松树根际高效解磷青霉发酵条件的优化

土壤磷素供应不足是导致松林地力衰退的重要因素之一,通过研制解磷微生物肥料来分解土壤中难溶磷是改善土壤磷素供应状况的有效途径.在分离获得两株解磷微生物(瓜纳卡斯特青霉JP-NJ2菌株和嗜松青霉JP-NJ4菌株)的基础上,通过正交试验分别对瓜纳卡斯特青霉JP-NJ2菌株及嗜松青霉JP-NJ4菌株的液体发酵培养基部分组分进行了优化,并对其适宜发酵条件进行了研究,得出JP-NJ2菌株适宜发酵培养基为蔗糖10 g+ (NH4)2SO4 0.3 g+MgSO4·7H2O 0.3 g+NaCl 0.3 g+KCl 0.5 g+FeSO4·7H2O 0.03 g+MnSO4·7H2O 0.03 g+卵磷脂0.4 g+CaCO3 5 g+蒸馏水1 000 mL,初始pH 5.0,发酵培养周期为9d,溶氧量为80％;JP-NJ4菌株适宜发酵培养基为蔗糖8 g+ (NH4)2SO40.5 g+MgSO4·7H2O 0.3 g+NaCl0.3 g+KCl0.7 g+FeSO4 ·7H2O 0.03 g+MnSO4 ·7H2O 0.03 g+卵磷脂0.8 g+CaCO3 5 g+蒸馏水1 000 mL,初始pH 6,培养周期为11d,溶氧量为90％.研究结果为两株解磷青霉工业化生产提供了参考.     

核桃根际溶磷菌的筛选

为获得高效的溶磷菌,用于菌肥生产。通过Pikovskava无机解磷培养基从核桃土壤里筛选出溶磷菌,通过液体发酵试验确定其溶磷活力,利用分子生物学方法对较高活力的溶磷菌进行分子鉴定;通过单因素试验,比较该溶磷菌与两种菌肥溶磷菌在不同发酵液配方及发酵条件下的发酵活力。分离得到的高效溶磷菌为芽孢菌属,适宜初始p H值范围为5~9,适宜温度范围为16℃~40℃,适宜氮源有硫酸铵、氯化铵和草酸铵、蛋白胨,适宜碳源有草酸铵、蔗糖、甘油;高浓度Fe~(3+)、Mn~(2+)对其活力有一定的促进作用,而Cu~(2+)、Ni~(2+)、Zn~(2+)会抑制其解磷。在不同发酵液配方及发酵条件下,该溶磷菌溶磷能力优于菌肥2溶磷菌;在不同发酵条件下,该溶磷菌溶磷能力稳定性优于菌肥1溶磷菌。该溶磷菌添加到菌肥中有一定的市场潜力。     

厚壁轮枝菌摇瓶液体发酵培养的研究

厚壁轮枝菌对根结线虫虫卵有很强的寄生力,是线虫的生防菌,本文对其最适培养条件进行了研究.每12 h对其产孢情况进行跟踪,探讨了不同C、N源,初始pH值,无机盐对其产孢量的影响,确定了适宜的培养条件及发酵终止时间.结果显示,28 ℃下,在160 r·min-1 摇床上,以500 mL三角瓶200 mL的装量进行液体培养,筛选出的最佳复合培养基配方为:葡萄糖20 g·L-1,玉米粉20 g·L-1, 黄豆粉20 g·L-1,KH2PO4 0.5 g·L-1 ,MgSO4·7 H2O 0.5 g·L-1.最佳pH值范围5.0～7.0,最适发酵终止时间120～144 h.     

沙棘干缩病拮抗放线菌W培养基的筛选

拮抗放线菌W对沙棘镰刀菌干缩病有一定的抑制作用，试验采用对峙培养法和管碟法对放线菌W发酵培养基配方进行了筛选。通过试验筛选确定发酵培养基配方为KNO3 1g，K2HPO4 0．5g，MgSO4 0．5g，NaCl 0．5g，蔗糖1g，酵母膏0．2g，玉米粉1g。     

防治人参土传病害生防菌株X1和B59培养基筛选及发酵条件的优化研究

通过正交试验和单因素试验对防治人参土传病害的生防菌B59和X1菌株的培养基组成和培养条件进行优化研究。B59菌株培养基成分和最适培养条件为:葡萄糖15g/L,牛肉膏5.0g/L,NaH2PO4+Na2HPO45g/L,pH8,250mL三角瓶中装入25mL培养基,接种量为1.5%,30℃,160r/min培养。X1菌株的最佳培养基成分和培养条件为:葡萄糖15g/L,牛肉膏+酵母膏(1∶1)10.0g/L,NaH2PO4+Na2HPO42.5g/L,pH8,250mL三角瓶中装入25mL培养基,接种量为1%,25℃,160r/min培养。优化培养的枯草芽孢杆菌X1和B59菌株对人参腐皮镰刀菌抑菌能力显著提高。     

厚垣普可尼亚菌液体发酵动力学

厚垣普可尼亚菌是对植物线虫有防治潜力的生防菌。利用正交设计优化厚垣普可尼亚菌液体发酵条件,利用 Grow/Sigmoidal 模型中的非线性拟合方程 Logistic 函数和 Boltzmann 函数构建该菌液体发酵过程中的孢子增长、底物消耗和产物生成的液体发酵动力学模型,并运用 Origin Pro V8.6软件拟合求解出各模型参数。结果表明：在28℃条件下和500 mL摇瓶中,厚垣普可尼亚菌优化培养基及培养条件是葡萄糖15.0 g·L －1,玉米粉15.0 g·L －1,大豆粉20.0 g·L －1,KH2 PO40.25 g·L －1,MgSO4·7 H2 O 0.25 g·L －1,接种量5%,初始 pH 5.0,装量40%和转速190 r·min －1。厚垣普可尼亚菌液体发酵动力学模型可描述发酵过程中孢子含量、还原糖和氨基氮浓度随时间的变化规律,并对碳氮代谢进行分析。模型能够较好地拟合发酵过程：孢子量比生长速率在88.1 h时达到最大,最大值为0.0302 h －1;还原糖比消耗速率在86.8 h 时达到最大,最大值为0.0334 h －1;氨基氮比生成速率在110.8 h时达到最大,最大值为6.864×10－4 h －1。模型拟合和试验数据具有良好的适应性,可反映普可尼亚菌液体发酵过程的动力学特征,为其大规模生产奠定基础。     

硫磺菌液体培养基及pH值条件的研究

本试验以硫磺菌菌丝体的生物量为测量指标,对硫磺菌菌株6 600液体培养基配方以及初始pH值条件进行了研究。结果表明,硫磺菌菌株6 600液体培养最佳培养基配方为:玉米粉3%,蛋白胨1.5%,MgSO4.7 H2O0.05%,KH2PO40.2%。液体培养基最适初始pH值为5.0。液体培养基中添加微量的VB1不利于菌丝的生长。     

杨树变色真菌生防细菌KLBMP033发酵条件优化

以内生解淀粉芽孢杆菌KLBMP 033对可可球二孢菌的拮抗活性为评价指标,采用单因素多浓度和响应面试验设计法,对其液体发酵培养基和培养条件进行了优化。优化结果表明,发酵培养基为玉米粉17.8g/L,黄豆粉13.7g/L,NaCl5.0g/L;发酵条件pH值7.5,培养温度28℃,转速为180r/min,种子液的接种量4%,装液量60mL/250mL,培养时间为60h;对可可球二孢的抑制率从起始的53.3%提高到83.2%。     

莱氏野村菌(Nomuraea rileyi)固液双相发酵配方研究

莱氏野村菌(Nomuraea rileyi)通过基础培养基基质、碳、氮、维生素筛选,玉米(50 g)、葡萄糖(1.5 g)、水解酪蛋白(1.5 g)、抗坏血酸(0.5 mg)、水50 m L为最佳固体培养基质(培养10 d),产孢量达4.78×1010cfu·m L-1。以SMY为液体培养基质,莱氏野村菌最适发酵条件:1.0×108cfu·m L-1接种浓度,25℃、p H=6、全天光照、180 r·min-1振荡培养7 d,菌丝干重为690.2 mg。固体发酵为复合粉炮生产提供基础配方,液体发酵缩短时间后可作为固体培养生产莱氏野村菌菌粉的二级种子,发酵产品为杜仲梦尼夜蛾粉炮防治重要生物制剂。     

米根霉无载体固定化发酵产L-乳酸

通过研究米根霉NLX-M-1利用葡萄糖无载体固定化发酵产L-乳酸的影响因素,获得米根霉利用木质纤维基葡萄糖进行无载体固定化发酵的最优条件。优化的米根霉无载体固定化产L-乳酸条件:初始葡萄糖质量浓度100 g/L,(NH4)2SO4质量浓度2 g/L,接种量2%(体积分数),CaCO330 g/L,KH2PO40.1 g/L,MgSO4·7H2O 0.25 g/L,ZnSO4·7H2O 0.1 g/L。在优化条件下,以纯葡萄糖为碳源的米根霉发酵过程,形成平均直径1 mm的微球,L-乳酸产量为76.6 g/L,转化率为81.6%。以玉米秸秆酸爆渣酶解葡萄糖浓缩至60 g/L进行L-乳酸发酵,米根霉形成直径约1.2 mm的微球,L-乳酸产量为36.4 g/L,转化率为63.5%。     

苏云金杆菌CF1263菌株发酵条件优化的研究

对高毒BT菌株——CF1263进行液体振荡培养和正交试验结果表明:依据碳源、氮源和无机盐对芽孢产量的影响,对液体培养基进行成分优化组合,在碳源和氮源中分别筛选出最佳因子,淀粉、蛋白胨、牛肉膏、麦麸、酵母粉,从无机盐中筛选出KH2PO4和MgSO4.7H2O。运用以上7个因素进行L18(37)因素3水平的正交试验,从而得出CF1263最优配方为1.5%淀粉、2%蛋白胨、0.2%牛肉膏、0.3%麦麸、2.0%酵母粉、0.1%KH2PO4和0.2%Mg-SO4.7H2O。     

油茶根际土壤解钾菌的发酵培养

采用双层平板法对已分离出的15株油茶根际解钾细菌进行筛选,获得3株解钾能力较强的菌株CoPDB 6、CoPDB 13和CoPDB 15,并对3个菌株的培养基、pH、装液量、接种量、温度和摇床转速等发酵培养条件进行优化.结果 表明,解钾细菌的最佳发酵培养条件为培养基A(蔗糖5.0g,磷酸氢二钠0.5g,云母粉1.0g,M...     

大量元素组成对孝顺竹苗组培快繁的影响

为探索大量元素对竹子组培快繁的影响,以孝顺竹无菌苗为材料,采用L16(45)的正交试验设计,研究不同大量元素组成对孝顺竹组培苗扩繁效率的影响。结果表明,适宜孝顺竹增殖培养的大量元素组合为:1 650 mg.L-1NH4NO3+475 mg.L-1KNO3+220 mg.L-1CaCl2.2H2O+370 mg.L-1MgSO4.7H2O+85 mg.L-1KH2PO4;适宜孝顺竹生根培养的大量元素组合为:1 900 mg.L-1KNO3+220 mg.L-1CaCl2.2H2O+370 mg.L-1MgSO4.7H2O+85 mg.L-1KH2PO4。就不同成分而言,NH4NO3对孝顺竹继代增殖有促进作用,但抑制苗木的高生长。KH2PO4对苗木的增殖有抑制作用,KNO3对苗木的高生长有一定的抑制作用。     

马尾松硫酸盐浆两段氧脱木质素最佳工艺条件的研究

研究了马尾松硫酸浆两段氧脱木质素的最佳工艺条件。结果表明，第一段氧脱木质素的条件为：氧压0．6MPa，温度100℃，时间80min,NaOH 量5％，MgSO4用量0．5％，浆浓10％；第二段氧脱木质素的条件为：氧压0．4MPa，温度90℃，时间60min，NaOH用量3％，MgSO4用量0．5％，浆浓10％。在此条件下，OIOⅡ木质素脱除率达到72．5％，粘度775．2cm^3/g,得率90．5％。经过氧脱木质素后浆的裂断长5．8km，耐破指数5．3kPa.m^2/g，撕裂指数12．7mN.m^2/g。     

油茶优良无性系组织培养与植株再生

以油茶优良无性系的腋芽为外植体,分别采用附加不同种类激素的MS培养基对其进行组织培养试验,结果表明:不定芽的最佳继代增殖培养基为MS+6-BA0.8 mg.L-1+NAA0.1 mg.L-1,诱导生根最适培养基为1/2MS+IBA0.5 mg.L-1+NAA0.2 mg.L-1,生根率达87.5%。     

两种优良巴西杂交桉树的组织培养和快速繁殖

本研究以巴西尾巨桉和巨赤桉两种优良杂交桉树的带芽茎段为外植体进行离体培养和快速繁殖研究.结果表明:尾巨桉和巨赤桉再生芽诱导的最佳培养基为改良MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1,继代增殖的最适培养基为改良MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.15 mg·L-1.芽诱导和继代增殖中6-BA的浓度对两种杂交桉树有显著影响.生根培养中,尾巨桉和巨赤桉生根情况差异显著,尾巨桉茎芽最适生根培养基为1/2MS+NAA0.2 mg·L-1+IBA 1.0 mg·L-1,巨赤桉茎芽最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.15 mg·L-1+IBA 1.0 mg·L-1.两种杂交桉树组织培养体系的建立,为桉树良种选育和遗传转化体系的研究提供技术参考.     

银中杨茎段离体培养再生植株研究

以银中杨茎段为外植体,建立组织培养系统.试验结果表明,MS为最适基本培养基;各激素对诱导不定芽的作用大小为TDZ＞6-BA＞KT,诱导不定芽的最佳培养基为MS+0.1 mg·L-1TDZ+蔗糖20 g·L-1+琼脂0.7%;诱导不定芽再生的最佳光质为白光或黄光;生根培养基以1/2MS+0.5 mg·L-1IBA+蔗糖2...     

白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生

【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg ·L -1 )、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg ·L -1 )、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg ·L -1 )组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )、6-BA(0、0.5、1.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO 3和NH 4NO 3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS 、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS + 2,4-D 3.0 mg ·L -1 + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 0.2 mg ·L -1 + TDZ 1.0 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 1.0 mg ·L -1 + TDZ 0.5 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +谷氨酰胺100 mg ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO 3浓度提高1倍、NH 4NO 3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍;1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生长素与细胞分裂素组合及硝态氮和铵态氮的比例对体细胞胚的形成和发育具有调控作用,降低MS无机盐浓度可提高体细胞胚萌发率,本试验体系的再生植株移栽成活率达90%以上。