大头典竹插枝繁殖研究

选择生长1年的大头典竹母竹去梢,次年取其主枝和次生枝,分别于2、3、4、5月进行扦插育苗试验。结果表明:无论是主枝还是次生枝扦插,成苗率均以5月份扦插的高于2、3、4月份;主枝扦插成苗率高于次生枝;次生枝扦插的繁殖率高于主枝扦插;主枝育成的苗木质量显著优于次生枝。     

发展大头典竹生产 积极防治水土流失

漳平市位于我省西南部九龙江北溪上游．闽南金三角圈沿．是闻名的三乡三区（花乡、茶乡、画乡：林区、矿区、老区）。据1999年卫星遥感普查．我市水土流失面积为175.72平方公里，约占土地总面积的5.91％。为了防治水土流失．我市进行生态修复工程．在九龙江沿岸两旁的芦芝、桂林、西元、和平、南洋及龙漳公路、漳华公路、     

大头典竹的笋用价值和栽培技术

大头典竹属禾本科,绿竹属,别名新竹、大头竹、大头甜竹,是我国南方笋竹两用的优良丛生竹种之一,秆高8～16 m,直径6～10 cm,节间长30～35 cm,竹壁厚2 cm,节上密被毡毛,新竹秆节间被柔毛.     

桉树叶片双向电泳体系的建立及优化

对桉树(Eucalyptus spp.)叶片蛋白质的提取方法、溶解方法、溶解条件和上样量进行了优化.结果表明,TCA/丙酮沉淀/苯酚抽提法是桉树叶片蛋白质样品制备的最优方法;裂解缓冲液Ⅰ(7 mol·L-1尿素+2 mol·L-1硫脲+0.04 g·m L-1CHAPS+60 mmol·L-1DTT+0.5%(体积分数)IPG Buffer)可保证蛋白质样品的溶解,较适用于桉树叶片蛋白裂解;对于18 cm、p H 4-7的线性胶条,当每根胶条上样量为50μg时,采用银染可得到质量较高的2-DE图谱.     

发展大头典竹生产防治水土流失

漳平市位于福建省西南部九龙江北溪上游,闽南金三角圈沿,是闻名的三乡三区(即花乡、茶乡、画乡、林区、矿区、老区).据1999年卫星遥感普查,漳平市水土流失面积为175.72km2,约占土地总面积的5.91%,水土流失造成自然灾害频繁,保水、保肥、固土能力下降,影响水利工程效益,园地作物产量低,生态环境恶化.     

双向电泳方法研究油菜的进展(英文)

在中国油菜是一种可提供高质量油和蛋白的油料作物。双向电泳技术是一种有效的研究蛋白表达方法。综述了该技术的改进及其在油菜研究中的蛋白质提取、营养元素抑制影响、环境抑制影响、生理学研究、及抗菌核病等方面的应用研究,发现该方法可为油菜基因组学研究提供了大量很有价值的信息。随着双向电泳技术的发展,其将在未来的油菜蛋白组学研究中发挥更大的作用。     

蛋白质组学研究中双向电泳技术的应用

双向电泳技术（2-DE）是蛋白质组研究的核心技术。本文重点介绍了双向电泳的原理、实验操作过程中的具体步骤以及近年来在实验过程中发展的一些新方法和进展,并从一些方法的局限性和相关技术改进等方面做了简要综述,为进一步开发利用该技术提供参考依据。     

水稻胚乳双向电泳技术体系的优化分析

为比较同一杂交组合不同直链淀粉含量后代在灌浆期胚乳内蛋白表达差异,文章建立了一套适合灌浆期水稻胚乳蛋白的双向电泳技术,探讨了胚乳蛋白的提取、等电聚焦上样量的选择、胶条转移等双向电泳的一些关键技术。结果表明,一次溶解蛋白样品,TCA-丙酮法优于酚法蛋白提取,300μg上样量为最适上样量,能得到清晰、分离效果好、蛋白点数较多的图像。     

双向电泳技术在植物蛋白质组学研究中的应用

从双向电泳的历史、原理、操作步骤及其在植物蛋白质组学研究中的应用等几方面进行综合阐述,最后提出双向电泳技术中存在的一些问题,并展望了其在植物蛋白质组学研究中的未来应用前景。     

双向电泳技术在蛋白质组学研究中的应用进展

介绍蛋白质组学的概念,双向电泳技术在水稻蛋白质组学中的应用,双向电泳技术的一些优化步骤以及其局限性和对未来的展望。     

秋茄根系蛋白质组的双向电泳技术优化

建立适用于秋茄根系蛋白质组分析的双向电泳技术,并对秋茄根系蛋白质的制备、溶解、上样量、IEF及SDS-PAGE电泳等关键步骤进行优化。结果表明,应用酚抽法来提取秋茄根系蛋白,更适用于双向电泳分析;秋茄根系蛋白主要分布在pH4～7范围;裂解液中含有硫脲(2mmol.L-1)能较充分地溶解蛋白,DTT浓度为40mmol.L-1、上样量1.5mg时得到的双向电泳图谱分辨率较好,且蛋白斑点分布均匀、清晰,拖尾现象明显减少。采用与质谱兼容的考马斯亮兰进行染色,得到1 089个蛋白点。     

金鱼胚胎蛋白质双向凝胶电泳方法建立及优化

以金鱼胚胎为材料,以不同样品制备方式、裂解液成分、固相pH梯度胶条的选择、凝胶浓度为侧重点,建立并优化金鱼胚胎总蛋白质组最佳双向凝胶电泳技术条件.研究表明,采用匀浆器匀浆含硫脲和NP-40裂解液提取蛋白,应用pH值为3～10的非线性IPG胶条和浓度14%的SDS-PAGE凝胶进行双向电泳,经优化电泳电流、时间等参数后,获得了重复性和分辫率理想的金鱼胚胎总蛋白质双向电泳图谱,为金鱼胚胎蛋白质组分析莫定了基础,为揭示金鱼单倍体发育异常的机制提供了技术保障.     

文冠果枝条韧皮部蛋白质双向电泳体系的建立

以文冠果当年生硬枝韧皮部为材料,通过TCA/丙酮法提取总蛋白,研究了不同的蛋白质裂解液组成对双向电泳的影响,并在胶条选择、蛋白质上样量和等电聚焦时间等方面进行了优化。结果表明,TCA/丙酮提取法适用于提取文冠果韧皮部组织总蛋白,得到的图谱背景低,蛋白质点清晰;样品溶解于含有尿素和硫脲的蛋白质裂解液Ⅱ中,可显著地提高蛋白质的溶解性,获得的总蛋白溶液浓度远大于裂解液Ⅰ提取的总蛋白溶液浓度。在适宜的时间范围用超声波破碎仪处理蛋白质粉溶液有助于大幅度提高裂解液中蛋白质的浓度。等电聚焦条件宜根据样品特性选择,80 000Vh能够使得文冠果韧皮部蛋白质双向凝胶碱性端的横条纹大大减少。     

黄瓜根系蛋白质组分析的双向电泳技术条件优化

双向电泳(2-DE)是蛋白质组学研究的重要支撑技术之一。为建立适于黄瓜根系蛋白质组分析的双向电泳技术,对黄瓜根系蛋白质样品提取方法、裂解缓冲液配方及SDS-PAGE分离胶浓度等参数进行研究。结果表明:采用TCA/丙酮法提取黄瓜根系中的蛋白质,裂解缓冲液为8mol·L-1尿素、2mol·L-1硫脲、2%IPG Buffer、4%CHAPS、1%TBP、65mmol·L-1DTT、2mmol·L-1EDTA、0.001%溴酚蓝和1%鸡尾酒,SDS-PAGE分离胶浓度为11%时,可获得分离效果较好的双向电泳图谱。该技术条件为适合黄瓜根系蛋白分离的较优双向电泳体系。     

菜籽蛋白质组双向电泳技术体系的优化研究

[目的]建立适用于菜籽蛋白质组研究的双向电泳技术。[方法]以湘油17号为材料,对双向电泳技术中的样品制备方法、凝胶浓度、上样量等条件进行了优化。[结果]使用TCA一丙酮法提取菜籽总蛋白最佳,所获蛋白在2-DE图谱上获得的点数最多。当采用pH3～10IPG胶条和12％的凝胶、上样量为250μg时,可得到背景清晰、重复性好、蛋白点分辨率较高的双向电泳图谱。[结论]为开展油菜种子蛋白质组学研究奠定了基础。     

菜籽蛋白质组双向电泳技术体系的优化研究(英文)

[目的]建立适用于菜籽蛋白质组研究的双向电泳技术。[方法]以湘油17号为材料,对双向电泳技术中的样品制备方法、凝胶浓度、上样量等条件进行了优化。[结果]使用TCA-丙酮法提取菜籽总蛋白最佳,所获蛋白在2-DE图谱上获得的点数最多。当采用pH3～10IPG胶条和12%的凝胶、上样量为250μg时,可得到背景清晰、重复性好、蛋白点分辨率较高的双向电泳图谱。[结论]为开展油菜种子蛋白质组学研究奠定了基础。     

肺炎链球菌蛋白质组双向电泳技术的建立及优化

为了建立适合肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)蛋白质组的双向电泳技术,对蛋白样品提取、裂解、上样量、IEF和银染等关键步骤进行了优化,探索出一套有效的肺炎链球菌蛋白分析的双向电泳方法,即以裂解液[15 mmol/L Tris-HCl、7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、4%(m/v)CHAPS,使用前现加2%(v/v)IPG缓冲液、1%(m/v)二硫苏糖醇(DTT)和1%(m/v)蛋白酶抑制剂混合物]结合反复冻融和超声裂解菌体的方法来提取蛋白质样品,按80μg蛋白上样量,并结合适宜的双向电泳参数,可获得蛋白分辨率高、重复性较好的双向电泳图谱。     

细菌纤维素产生菌双向凝胶电泳分析技术

对细菌纤维素产生菌株———葡糖酸醋杆菌菌体蛋白的提取过程、等电点的分布及纯化方法等方面进行了探索和优化。结果表明:葡糖酸醋杆菌蛋白主要分布在pI 4~7的范围内;采用超滤浓缩后进行2D Clean-up试剂盒纯化,可以获得更优的蛋白分离效果;在考马斯亮蓝G250染色条件下,有效分离出(1037±65)个蛋白点;建立了高质量葡糖酸醋杆菌蛋白的双向凝胶电泳分析技术。     

NDRG1互作蛋白的双向电泳检测

【目的】为了更好地了解NDRG1的功能,通过双向电泳技术寻找与NDRG1相互作用的蛋白。【方法】先准备高表达肿瘤细胞系HHCC,然后纯化融合蛋白GST-NDRG1,最后孵育HHCC与融合蛋白,并通过双向电泳检测与NDRG1相互作用的蛋白。【结果】经SDS-PAGE和双向电泳后,在pH 7.0、Mr=43 ku处出现了新增点。【结论】在肿瘤细胞HHCC中存在与NDRG1相互作用的蛋白。     

西施舌胃蛋白质组双向电泳图谱的初步构建

采用裂解、离心等抽提方法提取西施舌胃组织蛋白样品,利用bradford蛋白定量试剂盒作蛋白定量后,进行双向凝胶电泳。电泳后的凝胶采用考马斯亮蓝染色过夜,利用ImageScannerⅢ扫描仪扫描凝胶,获得凝胶图像,首次构建了西施舌胃组织蛋白的双向电泳图谱。结果显示：西施舌胃组织蛋白点主要分布在pH4～7,大部分蛋白为酸性蛋白,其中部分蛋白为高分度蛋白,在高pH区,蛋白分布相对较少。