高温胁迫法对球孢白僵菌HFW-05耐热力及毒力的提高

为了检测及提高球孢白僵菌HFW-05对高温环境的耐受力,将浓度为108孢子/mL的孢悬液,在48℃下恒温振荡水浴,不同时间取出测定孢子存活率,同时将处理液接种制备孢子粉,测定下一代的产孢量、疏水性、不同温度下的萌发中时、生长速率、毒力以及胞外蛋白酶和几丁质酶的活性.结果表明,高温胁迫处理能够在一定程度上提高HFW-05菌株的耐热力.其中处理120 min孢子存活率可达到80%以上,处理110 min在27℃下产孢量是对照的3倍多,两者的疏水性均显著高于对照.各处理一代菌株分生孢子在32℃下萌发中时(GT50)均显著低于对照,在32,34℃下胞外蛋白酶和几丁质酶活性高于对照,但各处理间差异不显著.以二龄初小菜蛾为供试幼虫,在27℃下,各处理的毒力仍均低于未处理对照,但在32℃下均显著高于对照,在34℃下对照及处理分生孢子均无杀虫活性.     

不同环境条件对球孢白僵菌HFW-05的敏感性变化

通过对温度和紫外线等条件的变化,明确了该因素对HFW-05菌株生长与毒力的影响。结果表明,25℃培养有利于提高孢子萌发率及菌株产孢量;30℃培养有利于提高菌株产酶量,最适菌株生长的温度范围是25～30℃。生测试验表明,HFW-05菌株对小菜蛾的最佳致死温度范围为25～30℃。菌株在25℃下经紫外线1 h处理后,萌发率可比对照增加12%,产孢量增加26%,表明适量紫外处理有利于菌株生长。     

常用化学农药对球孢白僵菌HFW-05菌株的影响及其混用对小菜蛾的联合毒力

球孢白僵菌HFW-05对粉虱有很高的杀虫活性,为扩大该菌株的杀虫范围及明确其与常用化学农药的混用效果,测定了HFW-05菌株对小菜蛾的杀虫活性及化学药剂对HFW-05菌株孢子生长发育的影响。结果表明,HFW-05菌株对小菜蛾幼虫表现出很高的杀虫活性,5×107孢子/mL浓度下,HFW-05菌株对小菜蛾2,3龄幼虫的6 d校正死亡率分别为86.7%和76.7%,各试验浓度下对2龄小菜蛾幼虫的毒力显著高于3龄幼虫。随浓度降低化学药剂对孢子萌发的抑制作用均明显减弱,药剂对孢子的影响与菌药混用时对昆虫的毒力影响没有明显的相关性。常规用量下,抑太保、三氟氯氰菊酯和辛硫磷强烈抑制孢子萌发,孢子萌发率为0,0和7.9%,药剂5倍稀释液与1×106孢子/mL孢悬液混用,辛硫磷、灭多威、灭幼脲Ⅲ号对小菜蛾表现为拮抗作用,校正死亡率分别为23.4%,16.2%和20.5%,其余药剂均表现为毒力相加作用,抑太保、氟虫脲的增效作用显著,对小菜蛾的校正死亡率分别为93.3%和98.0%。可见菌药合理混用对改善小菜蛾的生物防治有一定的指导意义。     

球孢白僵菌HFW-05几丁质酶基因的克隆与序列分析

通过对粉虱、小菜蛾高效的球孢白僵菌HFW-05几丁质酶基因的克隆及序列分析,旨在从分子水平上了解HFW-05菌株的几丁质酶特性。根据已发表的几丁质酶基因序列(EU828354)设计几丁质酶基因全长引物,扩增HF-WBbchit1全长基因,与大肠杆菌(Escherichia coli)克隆载体pMD19-T连接获得含有HFWBbchit1全长基因的重组质粒pMDchit1并测序。该基因的编码区包括1 047 bp,编码了348个氨基酸,分子量约为36.795 kDa,进行同源性比较分析结果表明:其基因序列与球孢白僵菌菌株NCIM1216几丁质酶基因(EU828354)和球孢白僵菌菌株Bb0062几丁质酶基因(AY145440)的核苷酸同源性最高,同源性达到98%。氨基酸序列与球孢白僵菌菌株Bb0062几丁质酶(AAN41259)同源性达到99%。     

球孢白僵菌生长及毒力影响因子的研究进展

随着害虫综合治理的提出，昆虫病原真菌在防治农林害虫上的应用日趋广泛，白僵菌是世界各国研究应用最多的真菌杀虫剂。从白僵菌生长所需的营养、温湿度条件等方面的研究进展进行阐述，总结了提高菌株生长水平和杀虫效果的主要措施，以期对今后白僵菌的培养及应用提供参考。     

不同碳、氮营养对球孢白僵菌HFW-05的生长及胞外蛋白酶产量的影响

在基础培养基中添加14种碳源和11种氮源测定,球孢白僵菌HFW-05菌株的萌发率、生长速率、产孢量及胞外蛋白酶活性.综合各项指标得出,HFW-05菌株生长的最适碳源为蔗糖,产孢量与产酶量最大,分别为16.13×107孢子/cm2和117.38 μg/(min·mL);最适氮源为豆粕粉,其产孢量和酶活远高于对照和无机盐类,分别为15.62×107孢子/cm2和74.01 μg/(min·mL).除硝酸钾外,无机盐类在供试浓度上均对孢子萌发和生长有抑制作用.在各种碳(氮)源培养基中添加1%蛋白胨(葡萄糖)后,菌株的产孢量和产酶量均有所提高.结果表明,HFW-05菌株的产孢量和胞外蛋白酶之间具有一定的相关性.     

球孢白僵菌HFW-05菌株在蔬菜上的宿存研究

采用常规叶面喷雾法研究了HFW-05菌株在蔬菜上的宿存情况。在施菌前对白僵菌、细菌和放线菌进行本底调查。以2.5×107个孢子/m L浓度间隔5 d连续喷药3次后,2个月内,白僵菌在不同寄主植物中的成菌落数呈波浪状。白僵菌在不同作物叶片表面的最终宿存量在106cfu/g水平,在叶肉中的最终宿存量在103cfu/g水平。同时,白僵菌的释放对环境细菌、放线菌种群数量影响不明显,不会破坏原有的生态平衡。     

蝉蜕诱导对球孢白僵菌生物学特性及其毒力影响的研究

利用改良蝉蜕诱导培养基对球孢白僵菌进行诱导,以无蝉蜕PDA培养基作为对照,目的是比较蝉蜕诱导后球孢白僵菌菌株的生长速率、产孢量、孢子萌发率等多个生物学指标,及二者对3龄亚洲玉米螟幼虫的毒力。经蝉蜕诱导的球孢白僵菌菌株的产孢量、孢子萌发率以及对玉米螟幼虫毒力都高于对照组,且差异显著,对玉米螟幼虫毒力处理组LT₅₀为4.73天,对照组需要6.97天。同时经蝉蜕诱导过的菌株开始产孢时间和胞外蛋白酶活性都优于对照组,胞外蛋白酶活性的变化范围是1.497×10^-2~3.538×10^-2 IU/mL,但经诱导菌株的生长速率低于处理组。鉴于球孢白僵菌菌株经蝉蜕诱导后,其产孢量和孢子萌发率增加,并且能够增强对玉米螟幼虫毒力,可利用其进行球孢白僵菌菌种保存和改良。

     

常用农药与球孢白僵菌复配对甜菜夜蛾的毒力研究

选择与球孢白僵菌相容性好的4种杀虫剂甲维盐、除尽、铁沙掌和康夫。用它们的亚致死剂量和次亚致死剂量分别与白僵菌菌悬液复配,对甜菜夜蛾进行室内毒力测定。结果表明,含农药浓度高的复配剂的杀虫效果好于含低剂量农药的复配剂;且杀虫效果好的农药,其复配剂的防效也高。在第2天时,含甲维盐和除尽的复配剂校正防效达到了53%~70%,到第10天,校正防效达到了92%以上,其中含甲维盐的复配剂的防效都达到了97.7%。     

球孢白僵菌代谢产物对植物幼苗的影响研究

通过研究球孢白僵菌代谢产物对植物幼苗的影响,结果表明：球孢白僵菌代谢产物对不同植物的影响不同;不同培养基培养和不同溶剂抽提的球孢白僵菌代谢产物对植物的幼苗影响不同;不同浓度球孢白僵菌代谢产物对植物幼苗生长影响不同.     

白僵菌可分散油悬浮剂防治稻纵卷叶螟的药效研究

为探讨白僵菌可分散油悬浮剂防治稻纵卷叶螟的适宜浓度,进行了3个不同试验浓度与苏云金杆菌可湿性粉剂、清水的对比试验.结果表明：50g/667m2的白僵菌可分散油悬浮剂防治稻纵卷叶螟的效果最好,防效达85.58％.     

茶园捕食性天敌昆虫及其对害虫的制约

茶树属多年生常绿木本栽培植物,茶园灌丛郁闭,生态环境比较稳定,尤其是山林地区茶园,植被繁杂,茶园害虫天敌资源相当丰富,成为茶园害虫重要的自然控制因素。近年来,作者在安徽茶区调查,共采获各类天敌492种,其中捕食性天敌昆虫所占比例最大,初步统计达215种之多,其中已鉴定136种,分别属于10目28科;(详见后附天敌名录);有些种类对害虫具有比较明显的自然控制效应。现将考查情况报告研讨如后。     

转Bt基因玉米对田间主要捕食性天敌安全性的影响

以MC2884(转Bt基因玉米杂交种)、2884(受体玉米)和东农250等3种玉米品种为试验材料,探讨转Bt基因玉米对田间瓢虫、蜘蛛、草蛉等田间天敌安全性的影响。结果表明:当地品种东农250对照区、东农250化防区、MC2884区和2884区4种田间天敌的种群动态变化趋势基本一致。方差分析表明,4个处理区之间天敌数量差异不显著。说明转Bt玉米对田间4种天敌数量及其种群消长动态没有影响,转Bt玉米对上述几种田间天敌安全。     

继代培养对球孢白僵菌毒素产生水平的影响

继代培养对球孢白僵菌生物学特性、毒力及毒力相关因素等均会产生影响,研究了继代培养对球孢白僵菌毒素产生水平的影响。对野生球孢白僵菌D6-2和L1-1菌株进行室内培养基继代培养,利用高效液相色谱(HPLC)法对其代谢产物中已报道的2种毒素2-氯杀鼠灵酮和间甲基苯甲酸甲酯在不同世代的代谢水平进行了检测。对2株供试球孢白僵菌菌株,收集不同世代在SDAY培养基中培养相同时间后等量的白僵菌培养液,经过有机溶剂提取脂溶性部分,经HPLC定量检测,2个供试菌株各世代培养液中均只有F1代代谢产物中检测出了2-氯杀鼠灵酮,而F2~F5代未检测到,并且供试菌株各世代代谢产物中均未检测到间甲基苯甲酸甲酯;并且发现在继代培养过程中,有未知化合物产生水平未随着世代增加而发生显著变化。不同白僵菌菌株毒素的代谢种类存在差异,并且继代培养会降低某些毒素的代谢水平,也许是继代培养导致供试菌株毒力下降的原因之一;对于其他种类白僵菌毒素在继代培养过程中的代谢水平需进一步研究。     

金福隆植物生态营养剂对油研7号产量及其构成因素的影响

研究了喷施不同浓度的金福隆植物生态营养刑对优质杂交油菜油研7号产量及其构成因素的影响。其结果表明：在油菜的苗期、现蕾期、盛花期喷施金福隆植物生态营养剂能够显著提高油研7号的油菜籽产量、增加单株产量、单株有效角果数和有效分枝数等，其差异均达到极显著水平。其中最佳喷施浓度为1：300(1g营养剂兑水100nd)，油菜籽产量可达到183.33kg／667m^2，较对照ck(喷施清水)增产12．25％，在油菜生产上喷施金福隆植物生态营养剂提高油菜籽产量又一有效途径。     

可浸种型水稻种衣剂的开发与应用研究Ⅰ种衣剂不同配方对水稻恶苗病菌的毒力测定和稻种室内安全性的影响

室内测定结果表明：A-B2号种衣剂对水稻恶苗病毒的共毒系数为223.36，表现为显著的增效作用；其它的复制都不同程度地表现出一定的拮抗作用；另外，各种衣剂处理对水稻种子的发芽均无抑制作用，其中A-B2包衣处理对稻种的吸水、萌动和发芽还有很好的促进作用。     

几种杀菌剂对草莓灰霉病菌的室内毒力测定

在实验室条件下,采用菌丝生长速率法测定了6种杀菌剂对草莓灰霉病菌(Botrytiscinerea)的毒力。结果表明,咪鲜胺、多菌灵、速克灵、扑海因、烯唑醇和三唑酮对草莓灰霉病菌的质量浓度EC50值分别为0.0233、0.0421、0.1724、0.2837、0.3021和0.3263mg/L。草莓灰霉病菌对上述6种杀菌剂均表现敏感,其中,供试草莓灰霉病菌对咪鲜胺最敏感。     

六种杀菌剂对黄瓜尖孢镰刀菌的毒力测定试验

本试验分离与纯化黄瓜枯萎病病原菌,鉴定出病原菌为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporumSchl.）。采用含毒培养基生长速率法测定六种杀菌剂的抑制效果,以菌落直径为实验观察指标,测量对照组和处理组的菌落直径,以抑制率测定杀菌剂对尖孢镰刀菌的抑制效果。结果表明：药后72h,杀菌剂丙环唑的EC50值为0.9039,其毒力指数最大,对尖孢镰刀菌的抑制效果最佳;代森、异菌肽的EC50值为2.8939、6.8186,效果较好;醚菌酯、嘧霉胺的EC50值为29.3951、30.4126,效果一般;苯醚甲环唑的EC50值为143.2943,毒力指数最小,抑制效果较差。     

8种生物农药对温郁金弯孢霉叶枯病病原菌的室内毒力测定

为了筛选出有效防治温郁金弯孢霉叶枯病的药剂,采用菌丝生长速率法测定8 种生物农药对温郁金弯孢霉叶枯病病原菌(Curvularia clavata)的抑菌效果。8 种生物农药对温郁金叶枯病病原菌抑菌效果好的为0.5%氨基寡糖素AS、3%中生菌WP、荧光假单胞杆菌WP和枯草芽孢杆菌WP。毒力最强为荧光假单胞杆菌WP,EC50值为0.93 mg/L;其次为哈茨木霉菌WP、枯草芽孢杆菌WP、0.5%氨基寡糖素AS和3%中生菌素WP,EC50分别为1.30、3.27、6.14、8.42 mg/L。荧光假单胞杆菌、0.5%氨基寡糖素AS、枯草芽孢杆菌和3%中生菌素WP均可有效抑制温郁金叶枯病病原菌的生长,可进一步用于田间试验。     

不同浸提剂对保护地土壤有效硅测定结果的影响

北方保护地面积在不断扩大,随着种植年限增长,土壤有可能硅供应不足;充足的硅素供应对于提高保护地作物抗性、防治病虫害发生和改善产品品质具有特殊重要作用。但到目前为止,在北方旱田土壤上测定有效硅的方法还没有建立起来。自辽宁中部地区不同利用年限保护地采集不同深度土层土壤样品28个,选择几种常见的浸提剂及测定方法测定有效硅含量,通过对不同方法测定结果间的比较及测定结果与主要土壤化学性质间关系做相关分析,得出初步结论如下：不同浸提剂及测定方法测得的土壤有效硅含量相差别很大,但相关程度均达到了极显著水平;回归分析表明,几种方法测定的土壤有效硅含量主要与土壤pH、EC以及土样采集深度有关,但相关程度及相关形式不同。这一研究结果为今后深入开展研究提供了资料。