DNS法检测食用菌多糖含量条件优化研究

DNS法为食用菌多糖含量测定的常用方法,该法具有经济、操作简便、反应灵敏且干扰少等优点.试验以葡萄糖为显色底物,优化了DNS法的检测波长、显色温度、显色时间、pH值等测定条件.试验结果表明:DNS法检测食用菌多糖含量的最佳检测波长为520 nm,最适反应温度为90℃,最佳反应时间为6 min,最适pH值为6～7,适宜检测的糖浓度范围为≤0.16 mg/mL;试验研究了其他糖类对多糖含量测定的影响,结果表明其他糖类对DNS法检测多糖含量结果影响很大,在本试验研究的3种糖中,以麦芽糖干扰最大.本试验结果为食用菌多糖的含量测定及开发利用提供了科学的参数.     

食用菥蓂的生物学特性与加工

菥蓂(Thlaspi arvense L.)又叫遏蓝菜、苏败酱(江苏)、南败酱(湖北)、苦芥子、败酱草、瓜子草、野榆树、菥目(陕西),广泛分布于我国南北各地,甘肃省主要分布在陇南、天水地区,多生于麦田、菜田、路边、村旁.食用部位为十字花科植物菥蓂的地上部分.菥蓂始载于<神农本草经>,列为上品,之后历代本草多有记载.<救荒本草>所载的"遏蓝菜"和<滇南本草>所载的"甜葶子"(又名"麦蓝菜")就是菥蓂,当时遏蓝菜主要是用来充饥.     

蒽酮-硫酸法测定北冬虫夏草多糖含量

以葡萄糖为标准,采用蒽酮硫酸法测定北冬虫夏草子实体粗多糖含量。北冬虫夏草粗多糖液是经乙醚脱脂(脱色)、热水提取、乙醇沉淀和活性炭脱色后制得。结果表明,葡萄糖含量在0.01~0.08 mg/m l时有良好的线性关系,线性方程y=9.897 1x 0.025 6,相关系数r=0.999 8。对不同的冬虫夏草样品多糖含量进行测定,试验精密度好、重现性高,回收率达94%~96%。脱色处理对北冬虫夏草多糖液的测定影响较大,2次脱色后用蒽酮硫酸法测定多糖含量效果较好。     

苯酚-硫酸法测定草莓中总糖含量

目的:建立草莓中总多糖含量测定方法。方法:以葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸法,在490nm处测定吸光度。结果:葡萄糖浓度在10～100 mg/L范围内与吸光度呈良好的线性关系(r=0.9995);回收率在90.0%～101.5%范围内,测得不同品种的草莓总多糖含量在3.43%～5.43%。结论:该方法简便准确、稳定可靠,可作为草莓中总多糖含量的测定方法。     

3种比色法测定菌核侧耳多糖含量的比较研究

以葡萄糖为显色底物,作标准曲线,用硫酸-苯酚法、DNS法和蒽酮法3种方法检测菌核侧耳多糖含量.结果表明,DNS法稳定可靠、操作简便、反应灵敏且干扰少,采用DNS法,菌核侧耳经液体培养的干菌丝粗多糖含量为11%.     

响应面法优化酶解辅助-超声提取菥蓂中的黑芥子苷

为从菥蓂种子中高效提取高得率的目的活性成分黑芥子苷,采用酶解辅助-超声提取法,并利用高效液相色谱测定其含量。在单因素试验的基础上,以酶添加量、酶解温度和酶解时间为关键因素,以黑芥子苷得率为响应值,应用Design-Expert V11软件,Box-Behnken Design响应面法优化菥蓂种子中黑芥子苷酶解辅助-超声提取工艺;并与单独超声、索氏提取2种提取法的黑芥子苷得率进行比较。结果表明,采用Agilent HCC18柱(25 mm×4.6 mm×5μm),流动相A和B分别为甲醇和0.5%磷酸水溶液,检测波长215 nm,柱温25℃,流速1 mL·min^-1,进样量10μL,在等度洗脱10 min下,获得的分离效果和峰型较好。以筛选出的碱性蛋白酶为酶制剂,最佳提取工艺条件为：酶解温度49℃,酶用量2.90%,酶解时间18 min;在此条件下,菥蓂种子中黑芥子苷得率为2.679 mg·g^-1,经方差分析与理论值(2.687 mg·g^-1)差异不显著,但显著高于单独超声提取(2.036mg·g^-1)...     

差示苯酚-硫酸法结合DNS法测定红芪多糖(HPS)含量

[目的]优化建立差示苯酚-硫酸法结合DNS法测定红芪多糖含量的方法。[方法]采用单因素试验筛选考察差示苯酚-硫酸法的检测波长、显色剂用量、反应时间等条件;通过线性关系、精密度、稳定性、重复性、加样回收率分别对差示苯酚-硫酸法和DNS法进行方法学考察。[结果]差示苯酚-硫酸法测得的红芪样品中以葡萄糖计的总糖含量平均值为72.49%,DNS法测得样品中以葡萄糖计的还原性单糖含量平均值为8.13%,以葡萄糖计的多糖含量平均为64.36%,RSD均小于4%。[结论]该研究采用所建立的差示苯酚-硫酸法结合DNS法测定了红芪多糖的含量,结果显示此方法较准确稳定、重复性较好,在一定程度上减少游离还原糖及杂质的干扰,降低了由于操作等带来的系统误差,使样品中多糖含量的测定结果更接近真实值,为红芪多糖等中药多糖的含量测定提供更好的参考方法。     

大蒜多糖的提取及HPLC检测

采用热水浸提法、微波辅助冻融法和超声波法从新鲜大蒜中提取多糖,用DNS法测定多糖含量比较不同提取方法,对大蒜及皮中多糖的提取效果进行比较。以葡萄糖为标准品,采用DNS法测定多糖含量是可行的,HPLC检测平均回收率达到了98.50%,RSD为2.65%,提取率为3.27%。发现微波辅助冻融法是提取大蒜多糖较为合适的方法,该法提取大蒜多糖得率高,且多糖含量也较高。     

3,5-二硝基水杨酸比色法测定麦冬多糖含量

采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定麦冬多糖含量。结果表明,麦冬多糖占麦冬总干重的40.4mg.g-1,RSD=2.48%(n=5),总糖供试液和单糖供试液的平均回收率分别是100.4%(RSD=0.17%)和101.1%(RSD=0.62%)。试验表明,DNS比色法测定多糖含量简单易行,且重现性好,可作为麦冬多糖含量的常规测定方法。     

菥蓂药材中异牡荆苷的分离鉴定及指纹图谱研究

采用高效半制备液相色谱法分离,并以13C谱法(13C-NMR)、1H谱法(1H-NMR)、质谱法(Ms)、紫外光谱法(UV)确定结构;采用HPLC梯度洗脱进行色谱分离,对不同产地的11批菥蓂药材指纹图谱的相似度进行比较分析。结果表明,分离得到异牡荆苷纯度>98%(面积归一化法);各批药材共建立了17个共有峰,不同产地的菥蓂药材指纹图谱相似度良好。说明高效半制备液相色谱法制备异牡荆素方法简单、高效,指纹图谱分析方法稳定性、精密度、重现性较好,用于菥蓂的质量评价切实可行。     

红芪多糖的提取分离和含量测定

[目的]对红芪中的多糖进行提取分离和含量测定.[方法]采用水提醇沉法提取红芪多糖,并采用苯酚-硫酸法进行含量测定.[结果]线性回归方程为：y=0.007X-0.013,R=0.999 6,表明在0～30 mg/L范围内,葡萄糖浓度与吸光度的线性关系良好.红芪药材和红芪精制多糖HPS中的多糖含量分别为4.94％（RSD=1.06％）和45.30％（RSD=1.40％）,平均回收率为99.12％（RSD=0.65％）.[结论]该方法简便、快速、准确、灵敏度好,可用于红芪多糖的提取分离和含量测定.     

鳞轴小膜盖蕨不同部位多糖含量的测定

为测定鳞轴小膜盖蕨根、茎、叶中的多糖含量,用水提醇沉法分别提取鳞轴小膜盖蕨根、茎、叶中的多糖,采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖为标准品,蒸馏水为空白对照,于490 nm波长处分别测定对照品和供试品溶液的吸光度,按标准曲线计算多糖含量.结果显示葡萄糖浓度与吸光度在0～0.06 mg/mL范围内呈良好的线性关系,回归方程为y=10.955x-0.004,r2=0.9989(y为吸光度,x为葡萄糖浓度).鳞轴小膜盖蕨根、茎、叶中的中多糖含量分别为3.77％、6.42％、2.12％.结果表明鳞轴小膜盖蕨茎是鳞轴小膜盖蕨全株以多糖为主的重要活性部位.     

罗汉菜的采收与加工技术要点

<正>罗汉菜,为十字花科菥蓂属,又名菥蓂、遏蓝菜、苦格菜等,因其莲座叶生长像叠罗汉而得名。罗汉菜在全国各地均有种植,甘肃省陇南市山区和上海市嘉定区生产的罗汉菜常作为加工腌菜食用。罗汉菜是上海市嘉定区地方特色名菜,种植历史悠久,曾于1921年获荷     

马齿苋中水溶性总多糖含量测定方法研究

建立了一种准确测定马齿苋水溶性总多糖含量的方法。以葡萄糖作标准曲线,在580 nm检测波长下采用蒽酮-硫酸法测定马齿苋中水溶性总多糖含量。葡萄糖溶液浓度在0.02～0.10 mg/mL范围内线性关系良好,总多糖换算因子为4.177。结果表明供试样品溶液在2 h内显色稳定,重现性好,平均加样回收率为99.43%。该方法精密度高,适合马齿苋水溶性总多糖含量的测定。     

DNS法测定还原糖含量时最适波长的确定

探讨DNS法测定还原糖含量时的最适波长。以DNS为显色剂,用分光光度法分析测定了木糖和葡萄糖显色液的最大吸收波长和最适测定波长。结果表明,木糖和葡萄糖与DNS显色剂反应后,均在490 nm处有最大吸收峰。标准曲线糖含量范围为0~40 mg/L时,OD值在520 nm处的R2最接近于1,精确度和回收率均较高。提示DNS法测定还原糖含量时,520 nm为最适测定波长。     

硅烷化衍生化-气相色谱法测定不同品种莜麦的非淀粉多糖

本文采用硅烷化衍生化-气相色谱法,测定了白燕2号等内蒙古不同品种莜麦中可溶性和不可溶性非淀粉多糖的含量.样品经正己烷去脂肪,80％乙醇去游离糖,在pH =5的HAC缓冲液中用α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶酶解,可得到可溶性非淀粉多糖(SNSP)和不可溶性非淀粉多糖(ISNP).经酸水解后,对其非淀粉多糖的各组成单糖采用硅烷化进行衍生物制备,直接气相色谱法测定.本方法的线性相关系数在0.99584-0.99909之间,木糖含量在1.984-4.384 mg/g之间,甘露糖含量在1.866-3.221 mg/g之间,半乳糖含量在0.454-0.903mg/g之间,葡萄糖含量在5.31-10.528mg/g之间,总量在9.614-17.016mg/g之间.结果表明,该方法适用于莜麦中可溶性和不可溶性非淀粉多糖的测定,为莜麦的深入品质评价及进行产品有效成分提取和利用,提供了较科学的营养学依据.     

气相色谱法测定新疆桑枝多糖中单糖组成及含量

[目的]建立测定桑枝多糖中单糖的组成及含量的方法.[方法]水提醇沉法提取桑枝多糖,CF3 COOH水解多糖,水解产物用盐酸羟胺、吡啶和醋酸酐衍生化,生成糖腈乙酸酯衍生物,气相色谱法测定桑枝多糖的单糖组成及含量.[结果]新疆桑枝多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖等组成,含量分别为鼠李糖（11.8 mg/ml）、阿拉伯糖（14.4 mg/ml）、木糖（1.6 mg/ml）、甘露糖（1.9mg/ml）、葡萄糖（22.3 mg/ml）及半乳糖（28.0 mg/ml）.[结论]该方法简便、灵敏、准确可靠,可用于桑枝多糖中单糖的组成及含量测定.     

苯酚-硫酸法测定灰树花中多糖含量的研究

[目的]建立一种快速、稳定的适于测定灰树花多糖含量的方法。[方法]热水浸提法提取灰树花多糖,采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖为标准品,以蒸馏水为空白对照,于490 nm波长处分别测定对照品和供试品溶液的吸光度,按标准曲线计算葡萄糖含量。[结果]葡萄糖在20~170μg/ml范围内线性关系良好,回归方程为Y=0.009 7X-0.096 4（Y为吸光度,X为葡萄糖浓度,μg/ml）,相关系数r=0.998 5,低、中、高3个不同浓度的加样回收率分别为101.19%、100.01%和100.23%（n=5）,其RSD值分别为1.20%、0.85%和0.55%。[结论]苯酚硫酸法是一种快速、稳定、重现性好的灰树花多糖含量测定方法。     

正交设计优选薏苡茎多糖的酶提取工艺

[目的]确定薏苡茎多糖的最佳酶提取工艺。[方法]利用纤维素酶从薏苡茎中提取多糖,采用正交试验方法进行条件优选,并用分光光度法对提取物进行多糖的含量测定。[结果]检测波长为490 nm;葡萄糖含量在0.010～0.100 mg/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系(R=0.999 8);最佳酶提取工艺为:pH值为5,酶用量为6.0 ml,反应温度为40℃,酶解时间为150 min;在此条件下,薏苡茎多糖的平均提取率为19.62%,RSD为0.21%。[结论]优选出的酶提取工艺合理,经济,可行。     

熟地黄多糖含量测定方法研究

[目的]建立熟地黄中多糖含量的测定方法。[方法]利用苯酚硫酸法、蒽酮硫酸法、3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)分别测定熟地黄中的多糖含量,对检测结果进行比较。[结果]苯酚硫酸法、蒽酮硫酸法、DNS法的平均回收率分别为100.5%、99.8%、100.6%,RSD分别为1.6%、1.6%、1.5%,测得的多糖质量分数分别为14.80、14.66、17.46 mg/g。[结论]苯酚硫酸法的结果更可靠,且操作相对简单易行,可考虑作为熟地黄多糖含量测定的首选方法。