、200 mg?kg-1硫酸铜,预饲期7 d,试验期30 d。【结果】50、100 mg?kg-1 CS-Cu和200 mg?kg-1硫酸铜组的日增重分别比对照组显著增加(P＜0.05),料重比显著降低(P＜0.05);添加CS-Cu可使盲肠和结肠内容物中大肠杆菌、沙门氏菌数量明显降低(P＜0.05),而乳酸杆菌数量显著升高(P＜0.05);与硫酸铜组相比, 100 mg?kg-1 CS-Cu组空肠和回肠隐窝深度显著降低(P＜0.05);空肠绒毛高度明显提高(P＜0.05)。【结论】日粮中添加100 mg?kg-1CS-Cu与200 mg?kg-1硫酸铜,对提高断奶仔猪日增重和降低料重比具有等同的效果;日粮中添加CS-Cu具有改善肠道微生态平衡和肠道形态的作用。     

复合益生素对蛋鸡生产性能及肠道菌群的影响

在蛋鸡日粮中添加不同水平的复合益生素,研究其对蛋鸡生产性能及肠道微生物菌群的影响。将900只海兰褐蛋鸡随机分成对照组、试验1组和试验2组3个处理,每个处理3个重复,在日粮中分别添加0,3%,5%的复合益生素。试验结果表明,试验1组和试验2组比对照组平均蛋质量分别提高0.53,0.91 g,且差异显著(P<0.05);产蛋率分别提高1.72%和1.89%,差异显著(P<0.05);破(软)蛋率分别降低13.79%和17.24%;料蛋比分别降低0.03和0.05;乳酸菌浓度分别提高了6.26%和6.52%;大肠杆菌浓度分别降低了4.79%和6.18%,但差异不显著(P>0.05)。     

壳聚糖饲用微生物制剂对湘黄鸡免疫指标和肠道菌群的影响

在不用药物、不接种疫苗的条件下,于饮水中添加0（CK）,0．5％,1．0％和1．5％的以壳聚糖为培养底物研制的壳聚糖饲用微生物制剂饲喂湘黄鸡,探讨其对湘黄鸡免疫指标和肠道菌群的影响效果．结果表明,试验组脾脏指数有上升趋势（Jp〈0．25）,法氏囊指数和胸腺指数显著提高（p〈0．05）;试验组血液中IgG含量呈上升趋势（P〈0．25）,T3,T4和IgA含量也显著提高（P〈0．05或（p〈0．01）;试验组盲肠中大肠杆菌显著减少,而乳酸杆菌显著增加（P〈0．01）．同时在日增重和育成率上,试验组提高率达9．31％（p〈0．01）和7．01％（p〈O．05）,表明该制剂通过促进免疫器官发育,增强T3,T4,IgA,IgG分泌和改善肠道微生态环境,从而提高试鸡的抗病力和生长性能．     

铜、维生素A及互作效应对肉仔鸡肠壁组织结构、肠道微生物和血清生长激素的影响

 【目的】研究日粮中添加铜和维生素A及互作效应对肉仔鸡小肠各段肠壁厚度和绒毛高度、盲肠主要微生物、血清生长激素（GH）的影响。【方法】采用4×2(Cu×VA)完全随机试验设计,日粮Cu水平为0、8、150、225 mg?kg-1,VA水平为1 500、5 000 IU?kg-1,生长阶段分为前期（0～4 w）和后期（4～7 w）。选用1 d艾维茵肉仔鸡448只,随机分为8组,每组4个重复,每重复14只鸡,公母比为1﹕1。【结果】①前期添加Cu（8 mg?kg-1）生产性能较好,后期不添加Cu生产性能较好。②添加Cu 225 mg?kg-1明显降低生长前期肉仔鸡回肠肠壁厚度,添加Cu 150 mg?kg-1使生长后期肉仔鸡小肠各段肠壁厚度明显较低,在整个生长期,高铜对绒毛高度无影响;日粮添加Cu 150 mg?kg-1显著提高盲肠乳酸杆菌和双歧杆菌数量,降低大肠杆菌数量,添加Cu 225 mg?kg-1显著降低盲肠乳酸杆菌和双歧杆菌数量,增加大肠杆菌数量;Cu 8 mg?kg-1组盲肠沙门氏菌数量最低。③日粮中添加VA5 000 IU?kg-1显著降低前期小肠各段肠壁厚度和后期空肠肠壁厚度、提高前期十二指肠绒毛高度;显著增加盲肠大肠杆菌、乳酸杆菌、前期沙门氏菌和双歧杆菌的数量;④Cu和VA交互作用显著影响前期回肠肠壁厚度、后期空肠肠壁厚度(P＜0.05);极显著影响前期十二指肠绒毛高度、后期十二指肠和回肠绒毛高度、前后期盲肠内乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌数量(P＜0.01);⑤Cu、VA及互作对血清GH无影响(P＞0.05),前期GH平均水平高于后期。【结论】日粮添加Cu 150 mg?kg-1和VA 5 000 IU?kg-1有益于肉仔鸡小肠肠道形态和盲肠肠道菌群平衡;Cu和VA存在互作效应。     

人工饲养粘虫及其多世代生物学特性观察

首次在遵义地区对粘虫进行了人工饲养,并观察其各世代生物学特性。结果表明:粘虫在遵义地区1a可连续饲养7代,幼虫历期平均为18.79d、蛹历期平均为16.73d、成虫期平均为14.4d,卵孵化率为62.69%、幼虫化蛹率为87.42%、成虫羽化率为89.42%,平均蛹重0.287g、产卵量为324.9粒/雌,雌雄性比1.14:1。成功建立了稳定的种群,保证了繁殖其他天敌昆虫的猎物供应。     

草鱼模拟肠液的开发及其在仿生消化仪上的应用

[目的]研制草鱼模拟肠液配方。[方法]根据草鱼成鱼的肠道淀粉酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶活性,pH以及钠离子环境,研制了一套草鱼成鱼的模拟肠液配方,并研究其在仿生消化仪上的应用。[结果]利用配制的草鱼模拟肠液进行体外仿生消化试验,发现饲料中干物质和粗蛋白的消化率与真实值的绝对差值均在10%左右,达到仿生消化的目的与要求。此外,经过仿生消化,外源植酸酶能够显著提高干物质消化率、粗蛋白消化率和代谢能值,促进植酸磷的释放。[结论]该研究结果可为草鱼的体外模拟消化提供更可靠的试验数据,并为水产其他动物模拟肠液的开发提供参考。