α肿瘤坏死因子的研究进展

α肿瘤坏死因子(TNF-α)是一种由多核巨细胞产生的有广泛生物学活性的细胞因子,具有调节机体的免疫功能和导致肿瘤细胞坏死的特性。随着对TNF-α生物学活性研究的深入,TNF-α与各种疾病的关系越来越紧密,在许多疾病的研究中都将其作为检测的重要指标。论文通过对TNF-α的基因结构、在组织中的分布、生物学功能和检测方法的叙述,为有关TNF-α在生物学和医学方面更深入的研究提供参考依据。     

肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与肥胖

肿瘤坏死因子 ( Tumor Necrosis Factor,TNF)包括由活化的单核 /巨噬细胞产生的TNF- α和由活化的 T淋巴细胞产生的 TNF- β两种。二者在细胞来源、相对分子量、等电点、糖含量等方面有很大差别。 TNF-α是一种具有多种生物学活性的细胞因子 ,由 1 40 - 1 5 0个氨基酸残基组成 ,其中有两个反平行β片层 ,每个β片层有 5个β折叠。它由 TNFRI和 TNFRII两种受体组成 ,二者胞内结构区的同源性极低 ( 2 7% ) ,可能启动不同的生物学反应。研究发现TNF- α是与肥胖相关的蛋白质之一 ,对脂肪代谢具有重要调节作用。TNF- α通过抑制进食、增加机体产热量 ;促进脂肪分解、抑制脂肪合成 ;诱导产生瘦素 ;引起胰岛素抑制、抑制前脂肪细胞分化 ;诱导前脂肪细胞及脂肪细胞凋亡等作用调节脂肪代谢和能量平衡。同时 ,TNF- α在肥胖动物或人的脂肪组织中过量表达 ,也会给人和动物机体带来很多副作用     

肿瘤坏死因子α对脂代谢和能量平衡的调节作用

TNF-α在肥胖型动物和人脂肪组织中超量表达,对脂代谢具有重要的调节作用.近来发现,TNF-α通过降低LPL活性、对Glut4表达的下调作用、诱导瘦蛋白的表达和引起胰岛素抗性及产热作用来调节脂代谢和能量平衡.     

银杏叶多糖对雏鸡肿瘤坏死因子α和γ干扰素产生的影响

体外给1日龄雏鸡腹腔注射马立克氏病强毒株（0．2mL／只），而后注射不同浓度银杏多糖悬液，最后一次给药后48h，采雏鸡脾组织，制备淋巴细胞。生物法测肿瘤坏死因子α（TNFα），ELISA测γ干扰素（IFNT）。结果表明，一定浓度的银杏多糖能提高雏鸡脾淋巴细胞培养上清中TNFα活性，且在一定范围内呈剂量依赖关系。     

人肿瘤坏死因子α逆转录病毒表达载体的构建

应用ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔｌｌｋｓ质粒构建了含人肿瘤坏死因子－α　ｃＤＮＡ的过渡性载体ｐＢＴ１和ｐＢＴ２。用限制性内切酶ＢａｍＨＩ与ＥｃｏＲＶ消化ｐＢＴ１ＤＮＡ，分离出了ＴＮＦ－α　ｃＤＮＡ基因片段，并在其平末端加入了ＢａｍＨＩ接头。进而将带有ＢａｍＨＩ粘性末端的ＴＮＦ－αｃＤＮＡ克隆到了逆转录病毒载体ｐＺＩＰＮｅｏＳＶ（Ｘ）１５′－端长末端重复序列（ＬＴＲ）下游的ＢａｍＨＩ切点上，构建了重组质粒ｐＺＩＰＴＮＦ。该重组质粒经琼脂糖凝胶电泳，限制性内切酶消化和核酸杂交鉴定分析，证明ｐＺＩＰＮｅｏＳＶ（Ｘ）１中插入了ＴＮＦ－α　ｃＤＮＡ，并且方向正确。本研究为应用重组逆转录病毒介导ＴＮＦ－α基因转移与治疗奠定了基础。     

实验性鸡葡萄球菌性关节炎的发病机制--血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和类风湿因子的动态变化

8周龄健康肉鸡 6 0只随机分成 2组 ;其中试验组 4 5只 ,对照组 15只。试验组每只鸡经关节腔注射鸡源致病性金黄色葡萄球菌 2 .5× 10 9CFU,复制鸡葡萄球菌性关节炎的病理模型 ,研究血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素 6 (IL- 6 )、类风湿因子 (RF)的动态变化。结果表明 :接种后鸡血清中 RF水平自第 1天开始明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,第 2 8天达到峰值 5 .5。血清中 TNF-α的含量与对照组相比 ,在接种后第 3、5天差异显著 (P<0 .0 5 ) ,第 14天差异极显著 (P<0 .0 1) ;血清中 IL- 6的含量在第 2周上升的幅度最大 ,随后持续至少 3周 ,第 14天开始该因子水平显著高于对照组 (P<0 .0 1)。 3种细胞因子的含量均与关节炎的发展程度成正相关。     

鸡肿瘤坏死因子-α原核表达及生物活性鉴定

为研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)免疫功能,从鸡盲肠扁桃体克隆TNF-α的CDs保守区全序列,与pGEX-6p-1载体连接构建原核表达质粒,转化大肠杆菌M109,IPTG诱导蛋白表达,经包涵体洗涤、溶解、复性、亲和柱层析获得纯化的融合蛋白,经Western-blot鉴定为鸡TNF-α融合蛋白;用CEF/VSV法和MTT法检测表明,该融合蛋白的抗病毒活性为1.2×26 U/mg,在5-6稀释度下能显著促进淋巴细胞增殖.     

肿瘤坏死因子的体外诱生及检测

试验以ＢＣＧ和ＬＰＳ为诱导物,在体外培养条件下刺激小鼠腹腔巨噬细胞诱生ＴＮＦ,培养上清对Ｌ９２９细胞具有细胞毒作用。结果显示,ＰＥＣ具有良好的体外诱生ＴＮＦ的能力,产生了并分泌ＴＮＦ的最佳条件是ＬＰＳ浓度为１μｇ／ｍＬ,培养时间为８ｈ;改良的结晶紫染色测定ＴＮＦ活性的方法具有简便,快速,易于重复等优点。     

黄芩白术对LPS诱导流产小鼠的保胎作用及子宫内TNF—α含量的影响

为了研究TH1细胞因子TNF－α（肿瘤坏死因子）在流产发生机制中的意义,探讨中药黄苓白术的安胎作用及机理,本试验用细菌脂多糖（LPS）尾静脉注射（每鼠0.1μg）,诱导昆明小鼠流产,ELISA方法测定子宫匀浆中TNF－α的含量。发现LPS诱导流产的小鼠,子宫内TNF－α显著升高。预先口服保胎中药黄芩白术,则显著抑制LPS的作用,使母鼠胚胎吸收率降低,子宫内TNF－α含量也显著降低。这些结果表明,LPS诱导流产与子宫内TNF－α升高有关。保胎中药黄芩白术有抑制母体子宫与胎儿界面TH1细胞因子TNF－α分泌的作用。     

激光穴位照射对子宫卵巢病牛血浆β—内啡肽含量和发情的影响

３４头黑白花奶牛，患子宫炎或卵巢疾病而不孕，将其随机分为２组。激光组（２４头）用Ｈｅ－Ｎｅ激光照射交巢穴，７ｄ为１疗程。间歇７ｄ再照射第２疗程。对照组（１０头）不用激光照射。ＲＩＡ法分析血浆β－内啡肽（β－ＥＮＤ）含量。结果发现，激光组病牛血浆β－ＥＮＤ由照射前（第０天）的１１２．８６４±５８．９４７ｐｇ／ｍｌ升高到第１疗程后（第８天）的１７５．６３４±１０４．３１０ｐｇ／ｍｌ（Ｐ＜０．０５），间歇１周后为（第１４天）２３７．６２７±１５３．１３６ｐｇ／ｍｌ（Ｐ＜０．０１），第２疗程后（第２２天）为１９３．４４８±１０４．３７８ｐｇ／ｍｌ（Ｐ＜０．０５）。显著高于对照组同期测定值。同时观察到，激光组发情牛头数为２１头，发情率８７．５％；对照组发情３头，发情率３０％。组间差异显著（Ｐ＜０．０１）。表明激光照射穴位可使病牛β－ＥＮＤ分泌增加，并参与调节生殖机能